Metoda određivanja krvnih grupa. Coombsov test: klinički i laboratorijski aspekti Značenja i definicije Coombsovog testa

Ili otopljen u plazmi.

Sinonimi: antiglobulinski test, Coombsov test, AGT, neizravni/izravni antiglobulinski test, IAT, NAT, DAT, neizravni/izravni Coombsov test

Coombsov test je

analiza koja otkriva imunizaciju i antitijela na crvena krvna zrnca.

Vrste Coombsovog testa

  • direktni Coombsov test- otkriva antitijela fiksirana na površini eritrocita. Provodi se kod sumnje na autoimunu hemolitičku anemiju, hemolizu u autoimunim bolestima, nakon uzimanja lijekova (metildopa, penicilin, kinin), nakon transfuzije krvi i hemolitičke bolesti novorođenčadi.

Eritrociti su in vivo senzibilizirani – protutijela su već čvrsto vezana za njih, a dodavanjem antiglobulinskog seruma (anti-IgG) dolazi do slijepljenja senzibiliziranih stanica, što je vidljivo golim okom.

  • neizravni Coombsov test- otkriva antieritrocitna protutijela u krvnoj plazmi, izvodi se prije transfuzije krvi i tijekom trudnoće.

Antieritrocitna antitijela su vrsta autoantitijela, tj. antitijela protiv vlastitih tkiva. Autoantitijela se javljaju kada je imunološki sustav abnormalno reaktivan na određene lijekove, kao što su visoke doze penicilina.

Eritrociti na svojoj površini sadrže različite kemijske strukture (glikolipide, saharide, glikoproteine ​​i proteine) koji se u medicini nazivaju tzv. antigeni. Osoba nasljeđuje od roditelja određenu mapu antigena na svakom crvenom krvnom zrncu.

Antigeni se spajaju u skupine, a uz to se krv dijeli u nekoliko skupina - prema sustav AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Najpoznatiji i najznačajniji u radu liječnika su AB0 i Rh faktor (Rh).

AB0 sustav

Rhesus pripadnost osoba je određena prisutnošću ovih antigena. Posebno važan eritrocitni antigen je antigen D. Ako ga ima, onda se govori o Rh-pozitivnom RhD krvi, a ako ga nema, o Rh-negativnom Rhd.

Ako se odgovarajuće antitijelo pridruži antigenima eritrocita, tada se eritrocit uništava - hemolizira.

Indikacije za provođenje direktni antiglobulinski test

  • primarna autoimuna hemolitička anemija
  • hemolitička anemija kod autoimunih, neoplastičnih, zaraznih bolesti
  • autoimuna hemolitička anemija izazvana lijekovima
  • posttransfuzijska hemolitička anemija (dani - mjeseci)
  • hemolitička bolest novorođenčadi (inkompatibilnost u jednoj od krvnih grupa)

Indikacije za provođenje neizravni antiglobulinski test

  • prije transfuzije krvi
  • tijekom trudnoće Rh-negativne žene

Autoimuna hemolitička anemija

Autoimuna hemolitička anemija (primarna) je klasična autoimuna bolest nepoznatog uzroka. Pretpostavimo kršenje u procesu interakcije na razini imunološkog sustava, što dovodi do percepcije vlastitih eritrocita kao stranih. Stanice proizvode antitijela klase IgG (reagiraju na t 37°C) i/ili IgM (na t 40°C), pričvršćuju se na površinu eritrocita, pokreću niz enzima (sustav komplementa) i "buše" zid eritrocita, što dovodi do njegovog uništenja - hemoliza.


Simptomi hemolitičke anemije

  • umor, opća slabost, razdražljivost
  • dispneja
  • bolovi u trbuhu, mučnina
  • tamna boja urina
  • bol u leđima
  • ikterično obojenje kože i sluznica
  • povećanje jetre, slezene
  • smanjenje broja crvenih krvnih stanica i hemoglobina u općoj analizi krvi

Pozitivan rezultat ravno Coombsov test 100% potvrđuje dijagnozu autoimune hemolitičke anemije, dokazujući njezino autoimuno podrijetlo. Istodobno, negativan rezultat ne omogućuje postavljanje dijagnoze.

Sekundarna autoimuna hemolitička anemija i pozitivan Coombsov test mogu biti uz sljedeće bolesti:

  • sistemski eritematozni lupus
  • Evansov sindrom
  • Waldenströmova makroglobulinemija
  • paroksizmalna hladna hemoglobinurija
  • kronična limfocitna leukemija
  • limfomi
  • Infektivna mononukleoza
  • infekcija mikoplazmom pneumonije
  • sifilis

Pozitivnost antiglobulinskog testa u ovim bolestima ne služi kao dijagnostički kriterij, već je jedan od simptoma bolesti.

Hemolitička bolest novorođenčadi

Uzrok hemolitička bolest novorođenčadi nekompatibilnost krvnih grupa u majke i fetusa, u većini slučajeva prema Rhesus sustavu, u pojedinačnim slučajevima - prema sustavu AB0, kazuistički - prema drugim antigenima.

