Metodo per la determinazione dei gruppi sanguigni. Test di Coombs: aspetti clinici e di laboratorio

Tra i molti antigeni esistenti nella pratica medica, la massima importanza è data a tre tipi di agglutinogeni nel sangue. Uno di questi è il tipo responsabile della manifestazione del fattore Rh: se è presente sulla membrana eritrocitaria, viene diagnosticato il gruppo sanguigno Rh +, se è assente - Rh-. Se gli eritrociti con agglutinogeni Rh + entrano nella composizione del sangue Rh-negativo, il corpo innesca una risposta immunitaria e inizia a produrre anticorpi contro questo antigene, che causa condizioni patologiche.

RIFERIMENTO! Il fattore Rh è un complesso sistema multicomponente di diverse dozzine di antigeni. I più comuni sono gli agglutinogeni di tipo D (85% dei casi), così come E e C.

Il test di Coombs viene effettuato solo in presenza di indicazioni dirette. Un elenco generale dei motivi per prescrivere un test di Coombs:

• pianificazione e gestione della gravidanza (i genitori hanno Rh differenti);
• donazione e preparazione alla trasfusione di sangue (il disadattamento del sangue in Rh non è meno dannoso del disadattamento nel sistema AB0);
• intervento chirurgico programmato (in caso di ricostituzione della perdita di sangue con una trasfusione di sangue);
• diagnosi di malattie emolitiche.

Indicazioni più specifiche dipendono dal tipo di studio che si sta conducendo.

Prova di Coombs diretta

Un test diretto rileva gli anticorpi sulla superficie dei globuli rossi. Ciò è necessario per la diagnosi di esistente patologie emolitiche:

• autoimmune (gli eritrociti e l'emoglobina vengono distrutti a seguito di un attacco da parte degli anticorpi del corpo);
• farmaci (il processo patologico innesca l'assunzione di alcuni farmaci come la chinidina o la procainamide);
• post-trasfusione (con una mancata corrispondenza del gruppo sanguigno durante la trasfusione), nonché sotto forma di conflitto Rh durante la gravidanza (eritroblastosi dei neonati).

RIFERIMENTO! L'anemia emolitica è una malattia associata alla distruzione prematura dei globuli rossi a causa dell'emolisi, che porta a un'insufficiente saturazione di ossigeno nel sangue e all'ipossia del cervello e / o degli organi interni.

L'emolisi degli elementi del sangue si osserva nelle malattie oncologiche, infettive e reumatiche, quindi il test diretto di Coombs può essere utilizzato come mezzo aggiuntivo per diagnosticare una condizione patologica. Allo stesso tempo, vale la pena ricordare: un valore negativo dell'analisi non esclude la possibilità di emolisi, ma è motivo di ulteriore esame.

Test di Coombs indiretto

Un test indiretto è più spesso utilizzato per prevenire situazioni patologiche. Aiuta a rilevare gli anticorpi nel plasma sanguigno, che è necessario per valutare la compatibilità trasfusionale e diagnosticare i rischi di conflitto Rh durante la gravidanza.

Più dell'80% delle persone ha rispettivamente un fattore Rh positivo (Rh+), poco meno del 20% è Rh-negativo. Se una madre Rh- sviluppa un bambino Rh+, il suo corpo inizia a produrre anticorpi che attaccano i globuli rossi fetali, causando emolisi.

Tenuto conto del fatto che la percentuale di matrimoni “diversi Rhesus” raggiunge il 12-15%, il rischio di malattia emolitica del neonato dovrebbe essere alto, ma in realtà solo in 1 caso su 25 nelle donne il fenomeno di sensibilizzazione (per 200 nascite riuscite, 1 esempio di patologia emolitica). Ciò è in parte dovuto al fatto che il primo bambino Rh positivo di solito non provoca un'aperta aggressione al corpo della madre; la stragrande maggioranza dei casi si verifica nel secondo figlio e nei successivi. Lo stesso principio si applica alla sensibilizzazione convenzionale a un particolare allergene.

Non si verifica alcuna reazione al primo contatto. Il corpo conosce solo un nuovo antigene per esso, producendo anticorpi della classe IgM, che sono responsabili di una rapida risposta immunitaria, ma raramente penetrano nella barriera placentare nel sangue del bambino. Tutte le reazioni patologiche si manifestano in ripetuti "incontri", quando gli anticorpi di classe IgG iniziano a essere prodotti nel corpo, penetrando facilmente nel flusso sanguigno fetale, avviando il processo di emolisi.

Test di Coombs indiretto durante la gravidanza permette di rilevare la presenza di anticorpi nel corpo materno e in tempo di identificare lo stadio iniziale di sensibilizzazione. Una risposta positiva richiede la registrazione con uno studio mensile del titolo anticorpale e il ricovero obbligatorio 3-4 settimane prima del parto.

RIFERIMENTO! L'incompatibilità del fattore Rh non influisce in alcun modo sulle condizioni della madre, la malattia emolitica si sviluppa solo in un bambino. Nei casi più gravi e in assenza di una risposta tempestiva, il feto può morire nel grembo materno o subito dopo la nascita.

Preparazione alla procedura e sua attuazione

Il sangue venoso viene utilizzato per la diagnosi. Non è richiesta una preparazione speciale a lungo termine per il test di Coombs. Prova a seguire una serie standard di regole prima di prelevare sangue da una vena per l'analisi:

• per 3 giorni, rinunciare all'alcol, ai farmaci (se possibile);
• pianificare l'ultimo pasto per più di 8 ore prima di prelevare il sangue per l'analisi;
• smettere di fumare, stress fisico, mentale ed emotivo in 1 ora;
• Prima della procedura, bere un bicchiere di acqua pulita non gassata.

Il metodo di ricerca si basa sulla reazione di emoagglutinazione.

Quando si esegue un test diretto un campione di sangue viene esposto a siero antiglobulina pre-preparato con indicatori noti, la miscela viene conservata per qualche tempo e controllata per la presenza di agglutinati, che si formano quando sono presenti anticorpi sugli eritrociti. Il livello di agglutinati viene diagnosticato utilizzando un titolo agglutinante.

Prova indiretta Coombs ha una tecnica simile, ma una sequenza di azioni più complessa. Gli eritrociti antigenici (con fattore Rh) vengono introdotti nel siero del sangue separato e solo dopo queste manipolazioni viene aggiunto il siero antiglobulina per la diagnosi e il titolo degli agglutinati.

Risultati della ricerca

Normalmente, sia diretto che test di Coombs indiretto dovrebbe dare un risultato negativo:

• un test diretto negativo indica che gli anticorpi specifici contro il fattore Rh associato ai globuli rossi sono assenti nel sangue e non possono essere causa di emolisi
• un test indiretto negativo mostra che anche nel plasma sanguigno non sono presenti anticorpi liberi contro il fattore Rh; il fatto indica la compatibilità del sangue del donatore con il sangue del ricevente (o il sangue della madre e del bambino) secondo il fattore Rh.

Un test di Coombs positivo indica il fatto di sensibilizzazione Rh del corpo, che è la causa principale del conflitto Rh in caso di trasfusione di sangue o quando si trasporta un bambino con uno stato Rh diverso. In questo caso, i risultati rimangono invariati per 3 mesi (durata della vita degli eritrociti). Se l'anemia emolitica autoimmune è diventata la causa, un test positivo può perseguitare il paziente per diversi anni (in alcuni casi, per tutta la vita).

RIFERIMENTO! Il test dell'antiglobulina è altamente sensibile, ma ha scarso contenuto informativo. Non registra l'attività del processo emolitico, non determina il tipo di anticorpo e non è in grado di identificare la causa della patologia. Per ottenere un quadro più completo, il medico curante prescrive necessariamente ulteriori studi (microscopia del sangue, analisi generale e biochimica, test reumatici, VES, livelli di ferro e ferritina).

Il grado di sensibilizzazione può avere un'espressione qualitativa (da "+" a "++++") o quantitativa - sotto forma di didascalia:

• 1:2 - valore basso, non rappresenta un pericolo;
• 1:4 - 1:8 - l'inizio dello sviluppo di una reazione immunologica; non rappresenta un pericolo, ma richiede un monitoraggio costante;
• 1:16 -1:1024 - una brillante forma di sensibilizzazione, le misure dovrebbero essere prese immediatamente.

Il motivo di un test positivo può essere:

• trasfusione di sangue non tipizzato (o con un errore di battitura), quando il fattore Rh del donatore e del ricevente non corrisponde;
• Conflitto Rhesus durante la gravidanza (se la composizione degli antigeni del sangue nel padre e nella madre non corrisponde);
• anemia emolitica autoimmune - sia congenita (primaria) che secondaria, che è una conseguenza di alcune malattie (sindrome di Evans, polmonite infettiva, sifilide, emoglobinuria fredda, linfoma);
• reazione emolitica al farmaco.

Nessuno dei problemi di cui sopra può essere risolto dal paziente senza assistenza medica. In tutti i casi sarà necessaria una consulenza urgente, una registrazione o un ricovero urgente.

ATTENZIONE! In rari casi è possibile un test di Coombs falso positivo. La ragione di ciò possono essere frequenti trasfusioni di sangue, nonché una serie di malattie: artrite reumatoide, lupus eritematoso, sarcoidosi. Inoltre, questo fenomeno può essere osservato dopo la rimozione della milza, nonché in violazione del corso della reazione (frequente scuotimento del contenuto, presenza di contaminanti).

O disciolto nel plasma.

Sinonimi: test dell'antiglobulina, test di Coombs, AGT, test dell'antiglobulina indiretto/diretto, IAT, NAT, DAT, test di Coombs indiretto/diretto

Il test di Coombs è

un'analisi che rileva l'immunizzazione e gli anticorpi contro i globuli rossi.

Tipi di test di Coombs

• test di Coombs diretto- rileva gli anticorpi fissati sulla superficie degli eritrociti. Viene effettuato con sospetto di anemia emolitica autoimmune, emolisi nelle malattie autoimmuni, dopo l'assunzione di farmaci (metildopa, penicillina, chinino), dopo trasfusione di sangue e malattia emolitica del neonato.

Gli eritrociti sono stati sensibilizzati in vivo - gli anticorpi sono già saldamente attaccati a loro e l'aggiunta di siero antiglobulina (anti-IgG) fa aderire le cellule sensibilizzate, che è visibile ad occhio nudo.

• test di Coombs indiretto- rileva gli anticorpi antieritrociti nel plasma sanguigno, eseguiti prima della trasfusione di sangue e durante la gravidanza.

Gli anticorpi antieritrociti sono un tipo di autoanticorpi, ad es. anticorpi contro i propri tessuti. Un autoanticorpo si verifica quando il sistema immunitario è reattivo in modo anomalo a determinati farmaci, come alte dosi di penicillina.

Gli eritrociti sulla loro superficie contengono varie strutture chimiche (glicolipidi, saccaridi, glicoproteine ​​e proteine), in medicina indicate come antigeni. Una persona eredita dai suoi genitori una certa mappa di antigeni su ciascun globulo rosso.

Gli antigeni sono combinati in gruppi e accanto a questo, il sangue è diviso in diversi gruppi, secondo sistema AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. I più famosi e significativi nel lavoro di un medico sono AB0 e il fattore Rh (Rh).

Sistema AB0

Affiliazione Rhesus una persona è determinata dalla presenza di questi antigeni. Un antigene eritrocitario particolarmente importante è l'antigene D. Se è presente, si parla di RhD ematico Rh-positivo e, se non è presente, di Rhd Rh-negativo.

Se l'anticorpo corrispondente si unisce agli antigeni degli eritrociti, l'eritrocita viene distrutto - emolizza.

Indicazioni per l'esecuzione test diretto dell'antiglobulina

• anemia emolitica autoimmune primaria
• anemia emolitica nelle malattie autoimmuni, neoplastiche, infettive
• anemia emolitica autoimmune farmaco-indotta
• anemia emolitica post-trasfusione (giorni - mesi)
• malattia emolitica del neonato (incompatibilità in uno dei gruppi sanguigni)

Indicazioni per l'esecuzione test indiretto dell'antiglobulina

• prima della trasfusione di sangue
• durante la gravidanza di una donna Rh-negativa

Anemia emolitica autoimmune

Anemia emolitica autoimmune (primaria)è una classica malattia autoimmune con cause sconosciute. Assumere una violazione nel processo di interazione a livello del sistema immunitario, che porta alla percezione dei propri eritrociti come estranei. Le cellule producono anticorpi della classe IgG (reagiscono a t 37°C) e/o IgM (a t 40°C), legandosi alla superficie dell'eritrocita, avviano una serie di enzimi (sistema del complemento) e "perforano" il parete degli eritrociti, che porta alla sua distruzione - emolisi.

Sintomi di anemia emolitica

• affaticamento, debolezza generale, irritabilità
• dispnea
• dolore addominale, nausea
• colore delle urine scuro
• mal di schiena
• colorazione itterica della pelle e delle mucose
• ingrossamento del fegato, milza
• diminuzione del numero di globuli rossi ed emoglobina nell'analisi del sangue generale

Risultato positivo dritto Prova di Coomb Il 100% conferma la diagnosi di anemia emolitica autoimmune, dimostrandone l'origine autoimmune. Allo stesso tempo, un risultato negativo non consente di fare una diagnosi.

L'anemia emolitica autoimmune secondaria e un test di Coombs positivo possono essere associati alle seguenti malattie:

• lupus eritematoso sistemico
• Sindrome di Evans
• Macroglobulinemia di Waldenström
• emoglobinuria parossistica fredda
• leucemia linfatica cronica
• linfomi
• Mononucleosi infettiva
• infezione da micoplasma pneumoniae
• sifilide

La positività del test dell'antiglobulina in queste malattie non serve come criterio diagnostico, ma è uno dei sintomi della malattia.

Malattia emolitica del neonato

Causa malattia emolitica del neonato incompatibilità dei gruppi sanguigni nella madre e nel feto, nella maggior parte dei casi secondo il sistema Rhesus, in singoli casi - secondo il sistema AB0, casisticamente - secondo altri antigeni.

Il conflitto Rh si sviluppa se in una donna Rh-negativa il feto ha ereditato sangue Rh-positivo dal padre.

La malattia in un neonato si sviluppa solo se la madre ha già sviluppato anticorpi contro gli antigeni corrispondenti, cosa che si verifica dopo precedenti gravidanze, parto, aborti, trasfusioni di sangue incompatibile. Il motivo più comune per innescare la sintesi di anticorpi contro gli antigeni della membrana eritrocitaria è il parto (emorragia feto-materna). Le prime nascite passano per lo più senza complicazioni, ma le successive sono piene di malattia emolitica del neonato nei primi giorni dopo la nascita.

I sintomi della malattia emolitica del neonato

• ingiallimento della pelle
• anemia
• pelle pallida e mucose
• ingrossamento del fegato e della milza
• disturbi respiratori
• gonfiore di tutto il corpo
• eccitazione e graduale depressione del sistema nervoso centrale

Anemia dopo trasfusione di sangue

Test di Coombs indiretto effettuato prima della trasfusione di sangue per valutare la compatibilità e test di Coombs diretto- dopo di esso, se si sospetta l'emolisi post-trasfusionale, ad es. se hai sintomi come febbre, brividi, irrigazione (leggi sotto). Lo scopo del test è rilevare gli anticorpi contro i globuli rossi trasfusi che si sono legati ai globuli del ricevente e sono la causa dell'emolisi post-trasfusionale, nonché della rimozione prematura dei globuli rossi del donatore dalla circolazione del ricevente (ricevente).

Sintomi di una reazione emolitica dopo una trasfusione di sangue

• aumento della temperatura corporea
• eruzione cutanea sulla pelle
• mal di schiena
• colore rosso delle urine
• nausea
• vertigini

Decifrare il test di Coombs

Vale la pena ricordare che le regole fondamentali per la decodifica dei test antiglobuline diretti e indiretti sono le stesse. L'unica differenza è la posizione degli anticorpi - nel sangue o già su un globulo rosso - su un eritrocita.

• Se il test di Coombs diretto è negativo- questo significa che l'anticorpo non "si deposita" sugli eritrociti e la causa dei sintomi deve essere ricercata ulteriormente e deve essere eseguito un test di Coombs indiretto
• se viene rilevato un risultato positivo del test di Coombs dopo una trasfusione di sangue, infezioni, farmaci - la positività può durare fino a 3 mesi (tempo di vita degli eritrociti 120 giorni - 3 mesi)
• un risultato positivo del test antiglobulina in una malattia autoimmune può durare mesi o addirittura anni

Norme di prova di Coombs

• test di Coombs diretto- negativo
• test di Coombs indiretto- negativo

Qualitativamente, un risultato positivo viene misurato nel numero di vantaggi da uno a quattro (+, ++, +++, ++++) e quantitativamente in forma digitale - 1:16, 1:256, ecc.

4 fatti sul test di Coombs

• proposto per la prima volta a Cambridge nel 1945
• soglia di sensibilità - almeno 300 molecole di anticorpi fisse su un eritrocita
• il numero di anticorpi che provocano l'emolisi - individualmente per ogni persona (da 16-30 a 300)
• la dinamica di altri indicatori di laboratorio dell'anemia emolitica (emoglobina, bilirubina, reticolociti) potrebbe normalizzarsi e il test di Coombs rimarrà allo stesso livello

Svantaggi del test dell'antiglobulina

• non è in grado di determinare la forza di legame di un antigene con un anticorpo
• numero sconosciuto di anticorpi legati
• non determina il tipo di anticorpo
• un test di Coombs positivo non aiuterà a determinarne la causa
• Lo 0,5% delle persone sane ha un test di Coombs positivo senza alcuna evidenza di anemia emolitica
• non idoneo a monitorare il successo del trattamento, in quanto non indica l'attività di emolisi degli eritrociti

Prova di Coombs diretta. Con l'aiuto di questo test, viene dimostrata la presenza di anticorpi bloccanti fissati dagli eritrociti del bambino. Un test diretto positivo è indicativo di sensibilizzazione ed è una forte indicazione di malattia emolitica del neonato prima della comparsa di altri segni clinici. In via eccezionale, e solo in casi molto gravi, un test di Coombs diretto può essere negativo a causa dell'emolisi quasi completa degli eritrociti sensibilizzati, già insorta.

Il test diretto di Coombs si esegue nel modo seguente: 5 gocce di sangue prelevate dal tallone del bambino vengono poste in una provetta e si aggiungono 5 ml di soluzione fisiologica. Mescolare bene e centrifugare per 10 min. Un liquido limpido viene separato dal sedimento eritrocitario. Quindi aggiungere nuovamente 5 ml di soluzione salina, mescolare e centrifugare. Dopo tre volte la miscelazione con soluzione salina, gli eritrociti sono ben lavati. Dopo l'ultima separazione del supernatante, il sedimento eritrocitario nella quantità di 0,1 ml viene miscelato con 0,9 ml di soluzione salina. Applicare 2-3 gocce di questa miscela su un vetrino e aggiungere una goccia di siero di Coombs. La presenza di agglutinazione indica che la reazione è positiva (test di Coombs diretto positivo). Lo studio deve essere effettuato a temperatura ambiente superiore a 16°C per evitare l'azione delle agglutinine fredde.

Test di Coombs indiretto serve come prova della presenza di anticorpi liberi nel siero della madre e viene eseguita con il siero della madre.

La malattia emolitica in un neonato con incompatibilità Rh di solito si manifesta dopo la seconda gravidanza. Il primo bambino nasce sano, il secondo con segni di lieve anemia e solo dopo la terza gravidanza nascono bambini con evidenti segni di malattia emolitica. Solo in donne precedentemente sensibilizzate durante la prima gravidanza può nascere un bambino con sintomi di malattia emolitica. In alcuni casi, l'immunizzazione provoca aborti e natimortalità. Per l'inizio e la gravità della malattia, lo stato della placenta e la durata dell'esposizione alle agglutinine materne sul feto sono importanti. Con la comparsa delle agglutinine 10-14 settimane prima della nascita, il bambino di solito ha forme subcliniche. La comparsa precoce delle agglutinine, 15-26 settimane prima del parto, provoca forme gravi della malattia. In tutte le forme della malattia, il processo principale è l'emolisi. La conseguenza della reazione antigene-anticorpo è l'emolisi, danno ai capillari epatici e cerebrali. A seconda di quale lesione prevale, si osservano varie forme della malattia. Anche alcuni fenomeni anafilattici sono pericolosi. Portano alla formazione di sostanze simili all'istamina che causano gravi danni alle cellule del fegato e in particolare alle cellule gangliari dei nuclei basali, del corno di ammonio, del midollo allungato e persino della corteccia cerebrale. Con il danno alle cellule del fegato, l'ittero epatico si aggiunge all'ittero extraepatico. I bambini muoiono con gravi sintomi di ittero nucleare. Se sopravvivono, permangono sintomi di lesioni del sistema nervoso (disturbi del sistema extrapiramidale con movimenti coreoatetici, una sorta di andatura danzante, movimenti forzati della testa, a volte un disturbo nella coordinazione dei movimenti volontari con frequenti cadute, aumento del tono muscolare , ritardo mentale, cioè con segni chiamati encefalopatia posticteria infantum).

Negli ultimi anni, tra i pazienti di diverse età, il numero di malattie del sangue è aumentato e per diagnosticarle vengono utilizzati vari metodi e mezzi. Il test di Coombs è un esame del sangue clinico e lo scopo della sua condotta è identificare determinati organismi che rappresentano una minaccia per la salute umana.

Gli anticorpi possono attaccarsi e il risultato può essere una violazione dello stato del sistema immunitario. Il test diretto di Coombs è un test antiglobulina che viene eseguito per rilevare gli anticorpi attaccati alla superficie dei globuli rossi.

In genere, gli specialisti ricorrono a un test anticorpale nelle seguenti situazioni:

• La necessità di una trasfusione di sangue. Dal corso di anatomia della scuola, è noto che una persona può avere uno dei quattro gruppi sanguigni. L'esecuzione di un test dell'antiglobulina consente di determinare la possibilità di una trasfusione di sangue in un altro organismo. Si può dire che un paziente può diventare un donatore per trasfusioni solo se il suo sangue corrisponde al tipo del paziente, cioè contiene gli stessi antigeni. Nel caso in cui il paziente e il donatore abbiano una differenza di antigeni, ciò può portare alla distruzione delle cellule trasfuse da parte del sistema immunitario. Il risultato di ciò può essere lo sviluppo di gravi malattie e complicazioni e persino la morte. È per questo motivo che un ruolo importante viene assegnato alla ricerca del giusto tipo di sangue quando si rende necessario trasfonderlo.
• Determinazione del rischio di sensibilizzazione Rh. La medicina moderna definisce Rh come un antigene e la sua definizione completa è il concetto di "fattore Rh". Grazie al test di Coombs è possibile diagnosticare la presenza di anticorpi al fattore Rh nel sangue delle donne durante. Nel caso in cui la futura mamma abbia un fattore Rh negativo e il padre sia positivo, il nascituro può ereditarne uno qualsiasi. Se viene rilevato un fattore Rh positivo in un nascituro, aumenta il rischio di sviluppare sensibilizzazione Rh: questo è il processo di miscelazione del sangue e della madre durante la gravidanza o il travaglio.

Nel caso in cui vi sia incompatibilità tra il gruppo madre e bambino, il sistema immunitario del corpo femminile inizia a percepire il feto come un oggetto estraneo ed esercita su di esso ogni tipo di attacco. Il risultato di ciò potrebbe essere lo sviluppo di una grave patologia in un bambino, che si chiama eritroblastosi. In alcuni casi, in assenza di un trattamento efficace, si osserva la morte fetale nell'utero o subito dopo la nascita.

In alcuni casi, il test di Coombs viene eseguito per rilevare l'emolitico autoimmune.

Tale malattia è piuttosto rara e si manifesta nella formazione di antigeni eritrocitari del proprio corpo.

Gli esperti distinguono due tipi di campioni Coombs, ognuno dei quali viene utilizzato per scopi specifici.

Prova diretta. Un test diretto nella pratica medica è anche chiamato test diretto dell'antiglobulina e con il suo aiuto è possibile diagnosticare gli anticorpi attaccati alla superficie. In alcuni casi, la produzione di tali anticorpi nel corpo umano avviene a seguito della progressione di vari o dell'uso di farmaci come:

• chinidina
• metildop
• Procainamide

Il pericolo di tali anticorpi sta nel fatto che possono causare sviluppo e avere un effetto distruttivo. A volte si ricorre al test di Coombs quando è necessario identificare le cause dello sviluppo di patologie come l'anemia e.

Un test di Coombs negativo è considerato normale.

Prova indiretta. Spesso gli esperti ricorrono alla conduzione di un test di Coombs indiretto, che ha il secondo nome di "test dell'antiglobulina indiretto". Lo scopo principale di questo è rilevare gli anticorpi contro i globuli rossi che sono presenti nel siero del sangue. Grazie a questo test è possibile determinare se il sangue del donatore corrisponde al sangue del paziente se è necessario trasfonderlo. Tale analisi è una sorta di test di compatibilità e, grazie alla sua implementazione, è possibile evitare lo sviluppo di una reazione avversa al sangue del donatore.

In genere, un tale studio è raccomandato per le donne durante. Alcune madri possono avere anticorpi di una certa classe nel corpo che possono attraversare la placenta nel sangue del nascituro. Il risultato di un tale processo può essere la malattia emolitica del feto, nonché lo sviluppo di vari durante la gravidanza.

Preparazione alla procedura e sua attuazione

Di solito, la procedura non richiede alcuna preparazione speciale e può essere eseguita in qualsiasi momento.

La preparazione per la diagnostica include i seguenti punti:

• nel caso in cui l'analisi venga eseguita in un neonato, è necessario spiegare ai genitori che con il suo aiuto sarà possibile diagnosticare una malattia emolitica
• in presenza di un sospetto dello sviluppo di una malattia emolitica in un paziente, deve essere spiegato che tale analisi aiuterà a determinare le cause del suo sviluppo
• la preparazione per l'analisi non richiede alcuna restrizione nel cibo e nella dieta
• quando si esegue un'analisi in un neonato, i genitori dovrebbero essere informati che sarà richiesto il prelievo di sangue da una vena, oltre a chiarire il tempo della procedura
• è necessario informare il paziente che durante l'applicazione di un laccio emostatico e il prelievo di sangue può verificarsi disagio
• l'assunzione di farmaci può falsare i risultati del test di Coombs, quindi dovrebbero essere annullati qualche tempo prima che venga eseguito

Quando si esegue un test di Coombs diretto, il sangue viene prelevato da una vena usando una siringa. Prima di iniziare la procedura, viene eseguita un'accurata disinfezione del sito di puntura e, dopo aver prelevato il materiale per la ricerca, viene regolato un batuffolo di cotone o una garza sterile. Nel caso in cui l'analisi venga eseguita nei neonati, il sangue viene prelevato dal cordone ombelicale.

Quando compare un ematoma dopo il prelievo di sangue, vengono applicati impacchi riscaldanti sul sito della puntura. Dopo la procedura, il paziente può riprendere l'assunzione di farmaci.

In laboratorio, il sangue ottenuto viene purificato e, parallelamente, viene eseguita la separazione dei globuli rossi.

Il campione viene esaminato da uno specialista utilizzando vari sieri e reagenti di Coombs, in contrasto con la globulina umana. Nel caso in cui gli eritrociti non si attacchino e l'agglutinazione non si sviluppi, allora possiamo parlare di un risultato positivo.

Durante la procedura possono verificarsi le seguenti complicazioni:

• sviluppo dal sito del prelievo di sangue durante lo studio
• mal di testa, vertigini o svenimento
• sviluppo di emorragie sottocutanee
• con uno scarso trattamento antimicrobico della pelle nel sito di iniezione, aumenta il rischio che l'infezione entri nel corpo

Risultati della ricerca

Decodifica - possibili malattie

Una persona sana nel corpo non ha anticorpi contro, cioè normalmente non dovrebbero esserlo. Nel caso in cui lo studio mostri un test positivo, questo potrebbe indicare la presenza nel corpo di anticorpi sui globuli rossi.

Il risultato di una tale condizione patologica può essere la distruzione dei globuli rossi e di solito si sviluppa:

• con sistemico
• con infezione da micoplasma
• con mononucleosi infettiva
• nella malattia emolitica del neonato
• con anemia emolitica farmaco-indotta
• con leucemia linfatica cronica
• con anemia emolitica autoimmune
• con incompatibilità del sangue del feto e della madre

Il test diretto di Coombs viene spesso somministrato alle donne durante la gravidanza per determinare la compatibilità del sangue materno e fetale. Nel caso in cui vi sia incompatibilità del corpo della madre e del nascituro in termini di agenti eritrocitari, aumenta il rischio di sviluppare una malattia emolitica del neonato.

Un bambino Rh positivo in una donna Rh negativa provoca lo sviluppo di un conflitto Rh.

Con una tale patologia, la distruzione degli eritrociti del nascituro avviene da parte dei corpi anti-Rhesus del corpo della madre. Una volta nel corpo femminile, i globuli rossi fetali hanno un effetto stimolante sul sistema immunitario della madre e il risultato è la produzione di anticorpi contro il bambino.

Video utile - anemia emolitica.

La formazione di tali nell'organismo materno porta alla trombosi da agglutinazione dei capillari e alla necrosi ischemica dei tessuti fetali. Come risultato dell'emolisi degli eritrociti e della rottura dell'emoglobina, si osserva la formazione di indiretti tossici nel corpo del feto. Una forte diminuzione del contenuto di globuli rossi nel feto a causa della loro emolisi porta allo sviluppo di una malattia come l'anemia nel bambino.

Bassi livelli e alte concentrazioni di bilirubina complicano significativamente il decorso della malattia. Durante la gravidanza vengono diagnosticate molte complicazioni, come ad esempio:

• rischio di aborto spontaneo
• sviluppo del sanguinamento
• preeclampsia
• anemia
• parto prematuro

I corpi anti-Rhesus proteggono la madre, ma allo stesso tempo rappresentano una seria minaccia per il feto in via di sviluppo. Grazie al test di Coombs, è possibile diagnosticare in tempo una tale condizione patologica del corpo femminile e prescrivere un trattamento tempestivo. Inoltre, tale analisi aiuta a identificare varie malattie del sangue, la cui progressione può portare alla morte del paziente.

Prova di Coomb- analisi per rilevare gli anticorpi attaccati alla superficie o disciolti nel plasma. Con il suo aiuto, vengono rilevati l'immunizzazione e gli anticorpi contro i globuli rossi. Il secondo nome è il test dell'antiglobulina. Succede diretto e indiretto.

In test diretto dell'antiglobulina rileva gli anticorpi fissati sulla superficie degli eritrociti. Viene effettuato con sospetto, con altre malattie autoimmuni, dopo l'assunzione di farmaci (metildopa, penicillina, chinino) e.

Gli eritrociti sono stati sensibilizzati in vivo - gli anticorpi sono già saldamente attaccati a loro e l'aggiunta di siero antiglobulina (anti-IgG) fa aderire le cellule sensibilizzate, che è visibile ad occhio nudo.

Test di Coombs indiretto rileva gli anticorpi anti-eritrociti nel plasma sanguigno, viene eseguito prima della trasfusione di sangue e durante.

Anticorpi anti-eritrociti - un tipo di autoanticorpo, ad es. anticorpi contro i propri tessuti. Un autoanticorpo si verifica quando il sistema immunitario è reattivo in modo anomalo a determinati farmaci, come alte dosi di penicillina.

Gli eritrociti sulla loro superficie contengono varie strutture chimiche (glicolipidi, saccaridi, glicoproteine ​​e proteine), che in medicina sono chiamate antigeni. Una persona eredita dai suoi genitori una certa mappa di antigeni su ciascun globulo rosso.

Gli antigeni sono combinati in gruppi e accanto a questo, il sangue è diviso in diversi gruppi, secondo il sistema AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. I più famosi e significativi nel lavoro di un medico sono AB0 e il fattore Rh (Rh).

Sistema AB0

L'affiliazione Rh di una persona è determinata dalla presenza di questi antigeni. Un antigene eritrocitario particolarmente importante è l'antigene D. Se è presente, ne parlano Sangue Rh-positivo RhD, e se non lo è - circa Rh negativo Rhd.

Se l'anticorpo corrispondente si unisce agli antigeni degli eritrociti, l'eritrocita viene distrutto - ci sarà emolisi.

Indicazioni

L'indicazione principale per direttotest dell'antiglobulina- Sospetto di anemia emolitica. Molto spesso viene effettuato con anemia emolitica autoimmune primaria, emolisi con malattie reumatiche, neoplastiche, infettive, emolisi causata da farmaci.

Se l'anemia compare pochi giorni o mesi dopo una trasfusione di sangue o con ittero prolungato in un neonato, viene eseguito anche un test di Coombs diretto.

Indirettoeseguito il test dell'antiglobulina prima della trasfusione di sangue e durante la gravidanza di una donna Rh-negativa.

Anemia emolitica autoimmune

Anemia emolitica autoimmune (primaria)è una classica malattia autoimmune con cause sconosciute. L'interazione all'interno del sistema immunitario viene interrotta, il che porta alla percezione dei propri eritrociti come estranei. Nei linfonodi vengono sintetizzati anticorpi della classe IgG (reagiscono a t 37°C) e/o IgM (a t 40°C) che, attaccati alla superficie dell'eritrocita, avviano una serie di enzimi (il sistema del complemento) e "perforare" la parete degli eritrociti, che porta alla sua distruzione - emolisi.

I primi sintomi sono dovuti sia alla distruzione dei globuli rossi che alla diminuzione dell'emoglobina. Tra loro:

• affaticamento, debolezza generale, irritabilità
• dispnea
• dolore addominale e toracico, nausea
• colore delle urine scuro
• mal di schiena
• colorazione itterica della pelle e delle mucose
• una diminuzione del numero di eritrociti e

risultato diretto positivo Prova di Coomb Il 100% conferma la diagnosi di anemia emolitica autoimmune, dimostrandone l'origine autoimmune. Allo stesso tempo, un risultato negativo non consente di rimuovere la diagnosi.

Anemia emolitica secondaria

L'anemia emolitica autoimmune secondaria e un test di Coombs positivo possono essere associati alle seguenti malattie:

• Sindrome di Evans
• infezione da polmonite

Un test antiglobulina positivo in queste malattie è uno dei sintomi, non un criterio diagnostico.

Malattia emolitica del neonato

Causa malattia emolitica del neonato incompatibilità del gruppo sanguigno nella madre e nel feto, nella maggior parte dei casi secondo il sistema Rh, in singoli casi - secondo il sistema AB0, casisticamente - secondo altri antigeni.

Il conflitto Rh si sviluppa se in una donna Rh-negativa il feto ha ereditato sangue Rh-positivo dal padre.

La malattia in un neonato si sviluppa solo se la madre ha già sviluppato anticorpi contro gli antigeni corrispondenti, cosa che si verifica dopo precedenti gravidanze, aborti, trasfusioni di sangue incompatibile. Il motivo più comune per innescare la sintesi di anticorpi contro gli antigeni della membrana eritrocitaria è il parto (emorragia feto-materna). Le prime nascite generalmente passano senza complicazioni, ma le nascite successive sono irte di malattia emolitica del neonato nei primi giorni dopo la nascita.

Sintomi della malattia emolitica del neonato:

• ingiallimento della pelle
• , e mucoso
• ingrossamento del fegato e della milza
• disturbi respiratori
• gonfiore di tutto il corpo
• eccitazione e graduale depressione del sistema nervoso centrale

Anemia dopo trasfusione di sangue

Test di Coombs indiretto effettuato prima della trasfusione di sangue per valutare la compatibilità e un test di Coombs diretto - dopo di esso se si sospetta l'emolisi post-trasfusionale, ad es. se hai sintomi come febbre, irrigazione (leggi sotto). Lo scopo del test è rilevare gli anticorpi contro i globuli rossi trasfusi che si sono legati ai globuli del ricevente e sono la causa dell'emolisi post-trasfusionale, nonché della rimozione prematura dei globuli rossi del donatore dalla circolazione del ricevente (ricevente).

Sintomi:

• aumento della temperatura corporea
• eruzione cutanea sulla pelle
• mal di schiena
• rosso
• nausea
• vertigini

Decrittazione

Vale la pena ricordare che le regole fondamentali per la decodifica dei test antiglobuline diretti e indiretti sono le stesse. L'unica differenza è la posizione degli anticorpi: nel sangue o già sull'eritrocita.

• Se il test di Coombs diretto è negativo- significa che l'anticorpo non "si deposita" sugli eritrociti e la causa dei sintomi deve essere ricercata ulteriormente e deve essere eseguito un test di Coombs indiretto
• se viene rilevato un risultato positivo del test di Coombs dopo una trasfusione di sangue, infezioni, farmaci - la positività dura fino a 3 mesi (tempo di vita degli eritrociti 120 giorni - 3 mesi)
• un risultato positivo del test antiglobulina in una malattia autoimmune dura mesi e persino anni

Norma

• test di Coombs diretto - negativo
• test di Coombs indiretto - negativo

Qualitativamente, un risultato positivo viene misurato nel numero di vantaggi da uno a quattro (+, ++, +++, ++++) e quantitativamente in forma digitale - 1:16, 1:256, ecc.

Sì. Il fatto che tu abbia ricevuto una trasfusione di sangue deve essere noto al tuo medico, poiché ora influisce sulla corretta interpretazione dei risultati del test. Quando si riceve il sangue di qualcun altro (anche se più volte testato), c'è sempre la possibilità che il tuo corpo sviluppi anticorpi contro il sangue trasfuso. Sono questi anticorpi che avranno un impatto negativo sulla salute. Con le successive trasfusioni di sangue, il medico dovrebbe sapere che hai già ricevuto trasfusioni, il che significa che c'era tempo per la sintesi degli anticorpi. Per le donne in gravidanza, questa informazione è ancora più rilevante.

3. Se c'è una discrepanza nel fattore Rh tra madre e figlio, tutti i bambini saranno malati?

Dipende se il bambino è Rh-positivo o negativo (RhD). I portatori dei gruppi sanguigni I, II, III e IV possono essere sia Rh-positivi che negativi. In una situazione in cui la madre è Rh-negativa e il bambino è Rh-positivo, gli anticorpi verranno prodotti già con la prima gravidanza, ma solo dopo il primo parto (o interruzione della gravidanza) ci sarà un contatto diretto tra il sangue della madre e il bambino. L'implementazione dell'effetto emolitico degli anticorpi sarà solo nella seconda e nelle successive nascite, che porteranno alla malattia emolitica nel neonato.

Ogni donna con un fattore Rh negativo deve essere attentamente esaminata durante la gravidanza e dopo il parto viene effettuato un trattamento preventivo per prevenire la comparsa di anticorpi e ulteriori complicazioni.

4. Durante la gravidanza è necessario conoscere il gruppo sanguigno del marito prima di effettuare il test di Coombs?

È necessario non solo conoscere, ma anche controllare il gruppo sanguigno del padre biologico del bambino durante la gravidanza.

Dati

• proposto per la prima volta a Cambridge nel 1945
• soglia di sensibilità - almeno 300 molecole di anticorpi fisse su un eritrocita
• il numero di anticorpi che provocano l'emolisi - individualmente per ogni persona (da 16-30 a 300)
• la dinamica di altri indicatori di laboratorio dell'anemia emolitica (emoglobina, bilirubina, reticolociti) potrebbe normalizzarsi e il test di Coombs rimarrà allo stesso livello

Il test di Coombs è stato modificato l'ultima volta: 16 marzo 2018 da Maria Bodyan