طريقة تحديد فصائل الدم. اختبار كومبس: الجوانب السريرية والمخبرية اختبار كومبس معاني وتعريفات
أو مذاب في البلازما.
المرادفات: اختبار مضاد الغلوبولين ، اختبار كومبس ، AGT ، اختبار مضاد الغلوبولين غير المباشر / المباشر ، IAT ، NAT ، DAT ، اختبار كومبس غير المباشر / المباشر
اختبار كومبس هو
تحليل يكتشف التحصين والأجسام المضادة لخلايا الدم الحمراء.
أنواع اختبار كومبس
- اختبار كومبس المباشر- يكتشف الأجسام المضادة المثبتة على سطح كريات الدم الحمراء. يتم إجراؤه للاشتباه في الإصابة بفقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي ، وانحلال الدم في أمراض المناعة الذاتية ، بعد تناول الأدوية (ميثيل دوبا ، البنسلين ، الكينين) ، بعد نقل الدم ومرض الانحلالي لحديثي الولادة.
تم تحسس كريات الدم الحمراء في الجسم الحي - الأجسام المضادة مرتبطة بها بقوة بالفعل ، وإضافة مصل مضاد الجلوبيولين (مضاد IgG) يتسبب في التصاق الخلايا الحساسة ببعضها البعض ، وهو ما يمكن رؤيته بالعين المجردة.
- اختبار كومبس غير المباشر- يكتشف الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء في بلازما الدم ، والتي يتم إجراؤها قبل نقل الدم وأثناء الحمل.
الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء هي نوع من الأجسام المضادة الذاتية ، أي الأجسام المضادة ضد أنسجتها. يحدث الجسم المضاد الذاتي عندما يتفاعل الجهاز المناعي بشكل غير طبيعي مع بعض الأدوية ، مثل الجرعات العالية من البنسلين.
تحتوي كريات الدم الحمراء الموجودة على سطحها على تراكيب كيميائية مختلفة (جليكوليبيدات ، سكريات ، بروتينات سكرية وبروتينات) ، في الطب يشار إليها باسم المستضدات. يرث الشخص من والديه خريطة معينة من المستضدات على كل خلية دم حمراء.
يتم دمج المستضدات في مجموعات وبجانب ذلك ، يتم تقسيم الدم إلى عدة مجموعات - وفقًا لـ نظام AB0 ، Rh ، Kell ، Lewis ، Kidd ، Duffy. أشهرها وأهمها في عمل الطبيب هما AB0 و Rh (Rh).
نظام AB0
الانتماء الريسوسييتم تحديد الشخص من خلال وجود هذه المستضدات. مستضد كريات الدم الحمراء المهم بشكل خاص هو مستضد D. إذا كان موجودًا ، فإنهم يتحدثون عن Rh-إيجابي في الدم ، وإذا لم يكن موجودًا ، عن Rhd سلبي.
إذا انضم الجسم المضاد المقابل إلى مستضدات كريات الدم الحمراء ، فسيتم تدمير كريات الدم الحمراء - الدم.
مؤشرات لتنفيذ اختبار مضاد الجلوبيولين المباشر
- فقر الدم الانحلالي الأولي المناعي الذاتي
- فقر الدم الانحلالي في أمراض المناعة الذاتية والأورام والمعدية
- فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي الناجم عن المخدرات
- فقر الدم الانحلالي بعد نقل الدم (أيام - شهور)
- مرض انحلالي لحديثي الولادة (عدم التوافق في إحدى فصائل الدم)
مؤشرات لتنفيذ اختبار مضاد الغلوبولين غير المباشر
- قبل نقل الدم
- أثناء الحمل لامرأة سلبية عامل ريزوس
فقر الدم الانحلالي بالمناعة الذاتية
فقر الدم الانحلالي بالمناعة الذاتية (أولي)هو مرض مناعي ذاتي تقليدي لأسباب غير معروفة. افترض وجود انتهاك في عملية التفاعل على مستوى الجهاز المناعي ، مما يؤدي إلى تصور كريات الدم الحمراء على أنها غريبة. تنتج الخلايا أجسامًا مضادة من فئة IgG (تتفاعل عند درجة حرارة 37 درجة مئوية) و / أو IgM (عند درجة حرارة 40 درجة مئوية) ، وتلتصق بسطح كريات الدم الحمراء ، وتبدأ عددًا من الإنزيمات (نظام مكمل) و "تثقب" جدار كرات الدم الحمراء مما يؤدي إلى تدميرها - انحلال الدم.
أعراض فقر الدم الانحلالي
- التعب والضعف العام والتهيج
- ضيق التنفس
- آلام في البطن وغثيان
- لون البول الداكن
- ألم في الظهر
- تلوين إيقاعي للجلد والأغشية المخاطية
- تضخم الكبد والطحال
- انخفاض في عدد خلايا الدم الحمراء والهيموجلوبين في فحص الدم العام
نتيجة ايجابية مستقيم اختبار كومبس 100٪ يؤكد تشخيص فقر الدم الانحلالي بالمناعة الذاتية ، مما يثبت مصدره من المناعة الذاتية. في الوقت نفسه ، لا تجعل النتيجة السلبية من الممكن إجراء التشخيص.
يمكن أن يكون فقر الدم الانحلالي الثانوي المناعي الذاتي واختبار كومبس الإيجابي مع الأمراض التالية:
- الذئبة الحمامية الجهازية
- متلازمة إيفانز
- غلوبولين الدم الكبير والدنستروم
- بيلة الهيموغلوبينية الباردة الانتيابية
- سرطان الدم الليمفاوي المزمن
- الأورام اللمفاوية
- عدد كريات الدم البيضاء المعدية
- عدوى الميكوبلازما الرئوية
- مرض الزهري
إن إيجابية اختبار مضاد الجلوبيولين في هذه الأمراض لا تعمل كمعيار تشخيصي ، بل هي أحد أعراض المرض.
