Mikrobiologija: bilješke s predavanja Tkachenko Ksenia Viktorovna

2. Botulizam

2. Botulizam

Uzročnik botulizma pripada rodu Clistridium, vrsti Cl. botulinum. Uzročnik je trovanja hranom.

Toksikoza hranom je bolest koja nastaje konzumiranjem hrane koja sadrži egzotoksine uzročnika, pri čemu sam uzročnik nema presudnu ulogu u razvoju bolesti.

Cl. botulinum su Gram-pozitivni veliki štapići. Tvore subterminalno smještene spore. Kapsule ne. Strogi anaerobi.

Razmnožava se na krvno glukoznom agaru nepravilnog oblika kolonije s izdancima ili glatkim rubovima, zona hemolize oko kolonija. Kada rastu u stupcu agara, nalikuju kuglicama vate ili leći. U tekućim medijima nastaje jednolično zamućenje, a potom kompaktni talog pada na dno epruvete.

Prirodno stanište Clostridium botulizma je crijeva riba, životinja, mikroorganizmi ulaze u tlo s izmetom. Sposoban Dugo vrijeme opstaju i razmnožavaju se u vanjskom okolišu u obliku oblika spora. Vegetativni oblici su nestabilni u vanjskom okruženju.

Enzimska aktivnost je nestabilna i ne služi za identifikaciju.

Prema antigenskoj strukturi proizvedenih toksina razlikuju se serovari A, B, C1, D, E, F, Q. Antigenska specifičnost samih bakterija nije određena.

Clostridium botulinum proizvodi najjači egzotoksin, botulinum. Botulinum toksin se nakuplja u prehrambeni proizvod množeći se u njemu. Ovi proizvodi se obično konzerviraju kuhanje kod kuće, dimljene kobasice itd.

Toksin ima neurotropni učinak. S razvojem bolesti uvijek se javlja toksinemija, zahvaćena je medula oblongata i jezgre kranijalnih živaca. Toksin je otporan probavni enzimi, brzo se apsorbira iz gornje divizije probavnog trakta u krv i ulazi u neuromuskularne sinapse.

Botulinum toksin veže se za membranu sinaptosoma i endocitozom ulazi u živčanu stanicu.

Mehanizam djelovanja toksina je inhibicija oslobađanja acetilkolina ovisnog o kalciju, blokada funkcionalna aktivnost neuron. Prije svega, pogođeni su bulbarni živčani centri. Javljaju se opća intoksikacija, znakovi oštećenja organa vida - dupli vid, poremećaj smještaja, proširene zjenice, oštećenje okulomotornih mišića. Istodobno, gutanje postaje otežano, pojavljuje se afonija, glavobolja, vrtoglavica, povraćanje.

Bolest ima visoku stopu smrtnosti.

Dijagnostika:

1) infekcija laboratorijskih miševa; materijal - povraćanje, ispiranje želuca, izmet, krv;

2) detekcija toksina u reakciji neutralizacije toksina;

3) serodijagnostika.

Liječenje: antitoksični antibotulinski serum.

BOTULIZAM(lat. botulus kobasica; sin. botulizam) - teška intoksikacija koja se javlja kao posljedica konzumacije hrane koja sadrži toksine Clostridium botulinum, a karakterizira je dominantna lezija središnjeg i autonomnog živčanog sustava.

Statistika

Postojeće statistike ne odražavaju stvarnu veličinu učestalosti ljudi B. Pouzdanije su i potpunije tamo gdje se provodi detaljan laboratorijski pregled svih akutnih i smrtonosnih slučajeva bolesti, a praktički ih nema u mnogim zemljama gdje smrtni slučajevi nisu predmet na pregled i ne postoje uvjeti za hospitalizaciju bolesnika. I u razvijenim zemljama tek se posljednjih desetljeća počela diferencirati ova skupina teških intoksikacija prema vrsti toksina koji su uzrokovali njihov nastanak, što je neophodan uvjet za pravodobno i pravilno liječenje bolesnika. Mayer (K. Meyer, 1956), analizirajući incidenciju B. u svijetu 50 godina, vjeruje da je u tom razdoblju 5635 ljudi oboljelo, od kojih je 1714 umrlo.

Ove statistike temelje se na pojedinačnim publikacijama. U SAD-u za 65 godina (1899-1964) registrirana su 1574 slučaja, od kojih je 955 (60,6%) umrlo. U Rusiji je od 1818. do 1913. prijavljeno 609 pacijenata s B., od kojih je oko polovica umrlo. Poboljšanjem statističke evidencije morbiditeta u našoj zemlji od 1920. do 1939. poznata su 674 bolesnika s B., od kojih je više od četvrtine umrlo. U Japanu je od 1951. do 1964. registrirano 297 pacijenata s B., od kojih je 78 umrlo. U Francuskoj, prije okupacije fašističkih trupa, registrirana su 24 slučaja B.; tijekom okupacije, broj slučajeva premašio je 1 tisuću ljudi, što je, kako se pokazalo, bilo povezano s jedenjem mesa svinja tajno zaklanih u nehigijenskim uvjetima.

Etiologija

Uzročnik botulizma Clostridium botulinum (sin. Bacillus botulinus) opisao je 1896. Van Ermengem (E. van Ermengem) tijekom istraživanja izbijanja B. u Njemačkoj. B. proučavanje etiologije u narednim godinama pokazalo je da bolest uzrokuje nekoliko patogena koji pripadaju istoj vrsti. Poznato je šest tipova uzročnika botulizma: A, B, C, D, E, F. Podjela na tipove povezana je s izvornom antigenskom strukturom egzotoksina koji proizvodi stanica. Svaki tip toksina može se potpuno neutralizirati samo serumom homolognog tipa.

Uzročnici B. su široko rasprostranjeni u prirodi. Trajno stanište spora ovih bakterija je tlo, odakle dospijevaju u vodu, voće i povrće, prehrambene proizvode, stočnu hranu, a zatim u crijeva ljudi i životinja (sisavaca, ptica, riba, beskralješnjaka). Burke (G. Burke, 1919.) tijekom istraživanja u Kaliforniji izolirao je 235 usjeva iz vode, sijena, vrtnog tla, insekata, pauka, puževa, konjskog gnoja, crijevnog sadržaja ptica. U svim gore navedenim objektima uzročnici B. stvaraju spore koje su otporne na djelovanje kemikalija. i fizički čimbenici. Vegetativni oblici uzročnika B. ugibaju pri kuhanju 2-5 minuta, oblici spora nekih sojeva, posebno tipova A, B, C, F, vrlo su termorezistentni. Podnose 1-5 sati vrenja i umiru tek u autoklavu. Botulinum toksin se djelomično uništava kada se zagrije na t° 70-90°, kada se kuha 5-15 minuta. potpuno se uruši.

Kod nas su u okolišu najčešći tipovi A, B, E, rjeđe tipovi C i F, tipovi A, B, E nalaze se kod bolesti kod ljudi, tipovi A, B, C, E nalaze se kod životinja.

Svih šest vrsta Cl. botulinum vrlo su bliski po svojim morfološkim, kulturalnim svojstvima i po djelovanju svojih toksina na ljudski i životinjski organizam. Daju istu kliničku sliku bolesti.

Epidemiologija

Osobitost epidemiologije B. određena je činjenicom da se ne prenosi s bolesne osobe na zdravu. Glavni rezervoar infekcije u B. su toplokrvne životinje (uglavnom biljojedi), rjeđe ribe, rakovi, mekušci, u čijim se crijevima nakuplja Cl. botulinum, izmetom se izlučuju u okoliš, gdje postaju spore. Naknadno klijanje spora na organskim supstratima u anaerobnim uvjetima, osobito u temperaturnom rasponu od 22-37°C, praćeno je nakupljanjem mikroba i njihovih toksina.

Prevalencija bolesti u zemljama svijeta određena je: kontaminacijom sporama Cl. botulinum predmeti okoliš, stupanj osjetljivosti osobe na toksin ove vrste, kao i priroda proizvodnje (pripreme) prehrambenih proizvoda i karakteristike prehrane i svakodnevnog života stanovništva. Odsutnost Cl. spora u okolišnim objektima. botulinum, naravno, isključuje mogućnost njihovog ulaska u prehrambene proizvode, i Moderna tehnologija njihova proizvodnja čak iu prisutnosti spora sprječava zadržavanje ili nakupljanje botulinum toksina tijekom skladištenja proizvoda.

Ljudska osjetljivost na botulinum toksin tipa A, B, C, D, E i F varira. To potvrđuju epidemiološki podaci o širenju bolesti i kontaminaciji okolišnih objekata sporama, kao i podaci o različitoj osjetljivosti pokusnih i poljoprivrednih. životinje na različite vrste otrova.

Spore Cl. botulinum su široko rasprostranjeni. Prema V. M. Bermanu (1941.), "cijela je priroda izvor botulizma", što naglašava raširenu kontaminaciju okolišnih objekata sporama patogena. Međutim, statistika nalaza spora je beznačajna. To je zbog ograničenih i ciljanih pretraživanja povezanih s novonastalim bolestima ili potrebe za istraživanjem određenih područja odakle se dobavljaju povrće ili riblji proizvodi za Industrija hrane.

Poboljšanje laboratorijskih istraživačkih metoda u smjeru utvrđivanja karakteristika metabolizma patogena i raširena uporaba seruma specifičnih za tip omogućili su pouzdanije utvrđivanje kontaminacije okoliša različitim vrstama Cl. botulinum i prikazati suvremenu geografiju njihove rasprostranjenosti.

Prilikom istraživanja raznih uzoraka, uzetih u regijama Sjevernog Kavkaza, Azovskog i Kaspijskog mora, Primorskog kraja, Dalekog istoka, Lenjingrada, spore patogena B. pronađene su u 9% uzoraka tla i 4% uzoraka vode. Istodobno, u uzorcima tla pronađene su spore uzročnika tipova A, B, C i E, au uzorcima vode i mulja tipa E. Među pozitivnim nalazima tip E je cca. 74%; pronađen je u tlu obala vodenih tijela u gotovo svim istraživanim područjima, drugo mjesto po učestalosti nalaza zauzima tip B (16,5%), treće - tip A (7,8%) i četvrto - prema tipu C (1,8%). U 33% istraživanih uzoraka tla s obala ez Balkhash i neke regije Armenske SSR, spore patogena B.

Prema inozemnim istraživanjima, najčešći nalazi spora uzročnika B. javljaju se u istraživanju graha (32%), raspadajućih biljaka (20%) i fermentirane zelene krme (20%).

Pri analizi učestalosti B. skreće se pozornost na činjenicu da su sve bolesti uzrokovane trima vrstama otrova - A, B i E, s tim da u svakoj pojedinoj zemlji prevladava jedan od njih. Tako je u SAD-u tip A najčešći uzročnik B., u Francuskoj i Norveškoj tip B, u Japanu su gotovo sve bolesti povezane s tipom E, u Kanadi prevladava tip E. Kod nas su bolesti uzrokovane trima vrstama toksina (A, B i E). Bolesti uzrokovane toksinima kao što su C, D, F izuzetno su rijetke. Jedan slučaj grupnog trovanja (jezero Čad) uzrokovan otrovom tipa

D. Opisani su i izolirani slučajevi trovanja toksinom tipa C. Što se tiče patogena koji proizvodi toksin tipa F, nedavno otkrivenog u SSSR-u, bolesti povezane s njim registrirane su samo u Danskoj i SAD-u po jednom.

Dakle, očita je nejednakost u patologiji botulinum toksina različitih vrsta. To nije uzrokovano toliko vjerojatnošću da bilo koja vrsta toksina uđe u ljudsko tijelo, koliko prirodnom otpornošću osobe na jednu i visokom osjetljivošću na druge vrste toksina, iako postoji mišljenje (K. I. Matveev, 1959.) da sve toplokrvne životinje, uto. sati i ljudi su jednako osjetljivi na sve vrste botulinum toksina. Međutim, poznato je da stupanj osjetljivosti toplokrvnih životinja nije isti. Visoku otpornost na botulinum toksin imaju svinje, psi, vukovi, lisice, divlje i domaće mačke, lavovi, tigrovi i mnoge ptice. Ove vrste su "bolničari" koji uništavaju bolesne životinje i strvinu, a priroda njihove prehrane pruža izuzetne mogućnosti kontakta s uzročnicima B. i njihovim otrovima. Najosjetljiviji na botulinum toksine su konji, čija priroda isključuje širinu takvih kontakata, te mnoge laboratorijske životinje. to biološki fenomen, koji se sastoji u različitoj osjetljivosti toplokrvnih životinja na predstavnike jedne skupine toksina, nalazi objašnjenje u evolucijskom razvoju vrsta i njihovom odnosu s patogenima B. U procesu te evolucije, određeni dio jedinki vrste koje su imale individualnu (ali genotipski determiniranu) sposobnost da se u većoj mjeri odupru patogenom djelovanju otrova preživjele su prenoseći ta svojstva na sljedeću generaciju. Mora se pretpostaviti da su daleki preci čovjeka, koji su jeli sirovo i trulo meso, također imali najšire kontakte s uzročnicima B., a prije svega s tipovima C i D, kao i s najstarijim predstavnicima klostridioze.

patološka anatomija

Patoanatomske promjene nađene na obdukciji bolesnika umrlog od B. ne predstavljaju ništa specifično. U pravilu se otkriva oštra hiperemija svih visceralnih organa, popraćena višestrukim malim i velikim krvarenjima. Membrane mozga su snažno hiperemične, postoje krvarenja. U tkivu mozga nalaze se tromboze, lezije vaskularnog epitela nekrotične i destruktivne prirode. Zidovi krvnih žila moždanog tkiva su opušteni. Najviše su pogođene ganglijske stanice živčanog sustava. Postoji vakuolizacija protoplazme, dezintegracija jezgre. Mijenja se oblik stanica, procesi otpadaju, promjene se događaju i u neurogliji.

U srcu, vlakna vezivnog tkiva bubre, uočavaju se fenomeni nekrobioze. Dolazi do fragmentacije miokarda; prugasta pruga nestaje. Žile se oštro prelijevaju krvlju, otkriva se oticanje endotela u kapilarama i malim žilama.

Pluća su ispunjena krvlju, edematozna. Postoji oštra slika hemoragična upala pluća; u nekim slučajevima postoji hepatizacija pojedinih dijelova pluća, a ponekad i cijelih režnjeva. Kapilari pluća su oštro prošireni, u alveolama postoji nakupljanje eritrocita. Jetra je krvava, povećana, smećkaste boje, mlohave konzistencije. Mikroskopija pokazuje granularnu degeneraciju stanica jetrenog tkiva, masnu alteraciju, bubrenje kolagenih vlakana vezivnog tkiva, disocijaciju jetrenog parenhima.

U bubrezima je epitel uvijenih tubula jako promijenjen, au ravnim tubulima postoje distrofične promjene.

Sluznica probavnog trakta je oštro hiperemična. Sluznica želuca je otečena, žućkaste boje, opuštena, vrlo lako se kida, točkasta i u njoj su vidljiva veća krvarenja. Crijevne žile su oštro ubrizgane i daju seroznoj membrani mramorni uzorak; crijevna sluznica je natečena, mikroskopski se otkriva vazodilatacija, oštećenje stijenke i oslobađanje crvenih krvnih stanica.

Iz skeletni mišić najviše je zahvaćena muskulatura prsnog koša, trbušnog zida i udova. Mišići su "kuhani", sa sivkastim izgledom; mikroskopom se vidi vazodilatacija, zastoj u kapilarama, poprečna pruga nestaje, vlakna bubre, izgledaju kao kod Zenkerove degeneracije.

Patogeneza

Glavni patogenetski faktor u B. je botulinum toksin. Prema brojnim znanstvenicima, patogeneza B. ima toksičan karakter. Treba napomenuti važnu značajku u vezi s genezom intoksikacije toksinom tipa E. Na hranjivim supstratima ova vrsta patogena B. stvara toksin manje snage od patogena tipova A, B i F, međutim, težina intoksikacije a letalitet kod B. tipa E premašuje, u pravilu, onaj kod B. tipova A, B i F. Razlog ovim razlikama je postojanje toksina E u dva oblika: protoksin i toksin.

Neaktivni protoksin, dobivanje iz. hrana u želudac, aktivira se enzimima, pretvara se u toksin i već se u aktivnom stanju apsorbira u crijevima. Stoga je oslobađanje želuca od sadržaja, kao važna terapijska mjera kod intoksikacije botulinom izazvane toksinom tipa E, od iznimne važnosti.

Osim kroz probavni trakt, toksin može ući i kroz dišni trakt prilikom udisanja prašine koja ga sadrži. Postoje i slučajevi rane B., kada su spore Cl. botulinum je dospio u ranu sa zemljom, proklijao i izazvao bolest, kao i slučaj bolesti povezan s transfuzijom kadaverične krvi uzete od umrlog od B. (bolest kod umrlog nije prepoznata).

Cl. botulinum izlučuju se iz tijela s izmetom, toksini - s urinom, žuči i izmetom.

U eksperimentu s intoksikacijom botulinom utvrđena su dva važna obrasca: prvi je da istodobna primjena različitih vrsta toksina na kraju dovodi do sumacije toksično djelovanje; drugi obrazac povezan je s fenomenom paradoksalne osjetljivosti, kada ponovljena i česta primjena toksina dovodi do smrti, iako njegova ukupna doza nije premašila polovicu smrtonosne doze. Utvrđeno je da botulinum toksin tipa A selektivno djeluje na periferne kolinergičke živčane završetke, dok su adrenergička tkiva na njega neosjetljiva.

Iz krvi toksin prodire u organe, gdje zahvaća stanice različitih tkiva, prvenstveno živčanog sustava koji je najosjetljiviji na botulinum toksine. Botulinum otrov djeluje na motoričke neurone spinalnih motoričkih centara i produljene moždine, što je uzrok razvoja paralitičkog sindroma, kao i na periferne motorne neuromuskularne uređaje, uzrokujući kršenje prijenosa uzbude od živca do mišića. U ovom slučaju ne postoji potpuna blokada prijenosa impulsa. Osim toga, botulinum toksin u vrlo velikim dozama deprimira tkivno disanje mozga, ali te promjene nisu uzrok smrti. Klinička opažanja i eksperimentalni podaci omogućuju nam da razmotrimo botulinum toksin i vaskularni otrov, čije se djelovanje temelji na oštećenju živčanog sustava srca i krvnih žila. Kratkotrajna perfuzija toksina kroz žile uzrokuje njihov spazam, dugotrajna izloženost dovodi do vaskularne pareze i krhkosti kapilara.

Molekularni mehanizmi interakcije između toksina i stanica ostaju nedešifrirani.

Imunitet

Prenesena bolest ne ostavlja imunitet. Postoje izvješća o ponavljane bolesti. Tako je K. M. Ayanyan (1967.) promatrao B. u dvoje djece 1963. i ponovno u njih godinu dana kasnije. Oboje djece je umrlo. I prvi i drugi put toksin Cl. botulinum tip A.

Klinička slika

Razdoblje inkubacije je 12-24 sata, ali se može produljiti i do 10 dana. Što je kraća inkubacija, to je teži tijek bolesti. Tijekom izbijanja zapažaju se slučajevi bolesti s kratkim i dužim periodima inkubacije, čak i ako su pojedinci jeli istu hranu u isto vrijeme. To je, očito, zbog neravnomjerne raspodjele toksina u prehrambenom proizvodu, kao i individualne osjetljivosti oboljelih.

U velikoj većini slučajeva B. počinje akutno. Simptomi se često mogu manifestirati u obliku tri: glavne opcije: s prevlašću dispeptičkih poremećaja, poremećaja vida ili respiratorne funkcije. U prvoj varijanti, bolest počinje osjećajem mučnine, brzo se pridruži povraćanje, što može biti samo u početno razdoblje bolest. Neki pacijenti primjećuju grčeve, ponekad intenzivnu bol u epigastričnoj regiji. Često postoji osjećaj punoće i punoće želuca. Istodobno se razvija suhoća sluznice usne šupljine, a bolesnici osjećaju jaku žeđ. Karakterizira ga izražena nadutost, zatvor, koji, kao posljedica intestinalne pareze, može biti vrlo uporan. Međutim, u početnom razdoblju bolesti često se opaža labavljenje stolice, dok izmet ne sadrži patološke nečistoće.

