Izmet za crijevne infekcije koje su uključene. Kako se radi test na trbušni tifus?

Sveobuhvatna molekularna genetička studija koja vam omogućuje prepoznavanje genetskog materijala najvjerojatnijih uzročnika akutnih crijevnih infekcija u izmetu i utvrđivanje etiologije bolesti.

Za što se koristi ova analiza?

• Za diferencijalnu dijagnozu akutnih uzroka.

Kada je zakazana analiza?

• Sa simptomima akutne crijevne infekcije (proljev, groznica,).

ruski sinonimi

OKI, PCR (kal).

SinonimiEngleski

Probir za akutne crijevne infekcije; Skrining na bakterijski i virusni proljev, PCR, fekalni uzorci.

Način istraživanja

Lančana reakcija polimerazom u stvarnom vremenu.

Koji se biomaterijal može koristiti za istraživanje?

Kako se pravilno pripremiti za istraživanje?

• Studija se preporučuje provesti prije uzimanja antibiotika i drugih antibakterijskih kemoterapijskih lijekova.
• Izbjegavajte uzimanje laksativa rektalni supozitoriji, ulja, ograničiti unos lijekova koji utječu na motilitet crijeva (beladona, pilokarpin itd.) i boju fecesa (željezo, bizmut, barijev sulfat), unutar 72 sata prije skupljanja fecesa.

Opće informacije o studiju

Prema službenim statistikama, u Rusiji do 65-67% bolesti u ovoj skupini su akutne crijevne infekcije neodređene etiologije. Ako je uzročnik infekcije nepoznat, djelotvornost protuepidemijskih mjera je ograničena. Omjer učestalosti detekcije virusnih i bakterijskih uzročnika varira različite dobi: kod djece mlađe od 3 godine, virusni uzročnici čine 80-90% bolesti, bakterijski uzročnici čine 10-20%; među odraslim pacijentima, udio virusnih patogena smanjen je na 30%.

Shigellaspecies i Escherichiacoli su gram-negativni štapićasti mikroorganizmi iz obitelji Enterobacteriaceae. U rod Shigella spadaju patogene bakterije S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii i S. sonnei koje su uzročnici bolesti. Enteroinvazivne E. coli (EIEC) vrlo su slične Shigellama, sintetiziraju i izlučuju toksin sličan Shigellama, sposobne su prodrijeti u stanice crijevne sluznice i uništiti enterocite, što dovodi do stvaranja ulcerativnih defekata na crijevnoj sluznici. . Za značajan udio slučajeva "bakteriološki nepotvrđene dizenterije", osobito u djece, odgovorna je enteroinvazivna escherichiosis.

Bakterije roda Salmonella pripadaju obitelji Enterobacteriaceae. S. typhi i S. parathyphi su uzročnici trbušnog tifusa i. Postoje mnoge serovarijante vrste Salmonella koje mogu uzrokovati infekciju sličnu gastroenterokolitisu kod ljudi, kao i uzrokovati nozokomijalne infekcije. može se pojaviti u obliku akutne crijevne infekcije, teške generalizirane infekcije ili asimptomatskog nosioca. Konačna dijagnoza postavlja se tek nakon izolacije uzročnika ili otkrivanja njegove DNA.

Campylobacter je jedan od mikroorganizama koje je najteže kultivirati (što je potrebno tijekom analize). To je zbog njihove mikroaerofilnosti i mogućnosti suzbijanja njihovog rasta popratnom florom. Rod Campylobacter kombinira uzročnike AII (termofilne vrste) i saprofitne i oportunističke vrste, što se mora imati na umu pri identificiranju ovih mikroorganizama u kliničkom materijalu. Korištenjem kompleta temeljenih na PCR-u za određivanje termofilne skupine kampilobaktera ne samo da se izbjegava mukotrpan i skup bakteriološki rad, već se i jasno ograničava detekcija onih tipova kampilobaktera koji su etiološki povezani s akutnom crijevnom infekcijom (C. jejuni, C. coli, C. lari, C. upsaliensis).

Prema podacima iz inozemne literature, norovirus je najčešći uzročnik izbijanja AII nebakterijske etiologije. Ova značajka povezana je s niskom infektivnom dozom i visokom otpornošću na okoliš. PCR je "zlatni standard" u klinička dijagnostika norovirusne infekcije.

Unatoč nešto nižoj prevalenciji u odnosu na rota- i noroviruse, astrovirusi čine značajan sloj crijevnih infekcija, kod trećine bolesnika koji se javljaju s kolitisom. Najviše je rotavirusa skupine A zajednički uzrok sporadična AII u djece, a adenovirus F koji sadrži DNA (serotipovi 40 i 41) često uzrokuje izbijanje u male djece.