مرض انحلالي حديثي الولادة
سبب مرض انحلالي لحديثي الولادةعدم توافق فصائل الدم في الأم والجنين ، في معظم الحالات وفقًا لنظام Rhesus ، في حالات فردية - وفقًا لنظام AB0 ، بشكل عرضي - وفقًا لمولدات المضادات الأخرى.
يتطور تضارب العامل الريصي إذا ورث الجنين في المرأة التي تحمل عامل ريسس (Rh) دمًا إيجابيًا من والدها.
يتطور المرض عند الوليد فقط إذا كانت الأم قد طورت بالفعل أجسامًا مضادة للمستضدات المقابلة ، والتي تحدث بعد حالات الحمل السابقة ، والولادة ، والإجهاض ، وعمليات نقل الدم غير المتوافق. السبب الأكثر شيوعًا لتحفيز تخليق الأجسام المضادة لمستضدات غشاء كرات الدم الحمراء هو الولادة (نزيف الجنين والأم). تمر الولادات الأولى في الغالب دون مضاعفات ، لكن الولادات التالية محفوفة بمرض الانحلالي عند الوليد في الأيام الأولى بعد الولادة.
أعراض مرض الانحلالي عند الوليد
- اصفرار الجلد
- فقر دم
- شحوب الجلد والأغشية المخاطية
- تضخم الكبد والطحال
- اضطرابات في الجهاز التنفسي
- انتفاخ الجسم كله
- الإثارة والاكتئاب التدريجي للجهاز العصبي المركزي
فقر الدم بعد نقل الدم
اختبار كومبس غير المباشرأجريت قبل نقل الدم لتقييم التوافق ، و اختبار كومبس المباشر- بعد ذلك ، في حالة الاشتباه في حدوث انحلال دم بعد نقل الدم ، أي إذا كنت تعاني من أعراض مثل الحمى والقشعريرة والري (اقرأ أدناه). الغرض من الاختبار هو اكتشاف الأجسام المضادة لكرات الدم الحمراء المنقولة والتي ترتبط بكرات الدم الحمراء للمتلقي وهي سبب انحلال الدم بعد نقل الدم ، بالإضافة إلى إزالة كرات الدم الحمراء المتبرع بها من الدورة الدموية للمستلم (المتلقي) قبل الأوان.
أعراض رد الفعل الانحلالي بعد نقل الدم
- زيادة في درجة حرارة الجسم
- طفح جلدي على الجلد
- ألم في الظهر
- لون البول الأحمر
- غثيان
- دوخة
فك تشفير اختبار كومبس
تجدر الإشارة إلى أن القواعد الأساسية لفك تشفير اختبارات مضادات الغلوبولين المباشرة وغير المباشرة هي نفسها. الاختلاف الوحيد هو موقع الأجسام المضادة - في الدم أو بالفعل على خلايا الدم الحمراء - على كريات الدم الحمراء.
- إذا اختبار كومبس المباشر سلبي- هذا يعني أن الجسم المضاد لا "يجلس" على كريات الدم الحمراء ويجب البحث عن سبب الأعراض أكثر ويجب إجراء اختبار كومبس غير المباشر
- إذا تم الكشف عن نتيجة إيجابية لاختبار كومبس بعد نقل الدم ، والالتهابات ، والأدوية - يمكن أن تستمر الإيجابية لمدة تصل إلى 3 أشهر (عمر كريات الدم الحمراء 120 يومًا - 3 أشهر)
- يؤدي اختبار مضاد الغلوبولين الإيجابي إلى مرض مناعي ذاتي يمكن أن يستمر لأشهر أو حتى سنوات
معايير اختبار كومبس
- اختبار كومبس المباشر- نفي
- اختبار كومبس غير المباشر- نفي
من الناحية النوعية ، يتم قياس النتيجة الإيجابية في عدد الإيجابيات من واحد إلى أربعة (+ ، ++ ، +++ ، ++++) ، وكميًا في شكل رقمي - 1:16 ، 1: 256 ، إلخ.
4 حقائق عن اختبار كومبس
- تم اقتراحه لأول مرة في كامبريدج عام 1945
- عتبة الحساسية - ما لا يقل عن 300 جزيء ثابت من الجسم المضاد في خلية حمراء واحدة
- عدد الأجسام المضادة التي تسبب انحلال الدم - بشكل فردي لكل شخص (من 16-30 إلى 300)
- قد يتم تطبيع ديناميكيات المؤشرات المختبرية الأخرى لفقر الدم الانحلالي (الهيموغلوبين ، والبيليروبين ، والخلايا الشبكية) ، وسيظل اختبار كومبس على نفس المستوى
عيوب اختبار مضاد الجلوبيولين
- لا يمكن تحديد قوة ارتباط مولد الضد بجسم مضاد
- عدد غير معروف من الأجسام المضادة المرتبطة
- لا يحدد نوع الجسم المضاد
- لن يساعد اختبار كومبس الإيجابي في تحديد السبب
- 0.5 ٪ من الأشخاص الأصحاء لديهم اختبار كومبس إيجابي دون أي دليل على فقر الدم الانحلالي
- غير مناسب لمراقبة نجاح العلاج ، لأنه لا يشير إلى نشاط انحلال الدم في كريات الدم الحمراء
رد فعل الكومبس(R.R.A Coombs ، عالم المناعة الإنجليزي ، مواليد 1921 ؛ تزامن: اختبار كومبس ، اختبار مضاد الجلوبيولين) - تفاعل مناعي للكشف عن الأجسام المضادة غير الكاملة لمضادات الكريات الحمر الذاتية والمتساوية.
تم تطوير التفاعل في عام 1908 من قبل S. Moreschi ، ولكن تم استخدامه على نطاق واسع فقط منذ عام 1945 بعد أن أظهر Coombs دوره في تحديد التوافق في عمليات نقل الدم ، ونزاع الريسوس ، وتشخيص أمراض الحساسية الذاتية وأمراض المناعة الذاتية ، إلخ.
يعتمد تفاعل كومبس على استخدام مستحضر مُعد خصيصًا فيه - مصل مضاد الجلوبيولين. في وجود مصل مضاد للجلوبيولين ، تتراكم كريات الدم الحمراء المحملة بأجسام مضادة غير كاملة. تظل كريات الدم الحمراء التي لا تحتوي على أجسام مضادة على سطحها غير متراصة.
K. r. تستخدم على نطاق واسع من أجل: أ) تحديد حالة التحسس المتساوي ، أي الكشف عن الأجسام المضادة المتساوية التي تحدث أثناء عمليات نقل الدم المتكررة (انظر نقل الدم) أو حالات الحمل (انظر الحمل) ؛ ب) إجراء اختبار التوافق مع عمليات نقل الدم. ج) التعاريف في كريات الدم الحمراء لمجموعة متنوعة من عامل Rh (انظر) ؛ د) الكشف عن الأجسام المضادة للمناعة الذاتية على كريات الدم الحمراء للمرضى المصابين بفقر الدم الانحلالي المكتسب (انظر) وأمراض الحساسية الذاتية الأخرى (انظر) ، وكذلك في بعض الالتهابات التي تحدث مع أحد مكونات الحساسية ؛ ه) الكشف عن الأجسام المضادة المناعية المتساوية المثبتة على كريات الدم الحمراء للأطفال الذين يعانون من مرض الانحلالي عند الوليد (انظر). K. r. كما أنها تستخدم في أبحاث الطب الشرعي والأنثروبولوجيا.
المادة الرئيسية لتنظيم مرحلة K. r. هي البلازما المصلية أو الستراتية وكريات الدم الحمراء للمريض. هناك نوعان مختلفان من نهر K.: غير المباشر والمباشر. مع K. p غير المباشر. دراسة مصل المريض ، في عملية قطع تحديد الأجسام المضادة المنتشرة بحرية. بخط مستقيم K. p. يتم فحص كريات الدم الحمراء لوجود الأجسام المضادة المثبتة على خلايا الدم هذه.
مصل مضاد الجلوبيولين لنهر K. تلقي التحصين عن طريق المختبر. الحيوانات (الأرانب والماعز والأغنام وغيرها) مع الجلوبيولين المعزول من مصل الإنسان عن طريق التجزئة باستخدام الإيثانول أو كبريتات الأمونيوم أو الترشيح الهلامي في سيفاديكس. عند تلقي مصل مضاد الجلوبيولين ، من الضروري إزالة الأجسام المضادة غير المتجانسة الناتجة عن تحصين الحيوانات بالجلوبيولين البشري. يتم تحقيق ذلك عن طريق امتصاص المصل المناعي بمزيج من كريات الدم الحمراء لأشخاص ذوي مجموعات دموية مختلفة أو عن طريق تخفيفه بمحلول متساوي التوتر من كلوريد الصوديوم. في الحالة الأخيرة ، يجب أن يكون عيار الراصات غير المتجانسة منخفضًا (1: 16 - 1: 32) ، بحيث بعد التخفيف ، يحتفظ مصل مضاد الجلوبيولين بنشاط جيد في K. r.
تفاعل كومبس غير المباشر
يتم تنفيذ تفاعل كومبس غير المباشر على خطوتين. يتم تنفيذ المرحلة الأولى في أنابيب اختبار صغيرة مصممة خصيصًا لهذا الغرض ، بحجم 4 × 0.5 سم.في كل أنبوب اختبار ، إلى ثلاث قطرات من المصل (كامل ، 1: 2 ، إلخ) ، حيث توجد أجسام مضادة يُشتبه ، يتم إضافة قطرة واحدة من رواسب كريات الدم الحمراء ذات التركيب المستضدي المعروف. يتم خلط محتويات الأنبوب ووضعها في منظم حرارة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة. ثم يتم غسل كريات الدم الحمراء ثلاث مرات بمحلول متساوي التوتر من كلوريد الصوديوم. تتكون المرحلة الثانية من تحضير معلق بنسبة 5٪ من كريات الدم الحمراء المغسولة والتوصيل على صفيحة بيضاء (خزفية) بسطح مبلل لقطرة واحدة من كريات الدم الحمراء مع قطرة واحدة من مصل مضاد الجلوبيولين. يتم تنفيذ المحاسبة على النتائج حتى 10 دقائق. يتم استبعاد النتائج الإيجابية الكاذبة عن طريق إجراء دراسات التحكم. لا ينبغي أن يترافق استخدام محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر بدلاً من مصل مضاد الجلوبيولين مع تراص كرات الدم الحمراء. أداء K. r غير المباشر. فيما يتعلق بكريات الدم الحمراء من النمط الظاهري المعروف ، يسمح لك isoantigens بتحديد خصوصية الأجسام المضادة. على سبيل المثال ، دراسة مصل المريض مع كريات الدم الحمراء 0 (I) ، CDE ، Kk ، Fya ؛ 0 (1) ، CDe ، Kk ، Fya ؛ 0 (I) ، сDe ، Kk ، Fya ؛ 0 (I) ، cDE ، Kk ، Fya ؛ أظهر 0 (I)، cde، kk، Fya نتيجة إيجابية مع عينة دم في الحالتين الأولى والرابعة ؛ أظهرت عينات دم أخرى (2 ، 3 ، 5 حالات) نتيجة سلبية. يحتوي المصل على أجسام مضادة لـ E. بمساعدة غير المباشر K. r. يمكن الكشف عن الأجسام المضادة غير المكتملة ضد المستضدات: C ، D ، E ، c ، e ؛ ك ، ك ؛ فيا ، فيب ؛ ليا ليب Jka ، Jkb ، إلخ (انظر أنواع الدم).
