Mikrobiologija: bilješke s predavanja Tkachenko Ksenia Viktorovna

2. Botulizam

2. Botulizam

Uzročnik botulizma pripada rodu Clistridium, vrsta Cl. botulinum. Uzročnik je trovanja hranom.

Toksikoza hrane je bolest koja nastaje prilikom konzumiranja hrane koja sadrži egzotoksine patogena, a sam patogen ne igra odlučujuću ulogu u nastanku bolesti.

Cl. botulinum su gram-pozitivni veliki štapići. Oni formiraju subterminalno locirane spore. Kapsule ne. Strogi anaerobi.

Razmnožava se na agaru glukoze u krvi nepravilnog oblika kolonije sa izbojcima ili glatkim ivicama, zona hemolize oko kolonija. Kada rastu u agar koloni, podsjećaju na vatu ili sočivo. U tečnim medijima nastaje jednolično zamućenje, a zatim kompaktni talog pada na dno epruvete.

Prirodno stanište Clostridium botulizma su crijeva riba, životinja, mikroorganizmi ulaze u tlo s izmetom. U stanju dugo vrijeme perzistiraju i razmnožavaju se u vanjskom okruženju u obliku spora. Vegetativni oblici su nestabilni u vanjskom okruženju.

Enzimska aktivnost je nestabilna i ne koristi se za identifikaciju.

Prema antigenskoj strukturi proizvedenih toksina razlikuju se serovari A, B, C1, D, E, F, Q. Antigenska specifičnost samih bakterija nije određena.

Clostridium botulinum proizvodi najmoćniji egzotoksin, botulinum. Botulinski toksin se akumulira u prehrambeni proizvod množeći se u njemu. Ovi proizvodi se obično konzerviraju domaća kuhinja, dimljene kobasice itd.

Toksin ima neurotropni efekat. S razvojem bolesti uvijek se javlja toksinemija, zahvaćena su produžena moždina i jezgra kranijalnih živaca. Toksin je otporan digestivni enzimi, brzo se apsorbuje iz gornjim divizijama digestivnog trakta u krv i ulazi u neuromišićne sinapse.

Botulinum toksin se veže za membranu sinaptosoma i endocitozom ulazi u živčanu ćeliju.

Mehanizam djelovanja toksina je inhibicija oslobađanja acetilholina ovisnog o kalciju, blokada funkcionalna aktivnost neuron. Prije svega, zahvaćeni su bulbarni nervni centri. Javljaju se opća intoksikacija, znaci oštećenja organa vida - dvoslike, poremećaj akomodacije, proširene zjenice, oštećenje okulomotornih mišića. Istovremeno gutanje postaje otežano, pojavljuje se afonija, glavobolja, vrtoglavica, povraćanje.

Bolest ima visoku stopu smrtnosti.

dijagnostika:

1) infekcija laboratorijskih miševa; materijal - povraćanje, ispiranje želuca, izmet, krv;

2) otkrivanje toksina u reakciji neutralizacije toksina;

3) serodijagnostika.

Liječenje: antitoksični anti-botulinum serum.

BOTULIZAM(lat. botulus kobasica; sin. botulizam) - teška intoksikacija koja nastaje kao posljedica konzumiranja hrane koja sadrži toksine Clostridium botulinum, a karakterizira je dominantna lezija centralnog i autonomnog nervnog sistema.

Statistika

Postojeća statistika ne odražava pravu veličinu incidencije ljudi B. Pouzdanija je i potpunija tamo gdje se vrši detaljna laboratorijska ispitivanja svih akutnih i smrtonosnih slučajeva bolesti, a praktički je odsutna u mnogim zemljama u kojima smrt nije predmet na pregled i ne postoje uslovi za hospitalizaciju pacijenata. Čak iu razvijenim zemljama tek se posljednjih desetljeća ova grupa teških trovanja počela diferencirati prema vrstama toksina koji su uzrokovali njihov razvoj, što je neophodan uvjet za pravovremeno i pravilno liječenje bolesnika. Mayer (K. Meyer, 1956), analizirajući pojavu B. u svijetu za 50 godina, smatra da je u tom periodu oboljelo 5635 ljudi, od kojih je 1714 umrlo.

Ove statistike su zasnovane na pojedinačnim publikacijama. U SAD za 65 godina (1899-1964) registrovano je 1574 slučajeva, od kojih je 955 (60,6%) umrlo. U Rusiji je od 1818. do 1913. godine prijavljeno 609 pacijenata sa B., od kojih je oko polovina umrla. Poboljšanjem statističke evidencije morbiditeta u našoj zemlji od 1920. do 1939. godine, poznato je 674 bolesnika sa B., od kojih je više od četvrtine umrlo. U Japanu je od 1951. do 1964. registrovano 297 pacijenata sa B., od kojih je 78 umrlo. U Francuskoj su, prije okupacije od strane fašističkih trupa, registrovana 24 slučaja B.; tokom okupacije, broj slučajeva je premašio 1.000 ljudi, što je, kako se ispostavilo, povezano sa jedenjem mesa svinja koje su tajno zaklane u nehigijenskim uslovima.

Etiologija

Uzročnika botulizma Clostridium botulinum (syn. Bacillus botulinus) opisao je 1896. Van Ermengem (E. van Ermengem) tokom istrage o izbijanju B. u Njemačkoj. B.-ovo istraživanje etiologije u narednim godinama pokazalo je da je bolest uzrokovana nekoliko patogena koji pripadaju istoj vrsti. Poznato je šest vrsta uzročnika botulizma: A, B, C, D, E, F. Podjela na tipove povezana je s izvornom antigenskom strukturom egzotoksina koji proizvodi stanica. Svaka vrsta toksina može se potpuno neutralizirati samo serumom homolognog tipa.

B. aktivatori su rasprostranjeni u prirodi. Stalno stanište spora ovih bakterija je tlo, odakle ulaze u vodu, voće i povrće, prehrambene proizvode, stočnu hranu, a zatim u crijeva ljudi i životinja (sisara, ptica, riba, beskičmenjaka). Burke (G. Burke, 1919) je tokom istraživanja u Kaliforniji izolovao 235 useva iz vode, sijena, baštenske zemlje, insekata, pauka, puževa, konjskog stajnjaka, crevnog sadržaja ptica. U svim gore navedenim objektima, patogeni B. formiraju spore koje su otporne na dejstvo hemikalija. i fizički faktori. Vegetativni oblici patogena B. umiru kuhanjem 2-5 minuta, sporni oblici nekih sojeva, posebno tipova A, B, C, F, su visoko termootporni. Izdrže 1-5 sati ključanja i umiru samo u autoklavu. Botulinum toksin se djelimično uništava kada se zagrije na t° 70-90°, kada se kuha 5-15 minuta. potpuno se sruši.

Kod nas su u životnoj sredini najčešći tipovi A, B, E, rjeđe tipovi C i F, tipovi A, B, E se nalaze u bolestima kod ljudi, tipovi A, B, C, E se nalaze kod životinja.

Svih šest vrsta Cl. botulinum su veoma bliski po svojim morfološkim, kulturnim svojstvima i po dejstvu svojih toksina na ljudske i životinjske organizme. Daju istu kliničku sliku bolesti.

Epidemiologija

Posebnost epidemiologije B. je određena činjenicom da se ne prenosi sa bolesne osobe na zdravu. Glavni rezervoar infekcije u B. su toplokrvne životinje (uglavnom biljojedi), rjeđe ribe, rakovi, mekušci, u čijim se crijevima akumulira Cl. botulinum, izlučuju se izmetom u okolinu, gdje postaju spore. Naknadno klijanje spora na organskim supstratima u anaerobnim uslovima, posebno u temperaturnom opsegu od 22-37°C, praćeno je nakupljanjem mikroba i njihovih toksina.

Prevalencija bolesti u zemljama svijeta određena je: kontaminacijom sporama Cl. botulinum objekti okruženje, stepen osjetljivosti osobe na toksin ove vrste, kao i priroda proizvodnje (priprema) prehrambenih proizvoda i karakteristike ishrane i svakodnevnog života stanovništva. Odsustvo spora Cl. u objektima životne sredine. botulinum, naravno, isključuje mogućnost njihovog ulaska u prehrambene proizvode, i moderna tehnologija njihova proizvodnja čak iu prisustvu spora sprečava zadržavanje ili nakupljanje botulinum toksina tokom skladištenja proizvoda.

Ljudska osjetljivost na botulinum toksin tipova A, B, C, D, E i F varira. To potvrđuju epidemiološki podaci o širenju bolesti i kontaminaciji objekata životne sredine sporama, kao i podaci o različitoj osjetljivosti eksperimentalnih i poljoprivrednih. životinja na različite vrste toksina.

Spore Cl. botulinum su široko rasprostranjeni. Prema V. M. Bermanu (1941.), “sva priroda je izvor botulizma”, što naglašava raširenu kontaminaciju objekata životne sredine sporama patogena. Međutim, statistika nalaza spora je beznačajna. To je zbog ograničenih i ciljanih pretraga povezanih s novim bolestima ili potrebe da se ispitaju određena područja odakle se isporučuju povrće ili riblji proizvodi. Prehrambena industrija.

Unapređenje laboratorijskih metoda istraživanja u pravcu utvrđivanja karakteristika metabolizma patogena i široka upotreba seruma specifičnih za tip omogućili su pouzdanije utvrđivanje kontaminacije životne sredine različitim vrstama Cl. botulinum i predstaviti savremenu geografiju njihove rasprostranjenosti.

Prilikom istraživanja razni uzorci, uzeti u regijama Sjevernog Kavkaza, Azovskog i Kaspijskog mora, Primorskog kraja, Dalekog istoka, Lenjingrada, spore patogena B. pronađene su u 9% uzoraka tla i 4% uzoraka vode. Istovremeno su u uzorcima tla pronađene spore patogena tipova A, B, C i E, a u uzorcima vode i mulja tipa E. Među pozitivnim nalazima tip E je bio cca. 74%; pronađen je u tlu obala vodnih tijela u gotovo svim istraživanim područjima, drugo mjesto po učestalosti nalaza zauzima tip B (16,5%), treće - tip A (7,8%) i četvrto - prema tipu C (1,8%). U 33% proučavanih uzoraka tla sa obala jezera Balkhash i neke regije Armenske SSR, spore patogena B.

Prema stranim istraživanjima, najčešći nalazi spora uzročnika B. javljaju se u proučavanju pasulja (32%), raspadnutih biljaka (20%) i fermentisane zelene krme (20%).

Prilikom analize incidencije B. skreće se pažnja na činjenicu da su sve bolesti uzrokovane tri vrste toksina – A, B i E, s tim da u svakoj pojedinačnoj zemlji prevladava po jedan od njih. Dakle, u SAD je tip A najčešći uzročnik B., u Francuskoj i Norveškoj tip B, u Japanu su skoro sve bolesti povezane sa tipom E, u Kanadi preovlađuje tip E. Kod nas su bolesti uzrokovane tri vrste toksina (A, B i E). Bolesti uzrokovane toksinima kao što su C, D, F su izuzetno rijetke. Jedan slučaj grupnog trovanja (jezero Čad) uzrokovanog toksinom ovog tipa

D. Opisani su i izolovani slučajevi trovanja toksinom tipa C. Što se tiče patogena koji proizvodi toksin tipa F, nedavno otkrivenog u SSSR-u, bolesti povezane s njim su registrovane samo u Danskoj i SAD po jednom.

