Los linfocitos T citotóxicos cd3 cd8 están aumentados. Trastornos de los linfocitos T. Linfopenia CD8. Indicaciones para el nombramiento de una prueba de laboratorio.
), el nivel de inmunocomplejos circulantes, las principales clases de inmunoglobulinas Sangre periférica, el énfasis está en el análisis avanzado de células NK (Natural killers - "natural killers"), así como en la evaluación de linfocitos T activados (CD3 + HLA-DR + CD45 +) y linfocitos citotóxicos activados (CD8 + HLA-DR + CD45 +) responsable de la inmunidad antiviral. El análisis de las poblaciones de células anteriores ayudará a comprender si el sistema inmunológico responde adecuadamente a una infección viral y si el paciente necesita terapia inmunoestimulante.
* Los resultados del estudio se emiten con la conclusión de un médico: un alergólogo-inmunólogo, doctor en ciencias médicas.
leucemias de células T
Cada inmunograma va acompañado de una opinión escrita de un inmunólogo.
Notas importantes
Para diagnosticar patologías, los resultados de este estudio deben compararse con datos clínicos e indicadores de otras Pruebas de laboratorio. También se debe tener en cuenta que la importancia clínica del estudio aumenta significativamente con la evaluación del estado inmunológico del paciente a lo largo del tiempo.
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La primera etapa del diagnóstico de laboratorio es una evaluación cuantitativa de las células sanguíneas periféricas y sus elementos morfológicos: conteo fórmula de leucocitos. En este análisis, se debe prestar atención no solo al número relativo, sino también al número absoluto de células sanguíneas.
Al determinar los indicadores normales de la fórmula sanguínea en valores relativos, el recálculo en valores absolutos puede revelar patología y viceversa.
El número de leucocitos y otras células sanguíneas depende de la tasa de liberación de células de la médula ósea y su entrada en los tejidos. El número de leucocitos en la sangre periférica por encima de 10109 células / l se define como leucocitosis, por debajo de 4 * 109 células / l, como leucopenia. Las principales causas de la leucocitosis son todo tipo de infecciones, estados inflamatorios, neoplasias malignas, traumatismos, leucemia, uremia, la acción de la adrenalina y las hormonas esteroides. La leucopenia ocurre con aplasia e hipoplasia de la médula ósea roja, hiperesplenismo, leucemia aguda, mielofibrosis, plasmocitomas, metástasis de neoplasias en la médula ósea, infecciones graves, colagenosis (síntoma adverso), bajo la influencia de fármacos.
Se conocen varias desviaciones de la fórmula de los leucocitos, que pueden indicar, en combinación con otros datos de laboratorio, acerca de varias condiciones patológicas.
La leucocitosis con desviación a la izquierda se puede observar con infecciones bacterianas(inespecífica y específica), intoxicación (envenenamiento monóxido de carbono, hongos, etc.), coma (uremia, diabético, hepático, etc.), después pérdida de sangre aguda, a tiempo crisis hemolítica. También aparece en primeras etapas período postoperatorio, después de grandes intervenciones quirurgicas, durante y después del parto, con neoplasias malignas, leucemia, enfermedad por radiación(en la fase temprana de una lesión por radiación masiva).
La leucocitosis con un desplazamiento a la derecha se puede observar en infecciones virales y bacterianas crónicas (tuberculosis, sífilis, brucelosis, etc.), deficiencia ácido fólico, enfermedad por radiación, sepsis.
La neutropenia generalmente se combina con leucopenia en infecciones graves y virales, leucopenia autoinmune y medicinal, anemia por deficiencia de Bi2, hipoxia, inanición, deficiencia de vitaminas.
La eosinofilia se observa en enfermedades alérgicas ( asma bronquial, alergias a medicamentos, etc.), invasión helmíntica, piel, enfermedades autoinmunes e infecciosas durante el desarrollo del cuadro clínico y en la etapa de recuperación, con neoplasias malignas, con linfogranulomatosis.
La eosinopenia ocurre cuando situaciones estresantes, infecciones agudas, intoxicación, shock, infarto de miocardio.
La basofilia ocurre durante el tratamiento con heparina, administración de suero, diabetes, mixedema, nefrosis, en el período premenstrual, con trombocitopenia autoinmune, leucemia mieloide crónica, mielofibrosis, eritremia.
La linfocitosis absoluta se observa en niños menores de 4 años como condición fisiológica. En adultos, se observa un aumento en el número de linfocitos en enfermedades infecciosas. etiología viral en la leucemia crónica.
La linfopenia se encuentra en la enfermedad por radiación, el SIDA, la leucemia mieloide aleucémica crónica.
Monocitopenia: en formas hipertóxicas graves de fiebre tifoidea y otras enfermedades infecciosas, y es uno de los signos de procesos de regeneración deteriorados.
Monocitosis: con reumatismo, especialmente durante el período de exacerbación, se puede observar brucelosis, sífilis, tuberculosis, mononucleosis infecciosa en recién nacidos.
La aparición de células plasmáticas en la sangre periférica indica la intensidad del proceso inmunitario, por ejemplo, en infecciones infantiles (sarampión, rubéola, paperas, Mononucleosis infecciosa), en adultos, con infecciones virales respiratorias agudas, influenza, enfermedad por radiación, leucemia, hepatitis.
Una evaluación más detallada de la composición celular puede ser investigación adicional y, sobre todo, utilizando los métodos de citometría de flujo láser. Esta es una tecnología para medir rápidamente varias características de las células o sus orgánulos. La suspensión celular, previamente marcada con anticuerpos monoclonales fluorescentes o tintes fluorescentes, se alimenta al elemento de flujo. Las células se suceden unas a otras, donde son atravesadas por un rayo láser en la celda de flujo, bajo cuya acción las células teñidas emiten fluorescencia. Luego, a través del sistema óptico, la radiación ingresa al dispositivo de grabación, donde se procesa más. La citometría de flujo se puede utilizar para determinar el tamaño celular, la relación núcleo-citoplasma, el grado de asimetría y la intensidad de la fluorescencia. Se permite teñir hasta diez marcas por celda. En el estudio, es aceptable una evaluación de las propiedades de varias decenas a varios millones de células.
El alcance de la citometría de flujo es muy diverso. Aparte de características morfológicas Las células que usan anticuerpos monoclonales pueden determinar de manera confiable la composición de la población y la subpoblación de linfocitos, identificar la etapa de diferenciación y activación celular, evaluar el nivel de actividad funcional de los linfocitos, determinar las citocinas intracelulares y secretadas, realizar estudios de fagocitosis, analizar ciclo celular, evaluar la apoptosis y la proliferación. Las principales poblaciones de linfocitos de sangre periférica de individuos sanos se presentan en la Tabla 3.2. Estos indicadores pueden considerarse normativos en estudios inmunológicos.
Cuadro 3.2
Intervalos de distribución de las poblaciones principal y pequeña de linfocitos en la sangre periférica de individuos prácticamente sanos ___________________ [Khaidukov S.V. et al., 2009] __________________
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Una disminución en el número absoluto de linfocitos T indica una falta de inmunidad celular (insuficiencia del enlace efector celular de la inmunidad). Ocurre con bastante frecuencia en diversas infecciones, procesos inflamatorios inespecíficos, procesos malignos
tumores naturales, en el postoperatorio, con un infarto, etc. Un aumento en el número de linfocitos T en la dinámica de la enfermedad es un signo clínicamente favorable. La finalización completa de la enfermedad suele ir acompañada de la normalización del número de linfocitos T.
Incrementar número absoluto Los linfocitos CD4+ indican estimulación del sistema inmunitario frente a cualquier antígeno y sirven como confirmación de síndromes hiperreactivos. Sin embargo, hay que tener en cuenta que su aumento en la mayoría de los casos no es más que una reacción fisiológica normal a un antígeno, que es lo que observamos en enfermedades infecciosas específicas e inespecíficas. La proliferación de linfocitos T CD4+ continúa 3-5 días después de la activación. Proporciona un aumento en el número de células en clones involucrados en la respuesta inmune: la expansión proliferativa de clones. Las células T se someten a 6-8 divisiones, lo que proporciona un aumento en su número de aproximadamente 100-200 veces. Entonces, si la cantidad inicial de células T en un clon se puede estimar en humanos en aproximadamente 2 ^ 10 (basado en la estimación de la cantidad total de células T auxiliares, en 7x10 y
el número posible de clones es 3x10), luego, después de la proliferación, su número puede exceder los 106. Esto asegura la eficiencia adecuada de la respuesta inmune, ya que la formación de T-helpers activos es necesaria para la implementación exitosa de casi todas sus ramas. Una disminución en el número de T-helpers indica un síndrome hiporreactivo con una violación del vínculo regulador de la inmunidad. Esto es especialmente evidente en la infección por VIH.
Se determina un aumento en el número de linfocitos T citotóxicos en casi todas las infecciones virales, bacterianas y protozoarias. El aumento relativo en el número de células CD8+ generalmente se debe a una disminución en el número de T auxiliares, aunque no siempre se observa este patrón. Esto se debe al hecho de que los linfocitos T citotóxicos sintetizan IFN-γ, que inhibe la proliferación de células T, y porque los linfocitos CD8+ se consideraban anteriormente como supresores de T. Una disminución en el número de linfocitos T citotóxicos confirma la insuficiencia del vínculo efector celular de la inmunidad, que es especialmente importante en el tratamiento de infecciones virales crónicas (hepatitis viral, herpes, etc.).
El número de linfocitos B en la sangre periférica se determina usando el marcador CD^, que está presente en todas las células B en la sangre periférica, pero está ausente en las células plasmáticas.
Desde el punto de vista del diagnóstico, los linfocitos NK tienen dos marcadores CD importantes: 16 y 56. Su número total en la sangre es: células CD16 + - 6-26%, células CD56 + - 7-31% (0.09-0.6x10 %). También se observa una disminución en el número de estas células, un signo patognomónico de inmunodeficiencia celular efectora, debido a la gravedad del curso de las infecciones oncológicas y virales, cuando se toman inmunosupresores. Un aumento en el número de células NK está asociado con la activación de la inmunidad antitrasplante, en algunos casos se observa en el asma bronquial, es decir. es un signo patognomónico de citotoxicidad mediada por células.
Hoy, el llamado índice regulador (de diferenciación), la proporción de linfocitos CD4+ y CD8+, pierde su significado clínico. Se cree que el valor de este índice por debajo de 1,0 corresponde a inmunodeficiencia, más de 2,5 - hiperactividad. Desde posiciones modernas, sería un error interpretar este indicador de esta manera en el momento actual. Más informativo para tales conclusiones es el número absoluto de subpoblaciones de linfocitos T y marcadores de activación.
La manifestación de la activación es la expresión en las células de varios marcadores de activación. Por lo tanto, en los linfocitos T después de la estimulación, CD69 aparece en la superficie ya después de 2-3 horas: el antígeno de activación más temprano, parcialmente movilizado desde los depósitos intracelulares y parcialmente expresado de novo. Su expresión dura poco más de un día. Poco después de CD69, aparece en la superficie celular otro marcador de activación temprana, CD25. Las siguientes manifestaciones de activación se observan un día después de la acción del estimulante, cuando se expresa la molécula receptora de la transferrina (CD71). En los días siguientes (3-6 días) se expresan las moléculas MHC-II, que se clasifican como marcadores tardíos de activación de células T, y luego las integrinas, denominadas muy tardíos antígenos de activación VLA (Very late activación antigens), y las quimiocinas son secretados. Estas manifestaciones tardías de activación celular se combinan con el proceso proliferativo.
El estado funcional de los linfocitos T se evidencia por el número de células que expresan receptores de IL-2 (linfocitos CD25+). Normalmente en su sangre número relativo es 13-24%. Con síndromes hiperreactivos, el número de estas células aumenta, con inmunodeficiencias disminuye. Un indicador de la hiperreactividad inmunitaria es también el número de linfocitos que portan dos receptores: CD3 y HLA-DR. Normalmente, no deberían ser más del 12%.
Actualmente se están escribiendo otros marcadores, ahora hay alrededor de 263 variedades. Esto es especialmente importante en oncohematología para aclarar el diagnóstico.
Además de determinar la composición cuantitativa de las células del sistema inmunológico, es muy importante dar una descripción cualitativa de su actividad funcional. Gracias a la citometría de flujo multicolor utilizada recientemente, la presencia de ciertos receptores se puede utilizar para evaluar la actividad funcional de las células. Desde un punto de vista clínico, los receptores más importantes son:
CD5 es una molécula de adhesión que regula la activación celular. Se determina en linfocitos T, timocitos, clon B1 de células B;
CD11b - se refiere a las integrinas más importantes para la migración celular, que determinan la actividad de fagocitosis, citotoxicidad celular, quimiotaxis y activación celular de efectores T, células NK, macrófagos y granulocitos;
CD16 - es un receptor para el fragmento Fc de IgG, media la fagocitosis y la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos, cuando se activa aumenta la citotoxicidad de las células NK, se estimula la secreción de interferón y factor de necrosis tumoral;
CD23 se expresa en células B activadas, macrófagos, células epiteliales tímicas, eosinófilos, plaquetas. Un indicador de la actividad de las células B.
CD25 - cadena a del receptor IL2. Expresado en varios tipos células de sangre periférica: CD4+-, CD8+-, linfocitos NK, células NKT, linfocitos B, monocitos. Marcador de activación temprana de linfocitos T. Un aumento en su número, así como en la población general de linfocitos CD25 positivos, puede indicar un proceso inflamatorio de cualquier naturaleza (infeccioso, autoinmune);
CD27 es un marcador adicional de linfocitos B2. Indica la transición de los linfocitos B de células vírgenes a células de memoria;
CD28 se expresa en la mayoría de los linfocitos T activados, células NK y células plasmáticas. Necesario como factor coestimulador para la inducción de la respuesta inmune (proliferación y activación de células);
CD38: ADP-ribosilhidrolasa cíclica, ubicada en la superficie de los linfocitos, proporciona adhesión, transmisión de señales, también es un marcador de activación celular (marcador metabólico). Disminuye con infección por VIH, leucemia, mieloma, tumores sólidos, diabetes tipo II;
CD50 es una molécula de adhesión intercelular (ICAM-3) y también es una poderosa molécula de señalización. Presente en todos los leucocitos, células endoteliales y dendríticas. Proporciona señales coestimuladoras para las células T y regula la adhesión celular al interactuar con las integrinas. Se ha demostrado una disminución del número de células CD50+ en enfermedades tumorales;
CD57 - se expresa en subpoblaciones de 15-20% de células mononucleares de sangre periférica, en 60% de células NK y T. Se determina un aumento en los indicadores en pacientes con cáncer, pacientes después del trasplante, en pacientes con VIH, así como con artritis reumatoide y síndrome de Felty. La disminución es patognomónica en la enfermedad de Lyme crónica;
Los linfocitos T son un subtipo numeroso de agranulocitos. Participa en la inmunidad celular y humoral, protegiendo al organismo de los efectos patógenos.
linfocitos T
¡Atención! El primer análisis en un análisis de sangre clínico general es el cálculo de la fórmula de leucocitos. EN analisis generales sangre, se evalúa el contenido relativo y absoluto de linfocitos en la sangre. Las desviaciones de los valores normales indican patología.
¿Qué son los linfocitos T y dónde se forman?
Los precursores de agranulocitos aparecen en la médula ósea. En el timo tiene lugar el proceso de maduración. Ciertas hormonas y tejidos en etapa final maduración afectan la diferenciación de los linfocitos. Cada tipo de célula T difiere estructural y funcionalmente entre sí. Los linfocitos se producen en la médula ósea y en pequeñas cantidades en el bazo y los ganglios linfáticos. Con trastornos en el trabajo de la médula ósea o leucemia de diversas etiologías, los ganglios linfáticos aumentan, que es el primer signo de condiciones patológicas.
Las células T se pueden distinguir de otros linfocitos por la presencia de un receptor especial en la membrana. La mayoría de los linfocitos T llevan en la membrana receptor celular formado por cadenas alfa y beta. Estos linfocitos se denominan células alfa-β-T. Forman parte del sistema inmunológico adquirido. Las células T gamma delta especializadas (un tipo menos común de linfocitos T en el cuerpo humano) tienen receptores de células T invariables con diversidad limitada.
Tipos de linfocitos T y sus funciones
Hay varios tipos de células T:
- Efectores.
- Ayudantes.
- citotóxico
- Regulador.
- asesinos
- gamma delta.
- Memoria.
¡Importante! La función principal de los linfocitos T es identificar y destruir patógeno o partículas extrañas.