Za otkrivanje i diferencijalnu dijagnozu crijevnih infekcija koriste se kulturološke i molekularne genetske metode za proučavanje genetskog materijala uzročnika u fecesu i određivanje koncentracije specifičnih imunoglobulina u krvi. PCR ima prednost pred metodama kulture zbog brzo primanje rezultati, visoka specifičnost i osjetljivost studije. Ova analiza omogućuje identifikaciju patogena sa 100% točnosti crijevna bolest, a brza dijagnoza akutnih crijevnih infekcija pomaže u izbjegavanju nepotrebnih postupaka i kirurške intervencije, započeti liječenje na vrijeme i ograničiti žarište širenja infekcije.

Za što se koriste istraživanja?

• Uspostaviti etiološki faktor akutna crijevna infekcija;
• za diferencijalnu dijagnozu uzroka akutnog gastroenterokolitisa (upala probavnog trakta).

Kada je studija zakazana?

• Sa simptomima akutnog gastroenteritisa, vjerojatno infektivne etiologije (labave česte stolice, povraćanje, groznica, bolovi u trbuhu);
• s istodobnim ili uzastopnim razvojem akutnih crijevnih infekcija u više članova obitelji, u djece u dječja ustanova ili stacionarima;
• s sumnjom na razvoj nozokomijalne crijevne infekcije (s pogoršanjem simptoma enterokolitisa u bolesnika koji se liječi od akutnih crijevnih infekcija).

Što znače rezultati?

Referentne vrijednosti: negativan.

Razlozi za pozitivan rezultat:

• prisutnost DNA ili RNA uzročnika AII; etiologija ovisno o identificiranoj vrsti uzročnika (Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus 2 genotip, Astrovirus).

Razlozi negativnog rezultata:

• nema infekcije Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus 2 genotip, Astrovirus.

Što može utjecati na rezultat?

Čimbenici koji iskrivljuju rezultat:

• dugotrajno skladištenje materijala prije nego što uđe u laboratorij;
• smrzavanje materijala ili njegova toplinska obrada;
• nepoštivanje pravila za uzimanje biomaterijala i njegove kontaminacije.

Važne bilješke

• Opis
• Priprema
• Indikacije
• Interpretacija rezultata

Studija se koristi za diferencijalnu dijagnozu akutnih crijevnih infekcija.

• Shigella spp./Escherichia coli (Enteroinvazivna Escherichia coli - EIEC)
• Salmonella spp.
• Campylobacter spp.
• Adenovirus F
• Rotavirus A
• Norovirus GII
• Astrovirus

Većina akutnih crijevnih infekcija u djece (od 50 do 80% svih slučajeva bolesti) uzrokovana je virusne infekcije, dominantno uzrokovan rotavirusima skupine A i norovirusom genogrupe 2 (GII). U strukturi akutnih crijevnih infekcija bakterijskog podrijetla najčešći uzročnici u djece su salmonele. Uz salmonelozu (oko 7% akutnih crijevnih infekcija), relevantne su escherichioza (4,8% akutnih crijevnih infekcija), kampilobakterioza (2,9% slučajeva bolesti), šigeloza (0,3% slučajeva akutnih crijevnih infekcija).

Bakterijski proljev je teži od virusnog proljeva. klinički tijek, budući da su patofiziološki mehanizmi oštećenja sluznice povezani s prodorom mikroorganizama u epitelne stanice i djelovanjem bakterijskih endotoksina. Kod invazivnih (bakterijskih) akutnih crijevnih infekcija bakteriološka metoda je "zlatni standard" dijagnostike uz ključno pravilo: biomaterijal treba uzeti prije propisivanja antimikrobne terapije (vidi pretrage br. 457, 458, 460, 461, 462). ).

Molekularno genetske studije (uključujući PCR metodu), koje identificiraju specifične fragmente DNA i RNA patogena u biomaterijalu, uključene su u standardne sheme za dijagnosticiranje AEI i omogućuju vam brzu i učinkovitu provjeru kompleksa virusnih i bakterijskih patogena akutnog crijevne infekcije. Antigenski testovi za identifikaciju uzročnika AII (vidi testove br. 463, 481, 482, 483, 485, 486) također su ekspresne metode koje omogućuju postavljanje dijagnoze bakterijske ili virusne akutne crijevne infekcije na rani datumi bolesti, uključujući liječenje antibioticima. Serološke metode koje omogućuju otkrivanje specifičnih protutijela na uzročnike su pomoćne u dijagnostici većine invazivnih AII (vidi testove br. 234, 235, 238, 239, 273, 280-290, 292, 293).

