Metoda određivanja krvnih grupa. Coombsov test: klinički i laboratorijski aspekti

Od mnogih postojećih antigena u medicinskoj praksi, najveća važnost se daje trima vrstama krvnih aglutinogena. Jedan od njih je tip odgovoran za manifestaciju Rh faktora: ako je prisutan na membrani eritrocita, dijagnosticira se Rh + krvna grupa, ako je odsutan - Rh-. Ako eritrociti s Rh + aglutinogenima uđu u sastav Rh-negativne krvi, tijelo pokreće imunološki odgovor i počinje proizvoditi protutijela na ovaj antigen, što uzrokuje patološka stanja.

REFERENCA! Rh faktor je složen višekomponentni sustav od nekoliko desetaka antigena. Najčešći od njih su aglutinogeni tipa D (85% slučajeva), kao i E i C.

Coombsov test provodi se samo u prisutnosti izravnih indikacija. Opći popis razloga za propisivanje Coombsovog testa:

  • planiranje i vođenje trudnoće (roditelji imaju različite Rh);
  • donacija i priprema za transfuziju krvi (neusklađenost krvi u Rh nije ništa manje štetna od neusklađenosti u sustavu AB0);
  • planirana kirurška intervencija (u slučaju nadoknade gubitka krvi transfuzijom krvi);
  • dijagnoza hemolitičkih bolesti.

Konkretnije indikacije ovise o vrsti studije koja se provodi.

Izravni Coombsov test

Izravan test otkriva antitijela na površini crvenih krvnih stanica. Ovo je neophodno za dijagnozu postojećeg hemolitičke patologije:

  • autoimuni (eritrociti i hemoglobin se uništavaju kao rezultat napada vlastitih tjelesnih antitijela);
  • lijekovi (patološki proces izaziva unos određenih lijekova kao što su kinidin ili prokainamid);
  • nakon transfuzije (s neusklađenošću krvne grupe tijekom transfuzije), kao iu obliku Rh sukoba tijekom trudnoće (eritroblastoza novorođenčadi).

REFERENCA! Hemolitička anemija je bolest povezana s preranim uništavanjem crvenih krvnih stanica kao rezultat hemolize, što dovodi do nedovoljne zasićenosti krvi kisikom i hipoksije mozga i / ili unutarnjih organa.

Hemoliza krvnih elemenata opaža se u onkološkim, zaraznim, reumatskim bolestima, pa se izravni Coombsov test može koristiti kao dodatno sredstvo za dijagnosticiranje patološkog stanja. Istodobno, vrijedi zapamtiti: negativna vrijednost analize ne isključuje mogućnost hemolize, ali je razlog za dodatni pregled.

Indirektni Coombsov test

Neizravni test se češće koristi za sprječavanje patoloških situacija. Pomaže u otkrivanju antitijela u krvnoj plazmi, što je neophodno za procjenu kompatibilnosti transfuzije i dijagnosticiranje rizika od Rh konflikta tijekom trudnoće.

Više od 80% ljudi ima pozitivan Rh faktor (Rh +), odnosno nešto manje od 20% je Rh-negativno. Ako Rh-majka razvije Rh+ bebu, njezino tijelo počinje proizvoditi antitijela koja napadaju crvena krvna zrnca fetusa, uzrokujući hemolizu.

Uzimajući u obzir činjenicu da postotak brakova s ​​"različitim rezusom" doseže 12-15%, rizik od hemolitičke bolesti novorođenčadi trebao bi biti visok, ali u stvarnosti samo u 1 od 25 takvih slučajeva kod žena, fenomen uočena je senzibilizacija (za 200 uspješnih poroda, 1 primjer hemolitičke patologije). To je djelomično zbog činjenice da prvo Rh-pozitivno dijete obično ne uzrokuje otvorenu agresiju majčinog tijela; velika većina slučajeva javlja se kod druge i sljedeće djece. Primjenjuje se isti princip kao i kod konvencionalne senzibilizacije na određeni alergen.

Pri prvom kontaktu ne dolazi do reakcije. Tijelo se samo upoznaje s novim antigenom za njega, stvarajući antitijela klase IgM, koja su odgovorna za brzi imunološki odgovor, ali rijetko prodiru kroz placentarnu barijeru u krv djeteta. Sve patološke reakcije manifestiraju se pri ponovljenom "susretu", kada se u tijelu počnu stvarati antitijela klase IgG, koja lako prodiru u fetalni krvotok, započinjući proces hemolize.

Indirektni Coombsov test tijekom trudnoće omogućuje otkrivanje prisutnosti antitijela u majčinom tijelu i na vrijeme identificirati početnu fazu senzibilizacije. Pozitivan odgovor zahtijeva registraciju s mjesečnom studijom titra antitijela i obveznom hospitalizacijom 3-4 tjedna prije isporuke.

REFERENCA! Inkompatibilnost Rh faktora ni na koji način ne utječe na stanje majke, hemolitička bolest se razvija samo kod djeteta. U težim slučajevima i u nedostatku pravodobne reakcije, fetus može umrijeti u maternici ili odmah nakon rođenja.

Priprema za postupak i njegovo provođenje

Za dijagnozu se koristi venska krv. Posebna dugotrajna priprema za Coombsov test nije potrebna. Pokušajte slijediti standardni skup pravila prije uzimanja krvi iz vene za analizu:

  • za 3 dana, odreći se alkohola, lijekova (ako je moguće);
  • planirajte posljednji obrok najkasnije 8 sati prije uzimanja krvi za analizu;
  • odustati od pušenja, fizičkog, mentalnog i emocionalnog stresa za 1 sat;
  • Prije postupka popijte čašu čiste negazirane vode.

Metoda istraživanja temelji se na reakciji hemaglutinacije.

Prilikom provođenja izravnog testa uzorak krvi se izlaže unaprijed pripremljenom antiglobulinskom serumu s poznatim indikatorima, smjesa se neko vrijeme čuva i provjeravaju ima li aglutinata koji nastaju pri prisutnosti protutijela na eritrocitima. Razina aglutinata dijagnosticira se pomoću aglutinacijskog titra.

Indirektni test Coombs ima sličnu tehniku, ali složeniji slijed radnji. U izdvojeni krvni serum unose se antigeni eritrociti (s Rh faktorom), a tek nakon ovih manipulacija dodaje se antiglobulinski serum za dijagnostiku i titar aglutinata.

Rezultati istraživanja

Normalno, i izravni i neizravni Coombsov test trebao dati negativan rezultat:

  • negativan izravni test ukazuje da u krvi nema specifičnih protutijela na Rh faktor povezana s crvenim krvnim stanicama i ne mogu biti uzrok hemolize
  • negativan neizravni test pokazuje da u krvnoj plazmi također nema slobodnih protutijela na Rh faktor; činjenica ukazuje na kompatibilnost krvi davatelja s krvlju primatelja (ili krvi majke i djeteta) prema Rh faktoru.

Pozitivan Coombsov test ukazuje na činjenicu Rh senzibilizacije tijela, što je glavni uzrok Rh sukoba u slučaju transfuzije krvi ili kada nosite dijete s različitim Rh statusom. U tom slučaju rezultati ostaju nepromijenjeni 3 mjeseca (životni vijek eritrocita). Ako je uzrok postala autoimuna hemolitička anemija, tada pozitivan test može progoniti pacijenta nekoliko godina (u nekim slučajevima doživotno).

REFERENCA! Antiglobulinski test je vrlo osjetljiv, ali ima malo informacija. Ne registrira aktivnost hemolitičkog procesa, ne određuje vrstu antitijela i nije u stanju identificirati uzrok patologije. Da bi se dobila potpunija slika, liječnik koji je pohađao nužno propisuje dodatne studije (mikroskopija krvi, opća i biokemijska analiza, reumatski testovi, ESR, razina željeza i feritina).

Stupanj senzibilizacije može imati kvalitativni izraz (od "+" do "++++") ili kvantitativni - u obliku natpisa:

  • 1: 2 - niska vrijednost, ne predstavlja opasnost;
  • 1:4 - 1:8 - početak razvoja imunološke reakcije; ne predstavlja opasnost, ali zahtijeva stalno praćenje;
  • 1:16 -1:1024 - svijetli oblik senzibilizacije, treba odmah poduzeti mjere.

Razlog pozitivnog testa može biti:

  • transfuzija netipizirane krvi (ili s pogreškom pri tipkanju), kada se Rh faktor davatelja i primatelja ne podudara;
  • Rhesus sukob tijekom trudnoće (ako se sastav antigena krvi kod oca i majke ne podudara);
  • autoimuna hemolitička anemija - kongenitalna (primarna) i sekundarna, koja je posljedica određenih bolesti (Evansov sindrom, infektivna pneumonija, sifilis, hladna hemoglobinurija, limfom);
  • hemolitička reakcija lijeka.

Niti jedan od navedenih problema pacijent ne može riješiti bez medicinske pomoći. U svim slučajevima bit će potrebna hitna konzultacija, registracija ili hitna hospitalizacija.

PAŽNJA! U rijetkim slučajevima moguć je lažno pozitivan Coombsov test. Razlog tome mogu biti česte transfuzije krvi, kao i niz bolesti: reumatoidni artritis, eritematozni lupus, sarkoidoza. Također, ovaj fenomen se može promatrati nakon uklanjanja slezene, kao iu kršenju tijeka reakcije (često potresanje sadržaja, prisutnost kontaminanata).

Ili otopljen u plazmi.

Sinonimi: antiglobulinski test, Coombsov test, AGT, neizravni/izravni antiglobulinski test, IAT, NAT, DAT, neizravni/izravni Coombsov test

Coombsov test je

analiza koja otkriva imunizaciju i antitijela na crvena krvna zrnca.

Vrste Coombsovog testa

  • direktni Coombsov test- otkriva antitijela fiksirana na površini eritrocita. Provodi se kod sumnje na autoimunu hemolitičku anemiju, hemolizu u autoimunim bolestima, nakon uzimanja lijekova (metildopa, penicilin, kinin), nakon transfuzije krvi i hemolitičke bolesti novorođenčadi.

Eritrociti su in vivo senzibilizirani – protutijela su već čvrsto vezana za njih, a dodavanjem antiglobulinskog seruma (anti-IgG) dolazi do slijepljenja senzibiliziranih stanica, što je vidljivo golim okom.

  • neizravni Coombsov test- otkriva antieritrocitna protutijela u krvnoj plazmi, izvodi se prije transfuzije krvi i tijekom trudnoće.

Antieritrocitna antitijela su vrsta autoantitijela, tj. antitijela protiv vlastitih tkiva. Autoantitijela se javljaju kada je imunološki sustav abnormalno reaktivan na određene lijekove, kao što su visoke doze penicilina.

Eritrociti na svojoj površini sadrže različite kemijske strukture (glikolipide, saharide, glikoproteine ​​i proteine) koji se u medicini nazivaju tzv. antigeni. Osoba nasljeđuje od roditelja određenu mapu antigena na svakom crvenom krvnom zrncu.

Antigeni se spajaju u skupine, a uz to se krv dijeli u nekoliko skupina - prema sustav AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Najpoznatiji i najznačajniji u radu liječnika su AB0 i Rh faktor (Rh).

AB0 sustav

Rhesus pripadnost osoba je određena prisutnošću ovih antigena. Posebno važan eritrocitni antigen je antigen D. Ako ga ima, onda se govori o Rh-pozitivnom RhD krvi, a ako ga nema, o Rh-negativnom Rhd.

Ako se odgovarajuće antitijelo pridruži antigenima eritrocita, tada se eritrocit uništava - hemolizira.

Indikacije za provođenje direktni antiglobulinski test

  • primarna autoimuna hemolitička anemija
  • hemolitička anemija kod autoimunih, neoplastičnih, zaraznih bolesti
  • autoimuna hemolitička anemija izazvana lijekovima
  • posttransfuzijska hemolitička anemija (dani - mjeseci)
  • hemolitička bolest novorođenčadi (inkompatibilnost u jednoj od krvnih grupa)

Indikacije za provođenje neizravni antiglobulinski test

  • prije transfuzije krvi
  • tijekom trudnoće Rh-negativne žene

Autoimuna hemolitička anemija

Autoimuna hemolitička anemija (primarna) je klasična autoimuna bolest nepoznatog uzroka. Pretpostavimo kršenje u procesu interakcije na razini imunološkog sustava, što dovodi do percepcije vlastitih eritrocita kao stranih. Stanice proizvode antitijela klase IgG (reagiraju na t 37°C) i/ili IgM (na t 40°C), pričvršćuju se na površinu eritrocita, pokreću niz enzima (sustav komplementa) i "buše" zid eritrocita, što dovodi do njegovog uništenja - hemoliza.


Simptomi hemolitičke anemije

  • umor, opća slabost, razdražljivost
  • dispneja
  • bolovi u trbuhu, mučnina
  • tamna boja urina
  • bol u leđima
  • ikterično obojenje kože i sluznica
  • povećanje jetre, slezene
  • smanjenje broja crvenih krvnih stanica i hemoglobina u općoj analizi krvi

Pozitivan rezultat ravno Coombsov test 100% potvrđuje dijagnozu autoimune hemolitičke anemije, dokazujući njezino autoimuno podrijetlo. Istodobno, negativan rezultat ne omogućuje postavljanje dijagnoze.

Sekundarna autoimuna hemolitička anemija i pozitivan Coombsov test mogu biti uz sljedeće bolesti:

  • sistemski eritematozni lupus
  • Evansov sindrom
  • Waldenströmova makroglobulinemija
  • paroksizmalna hladna hemoglobinurija
  • kronična limfocitna leukemija
  • limfomi
  • Infektivna mononukleoza
  • infekcija mikoplazmom pneumonije
  • sifilis

Pozitivnost antiglobulinskog testa u ovim bolestima ne služi kao dijagnostički kriterij, već je jedan od simptoma bolesti.

Hemolitička bolest novorođenčadi

Uzrok hemolitička bolest novorođenčadi nekompatibilnost krvnih grupa u majke i fetusa, u većini slučajeva prema Rhesus sustavu, u pojedinačnim slučajevima - prema sustavu AB0, kazuistički - prema drugim antigenima.

Rh-konflikt se razvija ako je kod Rh-negativne žene fetus naslijedio Rh-pozitivnu krv od svog oca.

Bolest se kod novorođenčadi razvija samo ako je majka već razvila antitijela na odgovarajuće antigene, što se događa nakon prethodnih trudnoća, poroda, pobačaja, transfuzije nekompatibilne krvi. Najčešći razlog pokretanja sinteze protutijela na antigene membrane eritrocita je porođaj (feto-maternalno krvarenje). Prvi porodi uglavnom prolaze bez komplikacija, ali sljedeći su puni hemolitičke bolesti novorođenčeta u prvim danima nakon rođenja.

Simptomi hemolitičke bolesti novorođenčadi

  • žutost kože
  • anemija
  • blijeda koža i sluznice
  • povećanje jetre i slezene
  • respiratorni poremećaji
  • oticanje cijelog tijela
  • ekscitacija i postupna depresija središnjeg živčanog sustava

Anemija nakon transfuzije krvi

Indirektni Coombsov test provedeno prije transfuzije krvi za procjenu kompatibilnosti, i direktni Coombsov test- nakon toga, ako se sumnja na posttransfuzijsku hemolizu, tj. ako imate simptome kao što su vrućica, zimica, suzenje (pročitajte dolje). Svrha testa je otkrivanje antitijela na transfuzirane eritrocite koja su se vezala za primateljeve eritrocite i uzrokuju posttransfuzijsku hemolizu, kao i prerano uklanjanje donorskih eritrocita iz cirkulacije primatelja (primatelja).

Simptomi hemolitičke reakcije nakon transfuzije krvi

  • povećanje tjelesne temperature
  • osip na koži
  • bol u leđima
  • crvena boja urina
  • mučnina
  • vrtoglavica


Dešifriranje Coombsovog testa

Vrijedno je podsjetiti da su temeljna pravila za dekodiranje izravnih i neizravnih antiglobulinskih testova ista. Jedina razlika je mjesto antitijela - u krvi ili već na crvenom krvnom zrncu - na eritrocitu.

  • ako direktni Coombsov test je negativan- to znači da antitijelo ne “sjeda” na eritrocite te treba dalje tražiti uzrok simptoma i napraviti neizravni Coombsov test
  • ako se pozitivan nalaz Coombs testa otkrije nakon transfuzije krvi, infekcija, lijekova - pozitivnost može trajati do 3 mjeseca (vrijeme života eritrocita 120 dana - 3 mjeseca)
  • pozitivan rezultat antiglobulinskog testa kod autoimune bolesti može trajati mjesecima ili čak godinama

Norme Coombsovog testa

  • direktni Coombsov test- negativno
  • neizravni Coombsov test- negativno

Kvalitativno se pozitivan rezultat mjeri brojem pluseva od jedan do četiri (+, ++, +++, ++++), a kvantitativno u digitalnom obliku - 1:16, 1:256 itd.

4 činjenice o Coombsovom testu

  • prvi put predložen na Cambridgeu 1945
  • prag osjetljivosti - najmanje 300 fiksiranih molekula protutijela na jednom eritrocitu
  • broj antitijela koja pokreću hemolizu - pojedinačno za svaku osobu (od 16-30 do 300)
  • dinamika ostalih laboratorijskih pokazatelja hemolitičke anemije (hemoglobin, bilirubin, retikulociti) može se normalizirati, a Coombsov test će ostati na istoj razini


Nedostaci antiglobulinskog testa

  • ne može odrediti snagu vezanja antigena na protutijelo
  • nepoznat broj vezanih antitijela
  • ne određuje vrstu antitijela
  • pozitivan Coombsov test neće pomoći u određivanju njegovog uzroka
  • 0,5% zdravih ljudi ima pozitivan Coombsov test bez ikakvih dokaza hemolitičke anemije
  • nije pogodan za praćenje uspješnosti liječenja, jer ne ukazuje na aktivnost hemolize eritrocita

Izravni Coombsov test. Uz pomoć ovog testa dokazuje se prisutnost blokirajućih antitijela fiksiranih djetetovim eritrocitima. Pozitivan izravni test ukazuje na preosjetljivost i snažan je pokazatelj hemolitičke bolesti novorođenčeta prije nego što se pojave drugi klinički znakovi. Iznimno i samo u vrlo teškim slučajevima izravni Coombsov test može biti negativan zbog već započete, gotovo potpune hemolize senzibiliziranih eritrocita.

Izravni Coombsov test provodi se na sljedeći način: u epruvetu se stavi 5 kapi krvi uzete iz pete djeteta i doda 5 ml fiziološke otopine. Dobro promiješajte i centrifugirajte 10 minuta. Iz sedimenta eritrocita izdvaja se bistra tekućina. Zatim ponovno dodajte 5 ml fiziološke otopine, promiješajte i centrifugirajte. Nakon trostrukog miješanja s fiziološkom otopinom, eritrociti se dobro isperu. Nakon posljednjeg odvajanja supernatanta, sediment eritrocita u količini od 0,1 ml pomiješa se s 0,9 ml fiziološke otopine. Nanesite 2-3 kapi ove mješavine na predmetno staklo i dodajte jednu kap Coombsovog seruma. Prisutnost aglutinacije ukazuje da je reakcija pozitivna (pozitivan direktni Coombsov test). Ispitivanje treba provesti na sobnoj temperaturi iznad 16°C kako bi se izbjeglo djelovanje hladnih aglutinina.

Indirektni Coombsov test služi kao dokaz prisutnosti slobodnih antitijela u serumu majke i izvodi se sa serumom majke.

Hemolitička bolest u novorođenčadi s Rh inkompatibilnošću obično se manifestira nakon druge trudnoće. Prvo dijete rađa se zdravo, drugo sa znakovima blage anemije, a tek nakon treće trudnoće rađaju se djeca s očitim znakovima hemolitičke bolesti. Samo kod prethodno senzibiliziranih žena tijekom prve trudnoće može se roditi dijete sa simptomima hemolitičke bolesti. U nekim slučajevima imunizacija uzrokuje pobačaje i mrtvorođenčad. Za nastanak i težinu bolesti važno je stanje posteljice i trajanje izloženosti fetusa majčinim aglutininima. S pojavom aglutinina 10-14 tjedana prije rođenja dijete obično ima subkliničke oblike. Rana pojava aglutinina, 15-26 tjedana prije poroda, uzrokuje teške oblike bolesti. U svim oblicima bolesti glavni proces je hemoliza. Posljedica reakcije antigen-antitijelo je hemoliza, oštećenje jetrenih i moždanih kapilara. Ovisno o tome koja lezija prevladava, uočavaju se različiti oblici bolesti. Opasni su i neki anafilaktički fenomeni. Oni dovode do stvaranja tvari sličnih histaminu koje uzrokuju teška oštećenja stanica jetre, a posebno ganglijskih stanica bazalnih jezgri, amonovog roga, produžene moždine, pa čak i kore velikog mozga. S oštećenjem jetrenih stanica ekstrahepatalnoj žutici pridružuje se hepatalna žutica. Djeca umiru s teškim simptomima nuklearne žutice. Ako prežive, ostaju simptomi lezija živčanog sustava (poremećaji ekstrapiramidnog sustava s koreoatetičkim pokretima, svojevrsnim plesnim hodom, forsiranim pokretima glave, ponekad poremećaj koordinacije voljnih pokreta s čestim padovima, povišen mišićni tonus. , mentalna retardacija, tj. sa znakovima poput encephalopathia posticteria infantum).

Posljednjih godina među pacijentima različite dobi povećan je broj krvnih bolesti, a za njihovu dijagnostiku koriste se različite metode i sredstva. Coombsov test je klinički test krvi, a svrha njegovog provođenja je identificirati određene organizme koji predstavljaju prijetnju ljudskom zdravlju.

Protutijela se mogu zalijepiti i rezultat može biti kršenje stanja imunološkog sustava. Izravni Coombsov test je antiglobulinski test koji se izvodi za otkrivanje antitijela pričvršćenih na površinu crvenih krvnih stanica.

Obično stručnjaci pribjegavaju testu na antitijela u sljedećim situacijama:

  • Potreba za transfuzijom krvi. Iz školskog tečaja anatomije poznato je da osoba može imati jednu od četiri krvne grupe. Provođenje antiglobulinskog testa omogućuje vam određivanje mogućnosti transfuzije krvi u drugi organizam. Može se reći da pacijent može postati darivatelj za transfuziju samo ako njegova krv odgovara tipu bolesnika, odnosno sadrži iste antigene. U slučaju da pacijent i darivatelj imaju razliku u antigenima, to može dovesti do uništenja transfuziranih stanica od strane imunološkog sustava. Posljedica toga može biti razvoj ozbiljnih bolesti i komplikacija, pa čak i smrt. Zbog toga se važna uloga pridaje pronalaženju prave vrste krvi kada je potrebno transfuzirati.
  • Određivanje rizika od Rh senzibilizacije. Moderna medicina definira Rh kao antigen, a njegova puna definicija je koncept "Rh faktora". Zahvaljujući Coombsovom testu, moguće je dijagnosticirati prisutnost antitijela na Rh faktor u krvi žena tijekom. U slučaju da buduća majka ima negativan Rh faktor, a otac je pozitivan, tada nerođeno dijete može naslijediti bilo koji od njih. Ako se kod nerođenog djeteta otkrije pozitivan Rh faktor, povećava se rizik od razvoja Rh senzibilizacije - to je proces miješanja krvi i majke tijekom trudnoće ili poroda.

U slučaju da postoji nekompatibilnost između skupine majke i djeteta, tada imunološki sustav ženskog tijela počinje percipirati fetus kao strani objekt i vrši sve vrste napada na njega. Rezultat toga može biti razvoj teške patologije kod djeteta, koja se naziva eritroblastoza. U nekim slučajevima, u nedostatku učinkovitog liječenja, fetalna smrt se opaža u maternici ili odmah nakon rođenja.

U nekim slučajevima provodi se Coombsov test za otkrivanje autoimunih hemolitičkih bolesti.

Takva je bolest prilično rijetka i manifestira se stvaranjem eritrocitnih antigena vlastitog tijela.


Stručnjaci razlikuju dvije vrste Coombsovih uzoraka, od kojih se svaki koristi za određene svrhe.

Izravni test. Izravni test u medicinskoj praksi naziva se i izravni antiglobulinski test i uz njegovu pomoć moguće je dijagnosticirati antitijela pričvršćena na površinu. U nekim slučajevima, proizvodnja takvih antitijela u ljudskom tijelu javlja se kao rezultat progresije različitih ili uporabe lijekova kao što su:

  • kinidin
  • metildop
  • Prokainamid

Opasnost od takvih antitijela leži u činjenici da mogu izazvati razvoj i imati destruktivan učinak na. Ponekad se pribjegava Coombsovom testu kada je potrebno utvrditi uzroke razvoja patologija kao što su anemija i.

Negativan Coombsov test smatra se normalnim.

Indirektni test. Često stručnjaci pribjegavaju provođenju neizravnog Coombsovog testa, koji ima drugo ime "indirektni antiglobulinski test". Glavna svrha ovoga je otkrivanje antitijela na crvena krvna zrnca koja su prisutna u krvnom serumu. Zahvaljujući ovom testu moguće je utvrditi odgovara li krv darivatelja krvi pacijenta ako ju je potrebno transfuzirati. Takva je analiza svojevrsni test kompatibilnosti, a zahvaljujući njegovoj provedbi moguće je izbjeći razvoj neželjene reakcije na krv davatelja.

Obično se takva studija preporučuje ženama tijekom. Neke majke mogu imati antitijela određene klase u tijelu koja mogu prijeći posteljicu u krv nerođenog djeteta. Rezultat takvog procesa može biti hemolitička bolest fetusa, kao i razvoj raznih tijekom trudnoće.

Priprema za postupak i njegovo provođenje

Zahvat obično ne zahtijeva nikakvu posebnu pripremu i može se obaviti u bilo kojem trenutku.

Priprema za dijagnostiku uključuje sljedeće točke:

  • u slučaju da će se analiza provesti u novorođenčadi, roditeljima treba objasniti da će uz njegovu pomoć biti moguće dijagnosticirati hemolitičku bolest
  • ako postoji sumnja na razvoj hemolitičke bolesti kod pacijenta, potrebno mu je objasniti da će takva analiza pomoći u utvrđivanju uzroka njezina razvoja
  • priprema za analizu ne zahtijeva nikakva ograničenja u hrani i prehrani
  • prilikom provođenja analize u novorođenčadi, roditelje treba obavijestiti da će biti potrebno uzimanje krvi iz vene, kao i razjasniti vrijeme postupka
  • potrebno je obavijestiti pacijenta da se tijekom stavljanja steza i uzimanja krvi može pojaviti nelagoda
  • uzimanje lijekova može iskriviti rezultate Coombsovog testa, pa ih treba prekinuti neko vrijeme prije nego što se provede

Prilikom provođenja izravnog Coombsovog testa, krv se uzima iz vene pomoću štrcaljke. Prije početka postupka provodi se temeljita dezinfekcija mjesta uboda, a nakon uzimanja materijala za istraživanje namješta se vata ili sterilna gaza. U slučaju da se analiza provodi u novorođenčadi, tada se uzima krv iz pupkovine.

Kada se nakon vađenja krvi pojavi hematom, na mjesto uboda stavljaju se grijaći oblozi. Nakon postupka pacijent može nastaviti uzimati lijekove.

U laboratoriju se dobivena krv pročišćava i paralelno se vrši odvajanje crvenih krvnih zrnaca.

Uzorak pregledava specijalist koristeći različite serume i Coombsove reagense, za razliku od humanog globulina. U slučaju da se eritrociti ne drže zajedno i ne razvije se aglutinacija, tada možemo govoriti o pozitivnom rezultatu.

Tijekom postupka mogu se pojaviti sljedeće komplikacije:

  • razvoj od mjesta uzimanja krvi tijekom studije
  • glavobolja, vrtoglavica ili nesvjestica
  • razvoj krvarenja ispod kože
  • s lošom antimikrobnom obradom kože na mjestu ubrizgavanja povećava se rizik od ulaska infekcije u tijelo

Rezultati istraživanja

Dekodiranje - moguće bolesti

Zdrava osoba u tijelu nema antitijela na, to jest, normalno ih ne bi trebalo biti. U slučaju da studija pokaže pozitivan test, to može ukazivati ​​na prisutnost antitijela na crvenim krvnim stanicama u tijelu.

Rezultat takvog patološkog stanja može biti uništavanje crvenih krvnih stanica, a obično se razvija:

  • sa sustavnim
  • s infekcijom mikoplazmom
  • s infektivnom mononukleozom
  • kod hemolitičke bolesti novorođenčadi
  • s hemolitičkom anemijom izazvanom lijekovima
  • s kroničnom limfocitnom leukemijom
  • s autoimunom hemolitičkom anemijom
  • s nekompatibilnošću krvi fetusa i majke

Izravni Coombsov test često se daje ženama tijekom trudnoće kako bi se utvrdila kompatibilnost krvi majke i fetusa. U slučaju da postoji nekompatibilnost majčinog tijela i nerođenog djeteta u pogledu agenasa eritrocita, tada se povećava rizik od razvoja hemolitičke bolesti novorođenčeta.

Rh-pozitivno dijete kod Rh-negativne žene uzrokuje razvoj Rh-sukoba.

Uz takvu patologiju, uništavanje eritrocita nerođenog djeteta događa se anti-rezusnim tijelima majčinog tijela. Nakon što uđu u žensko tijelo, fetalne crvene krvne stanice imaju stimulirajući učinak na majčin imunološki sustav, a rezultat je proizvodnja antitijela na dijete.

Korisni video - hemolitička anemija.

Nastanak takvih u majčinom organizmu dovodi do aglutinacijske tromboze kapilara i ishemijske nekroze fetalnih tkiva. Kao rezultat hemolize eritrocita i razgradnje hemoglobina, opaža se stvaranje toksičnih neizravnih u tijelu fetusa. Oštar pad sadržaja crvenih krvnih stanica u fetusu zbog njihove hemolize dovodi do razvoja bolesti kao što je anemija kod djeteta.

Niske razine i visoke koncentracije bilirubina značajno kompliciraju tijek bolesti. Tijekom trudnoće dijagnosticiraju se mnoge komplikacije, kao što su:

  • opasnost od pobačaja
  • razvoj krvarenja
  • preeklampsija
  • anemija
  • prijevremeni trudovi

Anti-rezusna tijela štite majku, ali istovremeno predstavljaju ozbiljnu prijetnju fetusu u razvoju. Zahvaljujući Coombsovom testu, moguće je na vrijeme dijagnosticirati takvo patološko stanje ženskog tijela i propisati pravodobno liječenje. Osim toga, takva analiza pomaže identificirati različite bolesti krvi, čija progresija može dovesti do smrti pacijenta.

Coombsov test- analiza za otkrivanje protutijela pričvršćenih na površinu ili otopljenih u plazmi. Uz njegovu pomoć otkrivaju se imunizacija i antitijela na crvene krvne stanice. Drugi naziv je antiglobulinski test. Događa se izravno i neizravno.

Na direktni antiglobulinski test otkriva antitijela fiksirana na površini eritrocita. Provodi se kod sumnje na, s drugim autoimunim bolestima, nakon uzimanja lijekova (metildopa, penicilin, kinin) i.

Eritrociti su in vivo senzibilizirani – protutijela su već čvrsto vezana za njih, a dodavanjem antiglobulinskog seruma (anti-IgG) dolazi do slijepljenja senzibiliziranih stanica, što je vidljivo golim okom.

Indirektni Coombsov test detektira antieritrocitna protutijela u krvnoj plazmi, provodi se prije transfuzije krvi i tijekom.

Antieritrocitna antitijela - vrsta autoantitijela, tj. antitijela protiv vlastitih tkiva. Autoantitijela se javljaju kada je imunološki sustav abnormalno reaktivan na određene lijekove, kao što su visoke doze penicilina.

Eritrociti na svojoj površini sadrže različite kemijske strukture (glikolipide, saharide, glikoproteine ​​i proteine), koji se u medicini nazivaju antigeni. Osoba nasljeđuje od roditelja određenu mapu antigena na svakom crvenom krvnom zrncu.

Antigeni se spajaju u skupine, a uz to se krv dijeli u nekoliko skupina - prema sustavu AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Najpoznatiji i najznačajniji u radu liječnika su AB0 i Rh faktor (Rh).

AB0 sustav

Rh-pripadnost osobe određena je prisutnošću ovih antigena. Posebno važan antigen eritrocita je antigen D. Ako je prisutan, onda govore o Rh-pozitivna krv RhD, a ako nije - o Rh negativan Rhd.

Ako se odgovarajuće antitijelo pridruži antigenima eritrocita, tada dolazi do uništenja eritrocita – bit će hemoliza.

Indikacije

Glavna indikacija za direktnoantiglobulinski test- Sumnja na hemolitičku anemiju. Najčešće se provodi s primarnom autoimunom hemolitičkom anemijom, hemolizom s reumatskim, neoplastičnim, zaraznim bolestima, hemolizom uzrokovanom lijekovima.

Ako se anemija pojavi nekoliko dana ili mjeseci nakon transfuzije krvi ili kod dugotrajne žutice u novorođenčeta, također se radi izravni Coombsov test.

Neizravnonapravljen antiglobulinski test prije transfuzije krvi i tijekom trudnoće Rh-negativne žene.

Autoimuna hemolitička anemija

Autoimuna hemolitička anemija (primarna) je klasična autoimuna bolest nepoznatog uzroka. Interakcija unutar imunološkog sustava je poremećena, što dovodi do percepcije vlastitih eritrocita kao stranih. U limfnim čvorovima se sintetiziraju protutijela klase IgG (reagiraju na t 37 °C) i/ili IgM (na t 40 °C), koja, kada se pričvrste na površinu eritrocita, pokreću niz enzima ( sustav komplementa) i „perforiraju“ stijenku eritrocita što dovodi do njegove destrukcije – hemolize.


Prvi simptomi nastaju zbog razaranja crvenih krvnih stanica i smanjenja hemoglobina. Među njima:

  • umor, opća slabost, razdražljivost
  • dispneja
  • bolovi u trbuhu i prsima, mučnina
  • tamna boja urina
  • bol u leđima
  • ikterično obojenje kože i sluznica
  • smanjenje broja eritrocita i

pozitivan izravni rezultat Coombsov test 100% potvrđuje dijagnozu autoimune hemolitičke anemije, dokazujući njezino autoimuno podrijetlo. Istodobno, negativan rezultat ne omogućuje uklanjanje dijagnoze.

Sekundarna hemolitička anemija

Sekundarna autoimuna hemolitička anemija i pozitivan Coombsov test mogu biti uz sljedeće bolesti:

  • Evansov sindrom
  • infekcija pneumonijom

Pozitivan antiglobulinski test kod ovih bolesti jedan je od simptoma, a ne dijagnostički kriterij.

Hemolitička bolest novorođenčadi

Uzrok hemolitička bolest novorođenčadi nekompatibilnost krvne grupe u majke i fetusa, u većini slučajeva prema Rh sustavu, u pojedinačnim slučajevima - prema sustavu AB0, kazuistički - prema drugim antigenima.

Rh-konflikt se razvija ako je kod Rh-negativne žene fetus naslijedio Rh-pozitivnu krv od svog oca.

Bolest se kod novorođenčadi razvija samo ako je majka već razvila antitijela na odgovarajuće antigene, što se događa nakon prethodnih trudnoća, pobačaja, transfuzije nekompatibilne krvi. Najčešći razlog pokretanja sinteze protutijela na antigene membrane eritrocita je porođaj (feto-maternalno krvarenje). Prvi porodi uglavnom prolaze bez komplikacija, ali kasniji porodi su puni hemolitičke bolesti novorođenčeta u prvim danima nakon rođenja.

Simptomi hemolitičke bolesti novorođenčadi:

  • žutost kože
  • , i sluzav
  • povećanje jetre i slezene
  • respiratorni poremećaji
  • oticanje cijelog tijela
  • ekscitacija i postupna depresija središnjeg živčanog sustava

Anemija nakon transfuzije krvi

Indirektni Coombsov test provodi se prije transfuzije krvi za procjenu kompatibilnosti, a izravni Coombsov test - nakon njega ako se sumnja na posttransfuzijsku hemolizu, tj. ako imate simptome kao što su vrućica, suzenje (pročitajte dolje). Svrha testa je otkrivanje antitijela na transfuzirane eritrocite koja su se vezala za primateljeve eritrocite i uzrokuju posttransfuzijsku hemolizu, kao i prerano uklanjanje donorskih eritrocita iz cirkulacije primatelja (primatelja).

Simptomi:

  • povećanje tjelesne temperature
  • osip na koži
  • bol u leđima
  • Crvena
  • mučnina
  • vrtoglavica


Dešifriranje

Vrijedno je podsjetiti da su temeljna pravila za dekodiranje izravnih i neizravnih antiglobulinskih testova ista. Jedina razlika je mjesto antitijela - u krvi ili već na eritrocitu.

  • ako direktni Coombsov test je negativan- znači da antitijelo ne “sjeda” na eritrocite te treba dalje tražiti uzrok simptoma i napraviti neizravni Coombsov test
  • ako se pozitivan nalaz Coombs testa utvrdi nakon transfuzije krvi, infekcija, lijekova - pozitivnost traje do 3 mjeseca (vrijeme života eritrocita 120 dana - 3 mjeseca)
  • pozitivan nalaz antiglobulinskog testa kod autoimune bolesti traje mjesecima pa i godinama

Norma

  • direktni Coombsov test – negativan
  • neizravni Coombsov test – negativan

Kvalitativno se pozitivan rezultat mjeri brojem pluseva od jedan do četiri (+, ++, +++, ++++), a kvantitativno u digitalnom obliku - 1:16, 1:256 itd.


Da. Činjenicu da ste primili transfuziju krvi morate znati svom liječniku jer to sada utječe na ispravno tumačenje rezultata testa. Prilikom primanja tuđe (iako višestruko testirane krvi) uvijek postoji mogućnost da će vaše tijelo razviti antitijela na transfundiranu krv. Upravo će ta antitijela imati negativan utjecaj na zdravlje. Kod naknadnih transfuzija krvi liječnik bi trebao znati da ste već primili transfuziju, što znači da je bilo vremena za sintezu antitijela. Za trudnice su ove informacije još važnije.

3. Ako postoji neusklađenost Rh faktora između majke i djeteta, hoće li sva djeca biti bolesna?

Ovisi o tome je li dijete Rh pozitivno ili negativno (RhD). Nosioci krvnih grupa I, II, III i IV mogu biti Rh pozitivni i negativni. U situaciji kada je majka Rh negativna, a dijete Rh pozitivno, antitijela će se stvarati već s prvom trudnoćom, ali tek nakon prvog poroda (ili prekida trudnoće) doći će do izravnog kontakta krvi majka i dijete. Provedba hemolitičkog učinka protutijela bit će samo u drugom i sljedećim rođenjima, što će dovesti do hemolitičke bolesti u novorođenčadi.

Svaku ženu s negativnim Rh faktorom treba pažljivo pregledati tijekom trudnoće, a nakon poroda provodi se preventivno liječenje kako bi se spriječila pojava antitijela i daljnjih komplikacija.

4. Je li tijekom trudnoće potrebno znati krvnu grupu muža prije provođenja Coombsovog testa?

Potrebno je ne samo znati, već i provjeriti krvnu grupu biološkog oca djeteta tijekom trudnoće.

Podaci

  • prvi put predložen na Cambridgeu 1945
  • prag osjetljivosti - najmanje 300 fiksiranih molekula protutijela na jednom eritrocitu
  • broj antitijela koja pokreću hemolizu - pojedinačno za svaku osobu (od 16-30 do 300)
  • dinamika ostalih laboratorijskih pokazatelja hemolitičke anemije (hemoglobin, bilirubin, retikulociti) može se normalizirati, a Coombsov test će ostati na istoj razini

Coombsov test zadnji put je modificirao: 16. ožujka 2018 Marija Bodjan

Udio: