Feci per infezioni intestinali incluse. Come viene eseguito un test per la febbre tifoide?

Uno studio genetico molecolare completo che consente di identificare il materiale genetico dei patogeni più probabili delle infezioni intestinali acute nelle feci e stabilire l'eziologia della malattia.

A cosa serve questa analisi?

• Per la diagnosi differenziale delle cause acute.

Quando è programmata un'analisi?

• Con sintomi di infezione intestinale acuta (diarrea, febbre,).

Sinonimi russi

OKI, PCR (cal).

SinonimiInglese

Screening delle infezioni intestinali acute; Screening di diarrea batterica e virale, PCR, campioni fecali.

Metodo di ricerca

Reazione a catena della polimerasi in tempo reale.

Quale biomateriale può essere utilizzato per la ricerca?

Come prepararsi adeguatamente per la ricerca?

• Si raccomanda di eseguire lo studio prima di assumere antibiotici e altri farmaci chemioterapici antibatterici.
• Evita di prendere lassativi supposte rettali, oli, limitare l'assunzione di farmaci che influenzano la motilità intestinale (belladonna, pilocarpina, ecc.) e il colore delle feci (ferro, bismuto, solfato di bario), entro 72 ore prima della raccolta delle feci.

Informazioni generali sullo studio

Secondo le statistiche ufficiali, in Russia fino al 65-67% delle malattie in questo gruppo sono infezioni intestinali acute di eziologia non specificata. Se l'agente eziologico dell'infezione è sconosciuto, l'efficacia delle misure antiepidemiche è limitata. Il rapporto tra la frequenza di rilevamento di agenti patogeni virali e batterici varia in età diverse: nei bambini sotto i 3 anni, gli agenti virali rappresentano l'80-90% delle malattie, gli agenti batterici rappresentano il 10-20%; tra i pazienti adulti, la percentuale di agenti patogeni virali è ridotta al 30%.

Le specie Shigella ed Escherichiacoli sono microrganismi Gram-negativi a forma di bastoncino della famiglia delle Enterobacteriaceae. Il genere Shigella comprende i batteri patogeni S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii e S. sonnei, che sono patogeni. Gli E. coli enteroinvasivi (EIEC) sono molto simili alla Shigella, sintetizzano e secernono una tossina simile alla Shigella, sono in grado di penetrare nelle cellule della mucosa intestinale e distruggere gli enterociti, che porta alla formazione di difetti ulcerativi nella mucosa intestinale . Per una percentuale significativa di casi di "dissenteria batteriologicamente non confermata", soprattutto nei bambini, è responsabile l'escherichiosi enteroinvasiva.

I batteri del genere Salmonella appartengono alla famiglia delle Enterobacteriaceae. S. typhi e S. parathyphi sono gli agenti causali del tifo e. Esistono molte sierovarianti delle specie Salmonella che possono causare un'infezione simile alla gastroenterocolite nell'uomo, oltre a causare infezioni nosocomiali. può manifestarsi sotto forma di infezione intestinale acuta, grave infezione generalizzata o portamento asintomatico. La diagnosi finale viene effettuata solo dopo l'isolamento dell'agente patogeno o il rilevamento del suo DNA.

Il Campylobacter è uno dei microrganismi più difficili da coltivare (necessario durante l'analisi). Ciò è dovuto alla loro microaerofilia e alla possibilità di sopprimerne la crescita da parte della flora che li accompagna. Il genere Campylobacter combina sia i patogeni AII (specie termofile) sia le specie saprofite e opportunistiche, che devono essere ricordate quando si identificano questi microrganismi nel materiale clinico. L'uso di kit basati su PCR per la determinazione del gruppo termofilo di Campylobacter non solo evita laboriosi e costosi lavori batteriologici, ma limita chiaramente anche il rilevamento di quei tipi di Campylobacter che hanno una relazione eziologica con l'infezione intestinale acuta (C. jejuni, C. coli, C. lari, C. upsaliensis).

Secondo i dati della letteratura straniera, il norovirus è l'agente eziologico più comune delle epidemie di AII di eziologia non batterica. Questa caratteristica è associata a una bassa dose infettiva e ad un'elevata resistenza a ambiente. La PCR è il "gold standard" in diagnostica clinica infezioni da norovirus.

