Come determinare il gruppo sanguigno secondo i sieri standard. Istruzione secondaria specializzata di un profilo medico Determinazione del gruppo sanguigno mediante sieri

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Il gruppo sanguigno e il fattore Rh sono proteine ​​​​speciali che ne determinano il carattere individuale, proprio come il colore degli occhi o dei capelli di una persona. Gruppo e Rh hanno Grande importanza in medicina nel trattamento della perdita di sangue, malattie del sangue e influenzano anche la formazione del corpo, il funzionamento degli organi e persino caratteristiche psicologiche persona.

Il concetto di gruppo sanguigno

Anche i medici antichi cercavano di compensare la perdita di sangue trasfondendo sangue da una persona a una persona e persino da animali. Di norma, tutti questi tentativi hanno avuto un triste esito. E solo all'inizio del 20 ° secolo, lo scienziato austriaco Karl Landsteiner scoprì differenze nei gruppi sanguigni nelle persone, che erano proteine ​​​​speciali negli eritrociti - agglutinogeni, cioè che causavano una reazione di agglutinazione - incollaggio degli eritrociti. Era la causa della morte dei pazienti dopo la trasfusione di sangue.

Esistono 2 tipi principali di agglutinogeni, che sono stati denominati condizionatamente A e B. L'incollaggio degli eritrociti, cioè l'incompatibilità del sangue, si verifica se l'agglutinogeno si combina con la proteina con lo stesso nome - agglutinina, contenuta nel plasma sanguigno, rispettivamente, a e B. Ciò significa che nel sangue umano non possono esserci proteine ​​\u200b\u200bcon lo stesso nome che causano l'agglutinazione degli eritrociti, cioè se c'è l'agglutinogeno A, allora non può contenere agglutinina a.

Si è inoltre riscontrato che entrambi gli agglutinogeni, A e B, possono essere presenti nel sangue, ma poi non contiene alcun tipo di agglutinine, e viceversa. Tutti questi sono i segni che determinano il gruppo sanguigno. Pertanto, quando le proteine ​​​​con lo stesso nome negli eritrociti e nel plasma vengono combinate, si sviluppa un conflitto sul gruppo sanguigno.

Tipi di gruppi sanguigni

Sulla base di questa scoperta, nell'uomo sono stati identificati 4 tipi principali di gruppi sanguigni:

  • Il 1°, che non contiene agglutinogeni, ma contiene entrambe le agglutinine a e b, è il gruppo sanguigno più comune, posseduto dal 45% della popolazione mondiale;
  • 2°, contenente agglutinogeno A e agglutinina b, è determinato nel 35% delle persone;
  • 3°, in cui c'è l'agglutinogeno B e l'agglutinina a, ce l'ha il 13% delle persone;
  • 4 °, contenente entrambi gli agglutinogeni A e B e non contenente agglutinine, questo gruppo sanguigno è il più raro, è determinato solo nel 7% della popolazione.

In Russia è accettata la designazione del gruppo sanguigno secondo il sistema AB0, cioè in base al contenuto di agglutinogeni in esso contenuti. Di conseguenza, la tabella dei gruppi sanguigni si presenta così:

Il gruppo sanguigno è ereditato. Il gruppo sanguigno può cambiare - la risposta a questa domanda è inequivocabile: non può. Sebbene la storia della medicina conosca l'unico caso associato mutazioni geniche. Il gene che determina il gruppo sanguigno è nella nona coppia corredo cromosomico persona.

Importante! Il giudizio su quale gruppo sanguigno sia adatto a tutti ha perso oggi la sua rilevanza, proprio come il concetto donatore universale, cioè il proprietario del 1 ° (zero) gruppo sanguigno. Sono state scoperte molte sottospecie di gruppi sanguigni e viene trasfuso solo il sangue di un gruppo.

Fattore Rh: negativo e positivo

Nonostante la scoperta dei gruppi sanguigni da parte di Landsteiner, le reazioni trasfusionali continuarono a verificarsi durante la trasfusione. Lo scienziato ha continuato la sua ricerca e, insieme ai suoi colleghi Wiener e Levine, è riuscito a scoprire un'altra specifica proteina dell'antigene eritrocitario: il fattore Rh. È stato identificato per la prima volta nella scimmia rhesus, da cui ha preso il nome. Si è scoperto che Rh è presente anche nel sangue della maggior parte delle persone: l'85% della popolazione ha questo antigene e il 15% non ce l'ha, cioè ha un fattore Rh negativo.

La particolarità dell'antigene Rh è che quando entra nel circolo sanguigno di persone che ne sono sprovviste contribuisce alla produzione di anticorpi anti-Rh. A contatto ripetuto con il fattore Rh, questi anticorpi danno un grave reazione emolitica, che è chiamato il conflitto Rhesus.

Importante! Quando il fattore Rh è negativo, ciò non significa solo l'assenza dell'antigene Rh nei globuli rossi. Nel sangue possono essere presenti anticorpi anti-Rhesus, che potrebbero formarsi durante il contatto con sangue Rh-positivo. Pertanto, è obbligatoria un'analisi per la presenza di anticorpi Rh.

Determinazione del gruppo sanguigno e del fattore Rh

Il gruppo sanguigno e il fattore Rh sono soggetti a determinazione obbligatoria nei seguenti casi:

  • per trasfusioni di sangue;
  • per trapianto di midollo osseo;
  • prima di qualsiasi operazione;
  • durante la gravidanza;
  • con malattie del sangue;
  • nei neonati con ittero emolitico (incompatibilità Rhesus con la madre).

Tuttavia, idealmente, ogni persona, sia adulto che bambino, dovrebbe avere informazioni sul gruppo e sull'affiliazione Rh. Lesioni gravi o Malattia acuta quando il sangue è urgentemente necessario.

Determinazione del gruppo sanguigno

La determinazione del gruppo sanguigno viene effettuata con anticorpi monoclonali appositamente ottenuti secondo il sistema AB0, ovvero agglutinine sieriche, che danno agglutinazione eritrocitaria al contatto con gli agglutinogeni con lo stesso nome.

L'algoritmo per determinare il gruppo sanguigno è il seguente:

  1. Preparare colicloni (anticorpi monoclonali) anti-A - fiale rosa e anti-B - fiale blu. Preparare 2 pipette pulite, bastoncini di miscelazione in vetro e vetrini, una siringa monouso da 5 ml per il prelievo del sangue, una provetta.
  2. Eseguire il prelievo di sangue da una vena.
  3. Una grossa goccia di colicloni (0,1 ml) viene applicata su un vetrino o su una piastra speciale contrassegnata, piccole gocce del sangue di prova (0,01 ml) vengono mescolate con bastoncini di vetro separati.
  4. Osserva il risultato per 3-5 minuti. Una goccia di sangue misto può essere omogenea - reazione meno (-) o caduta di scaglie - reazione più o agglutinazione (+). La valutazione dei risultati deve essere effettuata da un medico. Le opzioni per lo studio della determinazione del gruppo sanguigno sono presentate nella tabella:

Definizione del fattore Rh

La determinazione del fattore Rh viene eseguita in modo simile alla determinazione del gruppo sanguigno, cioè utilizzando un anticorpo monoclonale sierico per l'antigene Rh. Una grossa goccia del reagente (zoliclone) e una piccola goccia di sangue appena prelevato vengono applicate su una speciale superficie ceramica bianca pulita nelle stesse proporzioni (10:1). Il sangue viene accuratamente miscelato con una bacchetta di vetro con il reagente.

La determinazione del fattore Rh con i colicloni richiede meno tempo, poiché la reazione avviene entro 10-15 secondi. Tuttavia, è necessario resistere al limite di tempo massimo di 3 minuti. Proprio come nel caso della determinazione del gruppo sanguigno, una provetta con sangue viene inviata al laboratorio.

IN pratica medica Oggi, un metodo rapido e conveniente per determinare l'appartenenza di gruppo e il fattore Rh è ampiamente utilizzato utilizzando solicloni secchi, che vengono diluiti con acqua sterile per preparazioni iniettabili immediatamente prima dello studio. Il metodo si chiama "Erythrotest-Groupcard", è molto conveniente sia nelle cliniche che in condizioni estreme e sul campo.

La natura e la salute di una persona per gruppo sanguigno

Sangue umano come suo specifico tratto genetico non ancora del tutto esplorato. IN l'anno scorso gli scienziati hanno scoperto opzioni per i sottogruppi sanguigni, si stanno sviluppando nuove tecnologie per determinare la compatibilità e così via.

Al sangue viene anche attribuita la capacità di influenzare la salute e il carattere del suo proprietario. E sebbene questo problema rimanga controverso, tuttavia, le osservazioni a lungo termine hanno notato Fatti interessanti. Ad esempio, i ricercatori giapponesi ritengono che sia possibile determinare il carattere di una persona in base al gruppo sanguigno:

  • i proprietari del 1 ° gruppo sanguigno sono persone volitive, forti, socievoli ed emotive;
  • i proprietari del 2 ° gruppo si distinguono per pazienza, scrupolosità, perseveranza, diligenza;
  • i rappresentanti del 3 ° gruppo sono individui creativi, ma allo stesso tempo sono troppo impressionabili, prepotenti e capricciosi;
  • le persone con il 4 ° gruppo sanguigno vivono di più con i sentimenti, sono indecise, a volte irragionevolmente dure.

Per quanto riguarda la salute, a seconda del gruppo sanguigno, si ritiene che sia il più forte nella maggioranza della popolazione, cioè nel 1° gruppo. Le persone con il 2o gruppo sono inclini a malattie cardiache e malattie oncologiche, i proprietari del 3 ° gruppo sono caratterizzati da un'immunità debole, bassa resistenza alle infezioni e allo stress, mentre i rappresentanti del 4 ° gruppo sono inclini a patologie cardiovascolari, malattie articolari e cancro.

Indicazioni: la necessità di trasfusione di sangue e dei suoi componenti.

Le condizioni necessarie: una stanza con una buona illuminazione e una temperatura da 15 o a 25 o C.

Attrezzatura: due set di sieri emoagglutinanti standard I (O), II (A), III (B) di gruppi di due serie diverse e una fiala di siero IV (AB) (una pipetta pulita a secco viene abbassata in ciascuna fiala con siero), un flacone con una soluzione isotonica di cloruro di sodio con una pipetta, una piastra speciale marcata o di maiolica ben lavata e asciutta, vetrini, bacchette di vetro, aghi sterili a forma di lancia per perforare la polpa di un dito, palline di garza sterile, alcool, clessidra per 5 minuti .

Fasi Fondamento logico
1. Prima di iniziare il lavoro, si lavano le mani, indossano guanti sterili. Ai fini della sicurezza infettiva del personale medico quando si lavora con il sangue.
2. Verificare che ogni fiala di siero standard abbia un passaporto: un'etichetta che indica il gruppo sanguigno, il numero di lotto, il titolo, la data di scadenza, il luogo di produzione. Una fiala senza etichetta non deve essere utilizzata. Il siero deve essere leggero e trasparente, l'ampolla è intatta, il titolo non è inferiore a 1:32. I sieri vengono collocati in appositi rack su 2 file. Sieri standard: I (O) - incolore - non ci sono strisce sull'etichetta; II (A) - blu - ci sono 2 strisce blu sull'etichetta; III (B) - rosso - ci sono 3 strisce rosse sull'etichetta; IV (AB) - giallo - ci sono 4 strisce gialle sull'etichetta. La presenza di scaglie, precipitazioni sono segni dell'inadeguatezza del siero. I sieri con durata di conservazione scaduta non sono adatti all'uso.
3. Una goccia di siero di due serie di gruppi I (O), II (A), III (B) viene applicata su una piastra standard o su una piastra divisa in 4 quadrati con una matita colorata. Su un piatto diviso con una matita colorata, è necessario indicare il gruppo sanguigno in ogni quadrato. Una goccia di siero di due serie I (O), II (A), III (B), IV (AB) viene applicata su una piastra standard o su una piastra divisa da una matita colorata in 4 quadrati per eliminare gli errori durante la lettura del risultato .
4. Una goccia di sangue da una provetta o da un dito viene applicata con una pipetta o una bacchetta di vetro o vicino a ogni goccia di siero (il sangue dovrebbe essere 10 volte inferiore al siero) e mescolata con diverse bacchette di vetro o angoli diversi vetro scorrevole. Per ottenere il sangue da un dito, la punta del dito viene trattata con alcool e la pelle viene perforata con un ago - una lancia. La prima goccia di sangue viene rimossa con una pallina di garza, seguita da diversi angoli del vetrino per escludere una falsa reazione di agglutinazione.
5. Dopo la miscelazione, agitare delicatamente la piastra tra le mani. Per un'agglutinazione più rapida e chiara dei globuli rossi.
6. Quando si verifica l'agglutinazione, ma non prima di 3 minuti, aggiungere 1 goccia di cloruro di sodio allo 0,9% a ciascuna goccia di siero con eritrociti in cui si è verificata l'agglutinazione, agitare la piastra, mescolare e continuare il monitoraggio fino a quando non sono trascorsi 5 minuti. Con una reazione positiva di isoemoagglutinazione, i fiocchi e i grani degli eritrociti incollati non si disperdono quando viene aggiunta e miscelata una soluzione isotonica di cloruro di sodio. Con una reazione negativa, le gocce di siero sulla piastra sono trasparenti, di colore rosa uniforme, non contengono scaglie e grani.
7. Dopo 5 minuti, leggere la reazione in luce trasmessa. Se l'agglutinazione non è chiara, viene aggiunta una goccia di soluzione di cloruro di sodio allo 0,9% alla miscela di siero e sangue, dopodiché si giunge a una conclusione sull'affiliazione al gruppo; sono possibili le seguenti 4 combinazioni: a) tutti e tre i sieri di entrambe le serie non danno agglutinazione. Sangue investigato del gruppo I (O); b) test di isoemoagglutinazione negativo con siero dei gruppi I (O) e III (C); il sangue studiato dei gruppi II (A); c) la reazione di isoemoagglutinazione è negativa con il siero dei gruppi III (B) in entrambe le serie e positiva con i sieri dei gruppi I (O) e II (A). Gruppo sanguigno investigato III (B); d) i gruppi sierici I (O), II (A), III (B) danno una reazione positiva in entrambe le serie. Il sangue appartiene al gruppo IV (AB). Ma prima di dare una tale conclusione, è necessario eseguire una reazione di isoemoagglutinazione con siero standard del gruppo IV (AB) secondo lo stesso metodo. Una reazione di isoemoagglutinazione negativa consente di attribuire finalmente il sangue in esame al gruppo IV (AB) a) l'assenza di agglutinazione in tutte le gocce indica che non c'è agglutinogeno nel sangue del test, cioè il sangue appartiene al gruppo I (O); b) l'inizio dell'agglutinazione in gocce con i sieri O (I) e B (III) indica che c'è agglutinogeno A nel sangue, cioè il sangue appartiene al gruppo II (A); c) la presenza di agglutinazione in gocce con sieri dei gruppi I (O) e II (A) indica che c'è agglutinogeno B nel sangue del test, cioè il sangue appartiene al gruppo III (B); d) l'agglutinazione in tutte le gocce indica la presenza di agglutinogeni A e B nel sangue del test, ad es. il sangue appartiene al gruppo IV (AB), tuttavia, poiché l'agglutinazione con tutti i sieri è possibile a causa di una reazione aspecifica, è necessario mettere sulla piastra una goccia di siero IV (AB) del gruppo IV (AB) e aggiungere 1 goccia del sangue di prova ad esso in un rapporto di siero 10: 1 e il sangue viene trasfuso e osservare il risultato entro 5 minuti. Se l'agglutinazione non si è verificata, il sangue studiato viene riferito al gruppo IV (AB).
8. L'identificazione di altre combinazioni indica definizione sbagliata affiliazione di gruppo del sangue del paziente. In caso di debole agglutinazione e in tutti i casi dubbi, il sangue viene ricontrollato con sieri standard altra serie.
9. Gli errori nella determinazione del gruppo sanguigno e l'agglutinazione non rilevata possono essere dovuti a: 1) debole attività del siero standard o bassa agglutinabilità degli eritrociti; 2) una quantità eccessiva di sangue di prova aggiunto al siero standard; 3) reazione di agglutinazione ritardata quando alta temperatura ambiente. Per evitare errori: 1) utilizzare siero attivo con un titolo 1:32 sufficientemente alto; 2) il rapporto tra il volume del sangue studiato e il siero standard 1:10; 3) lo studio viene effettuato a una temperatura non superiore a 25 ° C; 4) valutare i risultati non prima di 5 minuti dopo lo studio; 5) osservare rigorosamente e scrupolosamente tutte le regole dello studio.

Compito numero 1.

C'è un bambino di 6 anni trattamento ospedaliero diagnosticato con ascariasis. Alla visita infermieristica infermiera ha ricevuto i seguenti dati: lamentele di nausea, vomito, dolore all'ombelico, perdita di appetito, perdita di peso, affaticamento, sonno agitato, terrori notturni. Malato per diverse settimane.

Obiettivamente: la pelle è pallida, lo strato di grasso sottocutaneo non è sufficientemente sviluppato, c'è dolore alla palpazione nella regione ombelicale. Sedia secondo il ragazzo senza patologia.

Appuntamenti:

1. Feci su i / verme

2. Analisi del sangue generale

4. Dieta numero 5

Compiti:

1. Identificare la soddisfazione, i bisogni violati ei problemi del paziente.

2. Giustificare i problemi del paziente.

3. Definire gli obiettivi e creare un piano di intervento infermieristico motivato

4. Raschiatura per enterobiasi

Compito numero 2.

Il paziente lamenta febbre fino a 39°C, debolezza, debolezza in tutto il corpo, dolore muscolare, dolori articolari, dolore al movimento bulbi oculari, tosse secca dolorosa, eruzioni erpetiche sulle labbra.

Oggettivamente: pelle alta umidità, labbro superiore eruzioni erpetiche, iperemia congiuntivale, lacrimazione, iperemia nella faringe, respiro affannoso nei polmoni. HR-86 in 1 minuto, PA 110/70 mm Hg. Arte. Il fegato e la milza non sono ingrossati. Partenze fisiologiche senza caratteristiche.

Nell'analisi del sangue: L- 4,5 * 10 9 / l, p / i- 3; s / io - 40; l-52; m-5; ESR-18mm/ora.

Esercizio

1. Identificare i problemi del paziente, la cui soddisfazione è compromessa; formulare e giustificare i problemi del paziente.

2. Fissare obiettivi e fare un piano interventi infermieristici con motivazione.

3. Dì le regole per impostare l'insulina.

ISTRUZIONI

Informazioni sulla tecnica di manipolazione

"La tipizzazione del sangue con

sera (secondo il sistema ABO) »

per specialità

2-79 01 01 "Medicina",

2-79 01 31 "Infermieristica"

Determinazione del gruppo sanguigno utilizzando

isoemoagglutinante standard

sera (secondo il sistema ABO)

Indicazioni: la necessità di trasfusioni di sangue, preparazione per un intervento chirurgico.

Supporto materiale:

1) due serie di sieri emoagglutinanti standard in appositi rack;

2) flacone con soluzione isotonica di cloruro di sodio;

3) compresse etichettate;

5) una pipetta per prelevare il sangue;

6) pipette per soluzione isotonica;

7) clessidra per 5 minuti;

8) guanti;

9) disinfettante regolamentato.
La determinazione del gruppo sanguigno viene effettuata in una stanza con una buona illuminazione e una temperatura compresa tra +15 e +20 °C. La manipolazione viene eseguita con i guanti. In presenza di danni alla pelle, l'infermiera è temporaneamente sospesa dal lavoro. In caso di contatto con sangue sulla pelle o sulle mucose, il trattamento viene eseguito secondo le attuali istruzioni.

Sequenza di esecuzione:

1. Controllare la qualità dei sieri emoagglutinanti standard:

1) mediante marcatura a colori;

2) aspetto (leggero, trasparente);

3) conservazione dell'ampolla;

4) la presenza di un'etichetta correttamente disegnata indicante il gruppo sanguigno, il titolo, la data di scadenza, il luogo di preparazione;

2. Metti sul tavolo:

1) due set di sieri emoagglutinanti standard di tre gruppi (O, A, B) di due serie e una fiala con siero AB (IV), ogni fiala deve avere una pipetta;

2) flacone con soluzione isotonica, pipetta;

3) compressa etichettata sterile;

4) vetrini (barre di vetro);

5) una pipetta per prelevare il sangue;

6) clessidra;

3. Scrivi sul tablet il nome completo. paziente, gruppo sanguigno;

4. Indossare i guanti;

5. Applicare 1 goccia (0,1 ml) di sieri emoagglutinanti standard di tre gruppi di due serie nelle corrispondenti cavità della compressa sulla compressa;

6. Applicare 1 goccia di sangue da un dito o da una provetta con una pipetta nella cella appropriata;

7. Mettere 1 piccola goccia (0,1 ml) del sangue di prova in ciascun pozzetto della piastra, accanto al siero, nel rapporto sangue: reagente -1:10 (prelevare il sangue da una goccia grande utilizzando diverse bacchette di vetro);

8. Mescolare il sangue con il reagente, dopo la miscelazione agitare delicatamente la piastra tra le mani. Aggiungere 1 goccia di soluzione di cloruro di sodio allo 0,9% a gocce di siero con eritrociti, dove si è verificata l'agglutinazione, ma non prima di 3 minuti;

9. Valutare il risultato 5 minuti dopo l'inizio della reazione:

1) la reazione di agglutinazione può essere positiva e negativa;

2) se i sieri hanno dato una reazione positiva, il sangue contiene entrambi gli agglutinogeni AB, in questo caso è necessario eseguire un ulteriore studio di controllo con siero standard di gruppo AB (IV);

10. Disinfettare il materiale di scarto.

IN medicina moderna gruppo sanguigno caratterizza un insieme di antigeni situati sulla superficie degli eritrociti, che ne determinano la specificità. Esiste un numero enorme di tali antigeni (di solito viene utilizzata una tabella dei gruppi sanguigni con vari antigeni), ma la determinazione del gruppo sanguigno viene generalmente eseguita utilizzando la classificazione secondo il fattore Rh e il sistema AB0.

La definizione di un gruppo è una procedura obbligatoria in preparazione di qualsiasi operazione. Tale analisi è necessaria anche quando si entra in servizio in alcuni contingenti, compresi i militari, i lavoratori organi interni e strutture di potere. Questo intervento viene eseguito a causa dell'aumento del rischio di una condizione pericolosa per la vita al fine di ridurre il tempo necessario per fornire assistenza sotto forma di trasfusione di sangue.

La composizione del sangue di vari gruppi sanguigni

L'essenza del sistema AB0 è la presenza di strutture antigeniche sugli eritrociti. Nel plasma non ci sono anticorpi tipici corrispondenti a loro (gammaglobuline). Pertanto, per un esame del sangue, è possibile utilizzare la reazione "antigene + anticorpo".

I globuli rossi si uniscono quando l'antigene e l'anticorpo si incontrano. Questa reazione è chiamata emoagglutinazione. La reazione appare come piccoli fiocchi durante l'analisi. Lo studio si basa sull'imaging di agglutinazione del siero.

Gli antigeni eritrocitari "A" si legano agli anticorpi "ά", così come "B" a "β", rispettivamente.

I seguenti gruppi sanguigni si distinguono per composizione:

  • I (0) - ά, β - la superficie degli eritrociti non contiene affatto antigeni;
  • II (A) - β - sulla superficie sono presenti l'antigene A e l'anticorpo β;
  • III (B) – ά - la superficie contiene B con anticorpo di tipo ά;
  • IV (AB) - 00 - la superficie contiene entrambi gli antigeni, ma non ha anticorpi.

L'embrione ha già antigeni nello stato dell'embrione e le agglutinine (anticorpi) compaiono nel primo mese di vita.

Metodi di determinazione

Metodo standard

Esistono molte tecniche, ma il laboratorio di solito utilizza sieri standard.

Il metodo dei sieri standard viene utilizzato per determinare i tipi di antigeni AB0. La composizione del siero isoemoagglutinante standard contiene una serie di anticorpi contro le molecole di eritrociti. In presenza di un antigene suscettibile all'azione degli anticorpi, si forma un complesso antigene-anticorpo che innesca una cascata di risposte immunitarie.

Il risultato di questa reazione è l'agglutinazione degli eritrociti, in base alla natura dell'agglutinazione in corso, è possibile determinare se il campione appartiene a qualche gruppo.

Per la preparazione del siero standard, viene utilizzato il sangue del donatore e viene utilizzato un determinato sistema, isolando il plasma, inclusi gli anticorpi, e quindi diluendolo. La diluizione viene eseguita utilizzando una soluzione isotonica di cloruro di sodio.

L'allevamento è fatto in questo modo:

Lo studio stesso viene svolto nel modo seguente:

  1. SU tavoletta speciale posizionare una goccia di ciascun siero (con un volume totale di circa 0,1 millilitri) sull'area in cui è presente un segno corrispondente (vengono utilizzati 2 campioni, uno dei quali è di controllo, il secondo è destinato alla ricerca).
  2. Quindi, accanto a ciascuna goccia di siero, il campione di prova viene posto in un volume di 0,01 millilitro, dopodiché viene miscelato separatamente con ciascun diagnostico.

Regole per la decodifica dei risultati

Dopo cinque minuti, puoi valutare i risultati dello studio. In grandi gocce di siero si verifica la chiarificazione, in alcuni c'è una reazione di agglutinazione (si formano piccoli fiocchi), in altri no.

Video: Determinazione del gruppo sanguigno e del fattore Rh

Ecco le possibili opzioni:

  • Se non vi è alcuna reazione di agglutinazione in entrambi i campioni con i sieri II e III (+ controllo 1 e IV) - la definizione del primo gruppo;
  • Se la coagulazione è osservata in tutti i campioni tranne II - la definizione del secondo;
  • In assenza di una reazione di agglutinazione solo in un campione del gruppo III - definizione III;
  • Se si osserva coagulazione in tutti i campioni, compreso il controllo IV, la definizione di IV.

Quando i sieri sono disposti nell'ordine corretto e le etichette sono sulla piastra, è facile navigare: il gruppo corrisponde a luoghi senza agglutinazione.

In alcuni casi, l'incollaggio non è chiaramente visibile. Quindi l'analisi deve essere ripetuta, si osserva un'agglutinazione fine al microscopio.

Metodo di reazione incrociata

L'essenza di questa tecnica è la determinazione degli agglutinogeni utilizzando sieri standard o colicloni con una determinazione parallela delle agglutinine utilizzando eritrociti di riferimento.

La tecnica di analisi con il metodo incrociato non presenta praticamente differenze rispetto allo studio che utilizza i sieri, ma ci sono alcune aggiunte.


Aggiungere goccia a goccia di eritrociti standard alla piastra sotto i sieri. Quindi, il plasma viene prelevato dalla provetta con il sangue del paziente, che è passato attraverso la centrifuga, con una pipetta, che viene posta sugli eritrociti standard in basso, aggiunta al siero standard.

Oltre che secondo la tecnica del metodo standard, i risultati dello studio vengono valutati pochi minuti dopo l'inizio della reazione. Nel caso di una reazione di agglutinazione si può parlare della presenza di agglutinine AB0, nel caso di una reazione plasmatica si può giudicare di agglutinogeni.

I risultati di un esame del sangue utilizzando eritrociti e sieri standard:

La presenza di agglutinazione nella reazione con sieri isoemoagglutinanti standard La presenza di agglutinazione nella reazione con eritrociti standard Gruppi sanguigni
0(io)A(II)B(III)AB(IV)0(io)A(II)B(III)
- + + 0(io)
+ + - + A(II)
+ + - + B(III)
+ + + AB(IV)

Agglutinazione;

- nessuna agglutinazione;

- non viene eseguita alcuna reazione.

Il metodo incrociato si è diffuso grazie al fatto che previene gli errori diagnostici che si verificano quando si utilizzano metodi standard.

Determinazione del gruppo sanguigno mediante tsoliklons

I tsoliklon sono sostituti sierici sintetici che contengono sostituti artificiali delle agglutinine ά e β. Sono chiamati eritrotest "Zoliklon anti-A" (hanno colore rosa), così come "anti-B" (have Colore blu). L'agglutinazione prevista si osserva tra le agglutinine del coliclo e gli eritrociti del sangue.


Questa tecnica non richiede due serie, è più affidabile e precisa. La conduzione di uno studio e la valutazione dei suoi risultati avvengono allo stesso modo del metodo standard.

Tipo di tsoliklon Gruppo sanguigno
Risultato dell'agglutinazioneAnti-AAnti-B
- - 0(io)
+ - A(II)
- + B(III)
+ + AB(IV)

Il gruppo IV (AB) è necessariamente confermato dall'agglutinazione con coliclone anti-AB, nonché dall'assenza di agglutinazione eritrocitaria nella soluzione isotonica di cloruro di sodio.

Metodo espresso utilizzando il set "Erythrotest-Groupcard"

Sebbene i metodi generalmente accettati per determinare il sangue appartenente a un particolare gruppo siano diffusi, nella medicina moderna vi è un'introduzione di metodi espressi, il più comune dei quali è "Erythrotest".

Quando si determina un gruppo utilizzando il metodo "Erythrotest groupcard", è necessario un set di strumenti, inclusi i seguenti dispositivi:

  • Una tavoletta con cinque pozzetti per determinare il gruppo in base alla sua affiliazione Rh e al sistema AB0;
  • Scarificatore progettato per ottenere un campione necessario per la ricerca;
  • Bacchette di vetro per la miscelazione di campioni;
  • Una pipetta pulita per un set di soluzioni.

Tutti questi strumenti sono necessari per una diagnostica senza errori.

Il kit per analisi del sangue Erythrotest-Groupcard consente di studiare il fattore Rh e determinare il gruppo sanguigno in qualsiasi condizione, è particolarmente efficace in assenza della possibilità di utilizzare metodi convenzionali.

Nei pozzetti sulla piastra ci sono tsoliklones agli antigeni (questi sono tsoliklones anti-A, -B, -AB) e all'antigene principale, che determina l'ereditarietà del fattore Rh (è tsoliklon anti-D). Il quinto pozzetto contiene un reagente di controllo che aiuta a prevenire possibili errori e determinare correttamente l'appartenenza al gruppo sanguigno.

Video: determinazione dei gruppi sanguigni mediante tsoliklon

I gruppi sanguigni sono normali ereditati vari segni immunologici di sangue. Sulla base di queste caratteristiche, tutte le persone sono divise in quattro gruppi, indipendentemente da razza, età e sesso. Il gruppo sanguigno di una persona rimane costante per tutta la vita. Le persone di un gruppo sanguigno differiscono dalle persone di altri gruppi sanguigni per la presenza o l'assenza di agglutinogeni (A e B) contenuti negli eritrociti e agglutinine α e β contenute nel siero.

Gruppi sanguigni del sistema AB0: il gruppo sanguigno 0(I) contiene agglutinine α e β, gli agglutinogeni sono assenti in esso; A (II) gruppo sanguigno - agglutinina α e agglutinogeno A; B(III) gruppo sanguigno-agglutinina e agglutinogeno B; Gruppo sanguigno AB (IV) - contiene agglutinogeni A e B, le agglutinine sono assenti.

Il ricevente è la persona a cui viene trasfuso il sangue, il donatore è la persona che dona il proprio sangue per la trasfusione. Idealmente compatibile per il ricevente è il sangue dello stesso gruppo. Il sangue è assolutamente incompatibile se il ricevente ha agglutinine negli eritrociti del donatore, poiché in questi casi l'agglutinogeno A di un sangue è combinato con l'agglutinina A dell'altro, o l'agglutinogeno B con l'agglutinina β. Il cosiddetto si sviluppa, cioè l'incollaggio degli eritrociti in grumi piccoli e grandi. Trasfusione sangue incompatibile porta a gravi conseguenze e può essere la causa della morte. Un destinatario del gruppo 0 (I) non può essere trasfuso con sangue di nessun altro gruppo, ad eccezione dello stesso. Il ricevente del gruppo AB(IV) non ha agglutinine, quindi può essere trasfuso con sangue di tutti i gruppi. Il destinatario del gruppo AB(IV) è un destinatario universale. Il sangue del gruppo 0 (I) può essere trasfuso a persone di qualsiasi gruppo sanguigno. Pertanto, le persone con gruppo 0 (I) sono chiamate donatori universali.

Oltre agli agglutinogeni A e B, a volte negli eritrociti si trovano altri agglutinogeni (ad esempio, ecc.). Nei casi in cui il sangue è incompatibile con il fattore Rh (vedi), è anche impossibile trasfondere per evitare gravi complicazioni associate alla distruzione dei globuli rossi (emolisi).

Prima di ogni trasfusione di sangue, eseguita secondo la prescrizione e sotto la supervisione di un medico, è imperativo determinare il gruppo sanguigno e identificarne la compatibilità.


Riso. 1-4. Determinazione dei gruppi sanguigni con sieri standard (A, B, 0).
Riso. 1. Sangue testato del gruppo 0 (I).
Riso. 2. Sangue testato del gruppo A (II).
Riso. 3. Sangue testato del gruppo B (III).
Riso. 4. Sangue testato del gruppo AB (IV).

Metodo per la determinazione dei gruppi sanguigni. Per determinare il gruppo sanguigno, preparare una piastra pulita, una matita di vetro, sieri standard dei gruppi sanguigni 0 (I), A (II) e B (III), fiale con soluzione isotonica di cloruro di sodio, alcool e iodio, cotone assorbente, vetro vetrino o bacchette di vetro e tre pipette, che devono essere asciutte (l'acqua distrugge).

La lastra è divisa con una matita in tre settori, che denotano 0 (I), A (I), B (III). Una grossa goccia di siero standard di gruppi sanguigni 0 (I), A (II), B (III) viene applicata al settore corrispondente con varie pipette. Dopo che una goccia di siero è stata rilasciata dalla pipetta, viene immediatamente abbassata nella fiala da cui è stata prelevata. Il dito viene pulito con alcool prima di prelevare il sangue. Dopo un'iniezione nella polpa del dito, una goccia di sangue viene spremuta con un ago. Con una bacchetta di vetro o l'angolo di un vetrino pulito, tre gocce di sangue (ciascuna delle dimensioni di una capocchia di spillo) vengono trasferite su una piastra accanto ai sieri di sangue 0 (I), A (II) e B (III) gruppi. Dopo aver annotato l'ora sull'orologio, ogni volta con nuove bacchette di vetro mescolare il sangue alternativamente con i sieri dei gruppi sanguigni 0 (I), A (II) e B (III), fino a quando la miscela diventa uniformemente rosa. La determinazione del gruppo sanguigno viene eseguita entro 5 minuti. (segui l'orologio). Trascorso questo tempo, ad ogni goccia della miscela viene aggiunta una goccia di soluzione isotonica di cloruro di sodio. Successivamente, il piatto con il sangue viene leggermente scosso, inclinato verso l'interno lati diversi in modo che la miscela si mescoli bene con la soluzione isotonica di cloruro di sodio, ma non si diffonda sul vetro. Con reazione positiva, entro i primi minuti dall'inizio della miscelazione, ancor prima dell'aggiunta di una soluzione isotonica, nella miscela compaiono minuscoli granelli rossi, costituiti da globuli rossi incollati tra loro. I piccoli grani si fondono in quelli più grandi e talvolta in scaglie misure differenti(il fenomeno dell'agglutinazione). Con una reazione negativa, la miscela rimane uniformemente colorata di rosa. Quando si esegue un test con i tre sieri sopra elencati per ciascun gruppo sanguigno, può verificarsi una certa combinazione di reazioni positive e negative (Fig. 1-4). Se tutti e tre i sieri hanno dato una reazione negativa, cioè tutte le miscele sono rimaste uniformemente colorate di rosa, il sangue testato appartiene al gruppo 0 (I). Se solo il siero A (I) del gruppo sanguigno ha dato una reazione negativa e i sieri dei gruppi sanguigni 0 (I) e B (III) hanno dato una reazione positiva, ad es. il gruppo A (II). Se il siero B(III) del gruppo sanguigno ha dato una reazione negativa e i sieri dei gruppi sanguigni 0(I) e A(II) sono positivi, allora il sangue testato appartiene al gruppo B(III). Se tutti e tre i sieri hanno dato reazioni positive, cioè la granularità è apparsa ovunque, il sangue testato appartiene al gruppo AB (IV). Qualsiasi altra combinazione indica un errore nella definizione. Cause di errori nella determinazione dei gruppi sanguigni e misure per prevenirli. 1. Sangue in eccesso se viene prelevata una goccia troppo grande. Una goccia di sangue dovrebbe essere 10 volte più piccola di una goccia di siero. 2. Se i sieri sono deboli o gli eritrociti del soggetto non aderiscono bene, si può osservare l'agglutinazione (vedi), poiché la reazione inizia tardivamente o è lieve. È necessario prendere sieri affidabili, la cui attività è controllata e la data di scadenza non è scaduta. 3. A basse temperature ambiente, può verificarsi agglutinazione a freddo aspecifica - panagglutinazione. L'aggiunta di cloruro di sodio isotonico seguita dall'agitazione della piastra di solito elimina l'agglutinazione a freddo. Per evitare ciò, la temperatura dell'aria ambiente non deve essere inferiore a 12 e non superiore a 25°. 4. Con una lunga osservazione, la miscela inizia ad asciugarsi dalla periferia, dove a volte appare la granulosità. In assenza di granularità nella parte liquida della miscela si può parlare di reazione di agglutinazione negativa.

Dopo aver determinato il gruppo sanguigno, il medico deve immediatamente effettuare una registrazione sul foglio anteriore. Dopo aver terminato il lavoro, la piastra, le pipette e i vetrini devono essere accuratamente lavati sotto il rubinetto con acqua tiepida, asciugati e riposti in un armadietto. in fiale o flaconcini sono conservati in un locale asciutto e caldo in un armadio chiuso a t° non superiore a 20°.

La determinazione del gruppo sanguigno mediante eritrociti standard (la cosiddetta doppia reazione) viene utilizzata solo nei laboratori e nelle stazioni. IN lavoro quotidiano utilizzare la reazione di agglutinazione con sieri standard secondo il metodo sopra descritto.

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