تفاعل كومبس المباشر
وفقًا لتقنية التنفيذ ، فإن تفاعل كومبس المباشر يتوافق مع المرحلة الثانية من K. r: كريات الدم الحمراء للمريض (5 ٪ معلق) يتم غسلها ثلاث مرات بمحلول متساوي التوتر من كلوريد الصوديوم مع مصل مضاد للجلوبيولين. Direct K. r. أداء عندما يكون هناك سبب للاعتقاد بأن كريات الدم الحمراء للمريض قيد الدراسة في الجسم الحي قد تم تحسسها بالفعل بواسطة الأجسام المضادة. خط مستقيم موجب K. r. بمثابة علامة تشخيصية لمرض الانحلالي عند الوليد ، الناجم عن حساسية جسم المرأة لمولدات المضادات الجنينية وتغلغل الأجسام المضادة من خلال المشيمة في جسم الطفل ، وكذلك مع فقر الدم الانحلالي المكتسب.
في السنوات الأخيرة ، ظهر K. r. تحسن ملحوظ. بمساعدتها ، من الممكن ليس فقط التأكد من وجود الأجسام المضادة على كريات الدم الحمراء ، ولكن أيضًا لتحديد فئة الغلوبولين المناعي (انظر). للقيام بذلك ، استخدم المصل ضد فئات معينة من الغلوبولين المناعي: IgG ، IgM ، IgA. الأجسام المضادة Isoimmune ضد Rh ، ومستضدات Kell ، ومستضدات Duffy ومستضدات أخرى ، وكذلك الأجسام المضادة للمناعة الذاتية الدافئة ، عادةً ما تكون IgG. الأجسام المضادة للمناعة الذاتية الباردة ، وكذلك الأجسام المضادة المناعية ضد Le وبعض المستضدات الأخرى ، كقاعدة عامة ، تنتمي إلى IgM. فقط الأجسام المضادة المناعية الذاتية النادرة لها طبيعة الغلوبولين المناعي أ (انظر الأجسام المضادة الذاتية).
فهرس: Dygin V. P. أمراض المناعة الذاتية في عيادة الأمراض الداخلية ، L. ، 1970 ، ببليوجر. ؛ Kassirsky I.A and Alekseev G.A Clinical hematology، M.، 1970؛ Kosyakov P. N. Isoantigens والأجسام المضادة البشرية في الظروف الطبيعية والمرضية ، M. ، 1974 ، ببليوجر ؛ Boivin P. e. أ. فقر الدم الانحلالي ، ص. 93، P.، 1971، bibliogr .؛ الجوانب السريرية لعلم المناعة ، أد. بقلم P.GH Geli a. س ، أكسفورد ، 1975 ؛ كومبس آر آر أ ، مورانت أ. أ. Race R. R. داخل الجسم الحي لتحسس الخلايا الحمراء عند الأطفال المصابين بمرض انحلال الدم ، Lancet ، v. 1 ، ص. 264 ، 1946.
اختبار كومبس المباشر. بمساعدة هذا الاختبار ، تم إثبات وجود الأجسام المضادة التي تم تثبيتها بواسطة كريات الدم الحمراء لدى الطفل. يشير الاختبار المباشر الإيجابي إلى التحسس وهو مؤشر قوي على مرض الانحلالي عند الوليد قبل ظهور العلامات السريرية الأخرى. كاستثناء ، وفقط في الحالات الشديدة جدًا ، قد يكون اختبار كومبس المباشر سلبيًا بسبب بداية انحلال الدم شبه الكامل لكريات الدم الحمراء المحسّسة.
يتم إجراء اختبار كومبس المباشر على النحو التالي: 5 قطرات من الدم تؤخذ من كعب الطفل توضع في أنبوب اختبار ويضاف 5 مل من محلول ملحي. تخلط جيدا مع الطرد المركزي لمدة 10 دقائق. يتم فصل سائل صافٍ عن رواسب كرات الدم الحمراء. ثم أضف مرة أخرى 5 مل من محلول ملحي واخلط وطرد مركزي. بعد الاختلاط ثلاث مرات بالمحلول الملحي ، يتم غسل كريات الدم الحمراء جيدًا. بعد الفصل الأخير للمادة الطافية ، يتم خلط رواسب كرات الدم الحمراء بمقدار 0.1 مل مع 0.9 مل من محلول ملحي. ضع 2-3 قطرات من هذا الخليط على شريحة زجاجية وأضف قطرة واحدة من مصل كومبس. يشير وجود التراص إلى أن التفاعل إيجابي (اختبار كومبس المباشر الإيجابي). يجب إجراء الدراسة في درجة حرارة الغرفة أعلى من 16 درجة مئوية لتجنب عمل الراصات الباردة.
اختبار كومبس غير المباشربمثابة دليل على وجود أجسام مضادة حرة في مصل الأم ويتم إجراؤها مع مصل الأم.
عادة ما يظهر مرض انحلال الدم عند حديثي الولادة مع عدم توافق عامل ريسس بعد الحمل الثاني. يولد الطفل الأول بصحة جيدة ، والثاني بعلامات فقر دم خفيف ، وفقط بعد الحمل الثالث يولد الأطفال بعلامات واضحة على مرض الانحلالي. فقط في النساء اللواتي سبق لهن التحسس أثناء الحمل الأول ، يمكن أن يولد الطفل بأعراض مرض الانحلالي. في بعض الحالات ، يتسبب التحصين في الإجهاض والإملاص. بالنسبة لبداية المرض وشدته ، فإن حالة المشيمة ومدة التعرض لراكمات الأم على الجنين مهمة. مع ظهور agglutinins قبل الولادة بـ 10-14 أسبوعًا ، عادة ما يكون لدى الطفل أشكال تحت الإكلينيكية. يؤدي الظهور المبكر للجلوتينين ، قبل الولادة بـ15-26 أسبوعًا ، إلى أشكال حادة من المرض. في جميع أشكال المرض ، العملية الرئيسية هي انحلال الدم. نتيجة تفاعل الأجسام المضادة للمستضد هي انحلال الدم ، تلف الشعيرات الدموية في الكبد والدماغ. اعتمادًا على الآفة السائدة ، يتم ملاحظة أشكال مختلفة من المرض. بعض الظواهر التأقية خطيرة أيضًا. تؤدي إلى تكوين مواد شبيهة بالهيستامين تتسبب في أضرار جسيمة لخلايا الكبد وخاصة الخلايا العقدية للنواة القاعدية وقرن الأمون والنخاع المستطيل وحتى القشرة الدماغية. مع تلف خلايا الكبد ، يضاف اليرقان الكبدي إلى اليرقان خارج الكبد. يموت الأطفال بأعراض شديدة من اليرقان النووي. إذا بقوا على قيد الحياة ، تظل أعراض آفات الجهاز العصبي (اضطرابات في الجهاز خارج الهرمية مع حركات رشيقة ، نوع من المشي الراقص ، حركات قسرية للرأس ، أحيانًا اضطراب في تنسيق الحركات الإرادية مع السقوط المتكرر ، زيادة قوة العضلات ، التخلف العقلي ، أي مع وجود علامات مثل encephalopathia posticteria infantum).
