Izmet za crijevne infekcije koje su uključene. Kako se radi test na tifusnu groznicu?

Sveobuhvatna molekularno-genetička studija koja vam omogućava da identificirate genetski materijal najvjerovatnijih uzročnika akutnih crijevnih infekcija u izmetu i utvrdite etiologiju bolesti.

Za šta se koristi ova analiza?

• Za diferencijalnu dijagnozu akutnih uzroka.

Kada je zakazana analiza?

• Sa simptomima akutne crijevne infekcije (proljev, groznica,).

ruski sinonimi

OKI, PCR (kal.).

Sinonimiengleski

Skrining za akutne crijevne infekcije; Skrining na bakterijsku i virusnu dijareju, PCR, fekalni uzorci.

Metoda istraživanja

Lančana reakcija polimeraze u realnom vremenu.

Koji se biomaterijal može koristiti za istraživanje?

Kako se pravilno pripremiti za istraživanje?

• Studiju se preporučuje provesti prije uzimanja antibiotika i drugih antibakterijskih kemoterapeutskih lijekova.
• Izbjegavajte uzimanje laksativa rektalne supozitorije, ulja, ograničiti unos lijekova koji utiču na pokretljivost crijeva (beladona, pilokarpin i dr.) i boju fecesa (gvožđe, bizmut, barijum sulfat), u roku od 72 sata pre uzimanja fecesa.

Opće informacije o studiji

Prema službenim statistikama, u Rusiji do 65-67% bolesti ove grupe su akutne crijevne infekcije neutvrđene etiologije. Ako je uzročnik infekcije nepoznat, djelotvornost protuepidemijskih mjera je ograničena. Omjer učestalosti otkrivanja virusnih i bakterijskih patogena varira u različite starosti: kod djece mlađe od 3 godine virusni agensi čine 80-90% bolesti, bakterijski uzročnici 10-20%; među odraslim pacijentima, udio virusnih patogena je smanjen na 30%.

Shigellaspecies i Escherichiacoli su gram-negativni mikroorganizmi u obliku štapa iz porodice Enterobacteriaceae. Rod Shigella uključuje patogene bakterije S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii i S. sonnei. Enteroinvazivne E. coli (EIEC) su vrlo slične šigelama, sintetiziraju i luče toksin sličan šigelama, sposobne su da prodru u ćelije crijevne sluznice i unište enterocite, što dovodi do stvaranja ulceroznih defekata na crijevnoj sluznici. . Za značajan dio slučajeva „bakteriološki nepotvrđene dizenterije“, posebno kod djece, odgovorna je enteroinvazivna ešerihioza.

Bakterije iz roda Salmonella pripadaju porodici Enterobacteriaceae. S. typhi i S. parathyphi su uzročnici tifusa i. Postoje mnoge serovarijante vrste Salmonella koje mogu uzrokovati infekciju sličnu gastroenterokolitisu kod ljudi, kao i uzrokovati bolničke infekcije. može se javiti u obliku akutne crijevne infekcije, teške generalizirane infekcije ili asimptomatskog nošenja. Konačna dijagnoza se postavlja tek nakon izolacije patogena ili otkrivanja njegove DNK.

Campylobacter je jedan od najtežih za uzgoj (što je potrebno prilikom analize) mikroorganizama. To je zbog njihove mikroaerofilnosti i mogućnosti suzbijanja njihovog rasta pratećom florom. Rod Campylobacter kombinuje i AII patogene (termofilne vrste) i saprofitne i oportunističke vrste, što se mora imati na umu prilikom identifikacije ovih mikroorganizama u kliničkom materijalu. Upotreba kompleta baziranih na PCR-u za određivanje termofilne grupe kampilobaktera ne samo da izbjegava naporan i skup bakteriološki rad, već i jasno ograničava otkrivanje onih tipova kampilobaktera koji imaju etiološki odnos s akutnom crijevnom infekcijom (C. jejuni, C. coli, C. lari, C. upsaliensis).

Prema podacima iz inostrane literature, norovirus je najčešći uzročnik izbijanja AII nebakterijske etiologije. Ova karakteristika je povezana s niskom infektivnom dozom i visokom otpornošću na okruženje. PCR je "zlatni standard" u klinička dijagnostika norovirusne infekcije.

Unatoč nešto nižoj prevalenciji u odnosu na rota- i noroviruse, astrovirusi čine značajan sloj crijevnih infekcija, kod trećine pacijenata koji se javljaju s kolitisom. Rotavirusi grupe A su najviše zajednički uzrok sporadični AII kod djece, a adenovirus F koji sadrži DNK (serotipovi 40 i 41) često uzrokuje izbijanje kod male djece.

Za otkrivanje i diferencijalnu dijagnozu crijevnih infekcija koriste se kulturološke i molekularne genetske metode za proučavanje genetskog materijala patogena u izmetu i određivanje koncentracije specifičnih imunoglobulina u krvi. PCR ima prednost u odnosu na metode kulture zbog brzi prijem rezultate, visoku specifičnost i osjetljivost studije. Ova analiza omogućava vam da identifikujete patogen sa 100% preciznošću crevna bolest, a brza dijagnostika akutnih crijevnih infekcija pomaže u izbjegavanju nepotrebnih zahvata i hirurške intervencije, pravovremeno započeti liječenje i ograničiti žarište širenja infekcije.

Za šta se koristi istraživanje?

• Uspostaviti etiološki faktor akutne crijevne infekcije;
• za diferencijalnu dijagnozu uzroka akutnog gastroenterokolitisa (upala gastrointestinalnog trakta).

Kada je predviđeno učenje?

• Sa simptomima akutnog gastroenteritisa, vjerovatno infektivne etiologije (retka česta stolica, povraćanje, groznica, bol u trbuhu);
• uz istovremeni ili uzastopni razvoj akutnih crijevnih infekcija kod više članova porodice, kod djece u dječija ustanova ili bolnica;
• sa sumnjom na razvoj bolničke crijevne infekcije (sa pogoršanjem simptoma enterokolitisa kod bolesnika koji se liječi od akutnih crijevnih infekcija).

Šta znače rezultati?

Referentne vrijednosti: negativan.

Razlozi za pozitivan rezultat:

• prisustvo DNK ili RNK uzročnika AII; etiologija u zavisnosti od identifikovanog tipa patogena (Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, genotip Norovirus 2, Astrovirus).

Razlozi za negativan rezultat:

• nema infekcije Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus 2 genotip, Astrovirus.

Šta može uticati na rezultat?

Faktori koji iskrivljuju rezultat:

• dugotrajno skladištenje materijala prije nego što uđe u laboratorij;
• smrzavanje materijala ili njegova toplinska obrada;
• nepoštivanje pravila za uzimanje biomaterijala i njegovu kontaminaciju.

Važne napomene

• Opis
• Trening
• Indikacije
• Interpretacija rezultata

Studija se koristi za diferencijalnu dijagnozu akutnih crijevnih infekcija.

• Shigella spp./Escherichia coli (Enteroinvazivna Escherichia coli - EIEC)
• Salmonella spp.
• Campylobacter spp.
• Adenovirus F
• Rotavirus A
• Norovirus GII
• Astrovirus

Većina akutnih crijevnih infekcija kod djece (od 50 do 80% svih slučajeva bolesti) uzrokovana je virusne infekcije, pretežno uzrokovane rotavirusima grupe A i norovirusima genogrupe 2 (GII). U strukturi akutnih crijevnih infekcija bakterijskog porijekla, najčešći uzročnici kod djece su salmonela. Uz salmonelozu (oko 7% akutnih crijevnih infekcija), relevantne su ešerihioza (4,8% akutnih crijevnih infekcija), kampilobakterioza (2,9% slučajeva bolesti), šigeloza (0,3% slučajeva akutnih crijevnih infekcija).

Bakterijska dijareja je teža od virusne dijareje. klinički tok, budući da su patofiziološki mehanizmi oštećenja sluznice povezani s prodiranjem mikroorganizama u epitelne stanice i djelovanjem bakterijskih endotoksina. Kod invazivnih (bakterijskih) akutnih crijevnih infekcija, bakteriološka metoda je "zlatni standard" dijagnoze, uz ključno pravilo: biomaterijal treba uzeti prije nego što se prepiše antimikrobna terapija (vidi testove br. 457, 458, 460, 461, 462 ).

Molekularno-genetičke studije (uključujući PCR metodu), koje identificiraju specifične fragmente DNK i RNK patogena u biomaterijalu, uključene su u standardne sheme za dijagnosticiranje AEI i omogućavaju vam da brzo i efikasno provjerite kompleks virusnih i bakterijskih patogena akutnog crijevne infekcije. Antigeni testovi za identifikaciju patogena AII (vidi testove br. 463, 481, 482, 483, 485, 486) su također ekspresne metode koje omogućavaju postavljanje dijagnoze bakterijske ili virusne akutne crijevne infekcije na ranih datuma bolesti, uključujući liječenje antibioticima. Serološke metode koje omogućavaju otkrivanje specifičnih antitela na patogene su pomoćne u dijagnozi većine invazivnih AII (videti testove br. 234, 235, 238, 239, 273, 280-290, 292, 293).

• diferencijalna dijagnoza akutne crijevne infekcije.

Tumačenje rezultata studije sadrži informacije za liječnika koji prisustvuje i nije dijagnoza. Informacije u ovom odjeljku ne bi se trebale koristiti za samodijagnozu ili samoliječenje. Tačnu dijagnozu postavlja ljekar, koristeći oba rezultata ovo istraživanje, i potrebne informacije iz drugih izvora: anamneza, rezultati drugih pregleda itd.

Analitička osjetljivost (izmet):

• Shigella spp./Escherichia coli (EIEC) - 1x103 GE/ml
• Salmonella spp. – 1x10 3 GE/ml
• Campylobacter spp. – 1x10 3 GE/ml
• Adenovirus F - 1x10 4 GE/ml
• Rotavirus A - 1x10 4 GE/ml
• Norovirus GII - 1x10 3 GE/ml
• Astrovirus - 1x10 4 GE / ml

Obrazac za prezentaciju rezultata:

Test kvalitete. Rezultat je dat u terminima "otkriveno" ili "nije otkriveno" za navedene patogene posebno, osim za Shigella spp./Escherichia coli (EIEC) test, u kojem je ukupno otkriveno prisustvo DNK ovih patogena.

Interpretacija rezultata

• infekcija uzrokovana odgovarajućim patogenom;
• prijenos infektivnog agensa.

"Nije detektovano":

• odsustvo DNK (RNA) patogena u test materijalu;
• nivo DNK (RNA) patogena u ispitivanom materijalu je ispod granice detekcije.

Književnost

• Vovk E.I., Masharova A.A. Akutna crijevne infekcije u ordinaciji lekara hitne pomoći medicinsku njegu. Lekar koji prisustvuje. - M. 2002;01-02:58-62.
• zarazne bolesti kod dece. Ed. D. Murray. - M.: Ed. "Vježba". 2006:928.
• Usenko D.V., Ploskireva A.A., Gorelov A.V. Akutne crijevne infekcije kod djece u praksi pedijatra: mogućnosti dijagnoze i terapije. Pitanja savremene pedijatrije. - M. 2014;13(3):12-20. http://www.spr-journal.ru/ojs/index.php/VSP/article/viewFile/340/682.
• Pawlowski S.W., Warren C.A., Guerrant R. Dijagnostika i liječenje akutne ili perzistentne dijareje. gastroenterologija. 2009;136(6):1874-1886.

Laboratorijska dijagnoza trbušnog tifusa uključuje opće kliničke metode istraživanja i specifične reakcije. Kao rezultat sveobuhvatnog pregleda, stručnjak će moći izvući zaključak o težini bolesti, svojstvima patogena (uključujući osjetljivost na antibiotike), stupnju opasnosti pacijenta za druge (njegova zaraznost). Sve potrebne studije provode se na početku bolesti (kada pacijent uđe u bolnicu) i prije otpusta. Ako je potrebno, analiza za tifusne groznice ponovljeno nekoliko puta.

Postoji još jedan važna nijansa: Diferencijalna dijagnoza trbušnog tifusa i paratifusa moguća je samo na osnovu specifičnog laboratorijskog pregleda. Ni klinički detalji ni opšte kliničke dijagnostičke metode ne dozvoljavaju razlikovanje paratifusa A, C ili B od patogena. Ova informacija može biti značajna u smislu moguće infekcije drugih, kao i formiranja samo tip-specifičnog imuniteta.

Opće karakteristike istraživanja

Gdje napraviti test za dijagnosticiranje tifusne groznice? Ovo pitanje ne bi trebalo da muči pacijenta, jer savremeni medicinski protokoli podrazumevaju obaveznu hospitalizaciju pacijenata sa takvom preliminarnom dijagnozom. U velikom medicinske ustanove(ili u okviru istog grada) postoji multidisciplinarna laboratorija, čiji će zaposleni moći da urade sve potrebne specifične i nespecifične studije za potpunu dijagnozu trbušnog tifusa i paratifusa.

Univerzalni odgovor na pitanje, nakon koliko dana će pacijent znati tačna dijagnoza, ne postoji. Za nespecifične studije potreban je samo jedan dan, a rezultat specifičnih reakcija dolazi tek 4-5 dana ili čak i više.

Identifikacija uzročnika trbušnog tifusa i paratifusa glavni je smjer sveobuhvatnog pregleda ne samo pacijenta, već i potencijalnih nositelja ( zdravi ljudi koji oslobađaju patogena i inficiraju druge). Rezultati takvog pregleda upisuju se u sanitarnu (medicinsku) knjižicu lica (deklarisane specijalizovane grupe) koje radi u prehrambenoj industriji, u dečijim ustanovama i nekim drugim preduzećima.

Za različite dijagnostičke pretrage od pacijenta (nosioca) uzimaju se sljedeće biološke tekućine:

• krv;
• fekalne mase;
• urin;
• žuč.

Potrebu za uzimanje određenog biološkog okruženja pacijenta utvrđuje ljekar koji prisustvuje. S druge strane, potrebno je djelovati dovoljno brzo, jer propisani antibiotici smanjuju djelotvornost mikrobiološka dijagnostika tifus - prije početka liječenja treba uzeti tjelesne tečnosti.

Opće kliničke metode

Standardne procedure, poput opće kliničke analize krvi i urina, u ovom slučaju zaista imaju dijagnostičku vrijednost, jer su uočene promjene vrlo karakteristične.

AT opšta analiza krv kod tifusno-paratifusnih bolesti se otkrivaju:

• leukocitoza u prvih 1-2 dana, koja se zamjenjuje leukopenijom;
• nekarakteristično za bakterijska infekcija limfocitoza, trombocitopenija, aneozinofilija;
• u teškim slučajevima može se primijetiti pancitopenija (depresija funkcije svih izdanaka krvi);
• otkrivanje eozinofila tokom perioda oporavka pacijenta je prognostički povoljan znak u toku bolesti.

U općoj kliničkoj analizi urina otkrivaju se tradicionalne promjene (povećan nivo leukocita, eritrocita), tipične za tešku intoksikaciju.

Prilikom provođenja opće kliničke studije fecesa (koprogram) mogu se otkriti eritrociti, što ukazuje na prisutnost manjeg crijevnog krvarenja. Uz koprogram, uobičajeno je propisati još jednu studiju izmeta na okultnu krv kako bi se isključila dijagnostička greška i pravovremeno dijagnosticirala krvarenje.

U slučaju tifusno-paratifusnih bolesti, biohemijski parametri se ispituju samo radi utvrđivanja izraženih disfunkcija. unutrašnje organe, na primjer, s razvojem specifičnog hepatitisa ili pijelonefritisa.

Specifične metode

Mikrobiološka dijagnoza trbušnog tifusa je osnova za konačnu dijagnozu i dalje protivepidemijsko djelovanje. Prilikom pregleda posebnih grupa stanovništva (deklarisane grupe), oznaka o negativnom rezultatu testa krvi na trbušni tifus za sanitarnu knjižicu je prijem na radno mjesto. Specifična analiza na trbušni tifus uključuje bakteriološke i serološke studije.

Bakteriološka metoda

Podrazumijeva uzimanje biološkog materijala od pacijenta i naknadnu sjetvu na specijalnu mediji kulture(najčešće - žučni bujon). Proučavanje morfoloških, biohemijskih i mnogih drugih svojstava mikroorganizma omogućava nam da ga identificiramo sa 100% točnošću. Osim toga, moderna mikrobiologija predviđa takvu obaveznu fazu kao što je osjetljivost na antibiotike, bez koje je proces učinkovite antimikrobne terapije značajno otežan.

Krv za trbušni tifus je bolje dati u prvoj sedmici bolesti. Pozitivan test krvi na trbušni tifus, odnosno pozitivna hemokultura, apsolutna je potvrda dijagnoze. Detekcija tifusne salmonele u urinu i feces može se u istoj mjeri uočiti i kod bolesne osobe i kod nosioca, odnosno potrebna su druga dodatna istraživanja.

Serološka metoda

Osnova mnogih reakcija koje implementiraju serološka metoda istraživanje je kombinacija poznatog antigena (tifus) i antitijela koja se sintetiziraju u krvi pacijenta. Serološka dijagnoza trbušnog tifusa je Vidal test, reakcija indirektna hemaglutinacija(RNGA), ako je potrebno - reakcija sa Vi - antigenom.

Vidal reakcija- ovo je modifikacija reakcije aglutinacije, dijagnostička vrijednost leži u povećanju titra antitijela kako bolest napreduje. Ova reakcija može biti lažno pozitivna kod drugih salmoneloza, pa je potrebna još jedna serodijagnostika tifusa. Na primjer, RNGA s različitim antigenima je specifičniji. Neke laboratorije jesu RPGA- reakcija pasivne aglutinacije antitela poznatim antigenima.

Ako se sumnja na trbušni tifus, specifična dijagnostika može potvrditi ili opovrgnuti dijagnozu infekciona zaraza i eventualno otkriti odakle dolazi ova infekcija.