Rh-konflikt se razvija ako je kod Rh-negativne žene fetus naslijedio Rh-pozitivnu krv od svog oca.

Bolest se kod novorođenčadi razvija samo ako je majka već razvila antitijela na odgovarajuće antigene, što se događa nakon prethodnih trudnoća, poroda, pobačaja, transfuzije nekompatibilne krvi. Najčešći razlog pokretanja sinteze protutijela na antigene membrane eritrocita je porođaj (feto-maternalno krvarenje). Prvi porodi uglavnom prolaze bez komplikacija, ali sljedeći su puni hemolitičke bolesti novorođenčeta u prvim danima nakon rođenja.

Simptomi hemolitičke bolesti novorođenčadi

  • žutost kože
  • anemija
  • blijeda koža i sluznice
  • povećanje jetre i slezene
  • respiratorni poremećaji
  • oticanje cijelog tijela
  • ekscitacija i postupna depresija središnjeg živčanog sustava

Anemija nakon transfuzije krvi

Indirektni Coombsov test provedeno prije transfuzije krvi za procjenu kompatibilnosti, i direktni Coombsov test- nakon toga, ako se sumnja na posttransfuzijsku hemolizu, tj. ako imate simptome kao što su vrućica, zimica, suzenje (pročitajte dolje). Svrha testa je otkrivanje antitijela na transfuzirane eritrocite koja su se vezala za primateljeve eritrocite i uzrokuju posttransfuzijsku hemolizu, kao i prerano uklanjanje donorskih eritrocita iz cirkulacije primatelja (primatelja).

Simptomi hemolitičke reakcije nakon transfuzije krvi

  • povećanje tjelesne temperature
  • osip na koži
  • bol u leđima
  • crvena boja urina
  • mučnina
  • vrtoglavica


Dešifriranje Coombsovog testa

Vrijedno je podsjetiti da su temeljna pravila za dekodiranje izravnih i neizravnih antiglobulinskih testova ista. Jedina razlika je mjesto antitijela - u krvi ili već na crvenom krvnom zrncu - na eritrocitu.

  • ako direktni Coombsov test je negativan- to znači da antitijelo ne “sjeda” na eritrocite te treba dalje tražiti uzrok simptoma i napraviti neizravni Coombsov test
  • ako se pozitivan nalaz Coombs testa otkrije nakon transfuzije krvi, infekcija, lijekova - pozitivnost može trajati do 3 mjeseca (vrijeme života eritrocita 120 dana - 3 mjeseca)
  • pozitivan rezultat antiglobulinskog testa kod autoimune bolesti može trajati mjesecima ili čak godinama

Norme Coombsovog testa

  • direktni Coombsov test- negativno
  • neizravni Coombsov test- negativno

Kvalitativno se pozitivan rezultat mjeri brojem pluseva od jedan do četiri (+, ++, +++, ++++), a kvantitativno u digitalnom obliku - 1:16, 1:256 itd.

4 činjenice o Coombsovom testu

  • prvi put predložen na Cambridgeu 1945
  • prag osjetljivosti - najmanje 300 fiksiranih molekula protutijela na jednom eritrocitu
  • broj antitijela koja pokreću hemolizu - pojedinačno za svaku osobu (od 16-30 do 300)
  • dinamika ostalih laboratorijskih pokazatelja hemolitičke anemije (hemoglobin, bilirubin, retikulociti) može se normalizirati, a Coombsov test će ostati na istoj razini


Nedostaci antiglobulinskog testa

  • ne može odrediti snagu vezanja antigena na protutijelo
  • nepoznat broj vezanih antitijela
  • ne određuje vrstu antitijela
  • pozitivan Coombsov test neće pomoći u određivanju njegovog uzroka
  • 0,5% zdravih ljudi ima pozitivan Coombsov test bez ikakvih dokaza hemolitičke anemije
  • nije pogodan za praćenje uspješnosti liječenja, jer ne ukazuje na aktivnost hemolize eritrocita

COOMBSOVA REAKCIJA(R. R. A. Coombs, engleski imunolog, rođen 1921.; sin.: Coombsov test, antiglobulinski test) - imunološka reakcija za otkrivanje nepotpunih protutijela na auto- i izoantigene eritrocita.

Reakciju je 1908. razvio S. Moreschi, ali je u širokoj upotrebi tek od 1945. nakon što je Coombs pokazao njezinu ulogu u određivanju kompatibilnosti u transfuzijama krvi, Rhesus konfliktu, dijagnosticiranju autoalergijskih i autoimunih stanja itd.

Coombsova reakcija temelji se na upotrebi posebno pripremljenog pripravka u njemu - antiglobulinskog seruma. U prisutnosti antiglobulinskog seruma dolazi do aglutinacije eritrocita opterećenih nepotpunim antitijelima. Eritrociti koji na svojoj površini ne sadrže protutijela ostaju neaglutinirani.