في السنوات الأخيرة ، بين المرضى من مختلف الأعمار ، ازداد عدد أمراض الدم ، وتستخدم طرق ووسائل مختلفة لتشخيصها. اختبار كومبس هو اختبار سريري للدم ، والغرض من إجرائه هو تحديد كائنات معينة تشكل خطراً على صحة الإنسان.
يمكن أن تلتصق الأجسام المضادة ويمكن أن تكون النتيجة انتهاكًا لحالة جهاز المناعة. اختبار كومبس المباشر هو اختبار مضاد للجلوبيولين يتم إجراؤه للكشف عن الأجسام المضادة المرتبطة بسطح خلايا الدم الحمراء.
عادةً ما يلجأ المتخصصون إلى اختبار الأجسام المضادة في المواقف التالية:
- الحاجة إلى نقل الدم. من خلال دورة التشريح المدرسي ، من المعروف أن الشخص يمكن أن يكون لديه نوع من أنواع الدم الأربعة. يسمح لك إجراء اختبار مضاد الغلوبولين بتحديد إمكانية نقل الدم إلى كائن حي آخر. يمكن القول أنه لا يمكن للمريض أن يصبح متبرعًا لنقل الدم إلا إذا كان دمه يطابق نوع المريض ، أي أنه يحتوي على نفس المستضدات. في حالة وجود اختلاف في المستضدات بين المريض والمتبرع ، يمكن أن يؤدي ذلك إلى تدمير الجهاز المناعي للخلايا المنقولة. يمكن أن تكون نتيجة ذلك ظهور أمراض ومضاعفات خطيرة ، وحتى الموت. ولهذا السبب يتم إعطاء دور مهم لإيجاد النوع الصحيح من الدم عندما يصبح من الضروري نقله.
- تحديد مخاطر التحسس من عامل ريسس. يعرّف الطب الحديث العامل الريسوسي بأنه مستضد ، وتعريفه الكامل هو مفهوم "عامل الريسوس". بفضل اختبار Coombs ، من الممكن تشخيص وجود الأجسام المضادة لعامل Rh في دم النساء أثناء. في حالة أن الأم الحامل لديها عامل ريسس سلبي ، وكان الأب إيجابيًا ، فيمكن للطفل الذي لم يولد بعد أن يرث أيًا منهما. إذا تم اكتشاف عامل Rh موجب في الجنين ، فإن خطر الإصابة بحساسية العامل الريصي يزداد - وهي عملية خلط الدم مع الأم أثناء الحمل أو المخاض.
في حالة وجود تعارض بين مجموعة الأم والطفل ، يبدأ الجهاز المناعي لجسد الأنثى في إدراك الجنين كجسم غريب ويمارس جميع أنواع الهجمات عليه. قد تكون نتيجة ذلك تطور أمراض خطيرة لدى الطفل ، والتي تسمى داء أرومات الدم الحمراء. في بعض الحالات ، في غياب العلاج الفعال ، لوحظ موت الجنين في الرحم أو بعد الولادة مباشرة.
في بعض الحالات ، يتم إجراء اختبار كومبس للكشف عن الانحلالي المناعي الذاتي.
مثل هذا المرض نادر جدًا ويتجلى في تكوين مستضدات كرات الدم الحمراء في جسمه.
يميز الخبراء نوعين من عينات كومبس ، يستخدم كل منهما لأغراض محددة.
اختبار مباشر. يُطلق على الاختبار المباشر في الممارسة الطبية أيضًا اختبار مضاد الجلوبيولين المباشر وبمساعدته يمكن تشخيص الأجسام المضادة المرتبطة بالسطح. في بعض الحالات ، يحدث إنتاج مثل هذه الأجسام المضادة في جسم الإنسان نتيجة لتطور الأدوية المختلفة أو استخدام الأدوية مثل:
- كينيدين
- ميثيلدوب
- بروكيناميد
يكمن خطر هذه الأجسام المضادة في حقيقة أنها يمكن أن تسبب التطور ولها تأثير مدمر. في بعض الأحيان يتم اللجوء إلى اختبار كومبس عندما يكون من الضروري تحديد أسباب تطور أمراض مثل فقر الدم و.
يعتبر اختبار كومبس السلبي أمرًا طبيعيًا.
اختبار غير مباشر. غالبًا ما يلجأ الخبراء إلى إجراء اختبار كومبس غير المباشر ، والذي يحمل الاسم الثاني "اختبار مضاد الجلوبيولين غير المباشر". الغرض الرئيسي من ذلك هو الكشف عن الأجسام المضادة لخلايا الدم الحمراء الموجودة في مصل الدم. بفضل هذا الاختبار ، من الممكن تحديد ما إذا كان دم المتبرع يتطابق مع دم المريض إذا كان من الضروري نقله. مثل هذا التحليل هو نوع من اختبار التوافق ، وبفضل تنفيذه ، من الممكن تجنب حدوث رد فعل سلبي على دم المتبرع.