Do rani znakovi B. je također uključivao simptome poremećaja gutanja, koji se u nekim slučajevima razvijaju već u prvim satima bolesti. Pacijenti se žale na prisutnost "kvržice" u grlu, bolove pri gutanju, osjećaj "grebanja" iza prsne kosti, a gušenje se pridružuje nešto kasnije.

Ako bolest počinje s poremećajima vida, tada se pacijenti često obraćaju oftalmologu. U početku se žale na "maglu", "mrežu", "muhe" pred očima. Čitanje redovnog fonta je teško ili nemoguće (pareza akomodacije), rjeđe se opaža udvostručenje objekata.

Kod pojedinih pacijenata razvija se "akutna dalekovidnost", rubovi se mogu ispraviti odgovarajućim lećama. Poremećaji vida u početnom razdoblju B. često se javljaju bez dispeptičkih simptoma, što komplicira dijagnozu. Temeljitim pregledom bolesnika, osim raznih poremećaja vida, moguće je ustanoviti prisutnost suhih usta, žeđi, promjene u boji glasa (promuklost, "hrapav" glas), kao i simptome opća intoksikacija: glavobolja, vrtoglavica, opća slabost mišića, umor, nesanica . Svi ti simptomi u početnom razdoblju nisu uvijek dovoljno jasno izraženi ili se mogu propustiti tijekom pregleda zbog oštre prevlasti očnih simptoma. Ako dispeptička varijanta početnih manifestacija B. traje nekoliko sati, poremećaji vida bez drugih karakterističnih manifestacija bolesti mogu trajati nekoliko dana.

Najteži tijek B. nastaje kada početni razvoj respiratorni poremećaji. Pacijenti u punom zdravlju počinju osjećati nedostatak zraka, čine neočekivane pauze tijekom razgovora. Ponekad se te stanke javljaju između pojedinih slogova. Postoji osjećaj stezanja ili težine u prsima, u nekim slučajevima postoje bolovi prsa. Disanje obično nije ubrzano, već površno. Istodobno s respiratornim poremećajima, mijenja se glas, koji postaje ne samo promukao, već također dobiva nazalni ton. Kršenje čina gutanja brzo se pridružuje respiratornim poremećajima. Uvijek su izraženi simptomi opće intoksikacije: glavobolja, jaka slabost mišića, vrtoglavica itd.

Nakon početnih manifestacija B., bolest ulazi u fazu najvećeg razvoja simptoma. Subjektivno, pacijenti bilježe "maglu", "mrežu", "treperenje" ili "muhe" pred očima. Konture objekata postaju mutne. Kada pokušate pročitati slova i linije "raspršiti". Ovi se simptomi razvijaju kao posljedica djelovanja toksina na cilijarni mišić, što dovodi do njegovog opuštanja, što dovodi do paralize smještaja. Često se uočava udvostručenje predmeta, osobito pri okretanju očnih jabučica u stranu. U teškim slučajevima postoji paraliza jednog ili više kranijalnih živaca koji inerviraju mišiće oka, oftalmoplegija (vidi).

Gotovo uvijek postoji izraženo i postojano širenje zjenica - midrijaza. Ovaj se simptom pojavljuje jedan od prvih i traje najdulje. Vrlo često postoji nejednakost učenika - anizokorija (vidi). Reakcija učenika na svjetlost oštro je smanjena ili potpuno odsutna. Ponekad pacijenti ne mogu razlikovati obrise predmeta i percipiraju samo svjetlosne podražaje. Često se opaža ptoza (vidi), često bilateralna, ali stupanj spuštenosti gornjeg kapka može prevladavati na bilo kojoj strani. U težem tijeku B. oči mogu biti potpuno zatvorene, a da bi ih otvorili bolesnici su prisiljeni rukama podići gornji kapak.

Djelovanje botulinum toksina proteže se na okulomotor i abducens živce, postoji kršenje kretanja očnih jabučica, postoji osjećaj udvostručenja predmeta. Obično se ranije javlja pareza lateralnog rektus mišića oka, što dovodi do konvergentnog strabizma. U rijetkim slučajevima, kada prevladava pareza okulomotornog živca, javlja se divergentni strobizam. U teškim B. uočava se istodobno trajno oštećenje svih okulomotornih mišića, što dovodi do potpune nepokretnosti očnih jabučica. U određenog broja bolesnika može se utvrditi prisutnost nistagmusa, češće okomitog.

Poremećaji gutanja su karakteristični simptomi, ali su rjeđi od očnih simptoma. Bolesnici se prvo žale na poteškoće i bol pri gutanju. U budućnosti osjećaju osjećaj "kvržice" u grlu i, konačno, čin gutanja je poremećen. Povezani poremećaj kretanja jezika pogoršava čin gutanja, mijenja artikulaciju. U teškim slučajevima B. pacijent ne može pomaknuti vrh jezika preko ruba zuba. Razvijanje pareze epiglotisa dovodi do nepotpunog zatvaranja dišni put kod gutanja, što stvara mogućnost ulaska hrane u dišne ​​putove, uzrokujući gušenje, kašalj i gušenje.

U bolesnika s poremećajem u aktu gutanja postoji nedostatak faringealnog refleksa, mogu se primijetiti fenomeni pareze mekog nepca. U težim slučajevima palatinska zavjesa je nepomična, visi na korijenu jezika. Kada pokušate progutati vodu, ona istječe kroz nos.

U prvim satima bolesti dolazi do smanjenja boje glasa i promuklosti, što je povezano sa smanjenjem salivacije i suhoće glasnica. Kako se pareza razvija, nejasna artikulacija (“kvržice u ustima”) i nazalnost pridružuju se ovim simptomima, a razvojem pareze glasnica može doći do potpune afonije.

Rjeđe, bolesnici s B. imaju mlitava pareza mišića lica zbog oštećenja VII para kranijalnih živaca. Od prvih sati kod pacijenata se razvija oštra miastenija, rubovi uznemiruju pacijenta tijekom cijelog razdoblja intoksikacije. Međutim, kod B. nikada ne dolazi do lezije osjetljive sfere, kao ni do gubitka svijesti.

U teškim B. karakterističan je razvoj pareze respiratornih mišića, što se izražava u odsutnosti dijafragmalnog disanja, oštrom ograničenju pokretljivosti interkostalnih mišića i nestanku refleksa kašlja. Poremećaj i respiratorni zastoj jedni su od glavnih uzroka smrti kod B. Respiratorno zatajenje ima posebno težak tijek i zato što uz parezu dišne ​​muskulature bolesnici u pravilu imaju upalne procese u plućima. Na početku bolesti pacijenti primjećuju "nedostatak" zraka, osjećaj stezanja i težine u prsima, brzo se umore tijekom razgovora ili prave neočekivane stanke kako bi duboko udahnuli. Brzina disanja može doseći 30-40 u 1 minuti. patološke vrste disanje.