K. r. naširoko se koristi za: a) utvrđivanje stanja izosenzibilizacije, tj. otkrivanje izoantitijela koja se javljaju tijekom ponovljenih transfuzija krvi (vidi Transfuzija krvi) ili trudnoće (vidi Trudnoća); b) provođenje testa kompatibilnosti s transfuzijom krvi; c) definicije različitih Rh faktora u eritrocitima (vidi); d) otkrivanje autoimunih antitijela na eritrocitima pacijenata sa stečenom hemolitičkom anemijom (vidi) i drugim autoalergijskim bolestima (vidi), kao i kod nekih infekcija koje se javljaju s alergijskom komponentom; e) otkrivanje izoimunih protutijela fiksiranih na eritrocite djece koja boluju od hemolitičke bolesti novorođenčadi (vidi). K. r. Također se koristi u forenzičkim i antropološkim istraživanjima.

Glavni materijal za uprizorenje K. r. su serum ili citrirana plazma i eritrociti bolesnika. Postoje dvije varijante K. rijeke: neizravna i izravna. S neizravnim K. str. proučavati serum pacijenta, u rezu definirati slobodno cirkulirajuća antitijela. S ravnom linijom K. str. eritrociti se ispituju na prisutnost protutijela fiksiranih na te krvne stanice.

Antiglobulinski serum za K. rijeka. primiti imunizacijom lab. životinje (zečevi, koze, ovce itd.) s globulinima izoliranim iz ljudskog seruma frakcioniranjem s etanolom, amonijevim sulfatom ili gel filtracijom na Sephadexu. Po primitku antiglobulinskog seruma potrebno je ukloniti heteroaglutinirajuća protutijela nastala imunizacijom životinja humanim globulinima. To se postiže adsorpcijom imunološkog seruma s mješavinom eritrocita ljudi različitih krvnih grupa ili njegovim razrjeđivanjem izotoničnom otopinom natrijeva klorida. U potonjem slučaju titar heteroaglutinina treba biti nizak (1: 16 - 1: 32), tako da nakon razrjeđivanja antiglobulinski serum zadrži dobru aktivnost u K. r.

Neizravna Coombsova reakcija

Neizravna Coombsova reakcija provodi se u dva koraka. Prva faza se provodi u malim epruvetama posebno namijenjenim za tu svrhu, veličine 4 X 0,5 cm, u svaku epruvetu po tri kapi seruma (cijelog, 1:2 itd.) u kojem se utvrđuje prisutnost antitijela. sumnja se, jedna kap se doda sediment eritrocita poznatog antigenskog sastava. Sadržaj epruvete se promiješa i stavi u termostat na t° 37° 1 sat. Zatim se eritrociti tri puta isperu izotoničnom otopinom natrijeva klorida. Drugi stupanj sastoji se u pripremi 5% suspenzije ispranih eritrocita i povezivanju na bijeloj (porculanskoj) pločici s navlaženom površinom jedne kapi eritrocita s jednom kapi antiglobulinskog seruma. Obračunavanje rezultata provodi se do 10 minuta. Lažno pozitivni rezultati isključeni su izvođenjem kontrolnih studija. Primjena izotonične otopine natrijeva klorida umjesto antiglobulinskog seruma ne smije biti praćena aglutinacijom eritrocita. Izvedba neizravne K. r. u odnosu na eritrocite poznatog fenotipa, izoantigeni vam omogućuju utvrđivanje specifičnosti antitijela. Na primjer, studija seruma pacijenta s eritrocitima 0(I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fya; 0(I), cDe, Kk, Fya; 0(I), cDE, Kk, Fya; 0(I), cde, kk, Fya dali su pozitivan rezultat uzorka krvi u 1. i 4. slučaju; drugi uzorci krvi (2, 3, 5. slučaj) pokazali su negativan rezultat. Serum sadrži anti-E antitijela. Uz pomoć posrednog K. r. mogu se dokazati nepotpuna protutijela protiv antigena: C, D, E, c, e; K, k; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb itd. (vidi Krvne grupe).

Izravna Coombsova reakcija

Prema tehnici izvršenja, izravna Coombsova reakcija odgovara drugom stupnju neizravne K. r.: pacijentovi eritrociti (5% suspenzija) isprani tri puta izotoničnom otopinom natrijevog klorida kombiniraju se s antiglobulinskim serumom. Izravni K. r. provesti kada postoji razlog za vjerovanje da su eritrociti pacijenta koji se ispituje in vivo već senzibilizirani protutijelima. Pozitivna ravna linija K. r. služi kao dijagnostički znak u hemolitičkoj bolesti novorođenčadi, uzrokovanoj senzibilizacijom ženskog tijela na fetalne antigene i prodiranjem antitijela kroz placentu u djetetovo tijelo, kao i sa stečenom hemolitičkom anemijom.