عادة ، مثل هذه الدراسة موصى بها للنساء أثناء. قد يكون لدى بعض الأمهات أجسام مضادة من فئة معينة في الجسم يمكنها عبور المشيمة إلى دم الجنين. يمكن أن تكون نتيجة هذه العملية مرض انحلالي للجنين ، وكذلك تطور مختلف أثناء الحمل.
التحضير للإجراء وتنفيذه
عادة لا يتطلب الإجراء أي تحضير خاص ويمكن إجراؤه في أي وقت.
يشمل التحضير للتشخيص النقاط التالية:
- في حالة إجراء التحليل عند حديثي الولادة ، يجب توضيح الوالدين أنه بمساعدته سيكون من الممكن تشخيص مرض الانحلالي
- في حالة وجود اشتباه في تطور مرض انحلالي لدى المريض ، يحتاج إلى توضيح أن مثل هذا التحليل سيساعد في تحديد أسباب تطوره
- التحضير للتحليل لا يتطلب أي قيود في الغذاء والنظام الغذائي
- عند إجراء تحليل لحديثي الولادة ، يجب إخبار الوالدين بأن أخذ عينات الدم من الوريد مطلوب ، وكذلك توضيح وقت الإجراء
- من الضروري إبلاغ المريض أنه أثناء تطبيق عاصبة وأخذ عينات من الدم ، قد يحدث عدم الراحة
- يمكن أن يؤدي تناول الأدوية إلى تشويه نتائج اختبار كومبس ، لذلك يجب إلغاؤها قبل أن يتم إجراؤها في بعض الوقت
عند إجراء اختبار كومبس المباشر ، يتم أخذ الدم من الوريد باستخدام حقنة. قبل البدء في الإجراء ، يتم إجراء تطهير شامل لموقع البزل ، وبعد أخذ المادة للبحث ، يتم ضبط الصوف القطني أو الشاش المعقم. في حالة إجراء التحليل عند الأطفال حديثي الولادة ، يتم أخذ الدم من الحبل السري.
عندما يظهر ورم دموي بعد أخذ عينات الدم ، يتم وضع كمادات دافئة على موقع البزل. بعد العملية ، يمكن للمريض استئناف تناول الأدوية.
في المختبر ، يتم تنقية الدم الذي تم الحصول عليه وبالتوازي مع فصل خلايا الدم الحمراء.
يتم فحص العينة من قبل متخصص باستخدام مصل وكواشف كومبس المختلفة ، على عكس الجلوبيولين البشري. في حالة عدم التصاق كريات الدم الحمراء ببعضها وعدم تطور التراص ، فيمكننا التحدث عن نتيجة إيجابية.
أثناء الإجراء ، قد تحدث المضاعفات التالية:
- التطور من موقع أخذ عينات الدم أثناء الدراسة
- صداع أو دوار أو إغماء
- تطور نزيف تحت الجلد
- مع سوء العلاج المضاد للميكروبات للجلد في موقع الحقن ، يزداد خطر دخول العدوى إلى الجسم
نتائج البحث
فك - الأمراض المحتملة
لا يمتلك الشخص السليم في الجسم أجسامًا مضادة ، أي لا ينبغي أن تكون كذلك. في حال أظهرت الدراسة اختبارًا إيجابيًا ، فقد يشير ذلك إلى وجود أجسام مضادة في خلايا الدم الحمراء في الجسم.
يمكن أن تكون نتيجة هذه الحالة المرضية تدمير خلايا الدم الحمراء ، وعادة ما تتطور:
- مع النظامية
- مع عدوى الميكوبلازما
- مع عدد كريات الدم البيضاء المعدية
- في مرض الانحلالي لحديثي الولادة
- مع فقر الدم الانحلالي الناجم عن المخدرات
- مع ابيضاض الدم الليمفاوي المزمن
- مع فقر الدم الانحلالي المناعي الذاتي
- مع عدم توافق دم الجنين والأم
غالبًا ما يُعطى اختبار كومبس المباشر للنساء أثناء الحمل لتحديد مدى توافق دم الأم والجنين. في حالة وجود عدم توافق بين جسم الأم والطفل الذي لم يولد بعد من حيث عوامل كريات الدم الحمراء ، يزداد خطر الإصابة بمرض الانحلالي عند الوليد.
يتسبب طفل إيجابي عامل ريسس في امرأة سلبية عامل ريسس في تطور تضارب عامل ريسس.
مع مثل هذا المرض ، يحدث تدمير كريات الدم الحمراء للطفل الذي لم يولد بعد بواسطة الأجسام المضادة للريسوس في جسم الأم. بمجرد دخولها إلى جسم الأنثى ، يكون لخلايا الدم الحمراء الجنينية تأثير محفز على جهاز مناعة الأم ، والنتيجة هي إنتاج الأجسام المضادة للطفل.
فيديو مفيد - فقر الدم الانحلالي.
يؤدي تكوين مثل هذا في الكائن الحي للأم إلى تخثر تراص الشعيرات الدموية ونخر نقص تروية أنسجة الجنين. نتيجة لانحلال الدم في كريات الدم الحمراء وانهيار الهيموجلوبين ، لوحظ تكوين مادة سامة غير مباشرة في جسم الجنين. يؤدي الانخفاض الحاد في محتوى خلايا الدم الحمراء لدى الجنين بسبب انحلال الدم إلى تطور مرض مثل فقر الدم عند الطفل.
المستويات المنخفضة والتركيزات العالية من البيليروبين تعقد بشكل كبير مسار المرض. يتم تشخيص العديد من المضاعفات أثناء الحمل ، مثل:
- خطر الإجهاض
- تطور النزيف
- تسمم الحمل
- فقر دم
- مخاض مبكر
تحمي الأجسام المضادة لمرض الريسوس الأم ، ولكنها في نفس الوقت تشكل تهديدًا خطيرًا للجنين النامي. بفضل اختبار كومبس ، من الممكن تشخيص مثل هذه الحالة المرضية للجسد الأنثوي في الوقت المناسب ووصف العلاج في الوقت المناسب. بالإضافة إلى ذلك ، يساعد هذا التحليل في تحديد أمراض الدم المختلفة ، والتي يمكن أن يؤدي تطورها إلى وفاة المريض.