Kardiovaskularni sustav pati drugi put, na temelju intoksikacije, s težim tijekom bolesti (tahikardija, prigušeni tonovi srca, ponekad širenje granica relativna glupost srce, sistolički šum na vrhu, znaci miokardijalne distrofije prema elektrokardiografiji). Arterijski tlak, sistolički i dijastolički, ima određenu tendenciju porasta, što je povezano s vazokonstrikcijskim učinkom toksina.

S B. tjelesna temperatura ne raste, ali u teškim oblicima bolesti moguća je hipertermija, kao kod početne faze, i u više kasno razdoblje. Međutim, povećanje tjelesne temperature u bolesnika s B. u kasnom razdoblju bolesti češće je posljedica dodavanja upale pluća.

U nekih bolesnika zabilježena je oligurija, smanjenje specifične težine urina i albuminurija. Sediment sadrži hijaline i granularne odljevke, eritrocite. Razina zaostalog dušika u krvi može premašiti normalne vrijednosti.

U krvi se češće primjećuje umjerena (ponekad značajna) leukocitoza s neutrofilijom i pojavom mladih oblika neutrofila (u teškim oblicima bolesti).

Komplikacije

S kršenjem gutanja - aspiracijska pneumonija. Rekonvalescenti mogu doživjeti miozitis, praćen bolovima i otežanim kretanjem, te infektivni miokarditis. Može se razviti kratkovidnost.

Dijagnoza

Dijagnoza se postavlja na temelju podataka anamneze, kliničkih i laboratorijskih studija.

Laboratorijska dijagnostika temelji se na otkrivanju botulinum toksina ili B. patogena u materijalima uzetim od pacijenta (krv, povraćanje, ispiranje želuca, izmet itd.), kao iu prehrambenim proizvodima koji su uzrokovali trovanje. Važno je utvrditi ne samo prisutnost toksina ili mikroba, već i njegovu vrstu kako bi se potvrdila klinička dijagnoza i propisalo ispravno liječenje.

Potrebno je uzeti krv prije uvođenja pacijenta da legne. serum. Konzervansi se ne smiju dodavati uzorcima uzetim za laboratorijska istraživanja, kao ni prehrambenim proizvodima. Materijali se moraju čuvati u hladnjaku.

Uzorci zaprimljeni u laboratorij ispituju se istovremeno u dva smjera: dvije trećine prethodno pripremljenog uzorka (dobije se filtrat ili centrifugat) namijenjeno je detekciji botulinum toksina u reakciji neutralizacije, jedna trećina je usjevima radi izolacije. botulinum mikrobi.

Za detekciju toksina uzimaju se za svaki uzorak 4 miša težine 16-18 g. S obzirom na to da se u ispitivanom materijalu može nalaziti jedna od šest vrsta botulinum toksina, potrebno je provesti preliminarnu reakciju sa smjesom anti- botulinum dijagnostički serumi svih vrsta. Medicinski serumi protiv botulina ne smiju se koristiti u dijagnostičke svrhe. Iz svakog ispitnog uzorka jednaka količina (1,5-2,4 ml) filtrata ili centrifugata se izlije u dvije epruvete. U jednu (prvu) epruvetu (kontrola) doda se 0,6 ml fiziološke otopine, u drugu (pokus) 0,6 ml smjese monovalentnih seruma, nakon čega se sadržaj prve epruvete ubrizga intraperitonealno ili u venu u dva bijela miša ili u venu u volumenu od 0,7-1,0 ml, isti volumen druge epruvete (pokus) daje se drugom paru bijelih miševa. Ispitni materijal iz svake epruvete treba ubrizgati različitim špricama.

Životinje se promatraju 4 dana, međutim, ako se miševi razbole ili uginu prije tog razdoblja, odmah se postavlja reakcija neutralizacije s monovalentnim dijagnostičkim serumima.

U prisutnosti botulinum toksina u uzorku, dva miša umiru, uveden je krimski filtrat bez seruma, preostala dva ostaju živa. Obično je slika bolesti i uginuća miševa vrlo karakteristična: javlja se ubrzano disanje, stanje potpune opuštenosti mišića, povlačenje mišića trbušne stijenke („osji struk” - sl. 10), paraliza i konvulzije prije smrt.

U slučaju smrti sva 4 miša, reakciju neutralizacije treba ponoviti s ekstraktima razrijeđenim 5, 10, 20, 100 puta. Kada se ekstrakti razrijede, strana mikroflora gubi sposobnost ubijanja miševa, a botulinum toksin, koji obično ima veću biološku aktivnost, uzrokovat će smrt miševa kada se filtrati razrijede.

Ako se u reakciji s polivalentnim serumom otkrije botulinum toksin, odmah se provodi detaljna neutralizacijska reakcija za određivanje vrste toksina tipospecifičnim dijagnostičkim serumima.

Posebnu pozornost treba obratiti na formulaciju reakcije neutralizacije s bolesnikovim krvnim serumom, budući da je ona obično mala. Potrebno je pažljivo odvojiti serum od krvnog ugruška i odmah staviti detaljnu reakciju neutralizacije s monovalentnim botulinum serumima tipova A, B, E (drugi tipovi B. su vrlo rijetki).

Po primitku pozitivna reakcija neutralizacija dijagnostičkim botulinum serumima, daje se zaključak o prisutnosti botulinum toksina u ispitivanom materijalu i naznačuje se njegova vrsta.

Često se formulacija reakcije neutralizacije s polivalentnim i monovalentnim serumom mora ponoviti zbog nespecifične toksičnosti strane mikroflore, koja se obično nalazi u povraćenom sadržaju, izmetu, pa je u najboljem slučaju odgovor na prisutnost toksina u uzorak se može dati 2.-3. dana, a o njegovoj tipskoj pripadnosti - 3.-5. dana od početka istraživanja.

Ako je nemoguće otkriti toksin u ispitivanim materijalima, provode se studije za otkrivanje patogena B.

U tu svrhu 3-5 ml pripremljenog materijala inokulira se na tekuće hranjive podloge. Za primarne inokulacije bolje je koristiti kazeinsko-gljivu ili kazeinsko-kiselu podlogu, Hottingerov bujon ili podlogu tipa Tarozzi. Potrebno je da pH bude u rasponu od 7,2-7,4. Obavezno je i mljeveno meso ili jetrica u mesnom mediju, te kuhani proso i vata u kazeinskom mediju. Epruveta ili bočica treba biti barem do pola napunjena hranjivim medijem. Prije sjetve u podlogu se dodaje 0,5% glukoze.