Nonostante una prevalenza leggermente inferiore rispetto a rota- e norovirus, gli astrovirus costituiscono uno strato significativo di infezioni intestinali, in un terzo dei pazienti che si verificano con colite. I rotavirus di gruppo A sono i più diffusi causa comune l'AII sporadica nei bambini e l'adenovirus F contenente DNA (sierotipi 40 e 41) spesso causano epidemie nei bambini piccoli.

Per il rilevamento e la diagnosi differenziale delle infezioni intestinali, vengono utilizzati metodi genetici culturali e molecolari per studiare il materiale genetico dell'agente patogeno nelle feci e determinare la concentrazione di immunoglobuline specifiche nel sangue. La PCR ha un vantaggio rispetto ai metodi di coltura a causa di ricevuta rapida risultati, alta specificità e sensibilità dello studio. Questa analisi consente di identificare l'agente patogeno con una precisione del 100%. malattia intestinale, e una rapida diagnosi di infezioni intestinali acute aiuta ad evitare procedure non necessarie e interventi chirurgici, iniziare il trattamento in modo tempestivo e limitare il focus della diffusione dell'infezione.

A cosa serve la ricerca?

• Stabilire fattore eziologico infezione intestinale acuta;
• per la diagnosi differenziale delle cause della gastroenterocolite acuta (infiammazione del tratto gastrointestinale).

Quando è programmato lo studio?

• Con sintomi di gastroenterite acuta, probabilmente di eziologia infettiva (feci molli frequenti, vomito, febbre, dolore addominale);
• con sviluppo simultaneo o sequenziale di infezioni intestinali acute in diversi membri della famiglia, nei bambini in istituto per bambini o ricoverati;
• con sospetto dello sviluppo di un'infezione intestinale nosocomiale (con esacerbazione dei sintomi di enterocolite in un paziente in trattamento per infezioni intestinali acute).

Cosa significano i risultati?

Valori di riferimento: negativo.

Motivi per un risultato positivo:

• la presenza di DNA o RNA dell'agente eziologico dell'AII; eziologia a seconda del tipo di patogeno identificato (Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus 2 genotipo, Astrovirus).

Motivi per un risultato negativo:

• nessuna infezione da Shigella spp., E. coli (EIEC), Salmonella spp., Campylobacter spp., Adenovirus F, Rotavirus A, Norovirus 2 genotipo, Astrovirus.

Cosa può influenzare il risultato?

Fattori che distorcono il risultato:

• stoccaggio a lungo termine del materiale prima che entri in laboratorio;
• congelamento del materiale o suo trattamento termico;
• inosservanza delle regole per il prelievo di biomateriale e sua contaminazione.

Note importanti

• Descrizione
• Preparazione
• Indicazioni
• Interpretazione dei risultati

Lo studio è utilizzato per la diagnosi differenziale delle infezioni intestinali acute.

• Shigella spp./Escherichia coli (Escherichia coli enteroinvasiva - EIEC)
• Salmonelle spp.
• Campylobacter spp.
• Adenovirus F
• Rotavirus A
• Norovirus GII
• Astrovirus

La maggior parte delle infezioni intestinali acute nei bambini (dal 50 all'80% di tutti i casi di malattie) sono dovute a infezione virale, prevalentemente causata da rotavirus di gruppo A e norovirus genogruppo 2 (GII). Nella struttura delle infezioni intestinali acute di origine batterica, i patogeni più comuni nei bambini sono la salmonella. Insieme alla salmonellosi (circa il 7% delle infezioni intestinali acute), sono rilevanti l'escherichiosi (4,8% delle infezioni intestinali acute), la campilobatteriosi (2,9% dei casi di malattie), la shigellosi (0,3% dei casi di infezioni intestinali acute).

La diarrea batterica è più grave della diarrea virale. decorso clinico, poiché i meccanismi fisiopatologici del danno della mucosa sono associati alla penetrazione di microrganismi nelle cellule epiteliali e all'azione delle endotossine batteriche. Nelle infezioni intestinali acute (batteriche) invasive, il metodo batteriologico è il "gold standard" della diagnosi, soggetto alla regola chiave: il biomateriale deve essere prelevato prima che venga prescritta la terapia antimicrobica (vedi test n. 457, 458, 460, 461, 462 ).

Gli studi genetici molecolari (incluso il metodo PCR), che identificano frammenti specifici di DNA e RNA di agenti patogeni nel biomateriale, sono inclusi negli schemi standard per la diagnosi di AEI e consentono di verificare in modo rapido ed efficiente il complesso di agenti patogeni virali e batterici di acuta infezioni intestinali. I test antigenici per l'identificazione dei patogeni AII (vedi test n. 463, 481, 482, 483, 485, 486) sono anche metodi espressi che consentono di stabilire una diagnosi di infezione intestinale acuta batterica o virale su prime date malattia, compreso il trattamento antibiotico. I metodi sierologici che consentono la rilevazione di anticorpi specifici contro i patogeni sono ausiliari nella diagnosi delle AII più invasive (vedi test n. 234, 235, 238, 239, 273, 280-290, 292, 293).

• diagnosi differenziale infezioni intestinali acute.

L'interpretazione dei risultati dello studio contiene informazioni per il medico curante e non è una diagnosi. Le informazioni contenute in questa sezione non devono essere utilizzate per l'autodiagnosi o l'autotrattamento. Una diagnosi accurata viene fatta dal medico, utilizzando entrambi i risultati questo sondaggio, E informazione necessaria da altre fonti: anamnesi, risultati di altri esami, ecc.

Sensibilità analitica (feci):

• Shigella spp./Escherichia coli (EIEC) - 1x103 GE/ml
• Salmonelle spp. – 1x10 3 GE/ml
• Campylobacter spp. – 1x10 3 GE/ml
• Adenovirus F - 1x10 4 GE/ml
• Rotavirus A - 1x10 4 GE/ml
• Norovirus GII - 1x10 3 GE/ml
• Astrovirus - 1x104GE/ml

Modulo di presentazione dei risultati:

Prova di qualità. Il risultato viene fornito in termini di "rilevato" o "non rilevato" per i patogeni specificati separatamente, ad eccezione del test Shigella spp./Escherichia coli (EIEC), in cui la presenza del DNA di questi patogeni viene rilevata in totale.

Interpretazione dei risultati

• infezione causata dall'agente patogeno corrispondente;
• trasporto dell'agente infettivo.

"Non rilevata":

• l'assenza di DNA (RNA) dell'agente patogeno nel materiale di prova;
• il livello di DNA (RNA) dell'agente patogeno nel materiale di prova è inferiore al limite di rilevamento.

Letteratura

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La diagnosi di laboratorio della febbre tifoide comprende metodi di ricerca clinica generale e reazioni specifiche. A seguito di un esame completo, lo specialista sarà in grado di trarre una conclusione sulla gravità della malattia, sulle proprietà dell'agente patogeno (compresa la sensibilità agli antibiotici), sul grado di pericolo del paziente per gli altri (la sua contagiosità). Tutti gli studi necessari vengono eseguiti all'inizio della malattia (quando il paziente entra in ospedale) e prima della dimissione. Se necessario, analisi per tifo ripetuto più volte.

Ce n'è uno in più sfumatura importante: La diagnosi differenziale tra febbre tifoide e febbre paratifoide è possibile solo sulla base di uno specifico esame di laboratorio. Né i dettagli clinici né i metodi diagnostici clinici generali consentono di distinguere dagli agenti patogeni il paratifo A, C o B. Questa informazione può essere significativa in termini di possibile infezione di altri, nonché la formazione di un'immunità specifica del solo tipo.

Caratteristiche generali della ricerca

Dove fare il test per diagnosticare la febbre tifoide? Questo problema non dovrebbe infastidire il paziente, poiché i moderni protocolli medici implicano il ricovero obbligatorio dei pazienti con una diagnosi così preliminare. In grande istituzioni mediche(o all'interno della stessa città) è presente un laboratorio multidisciplinare, i cui addetti potranno effettuare tutti gli studi specifici e non specifici necessari per la diagnosi completa della febbre tifoide e della febbre paratifoide.

Una risposta universale alla domanda, dopo quanti giorni il paziente saprà diagnosi accurata, non esiste. Per studi non specifici è richiesto un solo giorno, il risultato di reazioni specifiche arriverà solo per 4-5 giorni o anche di più.

L'identificazione dell'agente eziologico della febbre tifoide e della febbre paratifoide è la direzione principale di un esame completo non solo del paziente, ma anche dei potenziali portatori ( persone sane che rilasciano l'agente patogeno e infettano gli altri). I risultati di tale esame sono inseriti nel libro sanitario (medico) di una persona (dichiarata gruppo specializzato) che lavora nell'industria alimentare, nelle istituzioni per l'infanzia e in alcune altre imprese.

Per vari test diagnostici, vengono prelevati dal paziente (vettore) i seguenti fluidi biologici:

• sangue;
• masse fecali;
• urina;
• bile.

La necessità di prendere un particolare ambiente biologico del paziente è determinata dal medico curante. D'altra parte, è necessario agire abbastanza rapidamente, poiché gli antibiotici prescritti riducono l'efficacia diagnostica microbiologica tifo - i fluidi corporei devono essere assunti prima di iniziare il trattamento.

Metodi clinici generali

Le procedure standard, come un'analisi clinica generale del sangue e delle urine, in questo caso hanno davvero un valore diagnostico, poiché i cambiamenti identificati sono molto caratteristici.

IN analisi generale il sangue nelle malattie tifo-paratifo viene rilevato:

• leucocitosi nei primi 1-2 giorni, che viene sostituita dalla leucopenia;
• insolito per infezione batterica linfocitosi, trombocitopenia, aneosinofilia;
• nei casi più gravi si può osservare pancitopenia (depressione della funzione di tutti i germogli di sangue);
• il rilevamento di eosinofili durante il periodo di recupero del paziente è un segno prognosticamente favorevole nel corso della malattia.

Nell'analisi clinica generale delle urine vengono rilevati cambiamenti tradizionali (aumento dei livelli di leucociti, eritrociti), tipici di grave intossicazione.

Quando si esegue uno studio clinico generale sulle feci (coprogramma), è possibile rilevare gli eritrociti, che indicano la presenza di sanguinamento intestinale minore. Insieme al coprogramma, è consuetudine prescrivere un altro studio delle feci per il sangue occulto al fine di escludere un errore diagnostico e diagnosticare tempestivamente il sanguinamento.

Nel caso delle malattie tifoidi-paratifoidi, i parametri biochimici vengono esaminati solo per identificare disfunzioni pronunciate. organi interni, ad esempio, con lo sviluppo di epatite specifica o pielonefrite.

Metodi specifici

La diagnosi microbiologica della febbre tifoide è la base per la diagnosi finale e ulteriori azioni antiepidemiche. Quando si esaminano gruppi speciali della popolazione (gruppo dichiarato), un segno su un risultato negativo di un esame del sangue per la febbre tifoide per un libro sanitario è un'ammissione al posto di lavoro. L'analisi specifica per la febbre tifoide comprende studi batteriologici e sierologici.

Metodo batteriologico

Prevede il prelievo di materiale biologico dal paziente e la successiva semina su apposite strumenti della cultura(il più delle volte - brodo di bile). Lo studio delle proprietà morfologiche, biochimiche e molte altre di un microrganismo ci consente di identificarlo con una precisione del 100%. Inoltre, la moderna microbiologia prevede una fase così obbligatoria come la sensibilità agli antibiotici, senza la quale il processo di un'efficace terapia antimicrobica è significativamente ostacolato.

È meglio donare il sangue per la febbre tifoide nella prima settimana di malattia. Un esame del sangue positivo per la febbre tifoide, cioè un'emocoltura positiva, è una conferma assoluta della diagnosi. Rilevazione di salmonella tifoide nelle urine e feci può essere osservato nella stessa misura in una persona malata e in un portatore, cioè sono necessari altri studi aggiuntivi.

Metodo sierologico

La base di molte reazioni che implementano metodo sierologico ricerca è una combinazione di un antigene noto (tifo) e di anticorpi sintetizzati nel sangue del paziente. La diagnosi sierologica della febbre tifoide è il test Vidal, la reazione emoagglutinazione indiretta(RNGA), se necessario - reazione con Vi - antigene.

Reazione di Vidal- questa è una modifica della reazione di agglutinazione, il valore diagnostico risiede nell'aumento del titolo anticorpale con il progredire della malattia. Questa reazione può essere falsa positiva in altre salmonellosi, quindi è necessaria un'altra sierodiagnosi tifoidea. Ad esempio, RNGA con antigeni diversi è più specifico. Alcuni laboratori lo sono Gioco di ruolo- reazione di agglutinazione passiva di anticorpi da parte di antigeni noti.

Se si sospetta la febbre tifoide, la diagnostica specifica può confermare o smentire la diagnosi di questo malattia infettiva e forse anche scoprire da dove proviene questa infezione.