اختبار كومبس
اختبار كومبس- اختبار مضاد الجلوبيولين يهدف إلى الكشف عن الأجسام المضادة لعامل Rh في الدم سلبية عامل الريزوس - وهو بروتين محدد موجود على سطح كريات الدم الحمراء للدم الموجب عامل الريسوس. هناك نوعان من هذا الاختبار: مباشر - الكشف المباشر عن الأجسام المضادة على سطح خلايا الدم الحمراء ، غير المباشر - الكشف عن الأجسام المضادة في مصل الدم. يتم إجراء اختبار مباشر في تشخيص ومراقبة علاج أمراض الدم: فقر الدم الانحلالي ، مرض الانحلالي لحديثي الولادة وغيرها. يتم إجراء اختبار غير مباشر لتقييم توافق دم المتبرع والمتلقي أثناء نقل الدم ، وكذلك لتحديد وجود ومخاطر تضارب عامل ريسس عند التخطيط للحمل وإدارته. مادة اختبار كومبس هي الدم الوريدي ، ويتم إجراء الدراسة بطرق تعتمد على تفاعل التراص. عادة ، يعطي كلا الاختبارين نتيجة سلبية. يتم إجراء التحليل في غضون يوم واحد.
اختبار Coombs هو فحص سريري للدم السلبي Rh ، ويهدف إلى اكتشاف الأجسام المضادة لعامل Rh. يستخدم الاختبار لتحديد مخاطر تطور تضارب الريس وردود الفعل الانحلالي. في كل شخص ، يحتوي سطح كريات الدم الحمراء على مجموعة معينة من المستضدات أو الجيلاتينوجينات - مركبات ذات طبيعة مختلفة ، يستخدم وجودها أو عدم وجودها للحكم على فصيلة الدم وعامل Rh. هناك أنواع عديدة من المستضدات ، في الممارسة الطبية ، الجلاتينوجين A و B ، التي تحدد فصيلة الدم ، والعامل الريصي اللاصقة D ، هي الأكثر أهمية من الناحية العملية. مع عامل Rh موجب ، يتم اكتشاف مستضدات D على الغشاء الخارجي لخلايا الدم الحمراء ، مع وجود سلبي - لا.
يهدف اختبار كومبس ، والذي يُطلق عليه أيضًا اختبار مضاد الغلوبولين ، إلى الكشف عن الأجسام المضادة غير المكتملة لنظام العامل الريسوسي في الدم. الأجسام المضادة لعامل Rh هي جلوبولين مناعي محدد يتم إنتاجه في دم سلبي عامل ريسوس عندما تدخله كريات الدم الحمراء مع المتراصة D. يوجد اختبار كومبس في نسختين - مباشر وغير مباشر. عند إجراء اختبار كومبس المباشر ، يتم الكشف عن الأجسام المضادة الملتصقة بسطح خلايا الدم الحمراء. تستخدم الدراسة لتحديد سبب رد الفعل الانحلالي. يهدف اختبار كومبس غير المباشر إلى اكتشاف الأجسام المضادة لكريات الدم الحمراء في بلازما الدم. من الضروري تحديد توافق دم المتبرع والمتلقي أو الأم والجنين ، فهو يساعد على منع تطور صراع الريس وانحلال الدم اللاحق لخلايا الدم الحمراء.
يتم أخذ الدم لكلا النوعين من اختبار كومبس من الوريد. يتم إجراء التحليل بطريقة التراص باستخدام مصل مضاد الجلوبيولين. تُستخدم نتائج الدراسة في أمراض الدم في تحديد أسباب تفاعلات انحلال الدم ، في الجراحة والإنعاش أثناء عمليات نقل الدم ، في أمراض النساء والتوليد في مراقبة الحمل لدى النساء ذوات الدم السلبي عامل ريسوس.
دواعي الإستعمال
يوصف اختبار كومبس المباشر ، الذي يكتشف الأجسام المضادة المرتبطة بسطح خلايا الدم الحمراء ، للتفاعلات الانحلالية (تدمير خلايا الدم الحمراء) من أصول مختلفة. يشار إلى الدراسة لفقر الدم الانحلالي الأولي للمناعة الذاتية ، وفقر الدم الانحلالي بعد نقل الدم ، ومرض الانحلالي لحديثي الولادة ، وانحلال خلايا الدم الحمراء الناجم عن أمراض المناعة الذاتية والأورام والأمراض المعدية ، وكذلك تناول الأدوية ، على سبيل المثال ، الكينيدين ، ميثيل دوبا ، بروكاييناميد . يستخدم اختبار كومبس غير المباشر ، الذي يكتشف الأجسام المضادة في بلازما الدم ، لمنع تطور صراع الريس. يستطب للمرضى الذين يستعدون لعمليات نقل الدم ، وكذلك للنساء الحوامل المصابات بعامل ريس سلبي ، بشرط أن يكون لدى والد الطفل المستقبلي عامل ريس إيجابي.
من أجل تحديد توافق العامل الريصي ، لا يتم إجراء اختبار كومبس للمرضى الذين يعانون من دم إيجابي عامل ريسس. في هذه الحالات ، توجد بالفعل مستضدات على سطح خلايا الدم الحمراء ، ولا يمكن تحفيز إنتاج الأجسام المضادة عن طريق نقل الدم أو دخول دم الجنين إلى مجرى دم المرأة الحامل. أيضًا ، لا يُشار إلى الدراسة للنساء الحوامل إذا كان لدى كلا الوالدين عامل Rh سلبي ، وهي سمة متنحية موروثة. دائمًا ما يكون لدى الطفل في مثل هؤلاء الأزواج دم سلبي ، ومن المستحيل حدوث صراع مناعي مع الأم. في أمراض الانحلالي ، لا يتم استخدام اختبار مضاد الغلوبولين لمراقبة نجاح العلاج ، لأن النتائج لا تعكس نشاط عملية تدمير كرات الدم الحمراء.