Las células T auxiliares ayudan a otros leucocitos a procesos inmunológicos, en la transformación de los linfocitos B en células plasmáticas. Las células T auxiliares se conocen como linfocitos T CD4 porque tienen la glicoproteína CD4 en su membrana. Las células T auxiliares se activan cuando se unen a los antígenos moleculares del MHC de clase II que se encuentran en la superficie de las células presentadoras de antígenos. Una vez activados, los linfocitos T se dividen y liberan proteínas llamadas citocinas que regulan una respuesta inmunitaria activa. Las células pueden diferenciarse en uno de varios subtipos de linfocitos: TH1, TH2, TH3, TH17, TH9 o TFH. Los linfocitos T de esta especie pueden estar representados por el fenotipo CD3. Estas glicoproteínas (CD4 y CD3) ayudan a movilizar el sistema inmunológico y destruir el patógeno.
Los linfocitos T citotóxicos (CTL) destruyen las células cancerosas o infectadas por virus y están involucrados en el rechazo de trasplantes. Conocidas como células T CD8 porque tienen la glicoproteína CD8 en su membrana. Los objetivos se reconocen al unirse a moléculas peptídicas de MHC de clase I que están presentes en la membrana de la célula germinal.
Los linfocitos T reguladores juegan un papel clave en el mantenimiento de la tolerancia inmunológica. Su tarea principal es apagar respuesta inmune en la destrucción de un microorganismo patógeno. Esta función es realizada conjuntamente por T-killers y T-helpers.
Valores normales de linfocitos T en un análisis de sangre
Los recuentos normales de linfocitos varían según los grupos de edad. Asociado a las características individuales del sistema inmunológico. Volumen timo, en el que se encuentra la mayor parte de los agranulocitos, disminuye en el proceso de envejecimiento. Hasta los 6 años predominan en el torrente sanguíneo los linfocitos y a partir de los 6 los neutrófilos.
El porcentaje del número de linfocitos T en la sangre en diferentes grupos de edad:
- En los recién nacidos, el indicador es del 14 al 36% del número total de leucocitos.
- En los lactantes, varía entre el 41-78%.
- En niños de 12 meses a 15 años, disminuye gradualmente al 23-50%.
- En adultos, varía en el rango de 18-36%.
El análisis del número de linfocitos T es un caso especial de un análisis de sangre clínico general. Este estudio le permite determinar el contenido relativo y absoluto de linfocitos en el torrente sanguíneo. (inmunograma) para detectar la concentración de linfocitos. El inmunograma muestra los indicadores de células B y T. Se considera que la norma de los linfocitos T es del 48-68% y de las células B: del 4-18%. La proporción de T-helpers y T-killers normalmente no debe exceder de 2,0.
Análisis inmunológico de sangre (inmunograma) Indicaciones para un inmunograma.
Los médicos prescriben un inmunograma para estudiar el estado del sistema inmunitario. Ante todo esta encuesta la sangre es necesaria para los pacientes con infección por VIH u otras enfermedades infecciosas.
Enfermedades comunes en las que está indicado el paso de un estudio inmunológico:
- Enfermedades del tracto gastrointestinal.
- Enfermedades infecciosas persistentes o crónicas.
- Reacciones alérgicas de origen desconocido.
- Anemia de diversas etiologías (deficiencia de hierro, hemolítica).
- Enfermedades hepáticas crónicas de naturaleza viral o idiopática (hepatitis, cirrosis).
- Complicaciones postoperatorias.
- Sospecha de cáncer.
- Procesos inflamatorios severos que duran varias semanas.
- Evaluación de la eficacia de fármacos inmunoestimulantes.
- Sospecha de enfermedades autoinmunes (artritis reumatoide, miastenia grave).
Dependiendo del médico tratante, puede haber otras indicaciones para un examen inmunológico.
Interpretación de los resultados de las pruebas
El contenido total de linfocitos en la sangre.
Un aumento excesivo del nivel de linfocitos (células T CD3+) en la sangre puede indicar un proceso infeccioso o inflamatorio. Esta condición se observa cuando leucemia crónica o infecciones bacterianas. Una disminución en el número absoluto de células T indica una deficiencia en la inmunidad efectora celular. Se observa una cantidad reducida de linfocitos T con neoplasias malignas, un ataque cardíaco, el uso de medicamentos citotóxicos o lesiones de diversas etiologías.
Células B
Se observan niveles elevados de linfocitos B (células T CD19+) en enfermedades autoinmunes, enfermedades del hígado, asma bronquial, infecciones fúngicas o bacterianas. Leucemia linfocítica crónica puede causar alto contenido Linfocitos B en el torrente sanguíneo. Los niveles reducidos de linfocitos B aparecen con neoplasias benignas, agammaglobulinemia o después de la extirpación del bazo.
T-ayudantes
Si aumentan los indicadores del contenido absoluto y relativo de células T con el fenotipo CD3 + CD4 (T-helpers), esto indica la presencia de enfermedades autoinmunes, reacciones alérgicas o enfermedades infecciosas. Si los niveles de células T en la sangre caen excesivamente, esto es un signo de VIH, neumonía, neoplasias malignas o leucemia.
CTL
Asesinos naturales (N)
Una disminución en el número total de asesinos naturales con el fenotipo CD16 conduce al desarrollo de enfermedades oncológicas, virales y autoinmunes. Un aumento conduce al rechazo del injerto ya complicaciones de diversas etiologías.
¡Consejo! Los datos anteriores se proporcionan únicamente con fines informativos. Solo un especialista calificado puede realizar el análisis de indicadores. Se necesitan exámenes adicionales para confirmar o descartar el diagnóstico. No realice un autodiagnóstico o tratamiento; busque el consejo de su médico.
Más:
Razones para el aumento y disminución de linfocitos en la sangre, normas generalmente aceptadas.
inmunoglobulinas (al comienzo de la respuesta inmune, las células B sintetizan IgM, luego cambian a la producción de IgG, IgE, IgA).YouTube enciclopédico
1 / 5
✪ Linfocitos B y linfocitos T de poblaciones CD4+ y CD8+
✪ Linfocitos T citotóxicos
✪ Linfocitos T
✪ Linfocitos
✪ Linfocitos B (células B)
subtítulos
Ya he hablado de las principales células del sistema inmunitario específico, y ahora resumiremos una vez más lo que hemos aprendido. Comencemos con el linfocito B, que siempre dibujo en azul. Aquí está frente a ti. Las inmunoglobulinas de membrana están presentes en la superficie de los linfocitos B, y cada linfocito tiene su propia variante del dominio variable. Repito: los linfocitos B tienen inmunoglobulinas de membrana en la superficie, y cada linfocito tiene su propia versión del dominio variable. Dibujaré los dominios variables en rosa. Otro linfocito B tendrá diferentes dominios variables. Por lo tanto, pueden responder a una variedad de antígenos que han ingresado al cuerpo. En este caso, los linfocitos B se activan. ¿Qué se necesita para esto y qué sucede en este caso? Hablemos de lo que sucede cuando se activan los linfocitos B. ¿Qué necesitas para iniciar la activación? Esto requiere que el patógeno se una a la inmunoglobulina de membrana. Escribimos que el patógeno se une. El patógeno se une a la inmunoglobulina de membrana. Pero esto no es suficiente. Normalmente, un linfocito B necesita estimulación de un linfocito T. Entonces escribimos: estimulación por un linfocito T. ¿En qué situación es necesaria tal estimulación? El linfocito B es una célula presentadora de antígenos. Absorbe el antígeno, lo escinde y lo muestra junto con el MHC de clase 2. También lo dibujaremos ahora. Este es el MHC de clase 2. Los fragmentos de antígeno se unen a él. Este complejo se une a un auxiliar T activado, que tiene un receptor con un dominio variable específico para ese antígeno en particular. Sí, el receptor resultó estar torcido, pero la esencia es clara, al menos eso espero. Después de la activación, sigue la diferenciación: la célula se divide y sus descendientes pueden convertirse en células efectoras. Esto es cierto tanto para los linfocitos T como para los B. Una vez activado, el linfocito produce células efectoras y de memoria. Las celdas de memoria se almacenan durante mucho tiempo y, como resultado de la división, se obtienen muchas de ellas. Cuando el mismo patógeno vuelve a entrar, es más probable que tropiece con la célula de memoria, lo que desencadena una respuesta inmunitaria rápida. Los linfocitos B efectores son fábricas para la producción de inmunoglobulinas. Entonces, los