Posljednjih godina K. r. značajno poboljšana. Uz njegovu pomoć moguće je ne samo utvrditi prisutnost protutijela na eritrocitima, već i utvrditi klasu imunoglobulina (vidi). Da biste to učinili, koristite serum protiv određenih klasa imunoglobulina: IgG, IgM, IgA. Izoimuna antitijela protiv Rh, Kell antigena, Duffy antigena i drugih antigena, kao i topla autoimuna antitijela, obično su IgG. Hladna autoimuna antitijela, kao i izoimuna antitijela protiv Le i nekih drugih antigena, u pravilu pripadaju IgM. Samo rijetka autoimuna protutijela imaju prirodu IgA (vidi Autoantitijela).

Bibliografija: Dygin V. P. Autoimune bolesti u klinici internih bolesti, L., 1970, bibliogr. ; Kassirsky I. A. i Alekseev G. A. Klinička hematologija, M., 1970; Kosyakov P. N. Izoantigeni i ljudska izoantitijela u normalnim i patološkim uvjetima, M., 1974, bibliogr.; Boivin P. e. a. Les anemias hemolytiques, str. 93, str., 1971, bibliogr.; Klinički aspekti imunologije, ur. autor: P. G. H. Geli a. o., Oxford, 1975.; Coombs R. R. A., Mourant A. E. a. Race R. R. In vivo izosenzibilizacija crvenih krvnih zrnaca u beba s hemolitičkom bolešću, Lancet, v. 1, str. 264, 1946.

Izravni Coombsov test. Uz pomoć ovog testa dokazuje se prisutnost blokirajućih antitijela fiksiranih djetetovim eritrocitima. Pozitivan izravni test ukazuje na preosjetljivost i snažan je pokazatelj hemolitičke bolesti novorođenčeta prije nego što se pojave drugi klinički znakovi. Iznimno i samo u vrlo teškim slučajevima izravni Coombsov test može biti negativan zbog već započete, gotovo potpune hemolize senzibiliziranih eritrocita.

Izravni Coombsov test provodi se na sljedeći način: u epruvetu se stavi 5 kapi krvi uzete iz pete djeteta i doda 5 ml fiziološke otopine. Dobro promiješajte i centrifugirajte 10 minuta. Iz sedimenta eritrocita izdvaja se bistra tekućina. Zatim ponovno dodajte 5 ml fiziološke otopine, promiješajte i centrifugirajte. Nakon trostrukog miješanja s fiziološkom otopinom, eritrociti se dobro isperu. Nakon posljednjeg odvajanja supernatanta, sediment eritrocita u količini od 0,1 ml pomiješa se s 0,9 ml fiziološke otopine. Nanesite 2-3 kapi ove mješavine na predmetno staklo i dodajte jednu kap Coombsovog seruma. Prisutnost aglutinacije ukazuje da je reakcija pozitivna (pozitivan direktni Coombsov test). Ispitivanje treba provesti na sobnoj temperaturi iznad 16°C kako bi se izbjeglo djelovanje hladnih aglutinina.

Indirektni Coombsov test služi kao dokaz prisutnosti slobodnih antitijela u serumu majke i izvodi se sa serumom majke.

Hemolitička bolest u novorođenčadi s Rh inkompatibilnošću obično se manifestira nakon druge trudnoće. Prvo dijete rađa se zdravo, drugo sa znakovima blage anemije, a tek nakon treće trudnoće rađaju se djeca s očitim znakovima hemolitičke bolesti. Samo kod prethodno senzibiliziranih žena tijekom prve trudnoće može se roditi dijete sa simptomima hemolitičke bolesti. U nekim slučajevima imunizacija uzrokuje pobačaje i mrtvorođenčad. Za nastanak i težinu bolesti važno je stanje posteljice i trajanje izloženosti fetusa majčinim aglutininima. S pojavom aglutinina 10-14 tjedana prije rođenja dijete obično ima subkliničke oblike. Rana pojava aglutinina, 15-26 tjedana prije poroda, uzrokuje teške oblike bolesti. U svim oblicima bolesti glavni proces je hemoliza. Posljedica reakcije antigen-antitijelo je hemoliza, oštećenje jetrenih i moždanih kapilara. Ovisno o tome koja lezija prevladava, uočavaju se različiti oblici bolesti. Opasni su i neki anafilaktički fenomeni. Oni dovode do stvaranja tvari sličnih histaminu koje uzrokuju teška oštećenja stanica jetre, a posebno ganglijskih stanica bazalnih jezgri, amonovog roga, produžene moždine, pa čak i kore velikog mozga. S oštećenjem jetrenih stanica ekstrahepatalnoj žutici pridružuje se hepatalna žutica. Djeca umiru s teškim simptomima nuklearne žutice. Ako prežive, ostaju simptomi lezija živčanog sustava (poremećaji ekstrapiramidnog sustava s koreoatetičkim pokretima, svojevrsnim plesnim hodom, forsiranim pokretima glave, ponekad poremećaj koordinacije voljnih pokreta s čestim padovima, povišen mišićni tonus. , mentalna retardacija, tj. sa znakovima poput encephalopathia posticteria infantum).