• diferencijalna dijagnoza akutne crijevne infekcije.

Tumačenje rezultata studije sadrži informacije za liječnika i nije dijagnoza. Podaci u ovom odjeljku ne smiju se koristiti za samodijagnozu ili samoliječenje. Točnu dijagnozu postavlja liječnik koristeći oba rezultata ovu anketu, i potrebne informacije iz drugih izvora: anamneza, rezultati drugih pretraga i dr.

Analitička osjetljivost (izmet):

• Shigella spp./Escherichia coli (EIEC) - 1x103 GE/ml
• Salmonella spp. – 1x10 3 GE/ml
• Campylobacter spp. – 1x10 3 GE/ml
• Adenovirus F - 1x10 4 GE/ml
• Rotavirus A - 1x10 4 GE/ml
• Norovirus GII - 1x10 3 GE/ml
• Astrovirus - 1x10 4 GE / ml

Obrazac za prezentaciju rezultata:

Test kvalitete. Rezultat se daje u izrazu "otkriveno" ili "nije otkriveno" za navedene uzročnike posebno, osim za Shigella spp./Escherichia coli (EIEC) test, u kojem se prisutnost DNA ovih uzročnika dokazuje ukupno.

Interpretacija rezultata

• infekcija uzrokovana odgovarajućim patogenom;
• prijenos uzročnika infekcije.

"Nije otkriven":

• odsutnost DNA (RNA) patogena u ispitivanom materijalu;
• razina DNA (RNA) patogena u ispitnom materijalu je ispod granice detekcije.

Književnost

• Vovk E.I., Masharova A.A. Akutna crijevne infekcije u ordinaciji liječnika hitne pomoći medicinska pomoć. Ordinirajući liječnik. - M. 2002; 01-02: 58-62.
• zarazne bolesti kod djece. ur. D. Murray. - M.: ur. "Praksa". 2006:928.
• Usenko D.V., Ploskireva A.A., Gorelov A.V. Akutne crijevne infekcije u djece u praksi pedijatra: mogućnosti dijagnostike i terapije. Pitanja moderne pedijatrije. - M. 2014;13(3):12-20. http://www.spr-journal.ru/ojs/index.php/VSP/article/viewFile/340/682.
• Pawlowski S.W., Warren C.A., Guerrant R. Dijagnostika i liječenje akutne ili dugotrajne dijareje. gastroenterologija. 2009;136(6):1874-1886.

Laboratorijska dijagnoza trbušnog tifusa uključuje opće kliničke metode istraživanja i specifične reakcije. Kao rezultat sveobuhvatnog pregleda, stručnjak će moći donijeti zaključak o težini bolesti, svojstvima patogena (uključujući osjetljivost na antibiotike), stupnju opasnosti pacijenta za druge (njegova zaraznost). Sve potrebne studije provode se na početku bolesti (kada pacijent uđe u bolnicu) i prije otpusta. Ako je potrebno, analiza za trbušni tifus ponovljeno nekoliko puta.

Postoji još jedan važna nijansa: Diferencijalna dijagnoza trbušnog tifusa i paratifusa moguća je samo na temelju specifične laboratorijske pretrage. Niti klinički detalji niti opće kliničke dijagnostičke metode ne omogućuju razlikovanje paratifusa A, C ili B od uzročnika. Ovaj podatak može biti značajan u smislu moguće infekcije drugih, kao i formiranja samo tip-specifične imunosti.

Opće karakteristike istraživanja

Gdje uzeti test za dijagnosticiranje trbušnog tifusa? Ovo pitanje ne bi trebalo smetati pacijentu, budući da suvremeni medicinski protokoli podrazumijevaju obveznu hospitalizaciju pacijenata s takvom preliminarnom dijagnozom. U velikom medicinske ustanove(ili unutar istog grada) postoji multidisciplinarni laboratorij, čiji će djelatnici moći napraviti sve potrebne specifične i nespecifične studije za potpunu dijagnostiku trbušnog tifusa i paratifusa.

Univerzalni odgovor na pitanje, nakon koliko dana će pacijent znati točna dijagnoza, ne postoji. Za nespecifične studije potreban je samo jedan dan, rezultat specifičnih reakcija dolazi tek za 4-5 dana ili čak i više.

Identifikacija uzročnika trbušnog tifusa i paratifusa glavni je smjer sveobuhvatnog pregleda ne samo pacijenta, već i potencijalnih nositelja ( zdravi ljudi koji oslobađaju patogen i zaraze druge). Rezultati takvog pregleda upisuju se u sanitarnu (medicinsku) knjižicu osobe (deklarisana specijalizirana skupina) koja radi u prehrambenoj industriji, u dječjim ustanovama i nekim drugim poduzećima.