linfocitos B efectores producen inmunoglobulina. La lógica es esta: dado que el anticuerpo se acerca al antígeno que ha ingresado al cuerpo, se debe sintetizar más. Se aprovecha toda la capacidad de producción de la célula para sintetizar anticuerpos. Te diré un dato que me sugirió mi esposa. Escuchando cómo grabé el último video. Ella es especialista en hematología y entiende de inmunología, así que confío en ella en esto: es una experta en esta materia. En el último video, afirmé imprudentemente que los anticuerpos son producidos por linfocitos B efectores activados. Así es realmente: los anticuerpos son producidos exclusivamente por los linfocitos B. Sin embargo, las células secretoras de anticuerpos tienen su propio nombre. Estos linfocitos B efectores se conocen comúnmente como células plasmáticas. Escribiré el término. En el curso de la diferenciación, el nombre cambia. Este es el nombre del linfocito B, que comenzó a secretar anticuerpos. A partir de entonces, se denomina exclusivamente célula plasmática. Entonces, cuando se le pregunte qué células producen anticuerpos, no responda que son linfocitos B. La respuesta correcta es: células plasmáticas. Este es un término común usado en inmunología así como en reumatología. Disculpe, ¿dije que mi esposa es hematóloga? No, ella es reumatóloga. A veces me confundo con esto. Entonces, la esencia de los linfocitos B es la producción de anticuerpos que se unirán a los antígenos de virus o bacterias y los harán visibles a los macrófagos y otros fagocitos. Pero eso es todo sobre ellos, ahora pasemos a los linfocitos T. Les contaré lo que no estaba en los videos anteriores. Entonces, hay dos tipos de linfocitos T. Ya sabes acerca de los linfocitos T auxiliares y citotóxicos, pero hay otra clasificación de linfocitos, y te la contaré. Así que hay dos variedades. Ambos tienen un receptor de células T. Lo dibujaré así. receptor de células T. Además, hay una serie de otras proteínas en sus membranas. Algunos linfocitos T tienen una proteína de membrana llamada CD4. CD4. Otros linfocitos T tienen otra proteína: esta es CD8. Lo firmaremos también. CD8. El linfocito de la derecha se llama linfocito T CD8 positivo. Tiene CD8 en su membrana. Y aquí hay un linfocito T CD4 positivo. Aquí hay dos variedades. Se dividen según estas proteínas. La proteína CD4 es un receptor que tiene afinidad por las proteínas MHC de clase 2. La mayoría de las células positivas para CD4 son ayudantes T. En la mayoría de los casos, si se mencionan las células CD4 positivas en una conversación, entonces por costumbre se refieren precisamente a los linfocitos T auxiliares. Suelen hablar de ellos. Quizás lo firme - T-helper. El receptor CD8 tiene afinidad por el MHC clase 1. Lo indicamos en la figura. En las células cancerosas, el MHC de clase 1 en la membrana se asocia con antígenos cancerosos. Por lo tanto, CD8 es característico de los linfocitos citotóxicos. CD8 es característico de los linfocitos citotóxicos. Por lo general, antes de que se active la célula, se le llama CD4 o CD8 positivo, y la función del linfocito se dice después de la activación. Ya después. Estas son características terminológicas. Espero que entiendas la esencia. Ahora recordemos qué hace este linfocito. Se une a las proteínas MHC que se encuentran en la membrana junto con los antígenos. Aquí está el MHC de clase 1. Como dije en el último video, cada célula con núcleo lo tiene. Digamos que algo malo pasó en la celda. Algo malo, tal vez sea un virus. Tal vez cáncer. La célula afectada debe morir, de lo contrario copiará el virus o se multiplicará si es un tumor. Entonces, los linfocitos T CD8 positivos matan las células afectadas por un virus o una oncología. Matan las células afectadas que de otro modo podrían amenazar a todo el cuerpo como un todo. Los T-helpers son un asunto completamente diferente. Tomemos una célula dendrítica, una célula presentadora de antígenos. Ella tiene MHC clase 2, a la que se conectan fragmentos del antígeno digerido. Activa los linfocitos T auxiliares, que se dividen y diferencian en células efectoras y de memoria. El linfocito T efector tiene varias funciones. Los linfocitos T auxiliares activan los linfocitos B y liberan citoquinas. Libera citocinas. Un linfocito activado libera muchas sustancias que sirven de señal a otras células, como otros linfocitos, mientras da la alarma. Algunas de estas citocinas ayudan a los linfocitos citotóxicos en su activación. Las citoquinas dan la alarma y se toman CD8 positivos, es decir, linfocitos T citotóxicos, linfocitos efectores, para matar las células. En cuanto a las células de memoria, se trata de copias de los linfocitos originales que se almacenan de forma permanente en este lugar en caso de que se repita la amenaza, con el fin de dar una respuesta más rápida. Espero no haberte confundido demasiado con nuevos términos, pero era necesario. Y ahora sabes que los anticuerpos no son sintetizados por los linfocitos B, no por ellos, sino por células que tienen su propio nombre. Estas son células plasmáticas o plasmocitos.
Tipos de linfocitos T
Linfocitos T que proporcionan la regulación central de la respuesta inmune.
Diferenciación en el timo
Todas las células T se originan a partir de células madre hematopoyéticas de la médula ósea roja que migran al timo y se diferencian en células inmaduras. timocitos. El timo crea el microambiente necesario para el desarrollo de un repertorio de células T completamente funcional que es auto tolerante y limitado por MHC.
La diferenciación de los timocitos se divide en etapas diferentes dependiendo de la expresión de varios marcadores de superficie (antígenos). En una etapa muy temprana, los timocitos no expresan los correceptores CD4 y CD8 y, por lo tanto, se clasifican como doble negativo (Double Negative (DN)) (CD4-CD8-). En la siguiente etapa, los timocitos expresan ambos correceptores y se denominan doble positivo (Eng. Double Positive (DP)) (CD4+CD8+). Finalmente, en la etapa final, se seleccionan células que expresan solo uno de los co-receptores (ing. Single Positive (SP)): ya sea (CD4+) o (CD8+).
La etapa inicial se puede dividir en varias subetapas. Entonces, en la subetapa DN1 (English Double Negative 1 ), los timocitos tienen la siguiente combinación de marcadores: CD44 + CD25 -CD117 +. Las células con esta combinación de marcadores también se denominan progenitores linfoides tempranos. Progenitores linfoides tempranos (ELP)). Al progresar en su diferenciación, las ELP se dividen activamente y finalmente pierden la capacidad de transformarse en otros tipos de células (por ejemplo, linfocitos B o células mieloides). Pasando a la subetapa DN2 (ing. Double Negative 2 ), los timocitos expresan CD44 + CD25 + CD117 + y se convierten en progenitores tempranos de células T (ing. Progenitores tempranos de células T (ETP)). Durante la subetapa DN3 (ing. Double Negative 3 ), las células ETP tienen una combinación de CD44-CD25 + y entran en el proceso β-selección.
selección β
genes receptor de células T consisten en segmentos repetidos pertenecientes a tres clases: V (ing. variable), D (ing. diversidad) y J (ing. unión). Durante la recombinación somática, los segmentos de genes, uno de cada clase, se unen entre sí (recombinación V(D)J). La combinación aleatoria de secuencias del segmento V(D)J da como resultado secuencias de dominio variable únicas para cada una de las cadenas receptoras. La naturaleza aleatoria de la formación de secuencias de dominio variable permite generar células T capaces de reconocer un gran número de diferentes antígenos y, como resultado, brindan una protección más eficaz contra los patógenos que evolucionan rápidamente. Sin embargo, este mismo mecanismo a menudo conduce a la formación de subunidades no funcionales del receptor de células T. Los genes que codifican la subunidad β del receptor son los primeros en sufrir recombinación en las células DN3. Para excluir la posibilidad de la formación de un péptido no funcional, la subunidad β forma un complejo con la subunidad α invariable del receptor de células pre-T, formando el llamado. receptor de células pre-T (pre-TCR). Las células incapaces de formar pre-TCR funcional mueren por apoptosis. Los timocitos que han superado con éxito la selección β pasan al subestadio DN4 (CD44 -CD25 -) y se someten al proceso selección positiva.