Posljednjih godina među pacijentima različite dobi povećan je broj krvnih bolesti, a za njihovu dijagnostiku koriste se različite metode i sredstva. Coombsov test je klinički test krvi, a svrha njegovog provođenja je identificirati određene organizme koji predstavljaju prijetnju ljudskom zdravlju.

Protutijela se mogu zalijepiti i rezultat može biti kršenje stanja imunološkog sustava. Izravni Coombsov test je antiglobulinski test koji se izvodi za otkrivanje antitijela pričvršćenih na površinu crvenih krvnih stanica.

Obično stručnjaci pribjegavaju testu na antitijela u sljedećim situacijama:

  • Potreba za transfuzijom krvi. Iz školskog tečaja anatomije poznato je da osoba može imati jednu od četiri krvne grupe. Provođenje antiglobulinskog testa omogućuje vam određivanje mogućnosti transfuzije krvi u drugi organizam. Može se reći da pacijent može postati darivatelj za transfuziju samo ako njegova krv odgovara tipu bolesnika, odnosno sadrži iste antigene. U slučaju da pacijent i darivatelj imaju razliku u antigenima, to može dovesti do uništenja transfuziranih stanica od strane imunološkog sustava. Posljedica toga može biti razvoj ozbiljnih bolesti i komplikacija, pa čak i smrt. Zbog toga se važna uloga pridaje pronalaženju prave vrste krvi kada je potrebno transfuzirati.
  • Određivanje rizika od Rh senzibilizacije. Moderna medicina definira Rh kao antigen, a njegova puna definicija je koncept "Rh faktora". Zahvaljujući Coombsovom testu, moguće je dijagnosticirati prisutnost antitijela na Rh faktor u krvi žena tijekom. U slučaju da buduća majka ima negativan Rh faktor, a otac je pozitivan, tada nerođeno dijete može naslijediti bilo koji od njih. Ako se kod nerođenog djeteta otkrije pozitivan Rh faktor, povećava se rizik od razvoja Rh senzibilizacije - to je proces miješanja krvi i majke tijekom trudnoće ili poroda.

U slučaju da postoji nekompatibilnost između skupine majke i djeteta, tada imunološki sustav ženskog tijela počinje percipirati fetus kao strani objekt i vrši sve vrste napada na njega. Rezultat toga može biti razvoj teške patologije kod djeteta, koja se naziva eritroblastoza. U nekim slučajevima, u nedostatku učinkovitog liječenja, fetalna smrt se opaža u maternici ili odmah nakon rođenja.

U nekim slučajevima provodi se Coombsov test za otkrivanje autoimunih hemolitičkih bolesti.

Takva je bolest prilično rijetka i manifestira se stvaranjem eritrocitnih antigena vlastitog tijela.


Stručnjaci razlikuju dvije vrste Coombsovih uzoraka, od kojih se svaki koristi za određene svrhe.

Izravni test. Izravni test u medicinskoj praksi naziva se i izravni antiglobulinski test i uz njegovu pomoć moguće je dijagnosticirati antitijela pričvršćena na površinu. U nekim slučajevima, proizvodnja takvih antitijela u ljudskom tijelu javlja se kao rezultat progresije različitih ili uporabe lijekova kao što su:

  • kinidin
  • metildop
  • Prokainamid

Opasnost od takvih antitijela leži u činjenici da mogu izazvati razvoj i imati destruktivan učinak na. Ponekad se pribjegava Coombsovom testu kada je potrebno utvrditi uzroke razvoja patologija kao što su anemija i.

Negativan Coombsov test smatra se normalnim.

Indirektni test. Često stručnjaci pribjegavaju provođenju neizravnog Coombsovog testa, koji ima drugo ime "indirektni antiglobulinski test". Glavna svrha ovoga je otkrivanje antitijela na crvena krvna zrnca koja su prisutna u krvnom serumu. Zahvaljujući ovom testu moguće je utvrditi odgovara li krv darivatelja krvi pacijenta ako ju je potrebno transfuzirati. Takva je analiza svojevrsni test kompatibilnosti, a zahvaljujući njegovoj provedbi moguće je izbjeći razvoj neželjene reakcije na krv davatelja.

Obično se takva studija preporučuje ženama tijekom. Neke majke mogu imati antitijela određene klase u tijelu koja mogu prijeći posteljicu u krv nerođenog djeteta. Rezultat takvog procesa može biti hemolitička bolest fetusa, kao i razvoj raznih tijekom trudnoće.

Priprema za postupak i njegovo provođenje

Zahvat obično ne zahtijeva nikakvu posebnu pripremu i može se obaviti u bilo kojem trenutku.