يتمثل الحد من اختبار Coombs في مدى تعقيد إجراء البحث - للحصول على نتائج موثوقة ، من الضروري الامتثال لشروط درجة الحرارة والوقت ، وقواعد تحضير الكواشف والمواد الحيوية. ميزة اختبار كومبس هي حساسيته العالية. في فقر الدم الانحلالي ، تظل نتائج هذا التحليل إيجابية ، حتى لو تطبيع الهيموجلوبين والبيليروبين والخلايا الشبكية.
التحضير للتحليل وجمع المواد
المادة المستخدمة لإجراء اختبار كومبس هي الدم الوريدي. لا توجد متطلبات خاصة لوقت إجراء أخذ عينات الدم ولإعداد المريض. كما هو الحال مع أي دراسة ، يوصى بأخذ استراحة بعد تناول الطعام لمدة 4 ساعات على الأقل ، وفي آخر 30 دقيقة للتوقف عن التدخين وممارسة الرياضة وتجنب الإجهاد العاطفي. يجدر أيضًا أن تناقش مع طبيبك مسبقًا الحاجة إلى التوقف عن تناول الأدوية - فبعض الأدوية يمكن أن تشوه نتائج اختبار كومبس. يؤخذ الدم بحقنة من الوريد المرفقي ، في كثير من الأحيان أقل من وريد في مؤخرة اليد. في غضون ساعات قليلة ، يتم تسليم المواد إلى المختبر.
عند إجراء اختبار كومبس المباشر ، يضاف مصل مضاد الغلوبولين إلى مصل دم المريض. بعد مرور بعض الوقت ، يتم فحص الخليط بحثًا عن وجود تراص - تتشكل في حالة وجود أجسام مضادة على خلايا الدم الحمراء. مع نتيجة إيجابية ، يتم تحديد عيار التراص. يتكون اختبار كومبس غير المباشر من خطوات أكثر. أولاً ، يتم تثبيت الأجسام المضادة الموجودة في المصل على كريات الدم الحمراء المحقونة أثناء الحضانة. ثم يضاف مصل مضاد الجلوبيولين إلى العينة ، بعد فترة يتم تحديد وجود التراص وعايرها. فترة التحليل يوم واحد.
نتائج طبيعية
عادة ، تكون نتيجة اختبار كومبس المباشر سلبية (-). هذا يعني أنه لا توجد أجسام مضادة مرتبطة بخلايا الدم الحمراء في الدم ، ولا يمكن أن تكون سبب انحلال الدم. النتيجة الطبيعية لاختبار كومبس غير المباشر سلبية أيضًا (-) ، أي أنه لا توجد أجسام مضادة لعامل Rh في بلازما الدم. عند التحضير لنقل الدم للمتلقي ، فإن هذا يعني التوافق مع دم المتبرع ، أثناء مراقبة الحمل - غياب تحسس العامل الريصي للأم ، وانخفاض خطر حدوث تضارب مناعي. لا يمكن أن تؤثر العوامل الفسيولوجية ، مثل العادات الغذائية أو النشاط البدني ، على نتيجة الاختبار. لذلك ، إذا كانت النتيجة إيجابية ، فمن الضروري استشارة الطبيب.
القيمة التشخيصية للتحليل
يتم التعبير عن نتيجة اختبار كومبس الإيجابية نوعيا ، من (+) إلى (++++) ، أو كميا ، بالتر من 1:16 إلى 1: 256. يتم إجراء تحديد تركيز الأجسام المضادة على كريات الدم الحمراء وفي مصل الدم في كلا النوعين من العينات. مع نتيجة إيجابية لاختبار كومبس المباشر ، يتم الكشف عن الأجسام المضادة على الغشاء الخارجي لخلايا الدم الحمراء ، مما يؤدي إلى تدمير خلايا الدم هذه. قد يكون السبب هو نقل الدم دون تصنيف مسبق - تفاعل انحلالي بعد نقل الدم ، بالإضافة إلى داء الكريات الحمر الوليدي ، تفاعل انحلالي بسبب استخدام الأدوية ، فقر الدم الانحلالي الأولي أو الثانوي المناعي الذاتي. يمكن أن يحدث التدمير الثانوي لكريات الدم الحمراء بسبب الذئبة الحمامية الجهازية ، ومتلازمة إيفانز ، والدنستروم ماكروغلوبولين الدم ، وبيلة الهيموغلوبينية الباردة الانتيابية ، وسرطان الدم الليمفاوي المزمن ، وسرطان الغدد الليمفاوية ، وعدد كريات الدم البيضاء المعدية ، والزهري ، والالتهاب الرئوي الميكوبلازم.
تشير النتيجة الإيجابية لاختبار كومبس غير المباشر إلى وجود أجسام مضادة لعامل Rh في البلازما. في الممارسة العملية ، هذا يعني أن التحسس من عامل ريسس قد حدث ، وهناك احتمال لتطوير تضارب في عامل ريسس بعد ضخ دم المتبرع أثناء الحمل. لمنع مضاعفات الحمل ، يتم وضع النساء اللواتي حصلن على نتيجة إيجابية لاختبار كومبس في سجلات خاصة.
علاج الانحرافات عن القاعدة
يشير اختبار كومبس إلى الدراسات المتساوية. تتيح نتائجه تحديد رد الفعل الانحلالي ، وكذلك تحديد توافق دم المتبرع والمتلقي ، الأم والجنين ، من أجل منع تطور تضارب الريس. إذا كانت نتيجة الاختبار إيجابية ، فمن الضروري طلب المشورة من الطبيب المعالج - طبيب التوليد وأمراض النساء وأخصائي أمراض الدم والجراح.