Inokulacije treba provesti u mediju u velikim epruvetama ili u bočicama kapaciteta 100-200 ml. Odozgo se podloga prelije slojem vazelinskog ulja debljine 0,5 cm.Posebno treba imati na umu da je početni inokulum bolje inokulirati u velikom volumenu podloge (70-150 ml) tako da tekućina kulture od primarna inokulacija dovoljna je za sve studije. Naknadna potkultura ispitnih uzoraka iz primarne inokulacije u isti tekući hranjivi medij možda neće dovesti do stvaranja toksina u mediju. Sjetvu treba obaviti u četiri boce, od kojih se dvije zagrijavaju na t ° 80 ° 20 minuta. Druge dvije bočice se ne zagrijavaju nakon sjetve. Sve bočice se stave u termostat na t° 28 i 35° (u svakom termostatu jedna grijana, jedna nezagrijana).

Ako su uzročnici B. u proučavanom materijalu uglavnom u vegetativnom obliku, tada će rast usjeva biti hl. arr. u nezagrijanim bočicama. U istom slučaju, ako materijal sadrži oblike spora, rast će biti u zagrijanim bočicama i u nekim slučajevima može odmah dovesti do izolacije čiste kulture iz takvog zasijavanja.

Nakon 48 sati. od početka rasta uzimaju se uzorci tekućine kulture (po 10-15 ml) iz svih bočica uz poštivanje sterilnosti i podvrgavaju ispitivanju. Uz tekućinu iz kulture postavlja se reakcija neutralizacije s polivalentnim antibotulinskim serumom. Po primitku pozitivnih rezultata, reakcija neutralizacije provodi se sa svakim serumom za određenu vrstu zasebno. Ako se nakon dva dana ne otkrije rast u bočicama, tada je potrebno nastaviti inkubaciju u termostatu, a istraživanje treba provesti 4-6-10 dana. Nakon otkrivanja štapića morfološki tipičnih za Cl. botulinum, kao i botulinum toksin, daje se zaključak o kontaminaciji ispitivanog materijala patogenom B. Izolacija čiste kulture u ovom slučaju nije obvezna.

Ako se u usjevima nađu mikrobi morfološki slični Cl. botulinum, a toksin je odsutan, tekućinu kulture treba aktivirati pankreatinom ili tripsinom.

Za odgovor o kontaminaciji ispitivanog materijala patogenom B. i njegovoj vrsti odlučujuće su ove reakcije neutralizacije. U dvojbenim slučajevima izdvaja se čista kultura (iz visokog stupca agara, iz inokulacija na Petrijevim zdjelicama). Pojedinačne kolonije morfološki karakteristične za Cl. botulinum siju se na tekuće podloge i ispituju nakon 3-5 dana. rast u reakciji neutralizacije s anti-botulinum serumima specifičnim za tip.

Neutralizacijski test je pouzdana, visoko specifična i vrlo osjetljiva metoda za otkrivanje botulinum toksina.

Ostale predložene metode laboratorijske dijagnoze B. (reakcija pasivne hemaglutinacije, metoda izračuna fagocitnog indeksa, luminiscentni serumi) su čisto eksperimentalne i nisu široko korištene zbog nedovoljne specifičnosti.

Diferencijalna dijagnoza

B. treba razlikovati od trovanja kokošinjakom. Za razliku od B., prvi znakovi trovanja javljaju se nakon 1-5 sati. nakon što pojede biljku. Postoji slabost, pospanost, vrtoglavica, glavobolja. Može doći do mučnine, rijetko povraćanja. Koža lica i trupa je hiperemična, ponekad se nađe grimizni osip. Sličnost s B. leži u stalnom širenju zjenica i njihovoj odsutnosti reakcije na svjetlost, suhoći sluznice usta i smanjenom salivaciji. Naravno, promatraju se mentalni poremećaji. Bolesnici su obično vrlo nemirni, pokreti im nisu koordinirani, postoji neadekvatna reakcija na okolne pojave, delirij, često sa značajnim halucinacijama. Mogu se javiti kloničko-tonične konvulzije. Primjećuje se tahikardija, poremećaj ritma, pad arterijskog tlaka, gluhoća srčanih tonova. S razvojem kome dolazi do oštrog bljedila kože, bradikardije, kratkog daha, poremećaja respiratornog ritma. Smrt dolazi od zastoja disanja.

Trovanje metilnim alkoholom također dovodi do razvoja niza simptoma sličnih B. Opća slabost, zujanje u ušima, mučnina, povraćanje, a ponekad i bolovi u trbuhu. Zjenice su proširene i slabo reagiraju na svjetlost. Vizualni poremećaji su dvovalnog karaktera. Prvo, pacijenti primjećuju bljeskanje pred očima, smanjenu vidnu oštrinu, "maglu", udvostručenje predmeta; zatim može doći do određenog poboljšanja vida, nakon čega se razvija sljepoća, koja se ne opaža u B. U težim slučajevima trovanja bilježe se halucinacije, strah, konvulzije, slabljenje mišićne snage, gubitak svijesti, pad kardiovaskularne aktivnosti, ali se pareza ne opaža.

U diferencijalnoj dijagnozi s otrovanjem otrovnim gljivama treba uzeti u obzir da B. obično nastaje pri konzumiranju konzerviranih gljiva, dok se otrovanja otrovnim gljivama češće javljaju kod konzumiranja svježe pripremljenih gljiva.

U slučaju trovanja muharom, povezanog prvenstveno s djelovanjem muskarina, koji ima učinak sličan atropinu, muskaridina i pilttoksina, javlja se jaka salivacija, znojenje, obilan proljev, grčevita bol u trbuhu, usporavanje pulsa, blijeđenje lica , postojano širenje zjenica (posljednje nalikuje B.). U težim slučajevima bilježe se halucinacije (često vizualne), crvenilo kože lica i konvulzije.

Rani početak respiratornih poremećaja u određenog broja bolesnika s poliomijelitisom također se može pogrešno smatrati B. Za razliku od B., s poliomijelitisom postoji obilno izlučivanje sluzi i salivacija.

Za diferencijalnu dijagnozu s difterijom važne su promjene u ždrijelu - racije difterije. Neurološki poremećaji kod difterije obično se javljaju nakon upale grla, groznice, otekline potkožnog tkiva. Paraliza se često javlja istodobno s razvojem miokarditisa.

Prognoza kod B. uvijek težak. Aktivna i samo rana seroterapija i primjena umjetnog disanja mogu spasiti živote i onim pacijentima koji su prethodno bili osuđeni na propast. Oporavak je spor, obično tijekom mjesec dana ili više. Učinkovitost se vraća čak i duže; miopija, koja je nastala u akutnom razdoblju bolesti, također traje dugo vremena.