Priprema za dijagnostiku uključuje sljedeće točke:

  • u slučaju da će se analiza provesti u novorođenčadi, roditeljima treba objasniti da će uz njegovu pomoć biti moguće dijagnosticirati hemolitičku bolest
  • ako postoji sumnja na razvoj hemolitičke bolesti kod pacijenta, potrebno mu je objasniti da će takva analiza pomoći u utvrđivanju uzroka njezina razvoja
  • priprema za analizu ne zahtijeva nikakva ograničenja u hrani i prehrani
  • prilikom provođenja analize u novorođenčadi, roditelje treba obavijestiti da će biti potrebno uzimanje krvi iz vene, kao i razjasniti vrijeme postupka
  • potrebno je obavijestiti pacijenta da se tijekom stavljanja steza i uzimanja krvi može pojaviti nelagoda
  • uzimanje lijekova može iskriviti rezultate Coombsovog testa, pa ih treba prekinuti neko vrijeme prije nego što se provede

Prilikom provođenja izravnog Coombsovog testa, krv se uzima iz vene pomoću štrcaljke. Prije početka postupka provodi se temeljita dezinfekcija mjesta uboda, a nakon uzimanja materijala za istraživanje namješta se vata ili sterilna gaza. U slučaju da se analiza provodi u novorođenčadi, tada se uzima krv iz pupkovine.

Kada se nakon vađenja krvi pojavi hematom, na mjesto uboda stavljaju se grijaći oblozi. Nakon postupka pacijent može nastaviti uzimati lijekove.

U laboratoriju se dobivena krv pročišćava i paralelno se vrši odvajanje crvenih krvnih zrnaca.

Uzorak pregledava specijalist koristeći različite serume i Coombsove reagense, za razliku od humanog globulina. U slučaju da se eritrociti ne drže zajedno i ne razvije se aglutinacija, tada možemo govoriti o pozitivnom rezultatu.

Tijekom postupka mogu se pojaviti sljedeće komplikacije:

  • razvoj od mjesta uzimanja krvi tijekom studije
  • glavobolja, vrtoglavica ili nesvjestica
  • razvoj krvarenja ispod kože
  • s lošom antimikrobnom obradom kože na mjestu ubrizgavanja povećava se rizik od ulaska infekcije u tijelo

Rezultati istraživanja

Dekodiranje - moguće bolesti

Zdrava osoba u tijelu nema antitijela na, to jest, normalno ih ne bi trebalo biti. U slučaju da studija pokaže pozitivan test, to može ukazivati ​​na prisutnost antitijela na crvenim krvnim stanicama u tijelu.

Rezultat takvog patološkog stanja može biti uništavanje crvenih krvnih stanica, a obično se razvija:

  • sa sustavnim
  • s infekcijom mikoplazmom
  • s infektivnom mononukleozom
  • kod hemolitičke bolesti novorođenčadi
  • s hemolitičkom anemijom izazvanom lijekovima
  • s kroničnom limfocitnom leukemijom
  • s autoimunom hemolitičkom anemijom
  • s nekompatibilnošću krvi fetusa i majke

Izravni Coombsov test često se daje ženama tijekom trudnoće kako bi se utvrdila kompatibilnost krvi majke i fetusa. U slučaju da postoji nekompatibilnost majčinog tijela i nerođenog djeteta u pogledu agenasa eritrocita, tada se povećava rizik od razvoja hemolitičke bolesti novorođenčeta.

Rh-pozitivno dijete kod Rh-negativne žene uzrokuje razvoj Rh-sukoba.

Uz takvu patologiju, uništavanje eritrocita nerođenog djeteta događa se anti-rezusnim tijelima majčinog tijela. Nakon što uđu u žensko tijelo, fetalne crvene krvne stanice imaju stimulirajući učinak na majčin imunološki sustav, a rezultat je proizvodnja antitijela na dijete.

Korisni video - hemolitička anemija.

Nastanak takvih u majčinom organizmu dovodi do aglutinacijske tromboze kapilara i ishemijske nekroze fetalnih tkiva. Kao rezultat hemolize eritrocita i razgradnje hemoglobina, opaža se stvaranje toksičnih neizravnih u tijelu fetusa. Oštar pad sadržaja crvenih krvnih stanica u fetusu zbog njihove hemolize dovodi do razvoja bolesti kao što je anemija kod djeteta.

Niske razine i visoke koncentracije bilirubina značajno kompliciraju tijek bolesti. Tijekom trudnoće dijagnosticiraju se mnoge komplikacije, kao što su:

  • opasnost od pobačaja
  • razvoj krvarenja
  • preeklampsija
  • anemija
  • prijevremeni trudovi

Anti-rezusna tijela štite majku, ali istovremeno predstavljaju ozbiljnu prijetnju fetusu u razvoju. Zahvaljujući Coombsovom testu, moguće je na vrijeme dijagnosticirati takvo patološko stanje ženskog tijela i propisati pravodobno liječenje. Osim toga, takva analiza pomaže identificirati različite bolesti krvi, čija progresija može dovesti do smrti pacijenta.