Dakle, očigledna je neekvivalencija u patologiji botulinum toksina različitih vrsta. To je uzrokovano ne toliko vjerovatnoćom da bilo koja vrsta toksina uđe u ljudsko tijelo, koliko prirodnom otpornošću osobe na jednu i visokom osjetljivošću na druge vrste toksina, iako postoji mišljenje (K. I. Matveev, 1959) da sve toplokrvne životinje, uto. sati i ljudi su podjednako osjetljivi na botulinum toksine svih vrsta. Međutim, poznato je da stepen osjetljivosti toplokrvnih životinja nije isti. Visoko otporne na botulinum toksine su svinje, psi, vukovi, lisice, divlje i domaće mačke, lavovi, tigrovi i mnoge ptice. Ove vrste su "redovnici" koji uništavaju bolesne životinje i strvinu, a priroda njihove prehrane pruža izuzetne mogućnosti za kontakt sa patogenima B. i njihovim toksinima. Najosjetljiviji na botulinum toksine su konji, čija priroda isključuje širinu takvih kontakata, i mnoge laboratorijske životinje. to biološki fenomen, koji se sastoji u različitoj osjetljivosti toplokrvnih životinja na predstavnike jedne grupe toksina, nalazi objašnjenje u evolucijskom razvoju vrsta i njihovom odnosu sa patogenima B. U procesu ove evolucije određeni dio jedinki vrste koje su imale individualnu (ali genotipski određenu) sposobnost da se u većoj mjeri odupru patogenom djelovanju toksina preživjele su prenošenjem ovih osobina na sljedeću generaciju. Mora se pretpostaviti da su i daleki preci čovjeka, koji su jeli sirovo i trulo meso, imali najšire kontakte sa patogenima B., a prije svega sa tipovima C i D, kao i sa najstarijim predstavnicima klostridioze.

patološka anatomija

Patoanatomske promjene pronađene na obdukciji pacijenta koji je preminuo od B. ne predstavljaju ništa specifično. U pravilu se otkriva oštra hiperemija svih visceralnih organa, praćena višestrukim malim i velikim krvarenjima. Opne mozga su jako hiperemične, ima krvarenja. U moždanom tkivu nalaze se tromboza, lezije vaskularnog epitela nekrotične i destruktivne prirode. Zidovi žila moždanog tkiva su opušteni. Najviše su pogođene ganglijske ćelije nervnog sistema. Dolazi do vakuolizacije protoplazme, dezintegracije jezgra. Oblik ćelija se menja, procesi opadaju, promene se dešavaju i u neurogliji.

U srcu nabubre vlakna vezivnog tkiva, uočavaju se pojave nekrobioze. Dolazi do fragmentacije miokarda; prugaste pruge nestaju. Žile se naglo prepune krvlju, otkriva se oticanje endotela u kapilarama i malim žilama.

Pluća su puna krvi, edematozna. Postoji oštra slika hemoragična pneumonija; u nekim slučajevima dolazi do hepatizacije pojedinih dijelova pluća, a ponekad i cijelih režnjeva. Kapilare pluća su naglo proširene, u alveolama dolazi do nakupljanja eritrocita. Jetra je puna krvi, uvećana, braonkaste boje, mlohave konzistencije. Mikroskopski pregled pokazuje granularnu degeneraciju ćelija tkiva jetre, masnu alteraciju, oticanje kolagenih vlakana vezivnog tkiva, disocijaciju jetrenog parenhima.

U bubrezima je epitel uvijenih tubula snažno izmijenjen, a u ravnim tubulima dolazi do distrofičnih promjena.

Sluzokoža probavnog trakta je oštro hiperemična. Sluzokoža želuca je otečena, žućkaste boje, olabavljena, vrlo lako se kida, u njoj su vidljiva šiljasta i veća krvarenja. Crijevne žile se oštro ubrizgavaju i daju seroznoj membrani mramorni uzorak; crijevna sluznica je otečena, mikroskopija otkriva vazodilataciju, oštećenje stijenke i oslobađanje crvenih krvnih zrnaca.

Od skeletnog mišića najviše je pogođena muskulatura grudnog koša, trbušnog zida i udova. Mišići su "ukuhani", sivkastog izgleda; mikroskopija otkriva vazodilataciju, zastoj u kapilarama, prugasta prugasta linija nestaje, vlakna nabubre, izgledaju kao kod Zenkerove degeneracije.

Patogeneza

Glavni patogenetski faktor kod B. je botulinum toksin. Prema brojnim istraživačima, patogeneza B. ima toksični karakter. Treba istaći važnu osobinu u pogledu geneze intoksikacije toksinom tipa E. Na hranjivim supstratima ovaj tip patogena B. formira toksin manje jačine od patogena tipova A, B i F, međutim, jačina intoksikacije a smrtnost kod B. tipa E je po pravilu veća od one kod B. tipova A, B i F. Razlog za ove razlike je postojanje toksina E u dva oblika: protoksin i toksin.

Neaktivni protoksin koji se dobija iz. hrane u želudac, aktivira se enzimima, pretvara se u toksin i već se apsorbira u crijevima u aktivnom stanju. Stoga je oslobađanje želuca od sadržaja, kao važna terapijska mjera kod trovanja botulinom uzrokovanih toksinom tipa E, od izuzetnog značaja.

Osim u probavni trakt, toksin može ući i kroz respiratorni trakt prilikom udisanja prašine koja ga sadrži. Postoje i slučajevi rane B., kada su spore Cl. botulinum je u ranu ušao sa zemljom, tu proklijao, uzrokujući bolest, kao i slučaj bolesti povezane sa transfuzijom kadaverične krvi uzete od pokojnika iz B. (bolest kod pokojnika nije prepoznata).

Cl. botulinum se izlučuju iz organizma izmetom, toksini - urinom, žuči i izmetom.

U eksperimentu s intoksikacijom botulinumom ustanovljena su dva važna obrasca: prvi je da istovremena primjena različitih vrsta toksina na kraju dovodi do sumiranja toksično djelovanje; drugi obrazac je povezan s fenomenom paradoksalne osjetljivosti, kada ponovljena i česta primjena toksina dovodi do smrti, iako njegova ukupna doza nije prelazila polovinu smrtonosne doze. Utvrđeno je da botulinum toksin tipa A selektivno djeluje na periferne holinergičke nervne završetke, dok su adrenergička tkiva na njega neosjetljiva.

Iz krvi toksin prodire u organe, gdje djeluje na ćelije različitih tkiva, prvenstveno na nervni sistem koji je najosjetljiviji na botulinum toksine. Botulinski otrov djeluje na motorne neurone spinalnih motoričkih centara i produženu moždinu, što je uzročnik razvoja paralitičkog sindroma, kao i na periferne motoričke neuromuskularne uređaje, uzrokujući kršenje prijenosa ekscitacije s živca na mišića. U ovom slučaju nema potpune blokade prijenosa impulsa. Osim toga, botulinum toksin u vrlo velikim dozama deprimira tkivno disanje mozga, ali te promjene nisu uzrok smrti. Clinical Observations i eksperimentalni podaci nam omogućavaju da razmotrimo botulinum toksin i vaskularni otrov, čije se djelovanje temelji na oštećenju nervnog sistema srca i krvnih sudova. Kratkotrajna perfuzija toksina kroz krvne žile uzrokuje njihov grč, dugotrajno izlaganje dovodi do vaskularne pareze i krhkosti kapilara.

Molekularni mehanizmi interakcije između toksina i ćelija ostaju nedešifrovani.

Imunitet

Prenesena bolest ne ostavlja imunitet. Postoje izvještaji o ponovljene bolesti. Tako je K. M. Ayanyan (1967.) 1963. godine promatrao B. kod dvoje djece i ponovo kod njih godinu dana kasnije. Oba djeteta su umrla. I prvi i drugi put toksin Cl. botulinum tipa A.

Klinička slika

Period inkubacije je 12-24 sata, ali se može produžiti i do 10 dana. Što je period inkubacije kraći, tok bolesti je teži. Tokom izbijanja zapažaju se slučajevi bolesti sa kratkim i dužim periodima inkubacije, čak i ako su pojedinci jeli istu hranu u isto vrijeme. To je, očigledno, zbog neravnomjerne raspodjele toksina u prehrambenom proizvodu, kao i individualne osjetljivosti oboljelih.

U velikoj većini slučajeva B. počinje akutno. Simptomi se često mogu manifestirati u obliku tri: glavne opcije: s prevladavanjem dispeptičkih poremećaja, poremećaja vida ili respiratorne funkcije. U prvoj varijanti bolest počinje osjećajem mučnine, brzo se pridružuje i povraćanje, koje može biti samo kod početni period bolest. Neki pacijenti primjećuju grčeve, ponekad intenzivne bolove u epigastričnoj regiji. Često se javlja osjećaj punoće i punoće želuca. Istovremeno se razvija suhoća sluznice usne šupljine, a pacijenti osjećaju intenzivnu žeđ. Karakterizira ga izražena nadutost, zatvor, koji, kao posljedica crijevne pareze, može biti vrlo uporan. Međutim, u početnom periodu bolesti često se opaža labavost stolice, dok izmet ne sadrži patološke nečistoće.

To rani znaci B. je uključivao i simptome poremećaja gutanja, koji se u nekim slučajevima razvijaju već u prvim satima bolesti. Pacijenti se žale na prisustvo „knedle“ u grlu, bol pri gutanju, osjećaj „grebanja“ iza grudne kosti, a nešto kasnije se javlja i gušenje.

Ako bolest počinje smetnjama vida, tada se pacijenti često obraćaju oftalmologu. U početku se žale na "maglu", "mrežu", "muhe" pred očima. Čitanje običnog fonta je otežano ili nemoguće (akomodacijska pareza), rjeđe se uočava udvostručenje objekata.

Kod pojedinih pacijenata razvija se "akutna dalekovidnost", rubovi se mogu korigirati odgovarajućim sočivima. Poremećaji vida u početnom periodu B. često se javljaju bez dispeptičkih simptoma, što otežava dijagnozu. Temeljnim pregledom pacijenta, pored raznih poremećaja vida, može se ustanoviti prisustvo suvih usta, žeđi, promjena u tembru glasa (promuklost, „grub“ glas), kao i simptomi opća intoksikacija: glavobolja, vrtoglavica, opšta slabost mišića, umor, nesanica. Svi ovi simptomi u početnom periodu nisu uvijek dovoljno jasno izraženi ili mogu izostati tijekom pregleda zbog oštre dominacije očnih simptoma. Ako dispeptična varijanta početnih manifestacija B. traje nekoliko sati, poremećaji vida bez drugih karakterističnih manifestacija bolesti mogu trajati nekoliko dana.

Najteži tok B. javlja se kada početni razvoj respiratorni poremećaji. Pacijenti u punom zdravlju počinju osjećati nedostatak zraka, prave neočekivane pauze tokom razgovora. Ponekad se ove pauze javljaju između pojedinih slogova. Javlja se osjećaj stezanja ili težine u grudima, u nekim slučajevima i bolovi prsa. Disanje obično nije ubrzano, već površno. Istovremeno s respiratornim poremećajima mijenja se i glas, koji postaje ne samo promukao, već dobiva i nazalni ton. Povreda čina gutanja brzo se pridružuje respiratornim poremećajima. Uvijek su izraženi simptomi opće intoksikacije: glavobolja, jaka slabost mišića, vrtoglavica itd.