Liječenje

Pacijenti podliježu bezuvjetnoj hospitalizaciji. Hitno je potrebno izvršiti ispiranje želuca i čišćenje crijeva. Treba imati na umu da je ispiranje želuca s B. prilično teško, jer zbog odsutnosti faringealnog refleksa u pacijenta i prisutnosti pareze epiglotisa, sonda može ući u respiratorni trakt. Prije pranja morate provjeriti je li sonda u želucu.

Za neutralizaciju slobodno cirkulirajućeg botulinum toksina u krvi potrebno je koristiti antibotulinum serume. Njihovo uvođenje je najučinkovitije u prvim danima bolesti, budući da se najveća koncentracija toksina u krvi opaža 2.-3. bolesti (L. M. Shvedov, 1960).

Međutim, s obzirom na mogućnost dugotrajnog ulaska toksina u krv bolesnika, možemo pretpostaviti da leži. učinak serumske terapije doći će do izražaja u kasnijim fazama bolesti. U slučajevima kada je još nepoznata vrsta toksina koji je uzrokovao bolest, potrebno je uvođenje sve četiri vrste seruma (A, B, C, E). Nakon utvrđivanja vrste uzročnika, daje se serum odgovarajuće vrste. Treba imati na umu da je moguće trovanje s nekoliko vrsta otrova. Serum se može primijeniti i intravenozno i ​​intramuskularno. Inicijalno se uvodi serum tipa A - 10 000 ME, tipa B - 5 000 ME, tipa C - 10 000 ME, tipa E - 10 000 ME. Međutim, često ta količina nije dovoljna za potpunu neutralizaciju toksina. Naknadna uvođenja seruma su moguća, doze će ovisiti o kliničkom učinku. Obično se za cijeli tijek liječenja za liječenje teških oblika B. troši 50 000-60 000 IU tipa A, C, E i 25 000-30 000 IU tipa B. Međutim, te se doze također mogu povećati.

Opći kompleks liječenja bolesnika s B. uključuje nespecifičnu terapiju detoksikacije, koja se sastoji od uvođenja slanih otopina, glukoze i nadomjestaka krvi. Posebno povoljno djeluju niskomolekularne otopine - hemodez, polivinilpirolidon, kao i krvna plazma.

S obzirom na mogućnost vegetacije uzročnika iz spora u go.-kiš. puta pacijenta, mnogi kliničari preporučuju korištenje kloramfenikola ili tetraciklinskih lijekova. Trajanje liječenja je 7-8 dana. Primjenom antibiotika smanjena je učestalost "pogoršanja" bolesti.

Kako bi se smanjilo vrijeme oporavka kod poremećaja živčanog sustava, indicirano je imenovanje ATP-a u obliku 1% otopine od 2 ml tri puta dnevno tijekom 7 do 10 dana.

Poraz kardiovaskularnog sustava zahtijeva korištenje kamfora, kordiamina, srčanih glikozida.

Pacijent mora primiti ležati. doze vitamina, posebno iz skupine C i B.

Posebno mjesto u liječenju bolesnika zauzimaju pitanja borbe protiv respiratornih poremećaja. Primjena umjetnog aparata za disanje je opravdana. Respiratorna reanimacija kod B. sastoji se od uklanjanja opstrukcije dišnih putova i stvaranja odgovarajuće plućne ventilacije pomoću respiratora.

Indikacije za nametanje traheostomije i endotrahealne umjetne ventilacije u B. su pareza mišića ždrijela, grkljana i jezika s pritužbama na nedostatak zraka, pareza respiratornih mišića sa smanjenjem vitalnog kapaciteta pluća do 30%, slabljenje refleksa kašlja, atelektaza i upala u plućima. Preporuča se koristiti uređaje podesive zapremine s neovisnom brzinom disanja.

Unatoč smanjenju salivacije, pacijent mora povremeno usisati sluz koja se nakuplja u gornjim dišnim putovima.

S razvojem upale pluća, pacijentima je potrebna odgovarajuća antibiotska terapija.

U fazi kasne rekonvalescencije, fizioterapijski postupci mogu se uspješno koristiti za liječenje pareze.

Prevencija

S poboljšanjem tehnologije prerade hrane pri optimalnim temperaturnim uvjetima, B. među ljudima, povezan s korištenjem industrijskih proizvoda za hranu, praktički nestaje. Glavno mjesto kao uzrok bolesti u mnogim zemljama svijeta iu SSSR-u zauzimaju različiti domaći prehrambeni proizvodi (konzervirani, ukiseljeni, dimljeni, sušeni itd.). Međutim, u SAD-u je 1963. od komercijalnih proizvoda oboljelo 25 ljudi, od kojih je 9 umrlo. U Japanu je B. povezan s upotrebom nacionalnog jela "izushi", sastavni dio to-rogo je sirova riba, Eskimi s Aljaske imaju jela od mesa bijelog kita, Indijanci na pacifičkoj obali Sjeverne Amerike imaju kavijar od lososa. Prema podacima od povijesnog značaja, do 1964. u Sjedinjenim Američkim Državama glavni izvor B. bilo je loše sterilizirano ili ukiseljeno povrće i voće koje sadrži nedovoljan postotak kiseline. U Francuskoj, Danskoj, Norveškoj, Švedskoj, Jugoslaviji i drugim europskim zemljama B. je bio povezan s Ch. arr. sa šunkom i domaćom ribom.

Poznavanje optimalnih uvjeta za klijanje spora, njihove otpornosti na temperaturu, kao i uvjeta stvaranja toksina, omogućuje jasno definiranje glavnih zahtjeva za tehnološku obradu prehrambenih proizvoda, isključujući mogućnost nakupljanja botulinum toksina u njima. . Ovi zahtjevi uključuju: zaštitu proizvoda od kontaminacije sporama B. patogena, toplinsku obradu proizvoda koja osigurava smrt spora (sterilizacija), vegetativnih stanica i uništavanje toksina, te isključivanje mogućnosti klijanja spora i toksina. formiranje u gotovom proizvodu.

Potreba za maksimalnom zaštitom proizvoda od ulaska spora u njih ili njihovim obveznim uklanjanjem tijekom čišćenja i pranja tekućom vodom (povrće, voće, gljive) određena je širokom kontaminacijom predmeta. vanjsko okruženje ovaj patogen. Što se tiče mesnih i ribljih proizvoda, oslobađanje od spora provodi se pažljivo i brzo uklanjanje crijeva tijekom rasijecanja trupova nakon klanja i ribe, posebno crvene, neposredno nakon ulova.

U tom je slučaju prijeko potrebno proizvode nakon čišćenja i pranja odmah ohladiti, budući da se daljnjim tehnološkim postupcima, kao što su konzerviranje, soljenje, dimljenje i salamurenje, ne može uništiti toksin nastao skladištenjem proizvoda na toplini, a tvari korišteni za konzerviranje ili kiseljenje (sol, šećer, kiseline) mogu samo odgoditi daljnje stvaranje toksina.