Coombsov test

Coombsov test- antiglobulinski test čiji je cilj otkrivanje u Rh negativnoj krvi nepotpunih antieritrocitnih protutijela na Rh faktor - specifični protein koji se nalazi na površini eritrocita Rh pozitivne krvi. Postoje dvije vrste ovog testa: izravni - otkrivanje protutijela na površini crvenih krvnih stanica, neizravni - otkrivanje protutijela u krvnom serumu. Direktan test se provodi u dijagnostici i praćenju liječenja bolesti krvi: hemolitička anemija, hemolitička bolest novorođenčadi i dr. Provodi se neizravni test za procjenu kompatibilnosti krvi davatelja i primatelja tijekom transfuzije, kao i za određivanje prisutnosti i rizika od Rh sukoba pri planiranju i vođenju trudnoće. Materijal za Coombsov test je venska krv, studija se provodi metodama koje se temelje na reakciji aglutinacije. Obično oba testa daju negativan rezultat. Analiza se provodi unutar jednog dana.

Coombsov test je klinički pregled Rh-negativne krvi, čiji je cilj otkrivanje antitijela na Rh faktor. Test se koristi za prepoznavanje rizika od razvoja Rhesus sukoba i hemolitičkih reakcija. U svakoj osobi površina eritrocita sadrži određeni skup antigena ili aglutinogena - spojeva različite prirode, po čijoj se prisutnosti ili odsutnosti prosuđuje krvna grupa i Rh faktor. Postoje mnoge vrste antigena, au medicinskoj praksi najveći praktični značaj imaju aglutinogeni A i B koji određuju krvnu grupu, te aglutinogen D, Rh faktor. S pozitivnim Rh faktorom, D antigeni se otkrivaju na vanjskoj membrani eritrocita, s negativnim - ne.

Coombsov test, koji se naziva i antiglobulinski test, usmjeren je na otkrivanje nepotpunih antieritrocitnih antitijela na sustav Rh faktora u krvi. Protutijela na Rh faktor su specifični imunoglobulini koji se stvaraju u Rh negativnoj krvi kada u nju uđu eritrociti s aglutinogenima D. To se može dogoditi kod miješanja krvi fetusa i trudnice, pri čemu se transfuzije krvi rade bez prethodne krvne grupe. Coombsov test postoji u dvije verzije - izravnoj i neizravnoj. Prilikom izvođenja izravnog Coombsovog testa, antitijela se otkrivaju pričvršćena na površinu crvenih krvnih stanica. Studija se koristi za određivanje uzroka hemolitičke reakcije. Indirektni Coombsov test je usmjeren na otkrivanje antieritrocitnih protutijela u krvnoj plazmi. Potrebno je utvrditi kompatibilnost krvi davatelja i primatelja ili majke i fetusa, pomaže u sprječavanju razvoja Rhesus sukoba i naknadne hemolize crvenih krvnih stanica.

Krv za obje varijante Coombsovog testa uzima se iz vene. Analiza se provodi metodom aglutinacije pomoću antiglobulinskog seruma. Rezultati istraživanja koriste se u hematologiji pri utvrđivanju uzroka hemolitičkih reakcija, u kirurgiji i reanimaciji tijekom transfuzije krvi, u opstetriciji i ginekologiji pri praćenju trudnoće kod žena s Rh negativnom krvlju.

Indikacije

Izravni Coombsov test, koji otkriva antitijela pričvršćena na površinu crvenih krvnih stanica, propisan je za hemolitičke reakcije (uništavanje crvenih krvnih stanica) različitog podrijetla. Studija je indicirana za primarnu autoimunu hemolitičku anemiju, posttransfuzijsku hemolitičku anemiju, hemolitičku bolest novorođenčadi, hemolizu crvenih krvnih stanica uzrokovanu autoimunim, neoplastičnim ili zaraznim bolestima, kao i uzimanje lijekova, na primjer, kinidin, metildopa, prokainamid . Neizravni Coombsov test, koji otkriva antitijela u krvnoj plazmi, koristi se za sprječavanje razvoja Rhesus sukoba. Indiciran je za pacijente koji se pripremaju za transfuziju krvi, kao i za trudnice s negativnim Rh faktorom, pod uvjetom da budući otac djeteta ima pozitivan Rh faktor.

Kako bi se utvrdila Rh kompatibilnost, Coombsov test se ne primjenjuje kod pacijenata s Rh pozitivnom krvlju. U tim slučajevima na površini crvenih krvnih zrnaca već postoje antigeni, stvaranje antitijela ne može biti potaknuto transfuzijom krvi ili ulaskom fetalne krvi u krvotok trudnice. Također, studija nije indicirana za trudnice ako oba roditelja imaju negativan Rh faktor, nasljednu recesivnu osobinu. Dijete u takvim parovima uvijek ima Rh-negativnu krv, imunološki sukob s majkom je nemoguć. U hemolitičkim patologijama, antiglobulinski test se ne koristi za praćenje uspješnosti terapije, budući da rezultati ne odražavaju aktivnost procesa razaranja eritrocita.

