Kako odrediti krvnu grupu prema standardnim serumima. Srednja stručna sprema medicinskog profila Određivanje krvne grupe serumom

Materijali su objavljeni na pregled i nisu recept za liječenje! Preporučujemo da se obratite hematologu u vašoj zdravstvenoj ustanovi!

Krvna grupa i Rh faktor su posebni proteini koji određuju njegov individualni karakter, baš kao i boja očiju ili kose osobe. Grupa i Rh imaju veliki značaj u medicini u liječenju gubitka krvi, bolesti krvi, a utječu i na formiranje organizma, funkcionisanje organa, pa čak i psihološke karakteristike osoba.

Koncept krvne grupe

Čak su i drevni liječnici pokušavali nadoknaditi gubitak krvi transfuzijom krvi od osobe do osobe, pa čak i od životinja. Po pravilu, svi ovi pokušaji su imali tužan ishod. A tek početkom 20. stoljeća austrijski naučnik Karl Landsteiner otkrio je razlike u krvnim grupama kod ljudi, koje su bile posebne bjelančevine u eritrocitima - aglutinogeni, odnosno izazivali reakciju aglutinacije - lijepljenje eritrocita. Ona je bila uzrok smrti pacijenata nakon transfuzije krvi.

Postoje 2 glavne vrste aglutinogena, koji su uslovno nazvani A i B. Lepljenje eritrocita, odnosno nekompatibilnost krvi, nastaje ako se aglutinogen spoji sa proteinom istog imena - aglutininom, koji se nalazi u krvnoj plazmi, odnosno a i b. To znači da u ljudskoj krvi ne mogu postojati istoimeni proteini koji izazivaju aglutinaciju eritrocita, odnosno ako postoji aglutinogen A onda ne može sadržavati aglutinin a.

Utvrđeno je i da u krvi mogu biti prisutna oba aglutinogena, A i B, ali tada ona ne sadrži nijednu vrstu aglutinina, i obrnuto. Sve su to znakovi koji određuju krvnu grupu. Stoga, kada se spoje istoimeni proteini u eritrocitima i plazmi, dolazi do sukoba oko krvne grupe.

Vrste krvnih grupa

Na osnovu ovog otkrića, kod ljudi su identificirane 4 glavne vrste krvnih grupa:

• 1., koja ne sadrži aglutinogene, ali sadrži i aglutinine a i b, najčešća je krvna grupa koju posjeduje 45% svjetske populacije;
• 2., koji sadrži aglutinogen A i aglutinin b, određuje se kod 35% ljudi;
• 3., u kojem se nalazi aglutinogen B i aglutinin a, ima ga 13% ljudi;
• 4., koja sadrži i aglutinogene A i B, a ne sadrži aglutinine, ova krvna grupa je najrjeđa, određena je samo u 7% populacije.

U Rusiji je prihvaćena oznaka krvne grupe prema sistemu AB0, odnosno prema sadržaju aglutinogena u njemu. Shodno tome, tabela krvnih grupa izgleda ovako:

Krvna grupa je naslijeđena. Može li se krvna grupa promijeniti - odgovor na ovo pitanje je nedvosmislen: ne može. Iako istorija medicine poznaje jedini slučaj povezan sa mutacije gena. Gen koji određuje krvnu grupu nalazi se u 9. paru hromozomski set osoba.

Bitan! Procjena o tome koja je krvna grupa pogodna za sve danas je izgubila na važnosti, baš kao i koncept univerzalni donator, odnosno vlasnik 1. (nulte) krvne grupe. Otkrivene su mnoge podvrste krvnih grupa, a transfuzuje se samo krv jedne grupe.

Rh faktor: negativan i pozitivan

Uprkos Landsteinerovom otkriću krvnih grupa, transfuzijske reakcije i dalje su se javljale tokom transfuzije. Naučnik je nastavio svoja istraživanja, te je zajedno sa svojim kolegama Wienerom i Levineom uspio otkriti još jedan specifični protein antigena eritrocita - Rh faktor. Prvi put je identifikovan kod rezus majmuna, po čemu je i dobio ime. Pokazalo se da je Rh prisutan i u krvi većine ljudi: 85% stanovništva ima ovaj antigen, a 15% ga nema, odnosno ima negativan Rh faktor.

Posebnost Rh antigena je da kada uđe u krvotok ljudi koji ga nemaju, doprinosi stvaranju anti-Rh antitela. Pri ponovljenom kontaktu sa Rh faktorom, ova antitijela daju tešku hemolitička reakcija, koji se naziva rezus konflikt.

Bitan! Kada je Rh faktor negativan, to ne znači samo odsustvo Rh antigena u crvenim krvnim zrncima. U krvi mogu biti prisutna anti-Rhesus antitela, koja se mogu formirati tokom kontakta sa Rh-pozitivnom krvlju. Stoga je obavezna analiza na prisustvo Rh antitijela.

Određivanje krvne grupe i Rh faktora

Krvna grupa i Rh faktor podliježu obaveznom određivanju u sljedećim slučajevima:

• za transfuziju krvi;
• za transplantaciju koštane srži;
• prije bilo kakve operacije;
• tokom trudnoće;
• sa bolestima krvi;
• kod novorođenčadi sa hemolitičkom žuticom (rezus nekompatibilnost sa majkom).

Međutim, idealno bi bilo da svaka osoba, i odrasla osoba i dijete, ima informacije o grupi i Rh pripadnosti. Teška povreda ili akutna bolest kada je krv hitno potrebna.

Određivanje krvne grupe

Određivanje krvne grupe vrši se posebno dobijenim monoklonskim antitelima po sistemu AB0, odnosno serumskim aglutininima, koji daju aglutinaciju eritrocita u kontaktu sa istoimenim aglutinogenima.

Algoritam za određivanje krvne grupe je sljedeći:

1. Pripremite koliklone (monoklonska antitela) anti-A - roze ampule i anti-B - plave ampule. Pripremite 2 čiste pipete, staklene štapiće za miješanje i staklene pločice, jednokratnu špricu od 5 ml za vađenje krvi, epruvetu.
2. Uradite vađenje krvi iz vene.
3. Velika kap koliklona (0,1 ml) se nanosi na staklenu pločicu ili posebnu označenu ploču, male kapi test krvi (0,01 ml) se pomiješaju sa zasebnim staklenim štapićima.
4. Posmatrajte rezultat 3-5 minuta. Kap pomiješane krvi može biti homogena - reakcija minus (-), ili ispasti pahuljice - reakcija plus ili aglutinacija (+). Procjenu rezultata mora izvršiti ljekar. Opcije za studiju određivanja krvne grupe prikazane su u tabeli:

Definicija Rh faktora

Određivanje Rh faktora vrši se slično kao i određivanje krvne grupe, odnosno korištenjem serumskog monoklonskog antitijela na Rh antigen. Velika kap reagensa (zoliklon) i mala kap svježe uzete krvi nanose se na posebnu čistu bijelu keramičku površinu u istim omjerima (10:1). Krv se pažljivo miješa staklenim štapićem s reagensom.

Određivanje Rh faktora kod koliklona traje kraće, jer se reakcija javlja u roku od 10-15 sekundi. Međutim, potrebno je izdržati maksimalno vremensko ograničenje od 3 minute. Kao iu slučaju određivanja krvne grupe, epruveta sa krvlju šalje se u laboratorij.

AT medicinska praksa Danas se široko koristi pogodna i brza ekspresna metoda za određivanje grupne pripadnosti i Rh faktora pomoću suhih soliklona, ​​koji se neposredno prije studije razrjeđuju sterilnom vodom za injekcije. Metoda se zove "Erythrotest-Groupcard", veoma je zgodna kako u klinikama tako iu ekstremnim i terenskim uslovima.

Priroda i zdravlje osobe prema krvnoj grupi

Ljudska krv kao njena specifičnost genetska osobina još nije u potpunosti istražen. AT poslednjih godina naučnici su otkrili opcije za krvne podgrupe, razvijaju se nove tehnologije za određivanje kompatibilnosti itd.

Krvi se takođe pripisuje sposobnost da utiče na zdravlje i karakter svog vlasnika. I iako je ovo pitanje i dalje kontroverzno, ipak su uočena dugoročna zapažanja Zanimljivosti. Na primjer, japanski istraživači vjeruju da je moguće odrediti karakter osobe prema krvnoj grupi:

• vlasnici 1. krvne grupe su ljudi jake volje, jaki, društveni i emotivni;
• vlasnici 2. grupe odlikuju se strpljenjem, skrupuloznošću, upornošću, marljivošću;
• predstavnici 3. grupe su kreativni pojedinci, ali su u isto vrijeme previše upečatljivi, dominantni i hiroviti;
• ljudi sa 4. krvnom grupom više žive sa osećanjima, neodlučni su, ponekad nerazumno oštri.

Što se tiče zdravlja, u zavisnosti od krvne grupe, smatra se da je ono najjače kod većine stanovništva, odnosno u 1. grupi. Osobe sa 2. grupom su sklone srčanim oboljenjima i onkološke bolesti, vlasnike 3. grupe karakteriše slab imunitet, niska otpornost na infekcije i stres, a predstavnici 4. grupe su skloni kardiovaskularnim patologijama, bolestima zglobova i raku.

Indikacije: potreba za transfuzijom krvi i njenih komponenti.

Potrebni uslovi: prostorija sa dobrim osvetljenjem i temperaturom od 15 o do 25 o C.

Oprema: dva seta standardnih hemaglutinirajućih seruma I (O), II (A), III (B) grupa dvije različite serije i jedna ampula seruma IV (AB) (u svaku ampulu sa serumom se spušta pipeta za suho čišćenje), boca sa izotoničnim rastvorom hlorida natrijuma sa pipetom, čisto oprana suva specijalna obeležena ili fajansa ploča, staklena stakalca, stakleni štapići, sterilne igle u obliku koplja za bušenje mesa prsta, sterilne kuglice od gaze, alkohol, peščani sat 5 minuta .

Zadatak broj 1.

Dijete od 6 godina je na bolničko liječenje dijagnosticirana ascariasis. Na sestrinskom pregledu medicinska sestra dobio sljedeće podatke: tegobe na mučninu, povraćanje, bol u pupku, gubitak apetita, gubitak težine, umor, nemiran san, noćni strahovi. Bolestan nekoliko sedmica.

Objektivno: koža je bleda, potkožni masni sloj nije dovoljno razvijen, bol pri palpaciji u pupčanom predelu. Stolica po dječaku bez patologije.

Termini:

1. Izmet na i / crv

2. Opšti test krvi

4. Dijeta broj 5

Zadaci:

1. Identificirati zadovoljstvo, koje su potrebe narušene i pacijentove probleme.

2. Obrazložite pacijentove probleme.

3. Definirajte ciljeve i kreirajte plan sestrinske intervencije s motivacijom

4. Struganje za enterobiozu

Zadatak broj 2.

Bolesnik se žali na temperaturu do 39°C, slabost, slabost u cijelom tijelu, bol u mišićima, bol u zglobovima, bol pri kretanju očne jabučice, suvi bolni kašalj, herpetične erupcije na usnama.

objektivno: kože visoka vlažnost, gornja usna herpetične erupcije, hiperemija konjunktive, suzenje, hiperemija u ždrijelu, teško disanje u plućima. HR-86 za 1 minut, krvni pritisak 110/70 mm Hg. Art. Jetra i slezena nisu uvećane. Fiziološki odlasci bez osobina.

U testu krvi: L- 4,5 * 10 9 / l, p / i- 3; s/i - 40; l-52; m-5; ESR-18mm/sat.

Zadatak

1. Identificirati pacijentove probleme čije je zadovoljstvo narušeno; formulirati i opravdati pacijentove probleme.

2. Postavite ciljeve i napravite plan sestrinske intervencije sa motivacijom.

3. Recite pravila za postavljanje insulina.

INSTRUKCIJE

O tehnici manipulacije

„Krvna grupa sa

sera (prema ABO sistemu) »

po specijalnosti

2-79 01 01 "Medicina",

2-79 01 31 "Njega"

Određivanje krvne grupe pomoću

standardna izohemaglutinacija

sera (prema ABO sistemu)

Indikacije: potreba za transfuzijom krvi, priprema za operaciju.

Materijalna podrška:

1) dve serije standardnih hemaglutinirajućih seruma u posebnim policama;

2) boca sa izotoničnim rastvorom natrijum hlorida;

3) označene tablete;

5) pipeta za vađenje krvi;

6) pipete za izotonični rastvor;

7) pješčani sat za 5 minuta;

8) rukavice;

9) propisano dezinfekciono sredstvo.
Određivanje krvne grupe vrši se u prostoriji s dobrim osvjetljenjem i temperaturom od +15 do +20 °C. Manipulacija se izvodi u rukavicama. U slučaju oštećenja kože, medicinska sestra se privremeno suspenduje sa posla. U slučaju kontakta s krvlju na koži ili sluzokoži, tretman se provodi prema važećim uputama.

Redoslijed izvođenja:

1. Provjerite kvalitetu standardnih hemaglutinirajućih seruma:

1) označavanjem u boji;

2) izgled (svetlo, providno);

3) očuvanje ampule;

4) prisustvo pravilno dizajnirane etikete sa naznakom krvne grupe, titra, roka trajanja, mesta pripreme;

2. Stavite na sto:

1) dva seta standardnih hemaglutinirajućih seruma tri grupe (O, A, B) od dve serije i jedna ampula sa serumom AB (IV), svaka ampula mora imati pipetu;

2) boca sa izotoničnim rastvorom, pipeta;

3) sterilna označena tableta;

4) stakala (staklene šipke);

5) pipeta za vađenje krvi;

6) pješčani sat;

3. Na tabletu upišite puno ime. pacijent, krvna grupa;

4. Stavite rukavice;

5. Nanesite 1 kap (0,1 ml) standardnih hemaglutinirajućih seruma tri grupe od dvije serije na odgovarajuće utičnice tablete na tableti;

6. Nanesite 1 kap krvi sa prsta ili iz epruvete pipetom u odgovarajuću ćeliju;

7. Stavite 1 malu kap (0,1 ml) test krvi u svaku jažicu ploče, pored seruma, u omjeru krv: reagens -1:10 (uzmite krv iz velike kapi pomoću različitih staklenih štapića);

8. Pomiješajte krv sa reagensom, nakon miješanja lagano protresite ploču u rukama. Dodajte 1 kap 0,9% rastvora natrijum hlorida u kapi seruma sa eritrocitima, gde je došlo do aglutinacije, ali ne ranije od 3 minuta;

9. Procijenite rezultat 5 minuta nakon početka reakcije:

1) reakcija aglutinacije može biti pozitivna i negativna;

2) ako su serumi dali pozitivnu reakciju, onda krv sadrži oba AB aglutinogena, u tom slučaju treba uraditi dodatnu kontrolnu studiju sa standardnim serumom grupe AB (IV);

10. Dezinficirajte otpadni materijal.

AT moderne medicine krvna grupa karakterizira skup antigena smještenih na površini eritrocita, koji određuju njihovu specifičnost. Postoji ogroman broj takvih antigena (obično se koristi tabela krvnih grupa sa različitim antigenima), ali se određivanje krvne grupe uglavnom vrši klasifikacijom prema Rh faktoru i AB0 sistemu.

Definiranje grupe je obavezan postupak u pripremi za bilo koju operaciju. Takva analiza je neophodna i prilikom stupanja u službu u nekim kontingentima, uključujući i vojne, radnike unutrašnje organe i strukture moći. Ova intervencija se provodi zbog povećanog rizika od stanja opasnog po život kako bi se smanjilo vrijeme potrebno za pružanje pomoći u vidu transfuzije krvi.

Sastav krvi različitih krvnih grupa

Suština AB0 sistema je prisustvo antigenskih struktura na eritrocitima. U plazmi ne postoje tipična antitijela koja im odgovaraju (gama globulini). Stoga, za analizu krvi možete koristiti reakciju "antigen + antitijelo".

Crvena krvna zrnca se spajaju kada se antigen i antitijelo sretnu. Ova reakcija se naziva hemaglutinacija. Reakcija se pojavljuje kao male pahuljice tokom analize. Studija se zasniva na snimanju serum aglutinacije.

Antigeni eritrocita "A" vezuju se za antitela "ά", kao i "B" za "β", respektivno.

Po sastavu se razlikuju sljedeće krvne grupe:

• I (0) - ά, β - površina eritrocita uopšte ne sadrži antigene;
• II (A) - β - na površini se nalazi antigen A i antitelo β;
• III (B) – ά - površina sadrži B sa ά-tipom antitijela;
• IV (AB) - 00 - površina sadrži oba antigena, ali nema antitela.

Embrion već ima antigene u stanju embrija, a aglutinini (antitela) se pojavljuju u prvom mesecu života.

Metode određivanja

Standardna metoda

Postoji mnogo tehnika, ali laboratorija obično koristi standardne serume.

Standardna metoda seruma koristi se za određivanje tipova AB0 antigena. Sastav standardnog izohemaglutinirajućeg seruma sadrži skup antitijela na molekule eritrocita. U prisustvu antigena koji je podložan djelovanju antitijela, formira se kompleks antigen-antitijelo, koji pokreće kaskadu imunoloških odgovora.

Rezultat ove reakcije je aglutinacija eritrocita, na osnovu prirode aglutinacije koja je u toku, moguće je utvrditi da li uzorak pripada nekoj grupi.

Za pripremu standardnog seruma koristi se donorska krv i koristi se određeni sistem – izolovanjem plazme, uključujući antitela, i njenim razblaživanjem. Razrjeđivanje se izvodi korištenjem izotonične otopine natrijum hlorida.

Uzgoj se obavlja ovako:

Sama studija se izvodi na sljedeći način:

1. On specijalni tablet stavite kap svakog seruma (ukupne zapremine oko 0,1 mililitar) na mesto gde se nalazi odgovarajuća oznaka (koriste se 2 uzorka, jedan je kontrolni, drugi je namenjen za istraživanje).
2. Zatim se pored svake kapi seruma ispitni uzorak stavlja u zapreminu od 0,01 mililitar, nakon čega se posebno miješa sa svakim dijagnostikumom.

Pravila za dekodiranje rezultata

Nakon pet minuta možete ocijeniti rezultate studije. U velikim kapima seruma dolazi do bistrenja, kod nekih dolazi do reakcije aglutinacije (formiraju se male ljuskice), kod drugih nije.

Video: Određivanje krvne grupe i Rh faktora

Evo mogućih opcija:

• Ako nema reakcije aglutinacije u oba uzorka sa serumima II i III (+ kontrola 1 i IV) - definicija prve grupe;
• Ako je zgrušavanje uočeno u svim uzorcima osim II - definicija drugog;
• U odsustvu reakcije aglutinacije samo u uzorku iz grupe III - definicija III;
• Ako je uočeno zgrušavanje u svim uzorcima, uključujući IV-kontrolu - definicija IV.

Kada su serumi raspoređeni u ispravnom redoslijedu i oznake na ploči, lako je navigirati: grupa odgovara mjestima bez aglutinacije.

U nekim slučajevima, veza nije jasno vidljiva. Zatim je potrebno ponoviti analizu, fina aglutinacija se promatra pod mikroskopom.

Metoda unakrsne reakcije

Suština ove tehnike je određivanje aglutinogena pomoću standardnih seruma ili koliklona uz paralelno određivanje aglutinina pomoću referentnih eritrocita.

Tehnika analize unakrsnom metodom praktički se ne razlikuje od studije sa serumima, ali ima nekih dodataka.

Kap po kap standardnih eritrocita treba dodati na ploču ispod seruma. Zatim se pipetom iz epruvete sa krvlju pacijenta koja je prošla kroz centrifugu izvadi plazma koja se stavlja na standardne eritrocite na dnu - dodaje se standardnom serumu.

Kao i prema tehnici standardne metode, rezultati studije se evaluiraju nekoliko minuta nakon početka reakcije. U slučaju reakcije aglutinacije možemo govoriti o prisutnosti AB0 aglutinina, u slučaju reakcije plazme možemo suditi o aglutinogenima.

Rezultati krvne pretrage standardnim eritrocitima i serumima:

aglutinacija;

- nema aglutinacije;

- nema reakcije.

Unakrsna metoda je postala široko rasprostranjena zbog činjenice da sprječava dijagnostičke greške koje se javljaju pri korištenju standardnih metoda.

Određivanje krvne grupe tsoliklonima

Cilikloni su sintetičke zamjene za serum koje sadrže umjetne zamjene za ά i β aglutinine. Zovu se eritrotesti "Zoliklon anti-A" (ima roze boje), kao i "anti-B" (imaju Plava boja). Očekivana aglutinacija se opaža između aglutinina koliklona i krvnih eritrocita.

Ova tehnika ne zahtijeva dvije serije, pouzdanija je i preciznija. Provođenje studije i evaluacija njenih rezultata odvija se na isti način kao i kod standardne metode.

Grupa IV (AB) je nužno potvrđena aglutinacijom sa anti-AB koliklonom, kao i odsustvom aglutinacije eritrocita u izotoničnom rastvoru natrijum hlorida.

Ekspresna metoda pomoću seta "Erythrotest-Groupcard"

Iako su općeprihvaćene metode za određivanje pripadnosti krvi određenoj grupi široko rasprostranjene, u modernoj medicini dolazi do uvođenja ekspresnih metoda od kojih je najčešća „Erythrotest“.

Prilikom određivanja grupe metodom “Erythrotest groupcard” potreban je set alata, uključujući sljedeće uređaje:

• Tableta sa pet jažica za određivanje grupe prema Rh-pripadnosti i AB0 sistemu;
• Scarifier dizajniran za dobivanje uzorka potrebnog za istraživanje;
• Staklene šipke za miješanje uzoraka;
• Čista pipeta za set rastvora.

Svi ovi alati su neophodni za dijagnostiku bez grešaka.

Komplet za testiranje krvi Erythrotest-Groupcard omogućava vam proučavanje Rh faktora i određivanje krvne grupe u bilo kojim uvjetima, posebno je učinkovit u nedostatku mogućnosti korištenja konvencionalnih metoda.

U jamicama na ploči nalaze se tsolikloni na antigene (to su anti-A, -B, -AB cisolikloni) i na glavni antigen, koji određuje nasljeđivanje Rh faktora (to je tsoliklon anti-D). Peta jažica sadrži kontrolni reagens koji pomaže u prevenciji moguće greške i pravilno odrediti pripadnost krvnoj grupi.

Video: Određivanje krvnih grupa pomoću tsoliklona

Krvne grupe su normalno naslijeđeni različiti imunološki znakovi krvi. Na osnovu ovih karakteristika svi ljudi su podeljeni u četiri grupe, bez obzira na rasu, godine i pol. Krvna grupa osobe ostaje konstantna tokom cijelog života. Osobe jedne krvne grupe razlikuju se od ljudi druge krvne grupe po prisustvu ili odsustvu aglutinogena (A i B) sadržanih u eritrocitima i α i β aglutinina sadržanih u serumu.

Krvne grupe sistema AB0: 0(I) krvna grupa sadrži aglutinine α i β, u njoj nema aglutinogena; A (II) krvna grupa - aglutinin α i aglutinogen A; B(III) krvna grupa-aglutinin i aglutinogen B; AB(IV) krvna grupa - sadrži aglutinogene A i B, aglutinini su odsutni.

Primalac je osoba kojoj se daje krv, davalac je osoba koja daje svoju krv na transfuziju. Idealno kompatibilna za primatelja je krv iste grupe. Krv je apsolutno nekompatibilna ako primalac ima aglutinine na eritrocite davaoca, jer se u tim slučajevima aglutinogen A jedne krvi kombinuje sa aglutininom A druge, ili aglutinogen B sa aglutininom β. Razvija se tzv. lijepljenje eritrocita u male i velike grudice. Transfuzija nekompatibilne krvi dovodi do ozbiljnih posljedica i može biti uzrok smrti. Primatelju grupe 0(I) ne može se transfuzirati krv iz bilo koje druge grupe, osim iste. Primalac AB(IV) grupe nema aglutinine, pa mu se može transfuzirati krv svih grupa. Primalac grupe AB(IV) je univerzalni primalac. Krv grupe 0(I) može se transfuzirati osobama bilo koje krvne grupe. Stoga se osobe sa 0(I) grupom nazivaju univerzalnim donatorima.

Osim aglutinogena A i B, u eritrocitima se ponekad nalaze i drugi aglutinogeni (na primjer, itd.). U slučajevima kada je krv nekompatibilna s Rh faktorom (vidi), također je nemoguće izvršiti transfuziju kako bi se izbjegle ozbiljne komplikacije povezane s uništavanjem crvenih krvnih zrnaca (hemoliza).

Prije svake transfuzije krvi, koja se provodi prema receptu i pod nadzorom liječnika, neophodno je odrediti krvnu grupu i utvrditi njenu kompatibilnost.

Rice. 1-4. Određivanje krvnih grupa standardnim serumima (A, B, 0).
Rice. 1. Testirana krv grupe 0(I).
Rice. 2. Testirana krv grupe A (II).
Rice. 3. Ispitana krv grupe B (III).
Rice. 4. Ispitana krv grupe AB (IV).

Metoda za određivanje krvnih grupa. Za određivanje krvne grupe pripremite čistu ploču, staklenu olovku, standardne serume 0 (I), A (II) i B (III) krvne grupe, bočice sa izotoničnim rastvorom natrijum hlorida, alkohol i jod, upijajući pamuk, staklo stakalce ili staklene štapiće i tri pipete, koje moraju biti suhe (voda uništava).

Ploča je olovkom podijeljena na tri sektora, koji označavaju 0 (I), A (I), B (III). Jedna velika kap standardnog seruma 0 (I), A (II), B (III) krvnih grupa se nanosi na odgovarajući sektor raznim pipetama. Nakon što se kap seruma ispusti iz pipete, odmah se spušta u bočicu iz koje je uzet. Prije uzimanja krvi prst se obriše alkoholom. Nakon injekcije u pulpu prsta, iglom se istiskuje kap krvi. Staklenom šipkom ili uglom čistog staklenog tobogana, tri kapi krvi (svaka veličine glave igle) se prenose na ploču pored seruma 0 (I), A (II) i B (III) krvi grupe. Nakon što zabilježite vrijeme na satu, svaki put sa novim staklenim štapićima miješajte krv naizmjenično sa serumima krvnih grupa 0 (I), A (II) i B (III), dok smjesa ne postane ravnomjerno ružičasta. Određivanje krvne grupe vrši se u roku od 5 minuta. (pratite sat). Nakon tog vremena, jedna kap izotonične otopine natrijum hlorida dodaje se u svaku kap smjese. Nakon toga, ploča s krvlju se lagano protrese, nagne unutra različite strane tako da se smjesa dobro pomiješa sa izotoničnim rastvorom natrijum hlorida, ali da se ne širi po staklu. Uz pozitivnu reakciju, već u prvim minutama od početka miješanja, čak i prije dodavanja izotonične otopine, u smjesi se pojavljuju sitna crvena zrna koja se sastoje od sljepljenih crvenih krvnih zrnaca. Sitna zrna se spajaju u veća, a ponekad i u pahuljice različite veličine(fenomen aglutinacije). Uz negativnu reakciju, smjesa ostaje jednolično obojena ružičastom. Prilikom provođenja testa sa tri gore navedena seruma za svaku krvnu grupu, može ispasti određena kombinacija pozitivnih i negativnih reakcija (Sl. 1-4). Ako su sva tri seruma dala negativnu reakciju, odnosno sve smjese su ostale ravnomjerno ružičaste boje, ispitivana krv pripada 0 (I) grupi. Ako je samo serum A (I) krvne grupe dao negativnu reakciju, a serumi 0 (I) i B (III) krvne grupe pozitivnu, odnosno pojavila su se zrna u njima, onda ispitana krv pripada A (II) grupa. Ako je serum B(III) krvne grupe dao negativnu reakciju, a serumi krvne grupe 0(I) i A(II) - pozitivnu, onda ispitana krv pripada B(III) grupi. Kad bi sva tri seruma dala pozitivne reakcije, odnosno svuda se pojavila granularnost, testirana krv pripada AB (IV) grupi. Bilo koja druga kombinacija ukazuje na grešku u definiciji. Uzroci grešaka u određivanju krvnih grupa i mjere za njihovo sprječavanje. 1. Višak krvi ako se uzme prevelika kap. Kap krvi treba da bude 10 puta manja od kapi seruma. 2. Ako su serumi slabi ili se eritrociti subjekta ne lijepe dobro, može se vidjeti aglutinacija (vidi), jer reakcija počinje kasno ili je blaga. Potrebno je uzeti pouzdane serume čija je aktivnost provjerena i rok trajanja nije istekao. 3. Na niskim temperaturama okoline može doći do nespecifične hladne aglutinacije – panaglutinacije. Dodavanje izotoničnog natrijum hlorida praćeno mućkanjem ploče obično eliminiše hladnu aglutinaciju. Da bi se to izbjeglo, temperatura okolnog zraka ne smije biti niža od 12 i ne viša od 25°. 4. Dugim posmatranjem, smjesa počinje da se suši sa periferije, gdje se ponekad pojavljuje zrnastost. U nedostatku granularnosti u tekućem dijelu smjese, može se govoriti o negativnoj reakciji aglutinacije.

Nakon što je odredio krvnu grupu, doktor mora odmah upisati u prednji list. Nakon završetka rada, ploču, pipete i staklene pločice treba dobro oprati pod slavinom toplom vodom, osušiti i staviti u ormarić. u ampulama ili bočicama čuvaju se u suhoj i toploj prostoriji u zaključanom ormariću na t° ne višoj od 20°.

Određivanje krvne grupe standardnim eritrocitima (tzv. dvostruka reakcija) koristi se samo u laboratorijama i na stanicama. AT svakodnevni rad koristite reakciju aglutinacije sa standardnim serumima prema gore opisanoj metodi.