selección positiva
Las células que expresan pre-TCR en su superficie aún no son inmunocompetentes, ya que no son capaces de unirse a moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad. El reconocimiento de moléculas MHC por el receptor de células T requiere la presencia de correceptores CD4 y CD8 en la superficie de los timocitos. La formación de un complejo entre el pre-TCR y el correceptor CD3 conduce a la inhibición de los reordenamientos de los genes de la subunidad β y, al mismo tiempo, provoca la activación de la expresión de los genes CD4 y CD8. Así, los timocitos se vuelven doblemente positivos (DP) (CD4+CD8+). Los timocitos DP migran activamente a corteza timo, donde interactúan con células epiteliales corticales que expresan proteínas de ambas clases de MHC (MHC-I y MHC-II). Las células que son incapaces de interactuar con las proteínas MHC del epitelio cortical sufren apoptosis, mientras que las células que llevan a cabo dicha interacción con éxito comienzan a dividirse activamente.
selección negativa
Los timocitos que han sufrido selección positiva comienzan a migrar al borde córtico-medular del timo. Una vez en la médula, los timocitos interactúan con los propios antígenos del cuerpo, presentados en combinación con las proteínas MHC en las células epiteliales del timo medular (mTEC). Los timocitos que interactúan activamente con sus propios antígenos sufren apoptosis. selección negativa previene la aparición de células T autoactivadoras capaces de causar clones de enfermedades autoinmunes. Algunas de las células de este clon se convierten en linfocitos T efectores, que realizan funciones propias de este tipo de linfocitos (por ejemplo, secretan citocinas en el caso de los T-helper o lisan las células afectadas en el caso de los T-killers). Otra parte de las células activadas se transforma en Memoria de las células T. Las células de memoria permanecen en forma inactiva después del contacto inicial con un antígeno hasta que se produce una interacción repetida con el mismo antígeno. Por lo tanto, las células T de memoria almacenan información sobre los antígenos que actuaron previamente y brindan una respuesta inmune secundaria que se lleva a cabo en un tiempo más corto que la primaria.
La interacción del receptor de células T y los correceptores (CD4, CD8) con el complejo principal de histocompatibilidad es importante para la activación exitosa de las células T vírgenes, pero no es suficiente por sí sola para la diferenciación en células efectoras. Para la posterior proliferación de células activadas, la interacción de los llamados. moléculas coestimuladoras. Para los ayudantes T, estas moléculas son el receptor CD28 en la superficie de la célula T y la inmunoglobulina B7 en la superficie de la célula presentadora de antígeno.
La tarea principal de los linfocitos T es el reconocimiento de antígenos propios extraños o alterados como parte de un complejo con moléculas MHC. Si en la superficie de sus células se presentan moléculas extrañas o alteradas, el linfocito T inicia su destrucción.
A diferencia de los linfocitos B, los linfocitos T no producen formas solubles de moléculas de reconocimiento de antígenos. Además, la mayoría de los linfocitos T son incapaces de reconocer y unirse a antígenos solubles.
Para que un linfocito T "dirija su atención a un antígeno", otras células deben "pasar" de alguna manera el antígeno a través de sí mismo y exponerlo en su membrana en combinación con MHC-I o MHC-II. Este es el fenómeno de la presentación del antígeno al linfocito T. El reconocimiento de tal complejo por parte de un linfocito T es un doble reconocimiento o restricción de linfocitos T por parte del MHC.
RECEPTOR DE LINFOCITOS T QUE RECONOCE ANTÍGENOS
Los receptores de reconocimiento de antígenos de las células T - TCR consisten en cadenas que pertenecen a la superfamilia de las inmunoglobulinas (v. fig. 5-1). El sitio de reconocimiento de antígeno del TCR que sobresale por encima de la superficie celular es un heterodímero, es decir, consta de dos cadenas polipeptídicas diferentes. Se conocen dos variantes de TCR, denominadas αβTCR y γδTCR. Estas variantes difieren en la composición de las cadenas polipeptídicas del sitio de reconocimiento del antígeno. Cada linfocito T expresa solo 1 variante del receptor. Las células αβT se descubrieron antes y se estudiaron con más detalle que los linfocitos γδT. A este respecto, la estructura del receptor de reconocimiento de antígeno de los linfocitos T es más conveniente para describir utilizando el ejemplo de αβTCR. El complejo TCR ubicado en la transmembrana consta de 8 polipéptidos
Arroz. 6-1. Diagrama del receptor de células T y moléculas relacionadas
(un heterodímero de las cadenas α y β del propio TCR, dos cadenas ζ auxiliares, así como un heterodímero de las cadenas ε/δ y ε/γ de la molécula CD3) (fig. 6-1).
. Cadenas transmembranaα y β TCR. Estas son 2 cadenas polipeptídicas de aproximadamente el mismo tamaño:α (peso molecular 40-60 kDa, glicoproteína ácida) yβ (peso molecular 40-50 kDa, glicoproteína neutra o básica). Cada una de estas cadenas contiene 2 dominios glicosilados en la parte extracelular del receptor, una parte transmembrana hidrófoba (cargada positivamente debido a los residuos de lisina y arginina) y una región citoplasmática corta (de 5 a 12 residuos de aminoácidos). Las partes extracelulares de ambas cadenas están conectadas por un solo enlace disulfuro.
- Región V. Los dominios extracelulares externos (distales) de ambas cadenas tienen una composición de aminoácidos variable. Son homólogos a la región V de las moléculas de inmunoglobulina y constituyen la región V del TCR. Son las regiones V de las cadenas α y β las que se unen al complejo MHC-péptido.
-región C. Los dominios proximales de ambas cadenas son homólogos a las regiones constantes de las inmunoglobulinas; estas son las regiones C del TCR.
Una región citoplásmica corta (cadenas α y β) no puede garantizar de forma independiente la transmisión de señales al interior de la célula. Para ello sirven 6 cadenas polipeptídicas adicionales: γ, δ, 2ε y 2ζ.
.complejo CD3. cadenasγ, δ, ε forman heterodímeros entre sí.γε y δε (denominados colectivamente como el complejo CD3). Este complejo es necesario para la expresión.α- y cadenas β, su estabilización y transmisión de señales al interior de la célula. Este complejo consta de una transmembrana extracelular (con carga negativa y, por lo tanto, asociada electrostáticamente con regiones transmembrana)α- y cadenas β) y partes citoplasmáticas. Es importante no confundir las cadenas del complejo CD3 conγ Cadenas δ del dímero TCR.
.ζ -Cadenas conectados entre sí por un puente disulfuro. La mayoría de de estas cadenas se encuentra en el citoplasma. Las cadenas ζ conducen la señal dentro de la célula.
.secuencias del ITAM. Regiones citoplasmáticas de cadenas polipeptídicasγ, δ, ε y ζ contienen 10 secuencias ITAM (1 secuencia en cadaγ-, ε- y cadenas δ y 3 - en cada cadena ζ), interactuando con Fyn - tirosina quinasa citosólica, cuya activación inicia el inicio de reacciones bioquímicas para conducir la señal (ver Fig. 6-1).
La unión al antígeno implica fuerzas iónicas, de hidrógeno, de van der Waals e hidrofóbicas; la conformación del receptor en este caso cambia significativamente. Teóricamente, cada TCR es capaz de unirse a unos 10 5 antígenos diferentes, no sólo relacionados en estructura (reacción cruzada), sino también no homólogos en estructura. Sin embargo, en realidad, la poliespecificidad de TCR se limita al reconocimiento de solo unos pocos péptidos antigénicos estructuralmente similares. La base estructural de este fenómeno es la característica del reconocimiento TCR simultáneo del complejo MHC-péptido.
Moléculas correceptoras CD4 y CD8
Además del propio TCR, cada linfocito T maduro expresa una de las denominadas moléculas correceptoras, CD4 o CD8, que también interactúan con las moléculas MHC en las APC o células diana. Cada uno de ellos tiene una región citoplasmática asociada
con tirosina quinasa Lck, y probablemente contribuye a la transmisión de señales a la célula durante el reconocimiento del antígeno.
.CD4(dominio β2) de la molécula MHC-II (pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas, véase la fig. 5-1, b). CD4 tiene un peso molecular de 55 kDa y 4 dominios en la porción extracelular. Cuando se activa un linfocito T, una molécula de TCR es "servida" por 2 moléculas de CD4: probablemente, se produce la dimerización de las moléculas de CD4.
.CD8 asociado con la parte invariante(dominio α3) de la molécula MHC-I (pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas, véase la Fig. 5-1, a). CD8 - heterodímero de cadenaα y β, unidos por un enlace disulfuro. En algunos casos, se encuentra un homodímero de cadena α de dos cadenas que también puede interactuar con MHC-I. En la parte extracelular, cada una de las cadenas tiene un dominio de tipo inmunoglobulina.
Genes del receptor de células T
genes Las cadenas α, β, γ y δ (fig. 6-2, véase también la fig. 5-4) son homólogas a los genes de las inmunoglobulinas y experimentan una recombinación del ADN durante la diferenciación de los linfocitos T, lo que teóricamente asegura la generación de aproximadamente 10 16 -10 18 variantes de receptores de unión a antígeno (en realidad, esta diversidad está limitada por el número de linfocitos en el cuerpo a 109).
.Los genes de la cadena α tienen ~54 segmentos V, 61 segmentos J y 1 segmento C.
.Los genes de la cadena β contienen ~65 segmentos V, 2 segmentos D, 13 segmentos J y 2 segmentos C.
.genes de la cadena δ. Entre los segmentos V y J de la cadena α se encuentran los genes de los segmentos D-(3), J-(4) y C-(1) de la cadena δγ δTCR. Los segmentos V de la cadena δ están "intercalados" entre los segmentos V de la cadena α.
.genes de la cadena γ γ Los δTCR tienen 2 segmentos C, 3 segmentos J antes del primer segmento C y 2 segmentos J antes del segundo segmento C, 15 segmentos V.
reordenamiento de genes
.La recombinación del ADN ocurre cuando los segmentos V, D y J se combinan y es catalizada por el mismo complejo de recombinasas que durante la diferenciación de los linfocitos B.
.Después del reordenamiento de VJ en los genes de la cadena α y VDJ en los genes de la cadena β, así como después de la adición de nucleótidos N y P no codificados al ADN
Arroz. 6-2. Genes de las cadenas α y β del receptor de reconocimiento de antígeno de los linfocitos T humanos
Se transcribe el ARN. La asociación con el segmento C y la eliminación de segmentos J adicionales (no utilizados) se produce durante el empalme de la transcripción primaria.
.Los genes de la cadena α pueden reorganizarse repetidamente cuando los genes de la cadena β ya están reorganizados y expresados correctamente. Es por eso que existe alguna posibilidad de que una celda pueda llevar más de una variante de TCR.
.Los genes TCR no sufren hipermutagénesis somática.
TRANSMISIÓN DE UNA SEÑAL DE LOS RECEPTORES DE RECONOCIMIENTO DEL ANTÍGENO DE LOS LINFOCITOS
TCR y BCR tienen varios patrones comunes de registro y transmisión de señales de activación hacia la célula (v. fig. 5-11).
. Agrupación de receptores. Para activar un linfocito, es necesaria la agrupación de receptores y correceptores que reconocen antígenos, es decir, “reticulación” de varios receptores con un antígeno.
. Tirosina quinasas. Los procesos de fosforilación/desfosforilación de proteínas en el residuo de tirosina bajo la acción de tirosina quinasas y tirosina fosfatasas juegan un papel importante en la transmisión de señales.
lo que conduce a la activación o inactivación de estas proteínas. Estos procesos son fácilmente reversibles y "convenientes" para respuestas celulares rápidas y flexibles a señales externas.
. Src quinasas. Las secuencias ITAM ricas en tirosina de las regiones citoplasmáticas de los inmunorreceptores se fosforilan bajo la acción de tirosina quinasas no receptoras (citoplasmáticas) de la familia Src (Fyn, Blk, Lyn en linfocitos B, Lck y Fyn en linfocitos T).
. ZAP-70 quinasas(en linfocitos T) o Sik(en los linfocitos B), uniéndose a secuencias ITAM fosforiladas, se activan y comienzan a fosforilar proteínas adaptadoras: LAT (Enlazador para Activación de Células T)(cinasa ZAP-70), SLP-76 (cinasa ZAP-70) o SLP-65 (cinasa Syk).
. Las proteínas adaptadoras son reclutadas fosfoinositida-3-quinasa(PI3K). Esta quinasa, a su vez, activa la serina/treonina proteína quinasa Akt, provocando un aumento en la biosíntesis de proteínas, lo que promueve un crecimiento celular acelerado.
. Fosfolipasa Cγ (ver Fig. 4-8). Las quinasas de la familia Tec (Btk - en linfocitos B, Itk - en linfocitos T) se unen a proteínas adaptadoras y activan la fosfolipasa Cγ (PLCγ ).
PLCγ escinde el difosfato de fosfatidilinositol de la membrana celular (PIP 2) en inositol-1,4,5-trifosfato (IP 3) y diacilglicerol
(TROZO DE CUERO).
El DAG permanece en la membrana y activa la proteína quinasa C (PKC), una serina/treonina quinasa que activa el factor de transcripción evolutivamente "antiguo" NFκB.
IP 3 se une a su receptor en el retículo endoplásmico y libera iones de calcio del depósito al citosol.
El calcio libre activa las proteínas que se unen al calcio: la calmodulina, que regula la actividad de otras proteínas, y la calcineurina, que desfosforila y, por lo tanto, activa el factor nuclear de los linfocitos T activados NFAT (Factor Nuclear de Células T Activadas).
. Ras y otras proteínas G pequeñas en estado inactivo, se asocian con GDP, pero las proteínas adaptadoras reemplazan a este último con GTP, que convierte a Ras en estado activo.
Ras tiene su propia actividad GTPasa y escinde rápidamente el tercer fosfato, volviendo así a un estado inactivo (autoinactivación).
En el estado de activación a corto plazo, Ras tiene tiempo para activar la próxima cascada de quinasas llamada MAPK. (proteína quinasa activada por mitógenos), que finalmente activan el factor de transcripción AP-1 en el núcleo celular. En la fig. 6-3 representan esquemáticamente las principales vías de señalización con el TCR. La señal de activación se activa cuando el TCR se une a un ligando (un complejo MHC-péptido) con la participación de un co-receptor (CD4 o CD8) y una molécula coestimuladora CD28. Esto conduce a la activación de las quinasas Fyn y Lck. Las regiones ITAM en las partes citoplásmicas de las cadenas polipeptídicas CD3 están marcadas en rojo. Se muestra el papel de las Src-quinasas asociadas al receptor en la fosforilación de proteínas, tanto receptoras como señalizadoras. Se llama la atención sobre la gama extremadamente amplia de efectos de la quinasa Lck asociada con los correceptores; el papel de la quinasa Fyn se ha establecido con menos certeza (reflejado en el carácter discontinuo de las líneas).
Arroz. 6-3. Fuentes y dirección de activación de señales de activación durante la estimulación de linfocitos T. Designaciones: ZAP-70 (ζ -proteína quinasa asociada, ellos dicen masa 70 kDa) - proteína quinasa p70 asociada con la cadena ζ; PLCγ (fosfolipasa Cγ ) - fosfolipasa C, isoforma γ; PI3K (fosfatidil inositol 3-quinasa)- fosfatidilinositol 3-quinasa; Lck, Fyn -tirosina quinasas; LAT, Grb, SLP, GADD, Vav - proteínas adaptadoras
La tirosina quinasa ZAP-70 desempeña un papel clave en la mediación entre las quinasas receptoras y las moléculas y enzimas adaptadoras. Activa (mediante fosforilación) las moléculas adaptadoras SLP-76 y LAT, y esta última transmite una señal de activación a otras proteínas adaptadoras GADD, GRB y activa la isoforma γ de la fosfolipasa C (PLCy). Hasta esta etapa, la transmisión de señales involucra solo factores relacionados con membrana celular. Una importante contribución a la activación de las vías de señalización la realiza la molécula coestimuladora CD28, que realiza su acción a través de la lípido quinasa asociada PI3K. (fosfatidil inositol 3-quinasa). El objetivo principal de la quinasa PI3K es el factor Vav asociado con el citoesqueleto.