Ograničenje Coombsovog testa je složenost postupka istraživanja - za dobivanje pouzdanih rezultata potrebno je pridržavati se temperaturnih i vremenskih uvjeta, pravila za pripremu reagensa i biomaterijala. Prednost Coombsovog testa je njegova visoka osjetljivost. Kod hemolitičke anemije, rezultati ove analize ostaju pozitivni, čak i ako se hemoglobin, bilirubin i retikulociti normaliziraju.

Priprema za analizu i prikupljanje materijala

Materijal za izvođenje Coombsovog testa je venska krv. Ne postoje posebni zahtjevi za vrijeme postupka vađenja krvi i za pripremu pacijenta. Kao i kod svake studije, preporučuje se pauza nakon jela od najmanje 4 sata, au zadnjih 30 minuta prestati pušiti, vježbati i izbjegavati emocionalni stres. Također je vrijedno unaprijed razgovarati sa svojim liječnikom o potrebi prestanka uzimanja lijekova - neki lijekovi mogu iskriviti rezultate Coombsovog testa. Krv se uzima štrcaljkom iz kubitalne vene, rjeđe iz vene na nadlanici. U roku od nekoliko sati materijal se isporučuje u laboratorij.

Kod izvođenja izravnog Coombsovog testa serumu krvi bolesnika dodaje se antiglobulinski serum. Nakon nekog vremena, smjesa se ispituje na prisutnost aglutinata - oni nastaju ako postoje antitijela na crvenim krvnim stanicama. S pozitivnim rezultatom određuje se aglutinacijski titar. Indirektni Coombsov test sastoji se od više koraka. Najprije se antitijela prisutna u serumu fiksiraju na ubrizgane eritrocite tijekom inkubacije. Zatim se uzorku dodaje antiglobulinski serum, nakon nekog vremena utvrđuje se prisutnost i titar aglutinata. Period analize je 1 dan.

Normalni rezultati

Normalno je rezultat izravnog Coombsovog testa negativan (-). To znači da u krvi nema antitijela povezanih s crvenim krvnim zrncima i ona ne mogu biti uzrok hemolize. Normalan rezultat neizravnog Coombsovog testa također je negativan (-), odnosno u krvnoj plazmi nema antitijela na Rh faktor. Kada se pripremate za transfuziju krvi za primatelja, to znači kompatibilnost s krvlju davatelja, tijekom praćenja trudnoće - odsutnost Rh senzibilizacije majke, nizak rizik od razvoja imunološkog sukoba. Fiziološki čimbenici, poput prehrambenih navika ili tjelesne aktivnosti, ne mogu utjecati na rezultat testa. Stoga, ako je rezultat pozitivan, potrebna je konzultacija liječnika.

Dijagnostička vrijednost analize

Pozitivan rezultat Coombsovog testa izražava se kvalitativno, od (+) do (++++), ili kvantitativno, titrima od 1:16 do 1:256. Određivanje koncentracije protutijela na eritrocitima iu krvnom serumu provodi se u obje vrste uzoraka. S pozitivnim rezultatom izravnog Coombsovog testa otkrivaju se antitijela na vanjskoj membrani crvenih krvnih stanica, koja dovode do uništenja tih krvnih stanica. Uzrok može biti transfuzija krvi bez prethodne tipizacije - posttransfuzijska hemolitička reakcija, kao i neonatalna eritroblastoza, hemolitička reakcija zbog primjene lijekova, primarna ili sekundarna autoimuna hemolitička anemija. Sekundarna destrukcija eritrocita može biti uzrokovana sistemskim eritemskim lupusom, Evansovim sindromom, Waldenströmovom makroglobulinemijom, paroksizmalnom hladnom hemoglobinurijom, kroničnom limfocitnom leukemijom, limfomom, infektivnom mononukleozom, sifilisom, mikoplazmatskom pneumonijom.

Pozitivan rezultat neizravnog Coombsovog testa ukazuje na prisutnost antitijela na Rh faktor u plazmi. U praksi to znači da je došlo do Rh senzibilizacije, postoji mogućnost razvoja Rh sukoba nakon infuzije krvi donora tijekom trudnoće. Kako bi se spriječile komplikacije u trudnoći, žene s pozitivnim rezultatom Coombsovog testa stavljaju se na posebnu evidenciju.

Liječenje odstupanja od norme

Coombsov test odnosi se na izoserološke studije. Njegovi rezultati omogućuju prepoznavanje hemolitičke reakcije, kao i određivanje kompatibilnosti krvi davatelja i primatelja, majke i fetusa, kako bi se spriječio razvoj Rhesus sukoba. Ako je rezultat testa pozitivan, potrebno je potražiti savjet od liječnika - opstetričara-ginekologa, hematologa, kirurga.

Udio: