Metodo per la determinazione dei gruppi sanguigni. Test di Coombs: aspetti clinici e di laboratorio Significato e definizioni del test di Coombs

O disciolto nel plasma.

Sinonimi: test dell'antiglobulina, test di Coombs, AGT, test dell'antiglobulina indiretto/diretto, IAT, NAT, DAT, test di Coombs indiretto/diretto

Il test di Coombs è

un'analisi che rileva l'immunizzazione e gli anticorpi contro i globuli rossi.

Tipi di test di Coombs

• Test diretto di Coombs- rileva gli anticorpi fissati sulla superficie degli eritrociti. Viene eseguito con sospetto di anemia emolitica autoimmune, emolisi nelle malattie autoimmuni, dopo l'assunzione di farmaci (metildopa, penicillina, chinino), dopo trasfusioni di sangue e malattia emolitica del neonato.

Gli eritrociti sono stati sensibilizzati in vivo - gli anticorpi sono già saldamente attaccati ad essi e l'aggiunta di siero antiglobulinico (anti-IgG) fa aderire le cellule sensibilizzate, il che è visibile ad occhio nudo.

• test di Coombs indiretto- rileva gli anticorpi anti-eritrociti nel plasma sanguigno, eseguiti prima della trasfusione di sangue e durante la gravidanza.

Gli anticorpi anti-eritrociti sono un tipo di autoanticorpi, cioè anticorpi contro i propri tessuti. Un autoanticorpo si verifica quando il sistema immunitario reagisce in modo anomalo a determinati farmaci, come alte dosi di penicillina.

Gli eritrociti sulla loro superficie contengono varie strutture chimiche (glicolipidi, saccaridi, glicoproteine ​​e proteine), in medicina denominate antigeni. Una persona eredita dai suoi genitori una certa mappa di antigeni su ciascun globulo rosso.

Gli antigeni sono combinati in gruppi e accanto a questo, il sangue è diviso in diversi gruppi - secondo sistema AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. I più famosi e significativi nel lavoro di un medico sono AB0 e fattore Rh (Rh).

Sistema AB0

Affiliazione Rhesus una persona è determinata dalla presenza di questi antigeni. Un antigene eritrocitario particolarmente importante è l'antigene D. Se è presente, allora si parla di sangue Rh-positivo RhD, e se non c'è, di Rh-negativo Rhd.

Se l'anticorpo corrispondente si unisce agli antigeni degli eritrociti, l'eritrocita viene distrutto - hemolizes.

Indizi per realizzazione test diretto dell'antiglobulina

• anemia emolitica autoimmune primaria
• anemia emolitica nelle malattie autoimmuni, neoplastiche, infettive
• anemia emolitica autoimmune indotta da farmaci
• anemia emolitica post-trasfusionale (giorni - mesi)
• malattia emolitica del neonato (incompatibilità in uno dei gruppi sanguigni)

Indizi per realizzazione test indiretto dell'antiglobulina

• prima della trasfusione di sangue
• durante la gravidanza di una donna Rh-negativo

Anemia emolitica autoimmune

Anemia emolitica autoimmune (primaria)è una classica malattia autoimmune con cause sconosciute. Assumere una violazione nel processo di interazione a livello del sistema immunitario, che porta alla percezione dei propri eritrociti come estranei. Le cellule producono anticorpi della classe IgG (reagiscono a t 37°C) e/o IgM (a t 40°C), attaccandosi alla superficie dell'eritrocita, attivano una serie di enzimi (sistema del complemento) e "perforano" il parete eritrocitaria, che porta alla sua distruzione - emolisi.

Sintomi di anemia emolitica

• affaticamento, debolezza generale, irritabilità
• dispnea
• dolore addominale, nausea
• colore dell'urina scuro
• mal di schiena
• colorazione itterica della pelle e delle mucose
• ingrossamento del fegato, milza
• diminuzione del numero di globuli rossi e di emoglobina nel test del sangue generale

Risultato positivo dritto Prova di Coombs Il 100% conferma la diagnosi di anemia emolitica autoimmune, dimostrandone l'origine autoimmune. Allo stesso tempo, un risultato negativo non consente di effettuare una diagnosi.

L'anemia emolitica autoimmune secondaria e un test di Coombs positivo possono essere associati alle seguenti malattie:

• lupus eritematoso sistemico
• Sindrome di Evans
• Macroglobulinemia di Waldenström
• emoglobinuria parossistica da freddo
• leucemia linfatica cronica
• linfomi
• Mononucleosi infettiva
• infezione da micoplasma pneumoniae
• sifilide

La positività del test dell'antiglobulina in queste malattie non serve come criterio diagnostico, ma è uno dei sintomi della malattia.

Malattia emolitica del neonato

Causa malattia emolitica del neonato incompatibilità dei gruppi sanguigni nella madre e nel feto, nella maggior parte dei casi secondo il sistema Rhesus, in singoli casi - secondo il sistema AB0, casisticamente - secondo altri antigeni.

Il conflitto Rh si sviluppa se in una donna Rh-negativo il feto ha ereditato sangue Rh-positivo da suo padre.

La malattia in un neonato si sviluppa solo se la madre ha già sviluppato anticorpi contro gli antigeni corrispondenti, cosa che accade dopo precedenti gravidanze, parto, aborti, trasfusioni di sangue incompatibile. Il motivo più comune per innescare la sintesi di anticorpi contro gli antigeni della membrana eritrocitaria è il parto (sanguinamento feto-materno). Le prime nascite per lo più passano senza complicazioni, ma le successive sono irte di malattia emolitica del neonato nei primi giorni dopo la nascita.

Sintomi della malattia emolitica del neonato

• giallo della pelle
• anemia
• pelle pallida e mucose
• ingrossamento del fegato e della milza
• disturbi respiratori
• gonfiore di tutto il corpo
• eccitazione e graduale depressione del sistema nervoso centrale

Anemia dopo trasfusione di sangue

Test di Coombs indiretto effettuato prima della trasfusione di sangue per valutare la compatibilità, e Test diretto di Coombs- dopo di esso, se si sospetta un'emolisi post-trasfusionale, ad es. se ha sintomi come febbre, brividi, lacrimazione (leggi sotto). Lo scopo del test è rilevare gli anticorpi contro i globuli rossi trasfusi che si sono legati ai globuli rossi del ricevente e sono la causa dell'emolisi post-trasfusionale, nonché della rimozione prematura dei globuli rossi del donatore dalla circolazione del ricevente (ricevente).

Sintomi di una reazione emolitica dopo una trasfusione di sangue

• aumento della temperatura corporea
• eruzione cutanea sulla pelle
• mal di schiena
• colore rosso dell'urina
• nausea
• vertigini

Decifrare il test di Coombs

Vale la pena ricordare che le regole fondamentali per la decodifica dei test antiglobulinici diretti e indiretti sono le stesse. L'unica differenza è la posizione degli anticorpi - nel sangue o già su un globulo rosso - su un eritrocita.

• Se il test diretto di Coombs è negativo- ciò significa che l'anticorpo non si "posiziona" sugli eritrociti e la causa dei sintomi deve essere ricercata ulteriormente e deve essere eseguito un test di Coombs indiretto
• se viene rilevato un risultato positivo del test di Coombs dopo una trasfusione di sangue, infezioni, farmaci - la positività può durare fino a 3 mesi (tempo di vita degli eritrociti 120 giorni - 3 mesi)
• un risultato positivo del test dell'antiglobulina in una malattia autoimmune può durare mesi o addirittura anni

Norme del test di Coombs

• Test diretto di Coombs- negativo
• test di Coombs indiretto- negativo

Qualitativamente, un risultato positivo viene misurato nel numero di più da uno a quattro (+, ++, +++, ++++) e quantitativamente in forma digitale - 1:16, 1:256, ecc.

4 fatti sul test di Coombs

• proposto per la prima volta a Cambridge nel 1945
• soglia di sensibilità - almeno 300 molecole anticorpali fisse su un eritrocita
• il numero di anticorpi che attivano l'emolisi - individualmente per ogni persona (da 16-30 a 300)
• la dinamica di altri indicatori di laboratorio dell'anemia emolitica (emoglobina, bilirubina, reticolociti) può normalizzarsi e il test di Coombs rimarrà allo stesso livello

Svantaggi del test dell'antiglobulina

• non è in grado di determinare la forza di legame di un antigene con un anticorpo
• numero sconosciuto di anticorpi legati
• non determina il tipo di anticorpo
• un test di Coombs positivo non aiuterà a determinarne la causa
• Lo 0,5% delle persone sane ha un test di Coombs positivo senza alcuna evidenza di anemia emolitica
• non adatto per monitorare il successo del trattamento, in quanto non indica l'attività di emolisi degli eritrociti

REAZIONE DI COOMBS(R. R. A. Coombs, immunologo inglese, nato nel 1921; sin.: Test di Coombs, test dell'antiglobulina) - reazione immunologica per rilevare anticorpi incompleti contro auto e isoantigeni di eritrociti.

La reazione è stata sviluppata nel 1908 da S. Moreschi, ma è stata ampiamente utilizzata solo dal 1945 dopo che Coombs ha mostrato il suo ruolo nel determinare la compatibilità nelle trasfusioni di sangue, nel conflitto Rhesus, nella diagnosi di condizioni autoallergiche e autoimmuni, ecc.

La reazione di Coombs si basa sull'uso di una preparazione appositamente preparata al suo interno: il siero antiglobulina. In presenza di siero antiglobulinico, gli eritrociti carichi di anticorpi incompleti agglutinano. Gli eritrociti che non contengono anticorpi sulla loro superficie rimangono non agglutinati.

K.r. ampiamente utilizzato per: a) stabilire lo stato di isosensibilizzazione, cioè il rilevamento di isoanticorpi che si verificano durante ripetute trasfusioni di sangue (vedi Trasfusioni di sangue) o gravidanze (vedi Gravidanza); b) eseguire un test di compatibilità con le trasfusioni di sangue; c) definizioni in erythrocytes di una varietà di un fattore Rh (vedi); d) rilevazione di anticorpi autoimmuni sugli eritrociti di pazienti con anemia emolitica acquisita (vedi) e altre malattie autoallergiche (vedi), nonché in alcune infezioni che si verificano con una componente allergica; e) rilevazione di anticorpi isoimmuni fissati sugli eritrociti di bambini affetti da malattia emolitica del neonato (vedi). K.r. Viene utilizzato anche nella ricerca forense e antropologica.

Il materiale principale per la messa in scena di K. r. sono siero o plasma citrato ed eritrociti del paziente. Esistono due varianti del fiume K.: indiretto e diretto. Con indiretto K. p. studio il siero del paziente, in un taglio definiscono anticorpi liberamente circolanti. Con una linea retta K. p. gli eritrociti vengono esaminati per la presenza di anticorpi fissati su queste cellule del sangue.

Siero antiglobulinico per K. river. ricevere per immunizzazione un laboratorio. animali (conigli, capre, pecore, ecc.) con globuline isolate da siero umano mediante frazionamento con etanolo, solfato di ammonio o gel filtrazione su Sephadex. Al ricevimento del siero antiglobulinico, è necessario rimuovere gli anticorpi eteroagglutinanti risultanti dall'immunizzazione degli animali con globuline umane. Ciò si ottiene mediante l'adsorbimento del siero immunitario con una miscela di eritrociti di persone con diversi gruppi sanguigni o diluendolo con una soluzione isotonica di cloruro di sodio. In quest'ultimo caso, il titolo di eteroagglutinine dovrebbe essere basso (1: 16 - 1: 32), in modo che dopo la diluizione il siero antiglobulinico mantenga una buona attività in K. r.

Reazione indiretta di Coombs

La reazione indiretta di Coombs si svolge in due fasi. La prima fase viene eseguita in piccole provette appositamente progettate per questo scopo, di dimensioni 4 X 0,5 cm In ciascuna provetta, a tre gocce di siero (intero, 1: 2, ecc.), In cui la presenza di anticorpi si sospetta, si aggiunge una goccia di sedimento di eritrociti di composizione antigenica nota. Il contenuto del tubo viene miscelato e posto in un termostato a t° 37° per 1 ora. Quindi gli eritrociti vengono lavati tre volte con una soluzione isotonica di cloruro di sodio. Il secondo stadio consiste nella preparazione di una sospensione al 5% di eritrociti lavati e la connessione su una piastra bianca (porcellana) con una superficie bagnata di una goccia di eritrociti con una goccia di siero antiglobulina. La contabilizzazione dei risultati viene eseguita fino a 10 minuti. I risultati falsi positivi vengono esclusi eseguendo studi di controllo. L'uso di una soluzione isotonica di cloruro di sodio al posto del siero di antiglobulina non deve essere accompagnato da agglutinazione eritrocitaria. Prestazioni di indiretto K. r. in relazione agli eritrociti di un fenotipo noto, gli isoantigeni consentono di stabilire la specificità degli anticorpi. Ad esempio, uno studio del siero del paziente con eritrociti 0(I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fya; 0(I), cDe, Kk, Fya; 0(I), cDE, Kk, Fya; 0(I), cde, kk, Fya hanno mostrato un risultato positivo con un campione di sangue nel 1° e 4° caso; altri campioni di sangue (2, 3, 5 casi) hanno dato esito negativo. Il siero contiene anticorpi anti-E. Con l'aiuto di K. r. possono essere rilevati anticorpi incompleti contro antigeni: C, D, E, c, e; K, K; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb, ecc. (vedi Gruppi sanguigni).

Reazione diretta di Coombs

Secondo la tecnica di esecuzione, la reazione di Coombs diretta corrisponde al secondo stadio del K. r. indiretto: gli eritrociti del paziente (sospensione al 5%) lavati tre volte con soluzione isotonica di cloruro di sodio sono combinati con siero antiglobulina. Diretto K. r. eseguire quando vi è motivo di ritenere che gli eritrociti del paziente in studio in vivo siano già sensibilizzati da anticorpi. Retta positiva K. r. serve come segno diagnostico nella malattia emolitica del neonato, causata dalla sensibilizzazione del corpo della donna agli antigeni fetali e dalla penetrazione di anticorpi attraverso la placenta nel corpo del bambino, nonché con l'anemia emolitica acquisita.

Negli ultimi anni, K. r. notevolmente migliorata. Con il suo aiuto è possibile non solo accertare la presenza di anticorpi sugli eritrociti, ma anche stabilire la classe delle immunoglobuline (vedi). Per fare questo, usa il siero contro alcune classi di immunoglobuline: IgG, IgM, IgA. Gli anticorpi isoimmuni contro Rh, gli antigeni Kell, gli antigeni Duffy e altri antigeni, così come gli anticorpi autoimmuni caldi, sono solitamente IgG. Gli anticorpi autoimmuni freddi, così come gli anticorpi isoimmuni contro Le e alcuni altri antigeni, di regola, appartengono a IgM. Solo rari anticorpi autoimmuni hanno la natura di IgA (vedi Autoanticorpi).

Bibliografia: Dygin V. P. Malattie autoimmuni nella clinica delle malattie interne, L., 1970, bibliogr. ; Kassirsky I. A. e Alekseev G. A. Ematologia clinica, M., 1970; Kosyakov P. N. Isoantigeni e isoanticorpi umani in condizioni normali e patologiche, M., 1974, bibliogr.; Boivin P. e. un. Le anemie emolitiche, p. 93, P., 1971, bibliogr.; Aspetti clinici dell'immunologia, ed. di P. G. H. Geli a. o., Oxford, 1975; Coombs R.R.A., Mourant A.E.a. Razza R. R. Isosensibilizzazione in vivo dei globuli rossi nei bambini con malattia emolitica, Lancet, v. 1, pag. 264, 1946.

Test diretto di Coombs. Con l'aiuto di questo test viene dimostrata la presenza di anticorpi bloccanti fissati dagli eritrociti del bambino. Un test diretto positivo è indicativo di sensibilizzazione ed è una forte indicazione di malattia emolitica del neonato prima che compaiano altri segni clinici. In via eccezionale, e solo in casi molto gravi, un test di Coombs diretto può risultare negativo a causa dell'emolisi già insorta e quasi completa degli eritrociti sensibilizzati.

Il test di Coombs diretto viene eseguito come segue: 5 gocce di sangue prelevate dal tallone del bambino vengono poste in una provetta e vengono aggiunti 5 ml di soluzione fisiologica. Mescolare bene e centrifugare per 10 min. Un liquido limpido viene separato dal sedimento eritrocitario. Quindi aggiungere nuovamente 5 ml di soluzione fisiologica, mescolare e centrifugare. Dopo tre volte la miscelazione con soluzione salina, gli eritrociti sono ben lavati. Dopo l'ultima separazione del surnatante, il sedimento eritrocitario nella quantità di 0,1 ml viene miscelato con 0,9 ml di soluzione fisiologica. Applicare 2-3 gocce di questa miscela su un vetrino e aggiungere una goccia di siero di Coombs. La presenza di agglutinazione indica che la reazione è positiva (test di Coombs diretto positivo). Lo studio deve essere effettuato a temperatura ambiente superiore a 16°C per evitare l'azione delle agglutinine fredde.

Test di Coombs indiretto serve come prova della presenza di anticorpi liberi nel siero materno e viene eseguito con il siero materno.

La malattia emolitica in un neonato con incompatibilità Rh di solito si manifesta dopo la seconda gravidanza. Il primo figlio nasce sano, il secondo con segni di lieve anemia, e solo dopo la terza gravidanza nascono bambini con evidenti segni di malattia emolitica. Solo nelle donne precedentemente sensibilizzate durante la prima gravidanza può nascere un bambino con sintomi di malattia emolitica. In alcuni casi, l'immunizzazione provoca aborti e nati morti. Per l'insorgenza e la gravità della malattia, sono importanti lo stato della placenta e la durata dell'esposizione alle agglutinine materne sul feto. Con la comparsa delle agglutinine 10-14 settimane prima della nascita, il bambino di solito presenta forme subcliniche. La comparsa precoce delle agglutinine, 15-26 settimane prima del parto, provoca forme gravi della malattia. In tutte le forme della malattia, il processo principale è l'emolisi. La conseguenza della reazione antigene-anticorpo è l'emolisi, danno ai capillari epatici e cerebrali. A seconda di quale lesione prevale, si osservano varie forme della malattia. Anche alcuni fenomeni anafilattici sono pericolosi. Portano alla formazione di sostanze simili all'istamina che causano gravi danni alle cellule epatiche e in particolare alle cellule gangliari dei nuclei basali, al corno di ammonio, al midollo allungato e persino alla corteccia cerebrale. Con danni alle cellule del fegato, l'ittero epatico viene aggiunto all'ittero extraepatico. I bambini muoiono con gravi sintomi di ittero nucleare. Se sopravvivono, rimangono i sintomi delle lesioni del sistema nervoso (disturbi del sistema extrapiramidale con movimenti coreoatetici, una sorta di andatura danzante, movimenti forzati della testa, a volte un disturbo nella coordinazione dei movimenti volontari con frequenti cadute, aumento del tono muscolare , ritardo mentale, cioè con segni detti encefalopatia posticteria infantum).

Negli ultimi anni, tra i pazienti di età diverse, il numero di malattie del sangue è aumentato e vengono utilizzati vari metodi e mezzi per diagnosticarle. Il test di Coombs è un esame del sangue clinico e lo scopo della sua condotta è identificare alcuni organismi che rappresentano una minaccia per la salute umana.

Gli anticorpi possono attaccarsi e il risultato può essere una violazione dello stato del sistema immunitario. Il test diretto di Coombs è un test dell'antiglobulina che viene eseguito per rilevare gli anticorpi attaccati alla superficie dei globuli rossi.

In genere, gli specialisti ricorrono a un test anticorpale nelle seguenti situazioni:

• La necessità di una trasfusione di sangue. Dal corso di anatomia della scuola, è noto che una persona può avere uno dei quattro gruppi sanguigni. L'esecuzione di un test dell'antiglobulina consente di determinare la possibilità di una trasfusione di sangue in un altro organismo. Si può dire che un paziente può diventare donatore per trasfusione solo se il suo sangue corrisponde al tipo del paziente, cioè contiene gli stessi antigeni. Nel caso in cui il paziente e il donatore abbiano una differenza di antigeni, ciò può portare alla distruzione delle cellule trasfuse da parte del sistema immunitario. Il risultato di ciò può essere lo sviluppo di gravi malattie e complicanze e persino la morte. È per questo motivo che un ruolo importante viene dato alla ricerca del giusto tipo di sangue quando si rende necessario trasfonderlo.
• Determinazione del rischio di sensibilizzazione Rh. La medicina moderna definisce Rh come un antigene e la sua definizione completa è il concetto di "fattore Rh". Grazie al test di Coombs è possibile diagnosticare la presenza di anticorpi contro il fattore Rh nel sangue delle donne durante. Nel caso in cui la futura mamma abbia un fattore Rh negativo e il padre sia positivo, il nascituro può ereditarne uno qualsiasi. Se viene rilevato un fattore Rh positivo in un nascituro, aumenta il rischio di sviluppare sensibilizzazione Rh: questo è il processo di miscelazione del sangue e della madre durante la gravidanza o il travaglio.

Nel caso in cui vi sia incompatibilità tra il gruppo madre e figlio, il sistema immunitario del corpo femminile inizia a percepire il feto come un oggetto estraneo ed esercita su di esso ogni tipo di attacco. Il risultato di ciò potrebbe essere lo sviluppo di una grave patologia in un bambino, che si chiama eritroblastosi. In alcuni casi, in assenza di un trattamento efficace, si osserva la morte del feto nell'utero o immediatamente dopo la nascita.

In alcuni casi, viene eseguito il test di Coombs per rilevare l'emolisi autoimmune.

Tale malattia è piuttosto rara e si manifesta nella formazione di antigeni eritrocitari del proprio corpo.

Gli esperti distinguono due tipi di campioni di Coombs, ognuno dei quali viene utilizzato per scopi specifici.

Prova diretta. Un test diretto nella pratica medica è anche chiamato test diretto dell'antiglobulina e con il suo aiuto è possibile diagnosticare gli anticorpi attaccati alla superficie. In alcuni casi, la produzione di tali anticorpi nel corpo umano si verifica a seguito della progressione di vari o dell'uso di farmaci come:

• Chinidina
• metildop
• Procainammide

Il pericolo di tali anticorpi sta nel fatto che possono causare sviluppo e avere un effetto distruttivo su. A volte si ricorre al test di Coombs quando è necessario identificare le cause dello sviluppo di patologie come anemia e.

Un test di Coombs negativo è considerato normale.

Prova indiretta. Spesso gli esperti ricorrono all'esecuzione di un test indiretto di Coombs, che ha il secondo nome di "test indiretto dell'antiglobulina". Lo scopo principale di questo è rilevare gli anticorpi contro i globuli rossi presenti nel siero del sangue. Grazie a questo test è possibile determinare se il sangue del donatore corrisponde a quello del paziente se è necessario trasfonderlo. Tale analisi è una sorta di test di compatibilità e, grazie alla sua implementazione, è possibile evitare lo sviluppo di una reazione avversa al sangue del donatore.

In genere, tale studio è raccomandato per le donne durante. Alcune madri possono avere anticorpi di una certa classe nel corpo che possono attraversare la placenta nel sangue del nascituro. Il risultato di un tale processo può essere la malattia emolitica del feto, così come lo sviluppo di vari durante la gravidanza.

Preparazione della procedura e sua attuazione

Di solito, la procedura non richiede alcuna preparazione speciale e può essere eseguita in qualsiasi momento.

La preparazione per la diagnostica include i seguenti punti:

• nel caso in cui l'analisi venga eseguita in un neonato, è necessario spiegare ai genitori che con il suo aiuto sarà possibile diagnosticare una malattia emolitica
• in presenza di un sospetto dello sviluppo di una malattia emolitica in un paziente, deve essere spiegato che tale analisi aiuterà a determinare le cause del suo sviluppo
• la preparazione per l'analisi non richiede alcuna restrizione nel cibo e nella dieta
• quando si esegue un'analisi in un neonato, i genitori devono essere informati che sarà richiesto il prelievo di sangue da una vena, oltre a chiarire il tempo della procedura
• è necessario informare il paziente che durante l'applicazione di un laccio emostatico e il prelievo di sangue possono verificarsi disagi
• l'assunzione di farmaci può distorcere i risultati del test di Coombs, quindi dovrebbero essere annullati qualche tempo prima che venga eseguito

Quando si esegue un test di Coombs diretto, il sangue viene prelevato da una vena usando una siringa. Prima di iniziare la procedura, viene eseguita un'accurata disinfezione del sito di puntura e, dopo aver prelevato il materiale per la ricerca, viene regolato un batuffolo di cotone o una garza sterile. Nel caso in cui l'analisi venga eseguita nei neonati, il sangue viene prelevato dal cordone ombelicale.

Quando compare un ematoma dopo il prelievo di sangue, vengono applicati impacchi riscaldanti al sito di puntura. Dopo la procedura, il paziente può riprendere l'assunzione di farmaci.

In laboratorio, il sangue ottenuto viene purificato e, parallelamente, viene eseguita la separazione dei globuli rossi.

Il campione viene esaminato da uno specialista utilizzando vari siero e reagenti di Coombs, al contrario della globulina umana. Nel caso in cui gli eritrociti non si uniscano e l'agglutinazione non si sviluppi, allora possiamo parlare di un risultato positivo.

Durante la procedura possono verificarsi le seguenti complicazioni:

• sviluppo dal sito di prelievo di sangue durante lo studio
• mal di testa, vertigini o svenimento
• sviluppo di emorragia sotto la pelle
• con uno scarso trattamento antimicrobico della pelle nel sito di iniezione, aumenta il rischio di infezione che entra nel corpo

Risultati della ricerca

Decodifica - possibili malattie

Una persona sana nel corpo non ha anticorpi, cioè normalmente non dovrebbero esserlo. Nel caso in cui lo studio mostri un test positivo, ciò potrebbe indicare la presenza nel corpo di anticorpi sui globuli rossi.

Il risultato di una tale condizione patologica può essere la distruzione dei globuli rossi e di solito si sviluppa:

• con sistemica
• con infezione da micoplasma
• con mononucleosi infettiva
• nella malattia emolitica del neonato
• con anemia emolitica indotta da farmaci
• con leucemia linfatica cronica
• con anemia emolitica autoimmune
• con incompatibilità del sangue del feto e della madre

Il test diretto di Coombs viene spesso somministrato alle donne durante la gravidanza per determinare la compatibilità del sangue materno e fetale. Nel caso in cui vi sia incompatibilità tra il corpo della madre e il nascituro in termini di agenti eritrocitari, aumenta il rischio di sviluppare una malattia emolitica del neonato.

Un bambino Rh positivo in una donna Rh negativo provoca lo sviluppo di un conflitto Rh.

Con una tale patologia, la distruzione degli eritrociti del nascituro avviene da parte dei corpi anti-Rhesus del corpo della madre. Una volta nel corpo femminile, i globuli rossi fetali hanno un effetto stimolante sul sistema immunitario della madre e il risultato è la produzione di anticorpi per il bambino.

Video utile - anemia emolitica.

La formazione di tali nell'organismo materno porta alla trombosi da agglutinazione dei capillari e alla necrosi ischemica dei tessuti fetali. Come risultato dell'emolisi degli eritrociti e della rottura dell'emoglobina, si osserva la formazione di sostanze tossiche indirette nel corpo del feto. Una forte diminuzione del contenuto di globuli rossi nel feto a causa della loro emolisi porta allo sviluppo di una malattia come l'anemia nel bambino.

Bassi livelli e alte concentrazioni di bilirubina complicano significativamente il decorso della malattia. Durante la gravidanza vengono diagnosticate molte complicazioni, come:

• rischio di aborto spontaneo
• sviluppo di sanguinamento
• preeclampsia
• anemia
• parto prematuro

I corpi anti-Rhesus proteggono la madre, ma allo stesso tempo rappresentano una seria minaccia per il feto in via di sviluppo. Grazie al test di Coombs, è possibile diagnosticare in tempo tale condizione patologica del corpo femminile e prescrivere un trattamento tempestivo. Inoltre, tale analisi aiuta a identificare varie malattie del sangue, la cui progressione può portare alla morte del paziente.

Prova di Coombs

Prova di Coombs- un test dell'antiglobulina volto a rilevare nel sangue Rh-negativo anticorpi anti-eritrociti incompleti contro il fattore Rh - una proteina specifica che si trova sulla superficie degli eritrociti del sangue Rh-positivo. Esistono due tipi di questo test: diretto - rilevamento di anticorpi sulla superficie dei globuli rossi, indiretto - rilevamento di anticorpi nel siero del sangue. Un test diretto viene effettuato nella diagnosi e nel monitoraggio del trattamento delle malattie del sangue: anemia emolitica, malattia emolitica del neonato e altre. Viene eseguito un test indiretto per valutare la compatibilità del sangue del donatore e del ricevente durante la trasfusione, nonché per determinare la presenza e il rischio di conflitto Rh durante la pianificazione e la gestione della gravidanza. Il materiale per il test di Coombs è il sangue venoso, lo studio viene effettuato con metodi basati sulla reazione di agglutinazione. Normalmente, entrambi i test danno un risultato negativo. L'analisi viene eseguita entro un giorno.

Il test di Coombs è un esame clinico del sangue Rh-negativo, volto a rilevare gli anticorpi contro il fattore Rh. Il test viene utilizzato per identificare il rischio di sviluppare un conflitto Rhesus e reazioni emolitiche. In ogni persona, la superficie degli eritrociti contiene un certo insieme di antigeni o agglutinogeni - composti di varia natura, la cui presenza o assenza viene utilizzata per giudicare il gruppo sanguigno e il fattore Rh. Esistono molti tipi di antigeni, nella pratica medica, gli agglutinogeni A e B, che determinano il gruppo sanguigno, e l'agglutinogeno D, il fattore Rh, sono della massima importanza pratica. Con un fattore Rh positivo, gli antigeni D vengono rilevati sulla membrana esterna degli eritrociti, con un negativo - no.

Il test di Coombs, chiamato anche test dell'antiglobulina, ha lo scopo di rilevare anticorpi anti-eritrociti incompleti contro il sistema del fattore Rh nel sangue. Gli anticorpi contro il fattore Rh sono immunoglobuline specifiche che vengono prodotte nel sangue Rh negativo quando vi entrano eritrociti con agglutinogeni D. Ciò può verificarsi quando il sangue del feto e della donna incinta viene mescolato, con trasfusioni di sangue eseguite senza una precedente tipizzazione del sangue. Il test di Coombs esiste in due versioni: diretta e indiretta. Quando si esegue un test di Coombs diretto, gli anticorpi vengono rilevati attaccati alla superficie dei globuli rossi. Lo studio viene utilizzato per determinare la causa della reazione emolitica. Il test indiretto di Coombs ha lo scopo di rilevare gli anticorpi anti-eritrociti nel plasma sanguigno. È necessario determinare la compatibilità del sangue del donatore e del ricevente o della madre e del feto, aiuta a prevenire lo sviluppo del conflitto Rhesus e la successiva emolisi dei globuli rossi.

Il sangue per entrambe le varianti del test di Coombs viene prelevato da una vena. L'analisi viene eseguita con il metodo dell'agglutinazione utilizzando siero antiglobulina. I risultati dello studio sono utilizzati in ematologia per identificare le cause delle reazioni emolitiche, in chirurgia e rianimazione durante le trasfusioni di sangue, in ostetricia e ginecologia nel monitoraggio delle gravidanze nelle donne con sangue Rh negativo.

Indicazioni

Il test diretto di Coombs, che rileva gli anticorpi attaccati alla superficie dei globuli rossi, è prescritto per le reazioni emolitiche (distruzione dei globuli rossi) di varia origine. Lo studio è indicato per l'anemia emolitica autoimmune primaria, l'anemia emolitica post-trasfusionale, la malattia emolitica del neonato, l'emolisi dei globuli rossi causata da malattie autoimmuni, neoplastiche o infettive, nonché l'assunzione di farmaci, ad esempio chinidina, metildopa, procainamide . Il test indiretto di Coombs, che rileva gli anticorpi nel plasma sanguigno, viene utilizzato per prevenire lo sviluppo del conflitto Rhesus. È indicato per i pazienti in preparazione a trasfusioni di sangue, nonché per le donne in gravidanza con fattore Rh negativo, a condizione che il futuro padre del bambino abbia un fattore Rh positivo.

Per determinare la compatibilità Rh, il test di Coombs non viene somministrato a pazienti con sangue Rh positivo. In questi casi sono già presenti antigeni sulla superficie dei globuli rossi, la produzione di anticorpi non può essere innescata dalla trasfusione di sangue o dall'ingresso di sangue fetale nel flusso sanguigno della donna incinta. Inoltre, lo studio non è indicato per le donne in gravidanza se entrambi i genitori hanno un fattore Rh negativo, un carattere recessivo ereditario. Un bambino in tali coppie ha sempre sangue Rh negativo, un conflitto immunologico con la madre è impossibile. Nelle patologie emolitiche, il test dell'antiglobulina non viene utilizzato per monitorare il successo della terapia, poiché i risultati non riflettono l'attività del processo di distruzione degli eritrociti.

Il limite del test di Coombs è la complessità della procedura di ricerca: per ottenere risultati affidabili, è necessario rispettare le condizioni di temperatura e tempo, le regole per la preparazione dei reagenti e del biomateriale. Il vantaggio del test di Coombs è la sua elevata sensibilità. Nell'anemia emolitica, i risultati di questa analisi rimangono positivi, anche se l'emoglobina, la bilirubina e i reticolociti si normalizzano.

Preparazione per l'analisi e la raccolta del materiale

Il materiale per eseguire il test di Coombs è il sangue venoso. Non ci sono requisiti particolari per il tempo della procedura di prelievo del sangue e per la preparazione del paziente. Come con qualsiasi studio, si consiglia di fare una pausa dopo aver mangiato per almeno 4 ore e negli ultimi 30 minuti smettere di fumare, fare esercizio fisico ed evitare lo stress emotivo. Vale anche la pena discutere in anticipo con il proprio medico della necessità di interrompere l'assunzione di farmaci: alcuni farmaci possono distorcere i risultati del test di Coombs. Il sangue viene prelevato con una siringa dalla vena cubitale, meno spesso da una vena sul dorso della mano. Nel giro di poche ore il materiale viene consegnato al laboratorio.

Quando si esegue un test di Coombs diretto, il siero dell'antiglobulina viene aggiunto al siero del sangue del paziente. Dopo qualche tempo, la miscela viene esaminata per la presenza di agglutinati: si formano se ci sono anticorpi sui globuli rossi. Con un risultato positivo, viene determinato un titolo agglutinante. Il test di Coombs indiretto consiste in più passaggi. In primo luogo, gli anticorpi presenti nel siero vengono fissati sugli eritrociti iniettati durante l'incubazione. Quindi il siero antiglobulina viene aggiunto al campione, dopo un po 'vengono determinati la presenza e il titolo degli agglutinati. Il periodo di analisi è di 1 giorno.

Risultati normali

Normalmente il risultato del test di Coombs diretto è negativo (-). Ciò significa che non ci sono anticorpi associati ai globuli rossi nel sangue e non possono essere la causa dell'emolisi. Anche il risultato normale del test di Coombs indiretto è negativo (-), cioè non ci sono anticorpi contro il fattore Rh nel plasma sanguigno. Quando si prepara una trasfusione di sangue per il ricevente, ciò significa compatibilità con il sangue del donatore, durante il monitoraggio della gravidanza: l'assenza di sensibilizzazione Rh della madre, un basso rischio di sviluppare un conflitto immunologico. I fattori fisiologici, come le abitudini alimentari o l'attività fisica, non possono influenzare il risultato del test. Pertanto, se il risultato è positivo, è necessaria la consultazione di un medico.

Valore diagnostico dell'analisi

Un risultato positivo al test di Coombs è espresso qualitativamente, da (+) a (++++), o quantitativamente, in titoli da 1:16 a 1:256. La determinazione della concentrazione di anticorpi sugli eritrociti e nel siero del sangue viene eseguita in entrambi i tipi di campioni. Con un risultato positivo del test di Coombs diretto, gli anticorpi vengono rilevati sulla membrana esterna dei globuli rossi, che portano alla distruzione di questi globuli. La causa potrebbe essere una trasfusione di sangue senza una tipizzazione preventiva: una reazione emolitica post-trasfusione, così come l'eritroblastosi neonatale, una reazione emolitica dovuta all'uso di droghe, anemia emolitica autoimmune primaria o secondaria. La distruzione secondaria degli eritrociti può essere causata da lupus eritematoso sistemico, sindrome di Evans, macroglobulinemia di Waldenström, emoglobinuria parossistica da freddo, leucemia linfatica cronica, linfoma, mononucleosi infettiva, sifilide, polmonite da micoplasma.

Un risultato positivo del test di Coombs indiretto indica la presenza di anticorpi contro il fattore Rh nel plasma. In pratica, ciò significa che si è verificata la sensibilizzazione Rh, esiste la possibilità di sviluppare un conflitto Rh dopo l'infusione di sangue del donatore durante la gravidanza. Per prevenire complicazioni durante la gravidanza, le donne con risultato positivo al test di Coombs vengono inserite in registri speciali.

Trattamento delle deviazioni dalla norma

Il test di Coombs fa riferimento a studi isoserologici. I suoi risultati consentono di identificare una reazione emolitica, nonché di determinare la compatibilità del sangue del donatore e del ricevente, madre e feto, al fine di prevenire lo sviluppo del conflitto Rhesus. Se il risultato del test è positivo, è necessario chiedere consiglio al medico curante: ostetrico-ginecologo, ematologo, chirurgo.