Como resultado de la formación de señales y su transmisión desde el receptor de células T al núcleo, se forman 3 factores de transcripción: NFAT, AP-1 y NF-kB, que inducen la expresión de genes que controlan el proceso de activación de los linfocitos T. (Figura 6-4). La formación de NFAT da lugar a una vía de señalización independiente de la coestimulación, que se activa por la activación de la fosfolipasa C y se realiza con la participación de iones
Arroz. 6-4. Esquema de vías de señalización durante la activación de células T. NFAT (Factor nuclear de células T activadas), AP-1 (proteína de activación-1), NF-κB (Factor nuclear dea -gen de las células B)- factores de transcripción
Ca 2+ . Esta vía provoca la activación de la calcineurina que, al tener actividad fosfatasa, desfosforila el factor citosólico NFAT-P. Debido a esto, NFAT-P adquiere la capacidad de migrar al núcleo y unirse a los promotores de los genes de activación. El factor AP-1 se forma como un heterodímero de las proteínas c-Fos y c-Jun, cuya formación se induce debido a la activación de los genes correspondientes bajo la influencia de factores resultantes de la implementación de los tres componentes de la cascada MAP. . Estas vías son activadas por las proteínas cortas de unión a GTP Ras y Rac. Las señales que dependen de la coestimulación a través de la molécula CD28 hacen una contribución significativa a la implementación de la cascada MAP. Se sabe que un tercer factor de transcripción, NF-kB, es el principal factor de transcripción en las células. inmunidad innata. Se activa mediante la escisión de la subunidad bloqueadora de IkB por la cinasa IKK, que se activa en las células T durante la transducción de señales dependiente de la isoforma de la proteína cinasa C (PKC9). La principal contribución a la activación de esta vía de señalización la realizan las señales coestimuladoras de CD28. Los factores de transcripción formados, habiendo contactado con las regiones promotoras de los genes, inducen su expresión. Para fases iniciales Respuestas de células T a la estimulación, la expresión génica es particularmente importante IL2 y IL2R, que provoca la producción del factor de crecimiento de las células T IL-2 y la expresión de su receptor de alta afinidad en los linfocitos T. Como resultado, la IL-2 actúa como un factor de crecimiento autocrino, que determina la expansión proliferativa de los clones de células T involucrados en la reacción al antígeno.
DIFERENCIACIÓN DE LINFOCITOS T
La identificación de etapas en el desarrollo de los linfocitos T se basa en el estado de los genes del receptor V y la expresión de TCR, así como en los correceptores y otras moléculas de membrana. El esquema de diferenciación de los linfocitos T (fig. 6-5) es similar al esquema anterior para el desarrollo de los linfocitos B (v. fig. 5-13). Se presentan las características clave del fenotipo y los factores de crecimiento de las células T en desarrollo. Las designaciones aceptadas de las etapas del desarrollo de las células T están determinadas por la expresión de co-receptores: DN (de doble negativa, CD4CD8) - doble negativo, DP (de doble positivo, CD4 + CD8 +) - doble positivo, SP (de positivo simple, CD4 + CD8 - y CD4CD8 +) - positivo único. La división de los timocitos DN en etapas DN1, DN2, DN3 y DN4 se basa en la naturaleza
Arroz. 6-5. Desarrollo de linfocitos T
expresión de moléculas CD44 y CD25. Otros símbolos: SCF (de Factor de células madre- factor de células madre, lo (bajo; marca de índice) - bajo nivel de expresión. Etapas de reordenamiento: D-J - etapa preliminar, conexión de los segmentos D y J (solo en los genes de las cadenas β y δ de TCR, ver Fig. 6-2), V-DJ - etapa final, conexión del gen V de la línea germinal con el segmento combinado de DJ.
.Los timocitos se diferencian de una célula progenitora común que, fuera del timo, expresa marcadores de membrana como CD7, CD2, CD34 y la forma citoplasmática de CD3.
.Las células progenitoras comprometidas con la diferenciación en linfocitos T migran desde la médula ósea a la zona subcapsular de la corteza del timo, donde proliferan lentamente durante aproximadamente una semana. Aparecen nuevas moléculas de membrana CD44 y CD25 en los timocitos.
.Luego, las células se adentran profundamente en la corteza del timo, las moléculas CD44 y CD25 desaparecen de su membrana. En esta etapa, el reordenamiento de los genes β-, γ- y cadenas δ de TCR. Si los genesγ- y las cadenas δ son productivas, es decir, sin cambio de marco, se reorganizan antes que los genes de la cadena β, luego el linfocito se diferencia aún más comoγ δT. De lo contrario, la cadena β se expresa en la membrana en complejo con pTα (una cadena sustituta invariable que reemplaza la cadena α real en esta etapa) y CD3. Sirve
una señal para detener el reordenamiento de los genes de las cadenas γ y δ. Las células comienzan a proliferar y expresan tanto CD4 como CD8. doble positivo timocitos. Al mismo tiempo, se acumula una masa de células con una cadena β ya preparada, pero con genes de cadena α aún no reordenados, lo que contribuye a la diversidad de heterodímeros αβ.
.En la siguiente etapa, las células dejan de dividirse y comienzan a reorganizar los genes Vα varias veces en 3 a 4 días. El reordenamiento de los genes de la cadena α conduce a la eliminación irreversible del locus δ ubicado entre los segmentos de los genes de la cadena α.
.El TCR se expresa con cada nueva versión de la cadena α y la selección (selección) de timocitos según la fuerza de unión al complejo MHC-péptido en las membranas de las células epiteliales del timo.
Selección positiva: los timocitos que no se unen a ninguno de los complejos MHC-péptido disponibles mueren. Como resultado de la selección positiva, alrededor del 90% de los timocitos mueren en el timo.
La selección negativa elimina los clones de timocitos que se unen a los complejos MHC-péptido con una afinidad demasiado alta. La selección negativa elimina del 10 al 70% de las células seleccionadas positivamente.
Los timocitos que se han unido a cualquiera de los complejos MHC-péptido con el correcto, es decir, mediana en fuerza, afinidad, recibe una señal de supervivencia y continúa la diferenciación.
.Por un corto tiempo, ambas moléculas del correceptor desaparecen de la membrana del timocitos, y luego una de ellas se expresa: los timocitos que reconocen el péptido en complejo con MHC-I expresan el correceptor CD8, y con MHC-II, el correceptor CD4. En consecuencia, dos tipos de linfocitos T entran en la periferia (en una proporción de aproximadamente 2:1): CD8+ y CD4+, cuyas funciones en las próximas respuestas inmunitarias son diferentes.
-Células T CD8+ juegan el papel de los linfocitos T citotóxicos (CTL): reconocen y eliminan directamente las células modificadas por el virus, el tumor y otras células "alteradas" (Fig. 6-6).
-Células T CD4+. La especialización funcional de los linfocitos T CD4+ es más diversa. Una parte significativa de los linfocitos T CD4 + durante el desarrollo de la respuesta inmune se convierte en T-helpers (ayudantes) que interactúan con los linfocitos B, los linfocitos T y otras células durante
Arroz. 6-6. El mecanismo de acción de los linfocitos T citotóxicos en la célula diana. En el T-killer, en respuesta a un aumento en la concentración de Ca 2+, los gránulos con perforina (óvalos morados) y granzimas (círculos amarillos) se fusionan con la membrana celular. La perforina liberada se incorpora a la membrana de la célula diana, seguida de la formación de poros permeables a granzimas, agua e iones. Como resultado, la célula diana se lisa
contacto directo oa través de factores solubles (citoquinas). En ciertos casos, pueden desarrollar CTL CD4+: en particular, tales linfocitos T se encuentran en cantidades significativas en la piel de pacientes con síndrome de Lyell.
Subpoblaciones de T-helpers
Desde finales de los años 80 del siglo XX, se acostumbra aislar 2 subpoblaciones de T-helpers (dependiendo del conjunto de citocinas que producen): Th1 y Th2. EN últimos años el espectro de subpoblaciones de células T CD4+ continúa expandiéndose. Se han encontrado subpoblaciones como Th17, T-reguladores, Tr1, Th3, Tfh, etc.
Principales subpoblaciones de células T CD4+:
. Th0- CD4 + linfocitos T en primeras etapas desarrollo de una respuesta inmune, producen solamente IL-2 (un mitógeno para todos los linfocitos).
.Th1- una subpoblación diferenciada de linfocitos T CD4+, especializada en la producción de IFNγ, TNF β e IL-2. Esta subpoblación regula muchas respuestas inmunitarias celulares, incluida la hipersensibilidad de tipo retardado (DTH) y la activación de CTL. Además, Th1 estimula la producción de anticuerpos IgG opsonizantes por parte de los linfocitos B, que desencadenan la cascada de activación del complemento. El desarrollo de una inflamación excesiva con daño tisular posterior está directamente relacionado con la actividad de la subpoblación Th1.
.Th2- una subpoblación diferenciada de linfocitos T CD4+, especializada en la producción de IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 e IL-13. Esta subpoblación está implicada en la activación de los linfocitos B y contribuye a la secreción de grandes cantidades de anticuerpos por parte de los mismos. diferentes clases especialmente IgE. Además, la subpoblación Th2 está involucrada en la activación de los eosinófilos y el desarrollo de reacciones alérgicas.
.Th17- una subpoblación de linfocitos T CD4+, especializada en la formación de IL-17. Estas células llevan a cabo una protección antifúngica y antimicrobiana de las barreras epiteliales y mucosas, y también juegan un papel clave en la patología de las enfermedades autoinmunes.
.reguladores en T- Linfocitos T CD4+ que suprimen la actividad de otras células del sistema inmunitario a través de la secreción de citoquinas inmunosupresoras - IL-10 (un inhibidor de la actividad de macrófagos y células Th1) y TGFβ - un inhibidor de la proliferación de linfocitos. El efecto inhibitorio también se puede lograr por interacción intercelular directa, ya que la membrana de algunos reguladores T expresa inductores de apoptosis de linfocitos activados y "agotados" - FasL (ligando Fas). Hay varias poblaciones de linfocitos T reguladores CD4+: naturales (Treg), que maduran en el timo (CD4+CD25+, que expresan el factor de transcripción Foxp3) e inducidos, localizados principalmente en las membranas mucosas del tracto digestivo y cambiados a la formación de TGFβ (Th3) o IL-10 (Tr1). El funcionamiento normal de los reguladores T es necesario para mantener la homeostasis del sistema inmunológico y prevenir el desarrollo de enfermedades autoinmunes.
.Poblaciones auxiliares adicionales. Recientemente, ha habido una descripción de poblaciones siempre nuevas de linfocitos T CD4+, clase
clasificados según el tipo de citocina que producen predominantemente. Entonces, resultó que una de las poblaciones más importantes es Tfh (del inglés. ayudante folicular- ayudante folicular). Esta población de linfocitos T CD4+ se localiza predominantemente en folículos linfoides y realiza una función auxiliar para los linfocitos B a través de la producción de IL-21, provocando su maduración y diferenciación terminal en células plasmáticas. Además de IL-21, Tfh también puede producir IL-6 e IL-10, que son necesarias para la diferenciación de linfocitos B. La violación de las funciones de esta población conduce al desarrollo de enfermedades autoinmunes o inmunodeficiencias. Otra población "nueva" es Th9 - productores de IL-9. Aparentemente, estos son Th2 que han cambiado a la secreción de IL-9, que es capaz de causar la proliferación de células T auxiliares en ausencia de estimulación antigénica, así como de aumentar la secreción de IgM, IgG e IgE por B -linfocitos.
Las principales subpoblaciones de T-helpers se muestran en la fig. 6-7. La figura resumida ideas modernas sobre subpoblaciones adaptativas de células T CD4+, es decir subpoblaciones formando-
Arroz. 6-7. Subpoblaciones adaptativas de células T CD4+ (citoquinas, factores de diferenciación, receptores de quimioquinas)
durante la respuesta inmune, y no durante el desarrollo natural de las células. Para todas las variedades de T-helper, se indican las citocinas inductoras (en las flechas que conducen a los círculos que simbolizan las células), los factores de transcripción (dentro de los círculos), los receptores de quimiocinas que dirigen la migración (cerca de las líneas que se extienden desde la "superficie celular"), y produjo citocinas (en los rectángulos señalados por las flechas que se extienden desde los círculos).
La ampliación de la familia de subpoblaciones adaptativas de linfocitos T CD4+ requería resolver la cuestión de la naturaleza de las células con las que interactúan estas subpoblaciones (a las que prestan “ayuda” de acuerdo con su función de ayudantes). Estas representaciones se reflejan en la fig. 6-8. También proporciona una visión depurada de las funciones de estas subpoblaciones (participación en la defensa frente a determinados grupos de patógenos), así como de las consecuencias patológicas de un aumento desequilibrado de la actividad de estas células.
Arroz. 6-8. Subpoblaciones adaptativas de células T (células asociadas, efectos fisiológicos y patológicos)
γ linfocitos δT
La gran mayoría (99%) de los linfocitos T que experimentan linfopoyesis en el timo son células αβT; menos del 1% - células γδT. Estos últimos se diferencian principalmente fuera del timo, principalmente en las membranas mucosas del tracto digestivo. En la piel, los pulmones, los tractos digestivo y reproductivo, son la subpoblación dominante de linfocitos intraepiteliales. Entre todos los linfocitos T del cuerpo, las células T γδ constituyen del 10 al 50 %. En la embriogénesis, las células γδT aparecen antes que las células αβT.
.γδ Las células T no expresan CD4. La molécula CD8 se expresa en una parte de las células T γδ, pero no como un heterodímero p, como en las células apT CD8+, sino como un homodímero de dos cadenas a.
.Propiedades de reconocimiento de antígenos: Los γδTCR son más similares a las inmunoglobulinas que los αβTCR; son capaces de unirse a antígenos nativos independientemente de las moléculas MHC clásicas; para las células T γδ, no es necesario o no requiere ningún procesamiento previo del antígeno APC.
.Diversidadγδ TCR menos que αβTCR o inmunoglobulinas, aunque en general las células γδT son capaces de reconocer una amplia gama de antígenos (principalmente antígenos fosfolípidos de micobacterias, carbohidratos, proteínas de choque térmico).
.Funcionesγδ células T aún no se entiende completamente, aunque la opinión predominante es que sirven como uno de los componentes de conexión entre la inmunidad innata y la adquirida. Las células T γδ son una de las primeras barreras para los patógenos. Además, estas células, al secretar citoquinas, juegan un papel inmunorregulador importante y son capaces de diferenciarse en CTL.
linfocitos NKT
Las células T asesinas naturales (células NKT) representan una subpoblación especial de linfocitos, que ocupan una posición intermedia entre las células de la inmunidad innata y adaptativa. Estas células tienen características de linfocitos NK y T. Las células NKT expresan αβTCR y el receptor NK1.1 característico de las células NK, que pertenece a la superfamilia de glicoproteínas de lectina tipo C. Sin embargo, el receptor TCR de las células NKT difiere significativamente del receptor TCR de las células normales. En ratones, la mayoría de las células NKT expresan un dominio V de cadena α invariable que consta de
segmentos Vα14-Jα18, a veces denominados Jα281. En humanos, el dominio V de la cadena α consta de segmentos Vα24-JαQ. En ratones, la cadena α del TCR invariable está predominantemente complejada con Vβ8.2, en humanos, con Vβ11. Debido a las características estructurales de las cadenas de TCR, las células NKT se denominan invariantes: iTCR. El desarrollo de las células NKT depende de la molécula CD1d, que es similar a las moléculas MHC-I. A diferencia de las moléculas MHC-I clásicas que presentan péptidos a las células T, CD1d presenta solo glicolípidos a las células T. Aunque se cree que el hígado es el sitio de desarrollo de las células NKT, existe una fuerte evidencia del papel del timo en su desarrollo. Las células NKT juegan un papel importante en la regulación de la inmunidad. En ratones y humanos con varios procesos autoinmunes, la actividad funcional de las células NKT se ve gravemente afectada. No existe una imagen completa de la importancia de tales trastornos en la patogenia de los procesos autoinmunes. En algunos procesos autoinmunes, las células NKT pueden desempeñar un papel supresor.
Además de controlar las reacciones autoinmunes y alérgicas, las células NKT están involucradas en la vigilancia inmunológica, provocando el rechazo del tumor con un aumento de la actividad funcional. Su papel en la protección antimicrobiana es grande, especialmente en las primeras etapas del desarrollo del proceso infeccioso. Las células NKT están involucradas en varios procesos inflamatorios. procesos infecciosos especialmente en la enfermedad viral del hígado. En general, las células NKT son una población multifuncional de linfocitos que aún albergan muchos misterios científicos.
En la fig. 6-9 resumen los datos sobre la diferenciación de linfocitos T en subpoblaciones funcionales. Se presentan varios niveles de bifurcación: γ δT/ αβT, luego para células αβT - NKT/ otros linfocitos T, para estos últimos - CD4 + /CD8 + , para células T CD4 + - Th/Treg, para CD8 + T- linfocitos - CD8αβ/CD8αα. También se muestran los factores de transcripción de diferenciación responsables de todas las líneas de desarrollo.
Arroz. 6-9. Subpoblaciones naturales de linfocitos T y sus factores de diferenciación