Nakon početnih manifestacija B., bolest ulazi u fazu najvećeg razvoja simptoma. Subjektivno, pacijenti primjećuju "maglu", "mrežu", "treperenje" ili "muhe" pred očima. Konture objekata postaju mutne. Kada pokušate da pročitate slova i redovi se "razbacuju". Ovi simptomi se razvijaju kao rezultat djelovanja toksina na cilijarni mišić, što dovodi do njegovog opuštanja, što dovodi do paralize akomodacije. Često se opaža udvostručavanje predmeta, posebno pri okretanju očnih jabučica u stranu. U teškim slučajevima dolazi do paralize jednog ili više kranijalnih živaca koji inerviraju mišiće oka, oftalmoplegija (vidi).

Gotovo uvijek postoji izraženo i uporno proširenje zenica - midrijaza. Ovaj simptom se pojavljuje jedan od prvih i traje najduže. Često postoji nejednakost učenika - anizokorija (vidi). Reakcija zjenica na svjetlost je naglo smanjena ili potpuno odsutna. Ponekad pacijenti nisu u stanju razlikovati obrise objekata i percipiraju samo svjetlosne podražaje. Često se opaža ptoza (vidi), često bilateralna, ali stepen spuštanja gornjeg kapka može dominirati na bilo kojoj strani. Kod težeg toka B. oči mogu biti potpuno zatvorene, a da bi ih otvorili, bolesnici su prisiljeni rukama podići gornji kapak.

Djelovanje botulinum toksina proteže se na okulomotorne i abducentne živce, dolazi do kršenja kretanja očnih jabučica, postoji osjećaj udvostručavanja predmeta. Obično se ranije javlja pareza lateralnog pravog mišića oka, što dovodi do konvergentnog strabizma. U rijetkim slučajevima, kada prevladava pareza okulomotornog živca, javlja se divergentni strobizam. Kod teškog B. uočava se istovremeno trajno oštećenje svih okulomotornih mišića, što dovodi do potpune nepokretnosti očnih jabučica. Kod jednog broja pacijenata može se ustanoviti prisustvo nistagmusa, češće vertikalnog.

Poremećaji gutanja su karakteristični simptomi, ali su rjeđi od očnih simptoma. Pacijenti se prvo žale na poteškoće i bol prilikom gutanja. U budućnosti osećaju „kvrdlu“ u grlu i, konačno, narušava se čin gutanja. Pridruženi poremećaj pokreta jezika pogoršava čin gutanja, mijenja artikulaciju. U teškim slučajevima B., pacijent nije u stanju pomjeriti vrh jezika preko ruba zuba. Razvoj pareze epiglotisa dovodi do nepotpunog zatvaranja respiratornog trakta kada se proguta, što stvara mogućnost da hrana uđe u respiratorni trakt, uzrokujući gušenje, kašalj i gušenje.

Kod pacijenata s poremećajem u činu gutanja, postoji nedostatak faringealnog refleksa, mogu se uočiti pojave pareze mekog nepca. U teškim slučajevima, palatinska zavjesa je nepomična, visi na korijenu jezika. Kada pokušate da progutate vodu, ona vam iscuri kroz nos.

U prvim satima bolesti dolazi do smanjenja boje glasa i promuklosti, što je povezano sa smanjenjem salivacije i suhoće glasnih žica. Kako se razvija pareza, ovim simptomima se pridružuju nejasna artikulacija („kvržice u ustima”) i nazalnost, a razvojem pareze glasnih žica može doći do potpune afonije.

Rjeđe, pacijenti sa B. imaju mlohava pareza mišića lica zbog oštećenja VII para kranijalnih živaca. Od prvih sati kod pacijenata se razvija oštra mijastenija, rubovi uznemiruju pacijenta tijekom cijelog perioda intoksikacije. Međutim, kod B. nikada ne dolazi do oštećenja osjetljive sfere, kao ni do gubitka svijesti.

Kod teške B. karakterističan je razvoj pareze respiratornih mišića, koji se izražava u odsustvu dijafragmalnog disanja, oštrom ograničenju pokretljivosti interkostalnih mišića i nestanku refleksa kašlja. Poremećaj i respiratorni zastoj jedan su od glavnih uzroka smrti kod B. Respiratorna insuficijencija ima posebno težak tok i zbog toga što, uz parezu respiratornih mišića, pacijenti, po pravilu, imaju upalne procese u plućima. Na početku bolesti pacijenti primjećuju "nedostatak" zraka, osjećaj stezanja i težine u grudima, brzo se umaraju tokom razgovora ili prave neočekivane pauze kako bi duboko udahnuli. Brzina disanja može dostići 30-40 u 1 min. patološke vrste disanje.

Kardiovaskularni sistem pati drugi put, na osnovu intoksikacije, sa težim tokom bolesti (tahikardija, prigušeni tonovi srca, ponekad širenje granica relativna glupost srce, sistolni šum na njegovom vrhu, znaci miokardijalne distrofije prema elektrokardiografiji). Arterijski pritisak, i sistolni i dijastolni, ima određenu tendenciju povećanja, što je povezano sa vazokonstriktivnim dejstvom toksina.

Kod B., tjelesna temperatura ne raste, ali u teškim oblicima bolesti moguća je hipertermija, npr. početnim fazama, i više od toga kasni period. Međutim, povećanje tjelesne temperature kod bolesnika s B. u kasnom periodu bolesti češće je posljedica dodavanja pneumonije.

Kod nekih pacijenata bilježi se oligurija, smanjenje specifične težine urina i albuminurija. U sedimentu se nalaze hijalinski i zrnasti odljevci, eritrociti. Nivo rezidualnog dušika u krvi može premašiti normalne vrijednosti.

U krvi se češće bilježi umjerena (ponekad značajna) leukocitoza s neutrofilijom i pojava mladih oblika neutrofila (u teškim oblicima bolesti).

Komplikacije

S kršenjem gutanja - aspiracijska upala pluća. Rekonvalescenti mogu imati miozitis, praćen bolom i poteškoćama u kretanju, te infektivni miokarditis. Može se razviti miopija.

Dijagnoza

Dijagnoza se postavlja na osnovu podataka iz anamneze, kliničkih i laboratorijskih studija.

Laboratorijska dijagnostika zasniva se na detekciji botulinum toksina ili patogena B.-a u materijalima uzetim od pacijenta (krv, povraćanje, ispiranje želuca, izmet itd.), kao i u prehrambenim proizvodima koji su izazvali trovanje. Važno je utvrditi ne samo prisustvo toksina ili mikroba, već i njegovu vrstu kako bi se potvrdila klinička dijagnoza i propisao ispravan tretman.

Potrebno je uzeti krv prije uvođenja pacijentu da legne. serum. Konzervansi se ne smiju dodavati uzorcima uzetim za laboratorijska istraživanja, kao ni prehrambenim proizvodima. Materijali se moraju čuvati u frižideru.

Uzorci primljeni u laboratoriju se ispituju istovremeno u dva smjera: dvije trećine prethodno pripremljenog uzorka (dobi se filtrat ili centrifugat) namijenjeno je detekciji botulinum toksina u reakciji neutralizacije, jedna trećina je za usjeve u cilju izolacije. botulinum mikrobi.

Za detekciju toksina za svaki uzorak se uzimaju 4 miša težine 16-18 g. Zbog činjenice da u ispitivanom materijalu može biti jedan od šest vrsta botulinum toksina, mora se izvršiti preliminarna reakcija sa mješavinom anti- botulinum dijagnostičkih seruma svih vrsta. Medicinski anti-botulinum serumi se ne smiju koristiti u dijagnostičke svrhe. Iz svakog uzorka za ispitivanje, jednaka količina (1,5-2,4 ml) filtrata ili centrifugata se sipa u dvije epruvete. U jednu (prvu) epruvetu doda se 0,6 ml fiziološkog rastvora (kontrola), u drugu (pokus) 0,6 ml mešavine monovalentnih seruma, nakon čega se sadržaj prve epruvete ubrizga intraperitonealno ili u venu u dva bela miša ili u venu u zapremini od 0,7-1,0 ml, ista zapremina druge epruvete (eksperiment) se daje drugom paru belih miševa. Ispitni materijal iz svake epruvete treba ubrizgati različitim špricama.

Životinje se posmatraju 4 dana, međutim, ako se miševi razbole ili uginu prije tog perioda, odmah se daje reakcija neutralizacije monovalentnim dijagnostičkim serumima.

U prisustvu botulinum toksina u uzorku dva miša uginu, uveden je krimski filtrat bez seruma, preostala dva ostaju živa. Obično je slika bolesti i uginuća miševa vrlo karakteristična: pojavljuje se ubrzano disanje, stanje potpune relaksacije mišića, povlačenje mišića trbušne stijenke („osinji struk“ - slika 10), paraliza i konvulzije prije smrt.

U slučaju smrti sva 4 miša, reakciju neutralizacije treba ponoviti s ekstraktima razrijeđenim 5, 10, 20, 100 puta. Kada se ekstrakti razrijede, strana mikroflora gubi sposobnost ubijanja miševa, a botulinum toksin, koji obično ima veću biološku aktivnost, uzrokuje smrt miševa kada se filtrati razrijede.

Ako se botulinum toksin otkrije u reakciji s polivalentnim serumom, odmah se provodi detaljna reakcija neutralizacije kako bi se odredio tip toksina dijagnostičkim serumima specifičnim za tip.

Posebnu pažnju treba obratiti na formulaciju reakcije neutralizacije sa serumom krvi pacijenta, budući da je ona obično mala. Potrebno je pažljivo odvojiti serum od krvnog ugruška i odmah izvršiti detaljnu reakciju neutralizacije monovalentnim botulinum serumima tipova A, B, E (drugi tipovi B su vrlo rijetki).

Po primitku pozitivna reakcija neutralizacije dijagnostičkim botulinum serumima, daje se zaključak o prisutnosti botulinum toksina u ispitivanom materijalu i ukazuje se na njegovu vrstu.

Često se formulacija reakcije neutralizacije sa polivalentnim i monovalentnim serumima mora ponoviti zbog nespecifične toksičnosti strane mikroflore, koja se obično nalazi u povraćanju, izmetu, tako da je u najboljem slučaju odgovor na prisustvo toksina u uzorak se može dati 2-3. dana, a o njegovoj tipskoj pripadnosti - 3.-5. dana od početka studije.

Ako je nemoguće otkriti toksin u ispitivanim materijalima, provode se studije za otkrivanje patogena B.

U tu svrhu se 3-5 ml pripremljenog materijala inokulira na tečne hranjive podloge. Za primarne inokulacije bolje je koristiti medij kazein-gljiva ili kazeinsko-kiseli medij, Hottinger bujon ili podlogu tipa Tarozzi. Potrebno je da pH bude u rasponu od 7,2-7,4. U mesnoj podlozi obavezno je i mljeveno meso ili meso džigerice, a u kazeinskoj podlozi kuhano proso i vata. Epruveta ili bočica treba da bude najmanje do pola ispunjena hranljivim medijumom. Prije sjetve u podlogu se dodaje 0,5% glukoze.

Inokulacije se obavljaju u srednje velikim epruvetama ili u bočicama kapaciteta 100-200 ml. Odozgo se podloga prelije slojem vazelinskog ulja debljine 0,5 cm. Posebno treba imati na umu da je početni inokulum bolje inokulirati u velikom volumenu podloge (70-150 ml) tako da tečnost kulture primarna inokulacija je dovoljna za sve studije. Naknadne subkulture testnih uzoraka iz primarne inokulacije u istu tečnu hranljivu podlogu možda neće dovesti do stvaranja toksina u podlozi. Sjetvu treba obaviti u četiri boce, od kojih se dvije zagrijavaju na t°80° 20 minuta. Druge dvije bočice se ne zagrijavaju nakon sjetve. Sve bočice se stavljaju u termostat na t° 28 i 35° (u svakom termostatu jedna grijana, jedna nezagrijana).

Ako su aktivatori B. u proučavanom materijalu uglavnom u vegetativnom obliku, tada će rast usjeva biti hl. arr. u nezagrejanim bočicama. U istom slučaju, ako materijal sadrži forme spora, rast će biti u zagrijanim bočicama i u nekim slučajevima može odmah dovesti do izolacije čiste kulture iz takvog sjemena.

Nakon 48 sati. od početka rasta uzimaju se uzorci tečnosti kulture (po 10-15 ml) iz svih bočica u skladu sa sterilnošću i podvrgavaju se ispitivanju. Sa tečnošću kulture stavlja se reakcija neutralizacije sa polivalentnim anti-botulinum serumom. Po dobijanju pozitivnih rezultata, reakcija neutralizacije se izvodi sa svakim tip-specifičnim serumom posebno. Ako se nakon dva dana ne otkrije rast u bočicama, onda je potrebno nastaviti inkubaciju u termostatu, a ispitivanje treba provesti 4-6-10 dana. Nakon detekcije štapića tipičnih po morfologiji za Cl. botulinum, kao i botulinum toksina, daje se zaključak o kontaminaciji ispitivanog materijala patogenom B. Izolacija čiste kulture u ovom slučaju nije obavezna.

Ako se u usjevima nalaze mikrobi, morfološki slični Cl. botulinum, a toksina nema, tečnost kulture treba aktivirati pankreatinom ili tripsinom.

Odlučujuće za odgovor o kontaminaciji ispitivanog materijala patogenom B. i njegovom tipu su ove reakcije neutralizacije. U sumnjivim slučajevima izoluje se čista kultura (iz visoke kolone agara, iz inokulacija na Petrijevim zdjelicama). Pojedinačne kolonije morfološki karakteristične za Cl. botulinum se poseju na tečne podloge i pregledaju nakon 3-5 dana. rast u reakciji neutralizacije sa tip-specifičnim anti-botulinum serumima.

Neutralizacijski test je pouzdana, vrlo specifična i prilično osjetljiva metoda za otkrivanje botulinum toksina.

Ostale predložene metode laboratorijske dijagnostike B. (reakcija pasivne hemaglutinacije, metoda izračunavanja fagocitnog indeksa, luminiscentni serumi) su isključivo eksperimentalne i zbog nedovoljne specifičnosti se ne koriste široko.

Diferencijalna dijagnoza

B. treba razlikovati od trovanja kokošijom. Za razliku od B., prvi znaci trovanja javljaju se nakon 1-5 sati. nakon jedenja biljke. Javlja se slabost, pospanost, vrtoglavica, glavobolja. Može doći do mučnine, rijetko povraćanja. Koža lica i trupa je hiperemična, ponekad se nalazi grimizni osip. Sličnost sa B. leži u stalnom širenju zjenica i njihovom odsustvu reakcije na svjetlost, suhoći sluznice usta i poremećenoj salivaciji. Naravno, uočavaju se psihički poremećaji. Bolesnici su obično vrlo nemirni, njihovi pokreti nisu koordinirani, postoji neadekvatna reakcija na okolne pojave, delirij, često sa značajnim halucinacijama. Mogu se javiti kloničko-tonične konvulzije. Primjećuje se tahikardija, poremećaj ritma, sniženje arterijskog tlaka, gluvoća srčanih tonova. S razvojem kome javlja se oštro bljedilo kože, bradikardija, otežano disanje, poremećaj respiratornog ritma. Smrt dolazi od zastoja disanja.

Trovanje metil alkoholom također dovodi do razvoja niza simptoma sličnih B. Zapažaju se opšta slabost, zujanje u ušima, mučnina, povraćanje, a ponekad i bol u trbuhu. Zenice su proširene i slabo reaguju na svetlost. Poremećaji vida su dvotalasnog karaktera. Prvo, pacijenti primjećuju bljesak pred očima, smanjenu vidnu oštrinu, "maglu", udvostručavanje predmeta; tada može doći do određenog poboljšanja vida, nakon čega se razvija sljepoća, koja se ne opaža kod B. U teškim slučajevima trovanja primjećuju se halucinacije, strah, konvulzije, slabljenje mišićne snage, gubitak svijesti, pad kardiovaskularne aktivnosti, ali pareza nije primećena.

U diferencijalnoj dijagnozi sa trovanjem otrovnim pečurkama treba imati u vidu da se B. najčešće javlja prilikom konzumiranja konzerviranih gljiva, dok se trovanje otrovnim pečurkama češće javlja kada se konzumiraju svježe pripremljene gljive.

U slučaju trovanja muharom, povezanog prvenstveno s djelovanjem muskarina, koji djeluje slično atropinu, muskaridina i pilttoksina, dolazi do jakog lučenja sline, znojenja, obilne dijareje, grčeva u trbuhu, usporavanja pulsa, blijedenja lica. , uporno širenje zenica (ovo poslednje podseća na B.). U težim slučajevima primjećuju se halucinacije (često vizualne), crvenilo kože lica i konvulzije.

Rani početak respiratornih poremećaja kod jednog broja pacijenata sa poliomijelitisom takođe se može pogrešno smatrati B. Za razliku od B., kod poliomijelitisa dolazi do obilnog lučenja sluzi i salivacije.

Za diferencijalnu dijagnozu s difterijom važne su promjene u ždrijelu - napadi difterije. Neurološki poremećaji kod difterije obično nastaju nakon upale grla, povišene temperature, otoka potkožnog tkiva. Paraliza se često javlja istovremeno s razvojem miokarditisa.

Prognoza kod B. uvek težak. Aktivna i samo rana seroterapija i korištenje umjetnog disanja mogu spasiti živote čak i onim pacijentima koji su prethodno bili osuđeni na propast. Oporavak je spor, obično više od mjesec dana. Efikasnost se vraća još duže; miopija, koja je nastala u akutnom periodu bolesti, također traje dugo vremena.

Tretman

Pacijenti podliježu bezuslovnoj hospitalizaciji. Hitno je potrebno izvršiti ispiranje želuca i čišćenje crijeva. Treba imati na umu da je ispiranje želuca sa B. prilično teško, jer zbog odsustva faringealnog refleksa kod pacijenta i prisutnosti pareze epiglotisa, sonda može ući u respiratorni trakt. Prije pranja, morate se uvjeriti da je sonda u želucu.

Kako bi se neutralizirao slobodno cirkulirajući botulinum toksin u krvi, potrebno je koristiti anti-botulinum serum. Njihovo uvođenje je najefikasnije u prvim danima bolesti, jer se najveća koncentracija toksina u krvi uočava 2.-3. bolesti (L. M. Shvedov, 1960).

Međutim, imajući u vidu mogućnost dugotrajnog ulaska toksina u krv pacijenta, možemo pretpostaviti da se to može položiti. efekat serumske terapije će biti izražen u kasnijim stadijumima bolesti. U slučajevima kada je vrsta toksina koji je izazvao bolest još uvijek nepoznata, neophodno je uvođenje sve četiri vrste seruma (A, B, C, E). Nakon utvrđivanja vrste patogena, daje se serum odgovarajućeg tipa. Treba imati na umu da je moguće trovanje s nekoliko vrsta toksina. Serum se može primijeniti i intravenozno i ​​intramuskularno. Prvobitno se uvode serum tip A - 10.000 ME, tip B - 5.000 ME, tip C - 10.000 ME, tip E - 10.000 ME. Međutim, često ova količina nije dovoljna za potpunu neutralizaciju toksina. Naknadno uvođenje seruma je moguće, doze rez će ovisiti o kliničkom učinku. Obično se za liječenje teških oblika B. troši 50.000-60.000 IU tipova A, C, E i 25.000-30.000 IU tipa B za cijeli tok liječenja. Međutim, ove doze se mogu i povećati.

Opći kompleks liječenja bolesnika sa B. uključuje nespecifičnu terapiju detoksikacije koja se sastoji od uvođenja fizioloških otopina, glukoze i krvnih nadomjestaka. Posebno povoljno dejstvo imaju rastvori male molekularne mase - hemodez, polivinilpirolidon, kao i krvna plazma.

Uzimajući u obzir mogućnost vegetacije aktivatora iz spora u go.-kiš. puta pacijenta, mnogi kliničari preporučuju upotrebu hloramfenikola ili tetraciklinskih lijekova. Trajanje tretmana je 7-8 dana. Uz korištenje antibiotika, smanjila se učestalost "pogoršanja" bolesti.

Kako bi se smanjilo vrijeme oporavka kod poremećaja nervnog sistema, indicirano je imenovanje ATP-a u obliku 1% otopine od 2 ml tri puta dnevno u trajanju od 7 do 10 dana.

Poraz kardiovaskularnog sistema zahtijeva upotrebu kamfora, kordiamina, srčanih glikozida.

Pacijent mora primiti da legne. doze vitamina, posebno iz grupa C i B.

Posebno mjesto u liječenju pacijenata zauzimaju pitanja suzbijanja respiratornih poremećaja. Opravdana je upotreba umjetnog aparata za disanje. Respiratorna reanimacija kod B. sastoji se od otklanjanja opstrukcije disajnih puteva i stvaranja adekvatne plućne ventilacije pomoću respiratora.

Indikacije za nametanje traheostomije i endotrahealne umjetne ventilacije u B. su pareza mišića ždrijela, grkljana i jezika sa tegobama na kratkoću daha, pareza respiratornih mišića sa smanjenjem vitalnog kapaciteta pluća do 30%, slabljenje refleksa kašlja, atelektaza i upala u plućima. Preporučljivo je koristiti uređaje koji su podesivi po volumenu sa nezavisnom brzinom disanja.

Unatoč smanjenju salivacije, pacijent mora povremeno usisati sluz koja se nakuplja u gornjim dišnim putevima.

Sa razvojem upale pluća, pacijentima je potrebna odgovarajuća antibiotska terapija.

U fazi kasne rekonvalescencije, fizioterapeutski postupci se mogu uspješno koristiti za liječenje pareza.

Prevencija

Sa unapređenjem tehnologije prerade hrane pri optimalnim temperaturnim uslovima, B. među ljudima, povezan sa upotrebom industrijskih proizvoda za hranu, praktično nestaje. Glavno mjesto kao uzročnik bolesti u mnogim zemljama svijeta iu SSSR-u zauzimaju različiti domaći prehrambeni proizvodi (konzervirani, kiseli, dimljeni, sušeni, itd.). Međutim, u SAD-u je 1963. godine 25 ljudi oboljelo od komercijalnih proizvoda, od kojih je 9 umrlo. U Japanu se B. povezuje s upotrebom nacionalnog jela "izushi", sastavni dio to-rogo je sirova riba, Eskimi sa Aljaske imaju jela od mesa bijelog kita, Indijanci na pacifičkoj obali Sjeverne Amerike imaju kavijar od lososa. Prema podacima od istorijskog značaja, do 1964. godine u Sjedinjenim Državama glavni izvor B. je bilo loše sterilisano ili kiselo povrće i voće koje je sadržavalo nedovoljan procenat kiseline. U Francuskoj, Danskoj, Norveškoj, Švedskoj, Jugoslaviji i drugim evropskim zemljama, B. je bio povezan sa Ch. arr. sa šunkom i domaćom ribom.

Poznavanje optimalnih uslova za klijanje spora, njihove otpornosti na temperaturu, kao i uslova stvaranja toksina, omogućavaju jasno definisanje glavnih zahteva za tehnološku obradu prehrambenih proizvoda, isključujući mogućnost akumulacije botulinum toksina u njima. . Ovi zahtjevi uključuju: zaštitu proizvoda od kontaminacije sporama patogena B., toplinsku obradu proizvoda koja osigurava odumiranje spora (sterilizacija), vegetativnih stanica i uništavanje toksina, te isključenje mogućnosti klijanja spora i toksina. formiranje u gotovom proizvodu.

Potreba za maksimalnom zaštitom proizvoda od ulaska spora u njih ili njihovim obaveznim uklanjanjem tokom čišćenja i pranja tekućom vodom (povrće, voće, gljive) određena je širokom kontaminacijom predmeta spoljašnje okruženje ovog patogena. Što se tiče mesnih i ribljih proizvoda, oslobađanje od spora se provodi pažljivo i brzo uklanjanje crijeva prilikom rezanja nakon klanja trupova i ribe, posebno crvene, neposredno nakon ulova.

U tom slučaju je neophodno odmah ohladiti proizvode nakon čišćenja i pranja, jer daljnje tehnološke radnje, kao što su konzerviranje, soljenje, dimljenje i kiseljenje, ne mogu uništiti toksin koji nastaje tijekom skladištenja proizvoda u toplini, kao i tvari. koji se koriste za konzerviranje ili kiseljenje (sol, šećer, kiseline) mogu samo odgoditi daljnje stvaranje toksina.

Ispravan temperaturni režim tokom obrade proizvoda je od izuzetnog značaja. Konvencionalna termička obrada proizvoda namijenjenih direktnoj upotrebi može biti efikasna samo ako se prodaju u prvim satima, jer, dok uništava toksin u normalnim uvjetima zagrijavanja do 100°, ne narušava vitalnost spora. Uz postepeno hlađenje i dugotrajno skladištenje na sobnoj temperaturi, toksin se može akumulirati u takvim proizvodima zbog spora koje klijaju u vegetativne stanice. Jasno je da je ponovljena toplinska obrada takvih proizvoda prije konzumacije obavezna.

Sterilizacija proizvoda treba da se vrši samo u autoklavu gde je to potrebno visok krvni pritisak omogućava vam stvaranje temperature od 120 °, što ima štetan učinak ne samo na vegetativne stanice i njihove toksine, već i na spore. Takvi industrijski proizvodi su bezopasni čak i ako se čuvaju duže vrijeme na sobnoj temperaturi. Ova odredba se ne može odnositi na domaću konzerviranu hranu, jer temperaturni učinak ne prelazi 100°C, a zatvaranje konzervi stvara optimalne anaerobne uvjete za klijanje preostalih spora, vegetacije i stvaranja toksina u supstratu za hranu. Stoga se kod kuće, u nedostatku autoklava, proizvodi od mesa i ribe, koji su dobar hranljivi medij, ne mogu čuvati u hermetičkim teglama. Ova odredba u potpunosti se odnosi na očuvanje gljiva i povrća koje se ne može u potpunosti osloboditi spora patogena B. Dozvoljeno je pripremati takve proizvode za budućnost samo kiseljenjem ili soljenjem uz dodatak dovoljne količine kiseline i soli, te uvek u kontejneru otvorenom za vazduh.

Vanjska manifestacija kontaminacije konzervirane hrane sporama patogena B. i njihovog razvoja u supstratu konzervirane hrane je stvaranje plina, što dovodi do bombardiranja posude (oticanje poklopaca). Istovremeno, konzervirana hrana omekšava, mijenja se njihova struktura i pojavljuje se neugodan miris. Međutim, opisani su slučajevi kada je botulinum toksin pronađen u očigledno nepromijenjenoj konzerviranoj hrani.

U cilju prevencije bolesti B., tehnološki procesi u prehrambenim preduzećima u kojima se proizvode konzervirani proizvodi striktno su regulisani odgovarajućim uputstvima, od kojih su odstupanja nedopustiva.

U pogledu vrste sirovina ili proizvoda, postoje strogi zahtjevi, od mogućnosti ispunjenja kojih zavisi spremnost datog preduzeća da proizvodi visokokvalitetne proizvode. Takvi zahtjevi postoje za proizvodnju mliječnih proizvoda, za preradu povrća, voća i sirovina od zelja, za preradu gljiva, za pripremu raznih marinada, začina, začina i drugih tvari koje se koriste za konzerviranje. Strogi zahtjevi se postavljaju i za limenke, njihovu pripremu za punjenje i kontrolu njihove nepropusnosti. Garancija oslobađanja od strane preduzeća kvalitetne proizvodnje su: dobro dostojanstvo. stanje opreme postrojenja, korištenje vode za piće bez anaerobnih mikroorganizama u tehnološke svrhe, temeljito pranje sirovina i prerada pomoćnih materijala, poštovanje režima prerade koji isključuju razvoj patogena B. u proizvodima, uspostavljanje regulisana kiselost proizvoda, upotreba samo zatvorenih kontejnera uz stalno praćenje rada zavarivača, upotreba načina sterilizacije koji garantuju potpunu neutralizaciju konzervirane hrane (uništavanje toksina, odumiranje vegetativnih ćelija i spora).

Izuzetno efikasno sredstvo specifične profilakse B. kod ljudi je vakcinacija botulinum polianatoksinom. S obzirom na egzotičnu prirodu incidencije B. u SSSR-u, ovaj lijek nije široko korišten i koristi se samo u slučajevima zaštite laboratorijskog osoblja koje provodi istraživanja s patogenom B..

Botulizam u forenzičkom smislu

Za stručnu dijagnozu trovanja botulinum toksinom potrebni su istražni podaci o uslovima za nastanak trovanja (priroda konzumirane hrane, broj žrtava, uočeni simptomi, medicinska dokumentacija za pomoć). Sudski medicinski vještak treba imati na umu karakteristične karakteristike klinike za trovanje. Prilikom pregleda leša, promjene specifične za B. nisu utvrđene; obično se posmatra slika brze smrti. Obavezna je histološka pretraga, uz Krom slika poremećaja cirkulacije, paretičnog stanja kapilara i perivaskularnih krvarenja u c. n. sa., degenerativne promjene nervne ćelije (gl. arr. u jezgrima okulomotornih nerava, u produženoj moždini i kvadrigemini). Može postojati i paretično stanje malih žila u zidu tankog i debelog crijeva, u plućima i miokardu. Osim toga, na sudu.-on. studiju usmjeravaju organi (prema općim pravilima), a za bakteriološke - krv, prehrambene mase, ispiranja, urin, preostali prehrambeni proizvodi.

Konačan zaključak o trovanju botulinum toksinom sud.-med. vještak sastavlja na osnovu svih primljenih podataka.

Bibliografija: Burgasov P. N. i Rumjancev G. N. Evolucija botulizma, Zhurn, mikr., epid, and immuno., br. 9, str. 18, broj 11, str. 79, 1967, br. 1, str. 73, broj 2, str. 83, br.4, str. 3, 1968; Kravchenko A. T. i Shishulina JI. M. Rasprostranjenost uzročnika botulizma i tetanusa na teritoriji SSSR-a, M., 1970, bibliogr.; Matveev K. I. Botulizam, M., 1959, bibliogr.; Melnikov V. N. i Melnikov N. I. Anaerobne infekcije, With. 171, M., 1973; V o g o f D. A. a. D a s Gupta B. R. Botulinum toksin, u knjizi: Microbialtoxins, ur. od S. Kadis a. o., v. 11-A, str. 1, N. Y.-L., 1971, bibliogr.; Botulizam, ur. od K. H. Lewis a. K. Cassel, Cincinnati, 1964; Botulizam, ur. autor M. Ingram a. T. A. Roberts, L., 1967; Burke G. S. Pojava bacillus botulinus u prirodi, J. Bact., v. 4, str. 541, 1919; Dolman C. E. Ljudski botulizam u Kanadi, Kanadi. med. Ass. J., v. 68, str. 538, 1953; Meyer K. F. Status botulizma kao svjetskog zdravlja, Bull. Wld Hlth Org., v. 15, str. 281, 1956.

P. H. Burgasov, V. I. Pokrovsky, S. G. Pak; T. I. Bulatova (etiol., laboratorijska dijagnostika), V. K. Derboglav (sudska medicina).

Botulizam je teški oblik intoksikacije hranom koji se razvija kao rezultat konzumiranja hrane kontaminirane toksinom Cl.perfringens, koju karakterizira specifična lezija CNS-a.

Istorija:

dugo poznat pod imenom “allantiazis” (od grčkog “kobasica”), “ihtioizam” (od grčkog “riba”), botulus (od latinskog “kobasica”). Kerner je 1815. opisao 230 slučajeva trovanja, 1896. belgijski doktor E. Van Ermengem izolovao je patogen iz ostataka šunke, 1914. ruski doktor Konstansov izolovao je iz jesetra. Trenutno se trovanje ne povezuje s upotrebom kobasica, već s konzerviranom hranom.

Taksonomija: porodica Bacillaceae, rod: Clostridium, vrsta CL.botulinum (od latinskog botulus - kobasica).

Morfologija.

Polimorfni štapići sa zaobljenim krajevima, dužine 4-10 mikrona, širine 0,3 - 1,0 mikrona, slabo pokretni (peritrihozni), formiraju terminalno ili subterminalno locirane spore, dok uzročnici podsjećaju na teniski reket, nema kapsule.

Tinktorijalna svojstva: gram-pozitivne, prema Orzeszko metodi, spore su obojene crvenom bojom, a vegetativni oblici su plavi.

kulturna dobra.

Strogi anaerobi. Rastu na kazeinskim ili mesnim podlogama, u tečne kazeinske podloge dodaje se kuvano proso ili vata, a u mesne podloge dodaje se kaša od mesa ili jetre. Na krvnom agaru sa glukozom, nakon 24-46 sati, formiraju se velike okrugle kolonije, okružene zonom hemolize (tip A). Boja kolonije je blago smeđa ili sivkasto-mutna. Kod tetanusa, agar može biti u obliku dva oblika: S-forme u obliku pahuljica sa gušćim centrom i R-forme lentikularne. U tečnim medijima - zamućenost.

Optimalni pH - 7,2 - 7,4; temperatura uzgoja 35 °C za serovare A, B, C, D, F; 28 °C za serovare E i neproteolitičke sojeve B i F; 37 °C za serovar G; vrijeme uzgoja - 24-48 sati.

biohemijska svojstva.

Saharolitička svojstva izražena su u tipovima A i B (razlažu glukozu, maltozu, glicerin, fruktozu, levulozu sa stvaranjem kiseline i gasa). Tip C slabo razlaže šećere ili, poput serovara G, nema saharolitička svojstva, tipovi D i E zauzimaju međupoziciju. Svi sojevi tipova A i B imaju snažna proteolitička svojstva: hidroliziraju kazein i formiraju sumporovodik, komadi džigerice ili mljevenog mesa se tope u Kitta-Tarozzi mediju. Tipovi C, D, E nemaju takva svojstva.

Grupa 1 - razgrađuje glukozu, maltozu; proteolitička aktivnost u obliku želatinaze; aktivnost lipaze na podlozi sa bjelanjkom;

grupa 2 - imaju saharolitička svojstva;

grupa 3 - lipolitička aktivnost i ukapljivanje želatine;

Grupa 4 - hidroliza želatine, ne pokazuju saharolitičku aktivnost.

Naznačiti da se diferencijacija patogena prema biohemijskoj aktivnosti rijetko koristi.

Antigenska struktura.

Imaju O i H antigene. Međutim, oni ne identificiraju patogena. Prema antigenskoj specifičnosti toksina razlikuje se 8 serovara: A, B, C 1, C 2, E, F, G. Vrsta toksina se određuje u reakciji neutralizacije sa odgovarajućim antitoksičnim serumima.

faktori patogenosti.

a) egzotoksin (neurotoksin) - protein dobijen u kristalnom obliku (imajte na umu da je najmoćniji biološki otrov 3 puta jači od kalijum cijanida), nastao u anaerobnim uslovima na hranljivim podlogama, u raznim konzerviranim prehrambenim proizvodima, otporan na dejstvo proteolitičkih enzimi gastrointestinalnog trakta, imaju sposobnost hemaglutacije ljudskih, zečjih i ptičjih eritrocita; ima tropizam za nervnog tkiva(fiksira se na receptore sinaptičkih membrana i mijenja osjetljivost acetilkolinskog receptora na djelovanje medijatora). Toksin serovara E i B formira se kao protoksin i aktivira ga tripsin. Obratite pažnju da su za ljude najpatogeniji tipovi A, B, E (vrlo toksični E), manje patogeni - C, D, F.

Trenutno se vjeruje da je toksin endopeptidaze zavisne od Zn 2+. Tokom proteolize, razlaže se na 2 enzima povezana disulfidnom vezom (L i H lanci). Jedna podjedinica je odgovorna za adsorpciju na receptorima neurona, druga za prodiranje u njih endocitozom, inhibiciju oslobađanja acetilholina ovisnog o Ca 2+, kao rezultat toga, blokira se prijenos nervnog impulsa kroz sinapse, bulbarni nervni centri zahvaćeni su, poremećeni su hod i vid, dolazi do gušenja.

Vrste toksina razlikuju se po antigenskoj strukturi i molekularnoj težini; 12S-, 16S- i 19S toksini se razlikuju po brzini sedimentacije.

12S-toksini (M-toksini) se sastoje od molekula neurotoksina (H lanac) i netoksičnog i ne-hemaglutinirajućeg proteinskog molekula (L lanac);

16S-toksini (L-toksini) sastoje se od molekula neurotoksina i hemaglutininskog netoksičnog proteina;

19S-toksini (L L – toksini) velike molekularne težine, uključujući neurotoksin i netoksični protein sa hemaglutinirajućim svojstvima.

b) hemolizin (lizira ovčje eritrocite) i uzrokuje uginuće laboratorijskih životinja. Treba napomenuti da samo neki sojevi proizvode hemolizin.

otpor.

Vegetativni oblici su nestabilni (umiru na 80 °C u roku od 30 minuta);

Spore podnose ključanje 1-5 sati, na 105 ° C umiru nakon 2 sata, na 120 ° C - nakon 10-20 minuta. Imajte na umu da su u velikim komadima mesa, u teglama velikog kapaciteta, održivi nakon 15 minuta autoklaviranja na 120 °C; 10 % hlorovodonične kiseline ubija spore nakon 1 sata, 40% rastvor formalina - nakon jednog dana, otporan na kiselu sredinu želuca, spore prestaju da klijaju u 2% rastvoru sirćetne kiseline pri pH 3-4,5.

Botulinum toksin - kada se prokuva uništava se u roku od 15 minuta, otporan na sunčevu svjetlost, visoke koncentracije natrijum hlorida, smrzavanje, kiseline, pH ispod 7,0, na djelovanje proteolitičkih enzima gastrointestinalnog trakta; čuvati dugo u vodi, u konzerviranoj hrani - 6-8 mjeseci.

Uloga u patologiji: izazivaju botulizam.

Epidemiologija.

Prirodno stanište klostridija su crijeva biljojeda, ljudi, riba, rakova i mekušaca.

Načini infekcije (glavni) su prehrambeni, ali mogu prodrijeti kroz površinu rane. Imajte na umu da botulinum toksin može prodrijeti u netaknutu kožu i mukozne membrane. Bolesna osoba nije zarazna. Navedite da prisustvo samog patogena nije neophodno u konzerviranoj hrani. Imajte na umu da se botulinum toksin može locirati u proizvodu u obliku žarišta bez promjene njegovih organoleptičkih svojstava.

U zavisnosti od načina infekcije razlikuju se 4 oblika bolesti:

botulizam u hrani;

botulizam rana;

botulizam kod novorođenčadi;

nejasno klasifikovan botulizam (kod djece starije od 1 godine i odraslih, nije povezan s gutanjem i ulaskom kroz rane).

Patogeneza:

1. Prehrambeni botulizam - botulinum toksin, ulazeći u gastrointestinalni trakt, prodire u krv, utiče na nervni sistem, delujući na motoneurone kičmene moždine i jezgro produžene moždine, čvrsto se vezuje za nervne ćelije, izazivajući na prijenos uzbuđenja s živca na mišić, djelujući na krvne žile (konstrikcija s naknadnom parezom i povećanom krhkošću).

Period inkubacije: od nekoliko sati do 8-10 dana.

Klinika: bol u abdomenu, osjećaj težine u želucu, povraćanje, opća intoksikacija, moguće poremećaj stolice. Zatim se javljaju tegobe na zamagljen vid, dvoslike, otežano gutanje, gubitak glasa, zahvaćeni su III, IY, YI par kranijalnih nerava, glavobolja, paraliza respiratornog centra, smrt. Smrtnost 60-80%. Obratite pažnju na činjenicu da bolest može započeti pritužbama na "maglu" ili "mrežicu" pred očima, udvostručavanje predmeta.

2. Botulizam rana - treba napomenuti da su u posljednje vrijeme njegovi slučajevi sve češći, pogađa uglavnom dječji uzrast, uglavnom dječake.

3. Botulizam kod dojenčadi - u dobi od 3-20 sedmica kada u hranu djeteta dospiju spore ili vegetativni oblici (sa mlijekom, sa medom, posebno uz vještačko hranjenje). Simptomi su isti kao kod botulizma koji se prenosi hranom. Navesti da prilikom dijagnosticiranja bolesti kod novorođenčadi treba obratiti pažnju na slabost u kombinaciji s otežanim sisanjem i gutanjem + ptoza, midrijaza, oftalmoplegija. Bolest može završiti iznenadnom smrću (ne > 4%), takozvanom "smrtom u kolevci".

Postinfekcijski imunitet se ne formira, jer imunološka doza toksina premašuje smrtonosnu.

Mikrobiološka dijagnostika (vidi dijagram).

Obratite pažnju na otkrivanje botulinum toksina i patogena u ispitivanom materijalu (istraživanje se provodi istovremeno), toksin se utvrđuje u krvi, samo je patogen u izmetu, ostatak materijala se ispituje na toksin i bakterije.

Prevencija:

a) nespecifična - usklađenost sa tehnologijom prerade hrane (konzervirana hrana se autoklavira 30-40 minuta na temperaturi od 120°C), u proizvode se unose inhibitori: nitriti.

b) specifični - samo za hitne indikacije: osobama koje su jele kontaminiranu hranu, a još nisu oboljele, propisuje se polivalentni anti-botulinum serum i botulinum toksoid, zatim standardni anti-botulinum serumi kako se utvrđuje vrsta toksina.

Aktivna imunizacija se provodi za laboratorijske radnike, vojna lica i lica čija je profesija povezana sa kontaktom sa botulinum toksinom.

tretman:

a) nespecifične - ispiranje želuca, mjere detoksikacije, antibiotici: penicilin, tetraciklin;

b) specifični - hitno polivalentni antibotulinum (A, B, E) serum, intravenozno ili intramuskularno, nakon utvrđivanja vrste toksina - monoserum.

Radi student

410 Grupe medicinskog fakulteta

M. V. Zvonkov

Tver, 2011

Botulizam(od lat . botulus- kobasica: naziv je povezan s činjenicom da su prvi opisani slučajevi bolesti uzrokovani upotrebom krvi i jetrenih kobasica) - teška toksično-infektivna bolest koju karakterizira oštećenje nervnog sistema, uglavnom produžene moždine i kičmene moždine , koji se javlja s dominacijom oftalmoplegičnih i bulbarnih sindroma.

Razvija se kao rezultat gutanja hrane, vode ili aerosola koji sadrže botulinum toksin proizveden od bacila koji stvara spore Clostridium botulinum. Botulinum toksin utječe na motorne neurone prednjih rogova kičmene moždine, zbog čega je poremećena inervacija mišića i razvija se progresivna akutna respiratorna insuficijencija.

Ulazna kapija su sluzokože respiratornog trakta, gastrointestinalnog trakta, oštećena koža i pluća. Infekcija se ne prenosi sa osobe na osobu. Unatoč činjenici da se botulizam bilježi mnogo rjeđe od ostalih crijevnih infekcija i trovanja, on je i dalje relevantna i po život opasna bolest.

Istorijat

Pretpostavlja se da su ljudi oboljeli od botulizma tokom čitavog perioda ljudskog postojanja. Tako je vizantijski car Lav VI zabranio konzumaciju crnog pudinga zbog posljedica opasnih po život, međutim, bolest je dokumentovana tek 1793. godine, kada je u Württembergu oboljelo 13 osoba koje su jele crni puding, od kojih je 6 umrlo. Otuda je bolest i dobila ime.

Kasnije, na osnovu zapažanja 1817-1822, Yu Kerner je napravio prvi klinički i epidemiološki opis bolesti. U monografiji koju je objavio 1822. opisao je simptome botulizma (slabost, povraćanje, proljev i drugo), a također je sugerirao da male doze botulinum toksina mogu biti korisne u liječenju hiperkineze. U Rusiji je ova bolest više puta opisivana u 19. veku pod nazivom "ihtiizam" i povezivana je sa upotrebom slane i dimljene ribe, a prvu detaljnu studiju u Rusiji napravio je E.F. Zengbush.

Krajem 19. veka u Belgiji, 34 muzičara koji su se spremali da sviraju na sahrani jelo je sirovu domaću šunku. Tokom dana većina muzičara je počela da pokazuje simptome botulizma. Usled ​​toga su 3 osobe umrle, a još 10 je bilo nedelju dana u bolnici u teškom stanju. Iz ostataka šunke i slezene žrtava bakteriolog Emil van Ermengem izolovao je patogen i nazvao ga Bacillus botulinus. Također je otkrio da se toksin ne stvara u tijelu pacijenta, već u debljini šunke. Kasnije, 1904. godine, ruski istraživač S.V. Konstantinov je potvrdio svoj rad. Istovremeno je stvoren i prvi imunološki serum za liječenje botulizma. Istraživač Alan Scott je 1973. godine proveo prva ispitivanja botulinum toksina na životinjama kako bi smanjio aktivnost hiperkinetičkih mišića, a zatim su 1978. godine, pod njegovim vodstvom, započela ispitivanja patogena na ljudima, prema protokolu koji je odobrila FDA.

Sada, kao i prije, botulizam se manifestira iu obliku pojedinačnih trovanja iu obliku grupnih slučajeva. Za 1818-1913 u Rusiji je registrovano 98 grupnih izbijanja trovanja hranom, od kojih je oboljelo 608 osoba, odnosno 6,2 osobe po izbijanju. Za period 1974-1982. bilo je 81 izbijanje, koje su u prosjeku činile po 2,5 slučaja. Posljednjih desetljeća česti su slučajevi bolesti povezanih s upotrebom domaće konzervirane hrane.

Udžbenik se sastoji od sedam dijelova. Prvi dio - "Opća mikrobiologija" - sadrži informacije o morfologiji i fiziologiji bakterija. Drugi dio posvećen je genetici bakterija. Treći dio - "Mikroflora biosfere" - razmatra mikrofloru životne sredine, njenu ulogu u kruženju supstanci u prirodi, kao i mikrofloru čoveka i njen značaj. Četvrti dio - "Učenje o infekciji" - posvećen je patogenim svojstvima mikroorganizama, njihovoj ulozi u infektivnog procesa a sadrži i informacije o antibioticima i njihovim mehanizmima djelovanja. Peti dio - "Doktrina imuniteta" - sadrži moderne ideje o imunitetu. Šesti dio - "Virusi i bolesti koje uzrokuju" - pruža informacije o glavnim biološkim svojstvima virusa i bolestima koje uzrokuju. Sedmi dio - "Privatna medicinska mikrobiologija" - sadrži informacije o morfologiji, fiziologiji, patogenim svojstvima patogena mnogih zarazne bolesti, kao i savremene metode njihove dijagnostike, specifične prevencije i terapije.

Udžbenik je namijenjen studentima, diplomiranim studentima i nastavnicima viših medicinskih fakulteta obrazovne institucije, univerziteti, mikrobiolozi svih specijalnosti i praktičari.

5. izdanje, revidirano i prošireno

knjiga:

Botulizam je teška forma bolesti koja se prenosi hranom povezana s konzumiranjem kontaminirane hrane. Clostridium botulinum, a karakteriše ga specifična lezija centralnog nervnog sistema.

Uzročnika bolesti prvi je otkrio 1896. E. van Ermengem u ostacima kobasice (lat. . botulus- kobasica), kao i u slezeni i debelom crevu osoba umrlih od botulizma. Ovo otkriće potvrdio je S. V. Konstansov, koji je izdvojio C. botulinum od crvene ribe koja je izazvala trovanje.

C. botulinum- prilično velike polimorfne šipke sa zaobljenim krajevima, dužine 4 - 9 mikrona, promjera 0,5 - 1,5 mikrona, ponekad se formiraju skraćeni oblici; raspoređeni nasumično, ponekad u parovima ili u obliku kratkih lanaca; u starim kulturama mogu formirati duge niti; Gram-pozitivan, pokretljiv, sa peritrihoznim flagelama. Kapsule se ne formiraju, spore su ovalne, nalaze se subterminalno, dajući štapu oblik nalik teniskom reketu (Sl. 106). Spore u kulturama se pojavljuju nakon 24-48 sati od početka inkubacije. C. botulinum ne razmnožava se u proizvodima kisele reakcije (pH 3,0 - 4,0) i pri koncentraciji NaCl iznad 10%.

C. botulinum formira 8 vrsta toksina: A, B, C1, C2, D, E, F, G, koji se razlikuju po antigenskoj specifičnosti. Shodno tome, razlikuje se 8 vrsta patogena, jedan od važne karakteristikešto je prisustvo ili odsustvo proteolitičkih svojstava. Ova svojstva određena su sposobnošću hidrolize kazeina i proizvodnje H 2 S. U skladu s tim izdvaja se proteolitička grupa koja uključuje sve sojeve tipa A i dio sojeva B i F, te neproteolitička grupa koja uključuje sve sojeve tipa E i neke sojeve tipova B i F. Patogeni tipova C i D zauzimaju srednju poziciju između ovih grupa, jer neki od njih proizvode proteolitičke enzime, ali ih mnogi sojevi C i D ne formiraju (tablica 48 ). Serotip G se razlikuje od svih ostalih serotipova po tome što ne fermentira ugljikohidrate dok posjeduje proteolitička svojstva.

čista kultura

Tabela 48

Diferencijalni znaci proteolitički i neproteolitički sojevi C. botulinum

Bilješka. (+) - znak je pozitivan; (–) – znak je negativan; superscript znak (-) - neke vrste želatine ne hidroliziraju. a Ovaj serotip je izolovan kao posebna vrsta. C. argentinense.

Neke karakteristike različitih tipova C. botulinum. Tip A i proteolitički sojevi tipova B, C, D i F- ravni ili blago zakrivljeni štapići dužine 4,4 - 8,6 µm, prečnika 0,8 - 1,3 µm, pokretni (peritrihi). Spore ovalne, subterminalne. Bogato rasti u hranljivom bujonu. Na krvnom agaru sa 0,5-1,0% glukoze formiraju glatke ili hrapave kolonije prečnika 3-8 mm, okružene zonom hemolize. Na početku rasta kolonije su vrlo male, sjajne, u obliku kapi rose. Zatim se povećavaju, postaju sivkasti sa ravnim ili neravnim rubovima. U stupastom agaru, kolonije su u obliku diska ili poput paperja. Mlijeko je peptonizirano. Optimalna temperatura za rast je 30 - 40 °C. Sadržaj G + C u DNK je 26 - 28 mol%.

Tip E i neproteolitički sojevi tipova B i F. Pravi štapići, prečnika 0,3 - 0,7 mikrona, dužine 3,4 - 7,5 mikrona; gram-pozitivni, ali u starim kulturama postaju gram-negativni, pokretni (peritrihozni). Spore ovalne, subterminalne. Obilan rast na Kitt-Tarozzi medijumu sa stvaranjem gasa. Kolonije na krvnom agaru prečnika 1-3 mm, neravnih ivica, mat površine, mozaične strukture, sa zonom hemolize. Neki sojevi tipa E ne hidroliziraju želatinu. Mlijeko je koagulirano, ali nije peptonizirano. Optimalna temperatura za rast je 25-37°C. Sadržaj G + C u DNK je 26 - 28 mol%.

Neproteolitički sojevi tipa C i D. Prave šipke, prečnika 0,5 - 0,7 mikrona, dužine 3,4 - 7,9 mikrona, pokretne (peritrihozne), spore ovalne, subterminalne; želatin je hidrolizovan, mleko nije koagulisano niti peptonizovano; rast na Kitt-Tarozzi medijumu sa umerenim stvaranjem gasa. Na krvnom agaru kolonije su okrugle, nazubljenih ivica, blago uzdignute, glatke, sivkasto-bijele, prozirne, okružene zonom hemolize. Optimalna temperatura za rast je 30–37 °C, sadržaj G+C u DNK je 26–28 mol %.

G tip. Pravi štapići, prečnika 1,3 - 1,9 mikrona, dužine 1,6 - 9,4 mikrona, pokretni (peritrihozni), spore ovalne, subterminalne, gram pozitivne. Na krvnom agaru kolonije su okrugle, prečnika 0,5–1,5 mm, glatkih ivica, uzdignute, prozirne, sive, glatke, sa sjajnom površinom; na Kitt-Tarozzi srednji rast je umjeren, bez fermentacije glukoze; mlijeko se polako peptonizira. Optimalna temperatura za rast je 30-37°C. Nalazi se u zemljištu. Nisu poznati slučajevi kod ljudi uzrokovani ovom vrstom.

otpor. dugotrajno skladištenje C. botulinum u prirodi i raznim prehrambenim proizvodima povezuje se s njihovim stvaranjem spora. Spore ostaju dugo u tlu, a pod povoljnim uslovima ljeti mogu klijati i razmnožavati se. Dobro podnose niske temperature (ne umiru ni na -190°C). Kada se osuše, ostaju održive decenijama. Spore su također otporne na toplinu (posebno tip A). Spore tipova A i B podnose ključanje 5 sati, na temperaturi od 105 ° C umiru nakon 1 - 2 sata, na 120 ° C - nakon 20 - 30 minuta. Postoje sojevi čije spore podnose temperaturu od 120°C nekoliko sati. kontroverza C. botulinum otporan na mnoge baktericidne supstance: 20% rastvor formalina ih ubija nakon 24 sata; etil alkohol - nakon 2 mjeseca; 10% HCl ih ubija nakon samo 1 sata.

toksini C. botulinum takođe su veoma otporni na fizičke i hemijske faktore. Ne uništavaju ih proteolitički enzimi crijevnog trakta. U kiseloj sredini (pH 3,5 - 6,8) stabilniji su nego u neutralnoj ili alkalnoj sredini, uništavaju se delovanjem 2 - 3% alkalija, ali visoke koncentracije NaCl u prehrambenim proizvodima ih ne uništavaju; u konzerviranoj hrani, toksini opstaju dugo vremena. toksini C. botulinum imaju i određenu termičku stabilnost: na 58 ° C uništavaju se nakon 3 sata; na 80 °C - nakon 30 minuta; i na 100 °C u roku od nekoliko minuta. Toksini tipa C su najotporniji, tipovi D i E su manje otporni, a tipovi A i B su između. Otpornost toksina na visoke temperature zavisi od vrste proizvoda, njegovog pH i drugih uslova. Konkretno, u prisustvu masti, visoke koncentracije saharoze, povećava se otpornost toksina na visoke temperature.

faktori patogenosti. Glavni faktor patogenosti uzročnika botulizma su egzotoksini. Iako se razlikuju po antigenskim svojstvima, njihova biološka aktivnost je ista. Sve su varijante istog neurotoksina. Antigenska specifičnost i smrtonosna aktivnost određuju se različitim determinantama egzotoksina. Toksini svih vrsta nastaju kao toksični proteinski kompleksi (progenitorski toksini). Ovisno o molekularnoj težini i strukturi, ovi kompleksi se dijele u 3 grupe prema konstantama sedimentacije: toksini 12S– (300 kDa), 16S– (500 kDa) i 19S– (900 kDa). Nedavno su pronađeni hipertoksični superkompleksi toksina u tipovima A i B.

12S-toksini (M-toksini) sastoje se od molekula neurotoksina povezanog s netoksičnim proteinskim molekulom koji nema svojstva hemaglutiniranja. 16S-toksini (L-toksini) su strukture koje se sastoje od M-kompleksa i netoksičnog proteina koji se razlikuje od proteina M-kompleksa i ima svojstva hemaglutiniranja. 19S-toksini (LL-toksini) su najveće strukture koje uključuju neurotoksin i netoksični protein sa svojstvima hemaglutinina.