Za razne dijagnostičke pretrage od bolesnika (nosača) uzimaju se sljedeće biološke tekućine:

• krv;
• fekalne mase;
• urin;
• žuč.

Potrebu za uzimanjem određenog biološkog okruženja pacijenta određuje liječnik. S druge strane, morate djelovati dovoljno brzo, jer propisani antibiotici smanjuju učinkovitost mikrobiološku dijagnostiku tifus - prije početka liječenja treba uzeti tjelesne tekućine.

Opće kliničke metode

Standardni postupci, kao što je opća klinička analiza krvi i urina, u ovom slučaju stvarno imaju dijagnostičku vrijednost, jer su identificirane promjene vrlo karakteristične.

U opća analiza otkrivaju se krvi kod tifusno-paratifusnih bolesti:

• leukocitoza u prvih 1-2 dana, koja je zamijenjena leukopenijom;
• nekarakteristično za bakterijska infekcija limfocitoza, trombocitopenija, aneozinofilija;
• u teškim slučajevima može se uočiti pancitopenija (depresija funkcije svih izdanaka krvi);
• otkrivanje eozinofila tijekom razdoblja oporavka pacijenta je prognostički povoljan znak u tijeku bolesti.

U općoj kliničkoj analizi urina otkrivaju se tradicionalne promjene (povišene razine leukocita, eritrocita), tipične za tešku intoksikaciju.

Pri provođenju opće kliničke studije izmeta (koprogram) mogu se otkriti eritrociti, što ukazuje na prisutnost manjeg crijevnog krvarenja. Zajedno s koprogramom, uobičajeno je propisati još jednu studiju izmeta za okultnu krv kako bi se isključila dijagnostička pogreška i pravodobno dijagnosticirala krvarenje.

U slučaju tifusno-paratifusnih bolesti, biokemijski parametri se ispituju samo radi utvrđivanja izraženih disfunkcija. unutarnji organi, na primjer, s razvojem specifičnog hepatitisa ili pijelonefritisa.

Specifične metode

Mikrobiološka dijagnoza trbušnog tifusa osnova je za konačnu dijagnozu i daljnje protuepidemijske radnje. Pri pregledu posebnih skupina stanovništva (deklarisana skupina) oznaka o negativnom nalazu krvne slike na trbušni tifus za sanitarnu knjižicu je prijem na radno mjesto. Specifična analiza za trbušni tifus uključuje bakteriološke i serološke studije.

Bakteriološka metoda

Uključuje uzimanje biološkog materijala od pacijenta i naknadnu sjetvu na posebnim mediji kulture(najčešće - bujon žuči). Proučavanje morfoloških, biokemijskih i mnogih drugih svojstava mikroorganizma omogućuje nam da ga identificiramo sa 100% točnosti. Osim toga, moderna mikrobiologija predviđa tako obveznu fazu kao što je osjetljivost na antibiotike, bez koje je proces učinkovite antimikrobne terapije značajno otežan.

Bolje je donirati krv za tifusnu groznicu u prvom tjednu bolesti. Pozitivna krvna slika na trbušni tifus, odnosno pozitivna hemokultura apsolutna je potvrda dijagnoze. Detekcija tifusne salmonele u mokraći i izmet može se promatrati u istoj mjeri kod bolesne osobe i kliconoše, odnosno potrebne su druge dodatne studije.

Serološka metoda

Temelj mnogih reakcija koje provode serološka metoda istraživanje je kombinacija poznatog antigena (tifusa) i antitijela koja se sintetiziraju u krvi bolesnika. Serološka dijagnoza trbušnog tifusa je Vidal test, reakcija neizravna hemaglutinacija(RNGA), po potrebi - reakcija s Vi - antigenom.

Vidalova reakcija- ovo je modifikacija reakcije aglutinacije, dijagnostička vrijednost leži u porastu titra protutijela kako bolest napreduje. Ova reakcija može biti lažno pozitivna kod drugih salmoneloza, pa je potrebna još jedna serodijagnostika tifusa. Na primjer, RNGA s različitim antigenima je specifičnija. Neki laboratoriji jesu RPGA- reakcija pasivne aglutinacije protutijela poznatim antigenima.

Ako postoji sumnja na trbušni tifus, specifična dijagnostika može potvrditi ili opovrgnuti dijagnozu zarazna bolest a možda i saznati odakle je došla ova infekcija.