Heces para infecciones intestinales que se incluyen. ¿Cómo se hace una prueba para la fiebre tifoidea?

Un completo estudio de genética molecular que permite identificar el material genético de los patógenos más probables de las infecciones intestinales agudas en las heces y establecer la etiología de la enfermedad.

¿Para qué sirve este análisis?

• Para el diagnóstico diferencial de causas agudas.

¿Cuándo se programa un análisis?

• Con síntomas de infección intestinal aguda (diarrea, fiebre,).

sinónimos rusos

OKI, PCR (cal).

Sinónimosinglés

Detección de infecciones intestinales agudas; Detección de diarrea bacteriana y viral, PCR, muestras fecales.

Método de investigación

Reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real.

¿Qué biomaterial se puede utilizar para la investigación?

¿Cómo prepararse adecuadamente para la investigación?

• Se recomienda realizar el estudio antes de tomar antibióticos y otros medicamentos quimioterapéuticos antibacterianos.
• Evite tomar laxantes ovulos rectales, aceites, limite la ingesta de medicamentos que afectan la motilidad intestinal (belladona, pilocarpina, etc.) y el color de las heces (hierro, bismuto, sulfato de bario), dentro de las 72 horas antes de recolectar las heces.

Información general sobre el estudio

Según las estadísticas oficiales, en Rusia hasta el 65-67% de las enfermedades de este grupo son infecciones intestinales agudas de etiología no especificada. Si se desconoce el agente causal de la infección, la eficacia de las medidas antiepidémicas es limitada. La relación de la frecuencia de detección de patógenos virales y bacterianos varía en diferentes edades: en niños menores de 3 años, los agentes virales representan el 80-90% de las enfermedades, los agentes bacterianos representan el 10-20%; entre los pacientes adultos, la proporción de patógenos virales se reduce al 30%.

Las especies Shigella y Escherichiacoli son microorganismos gramnegativos con forma de bastón de la familia Enterobacteriaceae. El género Shigella incluye las bacterias patógenas S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii y S. sonnei, que son patógenas. Las E. coli enteroinvasoras (EIEC) son muy similares a Shigella, sintetizan y secretan una toxina similar a Shigella, son capaces de penetrar en las células de la mucosa intestinal y destruir los enterocitos, lo que conduce a la formación de defectos ulcerativos en la mucosa intestinal. . Para una proporción significativa de casos de "disentería no confirmada bacteriológicamente", especialmente en niños, la esquerichiosis enteroinvasiva es responsable.

Las bacterias del género Salmonella pertenecen a la familia Enterobacteriaceae. S. typhi y S. parathyphi son los agentes causantes de la fiebre tifoidea y. Hay muchas serovariantes de especies de Salmonella que pueden causar una infección similar a la gastroenterocolitis en humanos, así como causar infecciones nosocomiales. puede ocurrir en forma de una infección intestinal aguda, una infección generalizada grave o un estado de portador asintomático. El diagnóstico final se realiza solo después del aislamiento del patógeno o la detección de su ADN.

Campylobacter es uno de los microorganismos más difíciles de cultivar (que se requiere durante el análisis). Esto se debe a su microaerofilia ya la posibilidad de suprimir su crecimiento por la flora acompañante. El género Campylobacter combina tanto patógenos AII (especies termófilas) como especies saprofitas y oportunistas, lo que debe recordarse al momento de identificar estos microorganismos en el material clínico. El uso de kits basados ​​en PCR para la determinación del grupo termofílico de campylobacter no solo evita laboriosos y costosos trabajos bacteriológicos, sino que limita claramente la detección de aquellos tipos de campylobacter que tienen relación etiológica con infección intestinal aguda (C. jejuni, C. coli, C. lari, C. upsaliensis).

Según datos de la literatura extranjera, el norovirus es el agente causal más común de todos los brotes de etiología no bacteriana. Esta característica está asociada con una dosis infecciosa baja y una alta resistencia a ambiente. PCR es el "estándar de oro" en diagnóstico clínico infecciones por norovirus.

A pesar de una prevalencia ligeramente menor en comparación con los rotavirus y los norovirus, los astrovirus constituyen una capa significativa de infecciones intestinales, en un tercio de los pacientes que presentan colitis. Los rotavirus del grupo A son los más causa común AII esporádica en niños, y el adenovirus F que contiene ADN (serotipos 40 y 41) a menudo causa brotes en niños pequeños.

Para la detección y diagnóstico diferencial de las infecciones intestinales se utilizan métodos de cultivo y genética molecular para estudiar el material genético del patógeno en las heces y determinar la concentración de inmunoglobulinas específicas en la sangre. PCR tiene una ventaja sobre los métodos de cultivo debido a recibo rápido resultados, alta especificidad y sensibilidad del estudio. Este análisis le permite identificar el patógeno con 100% de precisión enfermedad intestinal, y el diagnóstico rápido de infecciones intestinales agudas ayuda a evitar procedimientos innecesarios y intervenciones quirurgicas, iniciar el tratamiento de manera oportuna y limitar el foco de propagación de la infección.

¿Para qué sirve la investigación?

• establecer factor etiológico infección intestinal aguda;
• para el diagnóstico diferencial de las causas de gastroenterocolitis aguda (inflamación del tracto gastrointestinal).

¿Cuándo está programado el estudio?

• Con síntomas de gastroenteritis aguda, probablemente de etiología infecciosa (heces blandas frecuentes, vómitos, fiebre, dolor abdominal);
• con desarrollo simultáneo o secuencial de infecciones intestinales agudas en varios miembros de la familia, en niños en institución de niños o pacientes hospitalizados;
• con sospecha de desarrollo de infección intestinal nosocomial (con exacerbación de síntomas de enterocolitis en un paciente en tratamiento por infecciones intestinales agudas).

¿Qué significan los resultados?

Valores de referencia: negativo.

Razones para un resultado positivo:

• la presencia de ADN o ARN del agente causante de AII; etiología según el tipo de patógeno identificado (Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus 2 genotipo, Astrovirus).

Razones para un resultado negativo:

• sin infección por Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus 2 genotipo, Astrovirus.

¿Qué puede influir en el resultado?

Factores que distorsionan el resultado:

• almacenamiento a largo plazo del material antes de que ingrese al laboratorio;
• congelación del material o su tratamiento térmico;
• incumplimiento de las normas para la toma de biomaterial y su contaminación.

Notas importantes

• Descripción
• Capacitación
• Indicaciones
• interpretación de resultados

El estudio se utiliza para el diagnóstico diferencial de infecciones intestinales agudas.

• Shigella spp./Escherichia coli (Escherichia coli enteroinvasiva - EIEC)
• Salmonella spp.
• Campylobacter spp.
• Adenovirus F
• Rotavirus A
• Norovirus GII
• astrovirus

La mayoría de las infecciones intestinales agudas en niños (del 50 al 80% de todos los casos de enfermedades) se deben a infecciones virales, predominantemente causada por rotavirus del grupo A y norovirus genogrupo 2 (GII). En la estructura de las infecciones intestinales agudas de origen bacteriano, los patógenos más comunes en los niños son la salmonella. Junto con la salmonelosis (alrededor del 7% de las infecciones intestinales agudas), son relevantes la esquerichiosis (4,8% de las infecciones intestinales agudas), la campilobacteriosis (2,9% de los casos de enfermedades), la shigelosis (0,3% de los casos de infecciones intestinales agudas).

La diarrea bacteriana es más grave que la diarrea viral. curso clínico, ya que los mecanismos fisiopatológicos del daño mucoso están asociados con la penetración de microorganismos en las células epiteliales y la acción de las endotoxinas bacterianas. En infecciones intestinales agudas invasivas (bacterianas), el método bacteriológico es el "estándar de oro" del diagnóstico, sujeto a la regla clave: el biomaterial debe tomarse antes de prescribir la terapia antimicrobiana (consulte las pruebas Nos. 457, 458, 460, 461, 462 ).

Los estudios de genética molecular (incluido el método PCR), que identifican fragmentos específicos de ADN y ARN de patógenos en el biomaterial, están incluidos en los esquemas estándar para diagnosticar AEI y le permiten verificar de manera rápida y eficiente el complejo de patógenos virales y bacterianos de aguda infecciones intestinales Las pruebas antigénicas para la identificación de patógenos AII (ver pruebas No. 463, 481, 482, 483, 485, 486) también son métodos rápidos que permiten establecer un diagnóstico de una infección intestinal aguda bacteriana o viral en fechas tempranas enfermedad, incluido el tratamiento con antibióticos. Los métodos serológicos que permiten la detección de anticuerpos específicos contra patógenos son auxiliares en el diagnóstico de la AII más invasiva (véanse las pruebas Nos. 234, 235, 238, 239, 273, 280-290, 292, 293).

• diagnóstico diferencial Infecciones intestinales agudas.

La interpretación de los resultados del estudio contiene información para el médico tratante y no es un diagnóstico. La información de esta sección no debe utilizarse para el autodiagnóstico o el autotratamiento. El médico realiza un diagnóstico preciso, utilizando tanto los resultados esta encuesta, y Información necesaria de otras fuentes: anamnesis, resultados de otros exámenes, etc.

Sensibilidad analítica (heces):

• Shigella spp./Escherichia coli (EIEC) - 1x103 GE/ml
• Salmonella spp. – 1x10 3 GE/ml
• Campylobacter spp. – 1x10 3 GE/ml
• Adenovirus F - 1x10 4 GE/ml
• Rotavirus A - 1x10 4 GE/ml
• Norovirus GII - 1x10 3 GE/ml
• Astrovirus - 1x10 4 GE / ml

Formulario de presentación de resultados:

Prueba de calidad. El resultado se da en términos de "detectado" o "no detectado" para los patógenos especificados por separado, excepto para la prueba de Shigella spp./Escherichia coli (EIEC), en la que se detecta la presencia de ADN de estos patógenos en total.

interpretación de resultados

• infección causada por el patógeno correspondiente;
• transporte del agente infeccioso.

"No detectado":

• la ausencia de ADN (ARN) del patógeno en el material de prueba;
• el nivel de ADN (ARN) del patógeno en el material de prueba está por debajo del límite de detección.

Literatura

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El diagnóstico de laboratorio de la fiebre tifoidea incluye métodos generales de investigación clínica y reacciones específicas. Como resultado de un examen completo, el especialista podrá sacar una conclusión sobre la gravedad de la enfermedad, las propiedades del patógeno (incluida la sensibilidad a los antibióticos), el grado de peligro del paciente para los demás (su contagiosidad). Todos los estudios necesarios se realizan al inicio de la enfermedad (cuando el paciente ingresa al hospital) y antes del alta. Si es necesario, análisis de fiebre tifoidea repetido varias veces.

hay uno mas matiz importante: El diagnóstico diferencial de la fiebre tifoidea y la fiebre paratifoidea solo es posible sobre la base de un examen de laboratorio específico. Ni los detalles clínicos ni los métodos generales de diagnóstico clínico permiten distinguir de los patógenos la paratifoidea A, C o B. Esta información puede ser significativa en términos de posible infección de otros, así como la formación de inmunidad específica de tipo.

Características generales de la investigación

¿Dónde tomar la prueba para diagnosticar la fiebre tifoidea? Este problema no debe molestar al paciente, ya que los protocolos médicos modernos implican la hospitalización obligatoria de pacientes con un diagnóstico tan preliminar. En grande instituciones medicas(o dentro de la misma ciudad) existe un laboratorio multidisciplinario, cuyos empleados podrán realizar todos los estudios específicos e inespecíficos necesarios para el diagnóstico completo de fiebre tifoidea y fiebre paratifoidea.

Una respuesta universal a la pregunta, después de cuántos días el paciente sabrá diagnóstico preciso, no existe. Para estudios no específicos, solo se requiere un día, el resultado de reacciones específicas llegará solo durante 4-5 días o incluso más.

La identificación del agente causante de la fiebre tifoidea y la fiebre paratifoidea es la dirección principal de un examen completo no solo del paciente, sino también de los posibles portadores ( gente sana que liberan el patógeno e infectan a otros). Los resultados de dicho examen se ingresan en el libro sanitario (médico) de una persona (grupo especializado declarado) que trabaja en la industria alimentaria, en instituciones infantiles y algunas otras empresas.

Para varias pruebas de diagnóstico, se toman los siguientes fluidos biológicos del paciente (portador):

• sangre;
• masas fecales;
• orina;
• bilis.

El médico tratante determina la necesidad de tomar un entorno biológico particular del paciente. Por otro lado, debe actuar con la suficiente rapidez, ya que los antibióticos prescritos reducen la eficacia. diagnóstico microbiológico fiebre tifoidea: se deben tomar líquidos corporales antes de comenzar el tratamiento.

Métodos clínicos generales

Los procedimientos estándar, como un análisis clínico general de sangre y orina, en este caso realmente tienen valor diagnóstico, ya que los cambios identificados son muy característicos.

EN analisis generales Se detecta sangre en enfermedades tifoideas-paratifoideas:

• leucocitosis en los primeros 1-2 días, que se reemplaza por leucopenia;
• poco característico para infección bacteriana linfocitosis, trombocitopenia, aneosinofilia;
• en casos severos, se puede observar pancitopenia (depresión de la función de todos los brotes de sangre);
• la detección de eosinófilos durante el período de recuperación del paciente es un signo pronóstico favorable en el curso de la enfermedad.

En el análisis clínico general de la orina, se detectan cambios tradicionales (aumento de los niveles de leucocitos, eritrocitos), típicos de una intoxicación grave.

Al realizar un estudio clínico general de las heces (coprograma), se pueden detectar eritrocitos, lo que indica la presencia de un sangrado intestinal menor. Junto con el coprograma, se acostumbra prescribir otro estudio de sangre oculta en heces para excluir un error de diagnóstico y diagnosticar el sangrado de manera oportuna.

En el caso de las enfermedades tifoideas-paratifoideas, los parámetros bioquímicos se examinan solo para identificar disfunciones pronunciadas. órganos internos, por ejemplo, con el desarrollo de hepatitis específica o pielonefritis.

Métodos específicos

El diagnóstico microbiológico de la fiebre tifoidea es la base para el diagnóstico final y otras acciones antiepidémicas. Al examinar grupos especiales de la población (grupo declarado), una marca en un resultado negativo de un análisis de sangre para fiebre tifoidea para un libro sanitario es una admisión al lugar de trabajo. El análisis específico para la fiebre tifoidea incluye estudios bacteriológicos y serológicos.

método bacteriológico

Consiste en la toma de material biológico del paciente y posterior siembra en medios culturales(más a menudo - caldo de bilis). El estudio de las propiedades morfológicas, bioquímicas y muchas otras de un microorganismo nos permite identificarlo con un 100% de precisión. Además, la microbiología moderna prevé una etapa tan obligatoria como la sensibilidad a los antibióticos, sin la cual el proceso de una terapia antimicrobiana efectiva se ve obstaculizado significativamente.

Es mejor donar sangre para la fiebre tifoidea en la primera semana de enfermedad. Un análisis de sangre positivo para fiebre tifoidea, es decir, un hemocultivo positivo, es una confirmación absoluta del diagnóstico. Detección de salmonella tifoidea en orina y heces se puede observar en la misma medida en un enfermo y en un portador, es decir, se requieren otros estudios adicionales.

Método serológico

La base de muchas reacciones que implementan método serológico La investigación es una combinación de un antígeno conocido (tifoidea) y anticuerpos que se sintetizan en la sangre del paciente. El diagnóstico serológico de la fiebre tifoidea es la prueba de Vidal, la reacción hemaglutinación indirecta(RNGA), si es necesario - reacción con Vi - antígeno.

Reacción de Vidal- esta es una modificación de la reacción de aglutinación, el valor diagnóstico radica en el aumento del título de anticuerpos a medida que avanza la enfermedad. Esta reacción puede ser un falso positivo en otras salmonelosis, por lo que se requiere otro serodiagnóstico de fiebre tifoidea. Por ejemplo, RNGA con diferentes antígenos es más específico. Algunos laboratorios son RPGA- reacción de aglutinación pasiva de anticuerpos por antígenos conocidos.

Si se sospecha fiebre tifoidea, los diagnósticos específicos pueden confirmar o refutar el diagnóstico de esta enfermedad infecciosa y también posiblemente averiguar de dónde vino esta infección.