Clostridium botulizam tipa A može proizvesti toksične komplekse tri varijante: M, L i LL, tipovi B, C i D - u obliku L- i M-toksina, i tipovi E i F - samo u obliku M-toksina . Dakle ista kultura C. botulinum može proizvesti nekoliko vrsta toksičnih kompleksa. Funkcije netoksičnih nehemaglutinirajućih proteina, kao i hemaglutinirajućih proteina (identifikovana su tri tipa: 15 kD, 35 kD i 70 kD), još nisu utvrđene. Neurotoksične komponente bilo kojeg serotipa botulinum toksina i bilo koje vrste toksičnog kompleksa imaju sličnu strukturu i biološka svojstva. Sintetizirani su kao jedan polipeptidni lanac sa 150 kDa mw (7S-toksin), koji nema značajnu toksičnu aktivnost. Ovaj polipeptidni lanac se pretvara u aktivni neurotoksin tek nakon što ga presječe bakterijska proteaza ili proteaze ljudskog crijevnog trakta. Kao rezultat tačkaste hidrolize nastaje struktura koja se sastoji od dva lanca međusobno povezana disulfidnim vezama - teškog, sa m. m. 100 kDa (H-lanac), i laganog, sa m. m. 50 kDa (L-lanac). H-lanac je odgovoran za vezivanje neurotoksina na receptore ćelijske membrane, a L-lanac vrši specifično blokirajuće djelovanje neurotoksina na holinergički prijenos ekscitacije u. Toksini tipova C1 i C2 razlikuju se jedni od drugih ne samo serološki, već i po tome što vegetativni oblici kultura ne stvaraju C2 toksin. Nastaje samo u periodu sporulacije, a njegovu aktivaciju obezbjeđuje mikrobna proteaza.

Sposobnost uzročnika botulizma da proizvodi proteolitičke enzime igra važnu ulogu u stvaranju toksina. Proteolitičke grupe patogena obezbeđuju aktivaciju protoksina svojim endogenim proteazama i aktivaciju neurotoksina proizvedenih od neproteolitičkih varijanti serotipova C. botulinum, provodi se egzogeno, odnosno uz pomoć proteaza gastrointestinalnog trakta tokom infekcije ili in vitro - tripsinom.

Pored izražene neurotoksične aktivnosti, različite vrste C. botulinum imaju leukotoksično, hemolitičko i lecitinazno djelovanje. Karakteristika leukotoksina je da inhibira fagocitozu bez uništavanja leukocita. Različiti periodi akumulacije leukotoksina, hemotoksina i lecitinaze u mediju kulture tokom inkubacije C. botulinum ukazuju na to da očigledno imaju drugačiju hemijsku prirodu.

Lokus gena za toksične komplekse sadrži gene za neurotoksine (bont), gene za netoksični nehemaglutinirajući protein (ntnh), gene za hemaglutinine (ha + ili ha -) i botR gen, čiji proizvod djeluje kao pozitivan regulator.

Karakteristike epidemiologije. Prirodno stanište C. botulinum je tlo, odakle ulaze u vodu, hranu, stočnu hranu, u crijeva ljudi, sisara, ptica i riba, gdje se razmnožavaju. U nizu zemalja svijeta (SAD, Kanada itd.) botulizam postoji u obliku prirodna žarišta: na mjestima gdje tlo, biljke i voda sadrže mnogo C. botulinum, masovno uginuće divljih ptica vodarica i drugih životinja (moždaši, žabe, itd.) koje imaju važnu ulogu u epidemiologiji botulizma je više puta uočeno. Prijevoz uspostavljen C. botulinum u crijevima konja goveda, svinje, kokoši, glodari. Kontaminirajući svojim izmetom proizvode, stočnu hranu, tlo, doprinose raširenoj kontaminaciji okoliša klostridijama.

Infekcija crvene i parcijalne ribe uzročnikom botulizma može biti endogena - iz crijeva, i egzogena - iz vanjskog okruženja (uz nepravilan transport i skladištenje).

Svi poljoprivredni proizvodi kontaminirani zemljom, ljudskim i životinjskim izmetom mogu biti zaraženi uzročnicima botulizma i uzrokovati bolesti ljudi.

Botulizam se javlja u svim regijama globus, ali češće zabilježeno u zemljama u kojima stanovništvo troši veliki broj razne konzervirane hrane. U svakoj zemlji izvor trovanja je konzervirana hrana za kojom je najveća potražnja: u Njemačkoj, Francuskoj i drugim evropskim zemljama - mesne konzerve, kobasice, šunka itd.; u SAD - konzervirano povrće; u Rusiji - riba i riblje konzerve. Botulizam nije zarazan. Bolest se javlja samo kada se jede hrana koja sadrži patogen i njegove toksine. Zbog C. botulinum- strogi anaerobni najbolji uslovi za svoju reprodukciju i proizvodnju toksina stvaraju se u konzerviranoj hrani, gdje spore mogu dospjeti s česticama tla. Oni mogu izdržati toplinsku obradu konzervirane hrane, a zatim klijati i proizvoditi toksin, što je olakšano dugotrajnim skladištenjem konzervirane hrane. Učestalost botulizma je niska, češće se javlja kao sporadična bolest. Međutim, poznate su i grupne epidemije, na primjer, izbijanje 1933. godine u gradu Dnjepropetrovsku, kada je od trovanja kavijarom od tikve oboljelo 230 ljudi, od kojih je 26 umrlo. Rijetko se infekcija javlja kroz rane.

Karakteristike patogeneze i klinike. Botulizam se razvija kao toksična infekcija. Na tijelo ne utječe samo toksin sadržan u prehrambenom proizvodu, već i toksin koji nastaje u probavnom traktu i tkivima u vezi s prodiranjem patogena tamo. Ljudi su izuzetno osjetljivi na botulinum toksin tipova A, B, C, E i F. Bolesti su uočene čak i kada je osoba unela kontaminirani proizvod u usta, a nije ga progutala. Smrtonosna doza toksina za ljude je 1 ng/kg tjelesne težine. Botulinum toksin se brzo apsorbira u želucu i crijevima, prodire u krv i selektivno djeluje na jezgra produžene moždine i ganglijske stanice kičmene moždine. Treba napomenuti da se, ulaskom u probavni trakt osobe ili životinje, Clostridium botulism razmnožava, prodire u krv i odatle u sve organe, proizvodeći toksine. Period inkubacije kod ljudi varira od dva sata do 10 dana, ali najčešće je 18-24 sata.Što je veća infektivna doza, period inkubacije je kraći i bolest je teža.

Klinička slika botulizma obično se sastoji od kombinacije različitih mioneuroloških sindroma, od kojih se prvi manifestira oftalmoplegični: poremećena je akomodacija bolesnika, neravnomjerno se šire zjenice, javlja se strabizam, dvostruki vid, a ponekad i sljepoća. Ovi simptomi su povezani s oštećenjem okulomotornih nerava. Zatim se pridruži pareza mišića jezika (afonija), gutanje postaje otežano, mišići vrata, trupa i crijeva slabe (pareza, zatvor, nadutost), dolazi do oslobađanja guste viskozne sluzi. Temperatura može biti normalna, ponekad raste. Svest je očuvana. U pravilu se ne bilježi akutna upala gastrointestinalnog trakta. U završnoj fazi bolesti glavnu ulogu ima respiratorni distres, smrt nastupa od respiratorne i srčane paralize. Mortalitet je 35 - 85%.

Postinfektivni imunitet. Prenesena bolest, očigledno, ostavlja tip-specifičan antitoksični imunitet, unakrsni imunitet se ne formira. Trajanje i intenzitet postinfekcijske imunosti i uloga antimikrobnih antitijela i fagocita u njemu nisu dovoljno proučavani.

Laboratorijska dijagnostika. Materijal za studiju je: od pacijenta - ispiranje želuca, izmet, krv, urin, povraćanje; iz leša - sadržaj želuca, tankog i debelog creva, limfni čvorovi, kao i glava i kičmena moždina. Proizvod koji je izazvao trovanje također je podvrgnut istraživanju. Istraživanja se provode radi otkrivanja i identifikacije C. botulinum ili, češće, u svrhu otkrivanja botulinum toksina i utvrđivanja njegovog serotipa. Za isticanje kulture C. botulinum materijal se inokulira na čvrstu podlogu i medij za skladištenje Kitt-Tarozzi (dio epruveta se zagrijava na temperaturi od 85 °C 20 min da bi se ubile nesporogene bakterije). Od tečnih kultura nakon inkubacije, inokulacije se vrše na čvrste podloge kako bi se dobile izolovane kolonije, a zatim čiste kulture, koje se identifikuju po morfološkim, kulturnim, biohemijskim i toksigenim svojstvima. Sljedeće tri metode mogu se koristiti za otkrivanje botulinum toksina u test materijalu ili filtratu kulture.

1. Biološki test na miševima. Da biste to učinili, uzmite najmanje 5 miševa. Jedan od njih je inficiran samo ispitnim materijalom, a svaki od preostala četiri inficiran je mješavinom materijala sa 200 AJ antitoksičnog seruma odgovarajućeg tipa - A, B, C i E. Smjesa se čuva na sobnoj temperaturi. 40 minuta kako bi se toksin neutralizirao antitoksinom. U prisustvu botulinum toksina u ispitivanom materijalu svi miševi uginu, osim onog kojem je ubrizgana mješavina materijala sa antitoksičnim serumom, čime je neutralizirano djelovanje homolognog tipa toksina.

2. Upotreba RPHA sa dijagnostikom antitijela, odnosno eritrocitima senzibiliziranim antitoksinima odgovarajućeg tipa.

3. Visoko osjetljiva i specifična metoda detekcije botulinum toksina zasniva se na njegovoj sposobnosti da inhibira aktivnost fagocita. U prisustvu odgovarajućeg antitoksičnog seruma neutralizira se leukotoksično svojstvo toksina.

Tretman. Većina efikasan metod liječenje botulizma je rana primjena antitoksičnih seruma. Dok se ne utvrdi vrsta toksina koji je izazvao botulizam, pacijentu se intramuskularno ubrizgava 10.000 IU antitoksičnog seruma tipa A, C i E i 5.000 IU seruma tipa B (ukupno 35.000 IU). Prvog dana serum se daje više puta svakih 5-10 sati, u teškim slučajevima - intravenozno. Svim osobama koje su jele hranu koja je izazvala trovanje, a nisu oboljele, daje se antitoksični serum od 2000 IU istih vrsta u profilaktičke svrhe. Nakon utvrđivanja vrste toksina, primjenjuje se samo homologni antiserum. Kako bi se podstaklo stvaranje aktivnog imuniteta, pacijentu se ubrizgavaju i toksoidi tipa A, B, C i E, a nakon utvrđivanja vrste toksina samo homologni toksoid. Ispiranjem želuca i davanjem laksativa postižu brzo uklanjanje toksina i uzročnika bolesti iz crijeva. Seroterapija je dopunjena terapijom antibioticima, kao i simptomatskim i restorativnim liječenjem.

Prevencija. Za stvaranje umjetnog antitoksičnog imuniteta protiv botulizma, dobiveni su toksoidi, ali nisu našli široku primjenu. Osnova za prevenciju botulizma je strogo poštivanje sanitarno-higijenskog režima pri preradi proizvoda u preduzećima prehrambene industrije, posebno onih povezanih s proizvodnjom konzervirane hrane, šunke, kobasica, kao i pri dimljenju, soljenju ribe i pripremanju balika. od toga. Konzervirana hrana nakon termičke obrade mora biti podvrgnuta termostatskoj kontroli (drže se u termostatu na 37°C određeno vrijeme): klostridije sačuvane u konzervi izazivaju bombardiranje (naduvavanje) konzervi, a njihov sadržaj ima miris užeglog ulja. Takva konzervirana roba je podložna zapljeni i oprezu bakteriološko istraživanje. Za soljenje ribe potrebno je koristiti jake slane otopine - salamuru koja sadrži 10 - 12% NaCl. Posebno opasna može biti domaća konzervirana hrana, posebno gljive, napravljena bez pridržavanja potrebnog režima.