Ispravan temperaturni režim tijekom obrade proizvoda od iznimne je važnosti. Konvencionalna toplinska obrada proizvoda namijenjenih izravnoj uporabi može biti učinkovita samo ako se prodaju u prvim satima, jer, dok uništava toksin u normalnim uvjetima zagrijavanja do 100 °, ne narušava održivost spora. Uz postupno hlađenje i duže skladištenje na sobnoj temperaturi, toksin se može akumulirati u takvim proizvodima zbog klijanja spora u vegetativne stanice. Jasno je da je višekratna toplinska obrada takvih proizvoda prije konzumiranja obavezna.

Sterilizaciju proizvoda treba provoditi samo u autoklavu gdje je to prikladno visoki krvni tlak omogućuje vam stvaranje temperature od 120 °, što ima štetan učinak ne samo na vegetativne stanice i njihove toksine, već i na spore. Takvi industrijski proizvodi su bezopasni čak i ako se duže vrijeme čuvaju na sobnoj temperaturi. Ova se odredba ne može odnositi na domaću konzerviranu hranu, budući da temperaturni učinak ne prelazi 100 ° C, a zatvaranje limenki stvara optimalne anaerobne uvjete za klijanje preostalih spora, vegetacije i stvaranje toksina u supstratu hrane. Stoga se kod kuće, u nedostatku autoklava, mesni i riblji proizvodi, koji su dobar hranjivi medij, ne mogu čuvati u hermetičkim staklenkama. Ova se odredba u potpunosti odnosi na konzerviranje gljiva i povrća koje se ne može potpuno osloboditi od spora uzročnika B. Dopušteno je takve proizvode pripremati za dalje samo kiseljenjem ili soljenjem uz dodatak dovoljne količine kiseline i soli, te uvijek u posudi otvorenoj za zrak.

Vanjska manifestacija kontaminacije konzervirane hrane sporama uzročnika B. i njihov razvoj u supstratu konzervirane hrane je stvaranje plina, što dovodi do bombardiranja posude (oticanje poklopaca). Istovremeno, konzervirana hrana omekšava, mijenja se njihova struktura i pojavljuje se neugodan miris. Međutim, opisani su slučajevi kada je botulinum toksin pronađen u naizgled nepromijenjenoj konzerviranoj hrani.

Kako bi se spriječile bolesti B., tehnološki procesi u prehrambenim poduzećima u kojima se proizvode konzervirani proizvodi strogo su regulirani odgovarajućim uputama, odstupanja od kojih su neprihvatljiva.

S obzirom na vrstu sirovina ili proizvoda, postoje strogi zahtjevi, čija mogućnost ispunjavanja određuje spremnost određenog poduzeća za proizvodnju visokokvalitetnih proizvoda. Takvi zahtjevi postoje za proizvodnju mliječnih proizvoda, za preradu povrća, voća i sirovina od zelenila, za preradu gljiva, za pripremu raznih marinada, začina, začina i drugih tvari koje se koriste za konzerviranje. Strogi zahtjevi postavljaju se i na limenke, njihovu pripremu za punjenje i kontrolu nepropusnosti. Jamstvo proizvodnje kvalitetne proizvodnje od strane poduzeća su: dobro dostojanstvo. stanje opreme postrojenja, korištenje pitke vode bez anaerobnih mikroorganizama za tehnološke svrhe, temeljito pranje sirovina i obrada pomoćnih materijala, poštivanje režima prerade koji isključuju razvoj patogena B. u proizvodima, uspostavljanje regulirana kiselost proizvoda, korištenje samo zapečaćenih spremnika uz stalno praćenje rada zavarivača, korištenje načina sterilizacije koji jamče potpunu neutralizaciju konzervirane hrane (uništavanje toksina, smrt vegetativnih stanica i spora).

Izuzetno učinkovito sredstvo specifične profilakse B. kod ljudi je cijepljenje botulinum polianatoksinom. S obzirom na egzotičnost pojave B. u SSSR-u, ovaj lijek nije naširoko korišten i koristi se samo u slučajevima zaštite laboratorijskog osoblja koje provodi istraživanja s B. patogenom.

Botulizam u forenzičkom smislu

Za stručnu dijagnozu trovanja botulinum toksinom potrebni su istražni podaci o uvjetima nastanka trovanja (priroda konzumirane hrane, broj unesrećenih, uočeni simptomi, medicinski dokumenti za pomoć). Sudski medicinski vještak mora imati na umu karakteristične značajke klinike trovanja. Pri pregledu leša nisu utvrđene promjene specifične za B.; obično se promatra slika brzo dolazeće smrti. Obavezna je histološka pretraga, uz krom slike cirkulatornih poremećaja, paretičnog stanja kapilara i perivaskularnih krvarenja u c. n. S., degenerativne promjeneživčane stanice (pogl. arr. u jezgri okulomotorni živci, u produženoj moždini i kvadrigemini). Može postojati i paretično stanje malih žila u stijenci tankog i debelog crijeva, u plućima i miokardu. Osim toga, na sudu.-njem. studija je usmjerena prema organima (prema općim pravilima), a za bakteriološke - krv, prehrambene mase, ispiranje, urin, preostale prehrambene proizvode.

Konačan zaključak o trovanju botulinum toksinom sud.-med. vještak sastavlja na temelju svih dobivenih podataka.

Bibliografija: Burgasov P. N. i Rumyantsev G. N. Evolucija botulizma, Zhurn, mikr., epid i imuno., br. 9, str. 18, broj 11, str. 79, 1967, br. 1, str. 73, broj 2, str. 83, broj 4, str. 3, 1968.; Kravchenko A. T. i Shishulina JI. M. Distribucija uzročnika botulizma i tetanusa na području SSSR-a, M., 1970, bibliogr.; Matveev K. I. Botulizam, M., 1959, bibliogr.; Melnikov V. N. i Melnikov N. I. Anaerobne infekcije, sa. 171, M., 1973; V o g o f f D. A. a. D a s Gupta B. R. Botulinum toxin, u knjizi: Microbialtoxins, ur. od S. Kadis a. o., v. 11-A, str. 1, N. Y.-L., 1971, bibliogr.; Botulizam, ur. od K. H. Lewis a. K. Cassel, Cincinnati, 1964.; Botulizam, ur. napisao M. Ingram a. T. A. Roberts, L., 1967.; Burke G. S. Pojava bacillus botulinus u prirodi, J. Bact., v. 4, str. 541, 1919.; Dolman C. E. Ljudski botulizam u Kanadi, Kanada. med. Dupe. J., v. 68, str. 538, 1953; Meyer K. F. Status botulizma kao svjetskog zdravlja, Bull. Wld Hlth Org., v. 15, str. 281, 1956.

P. H. Burgasov, V. I. Pokrovski, S. G. Pak; T. I. Bulatova (etiol., laboratorijska dijagnostika), V. K. Derboglav (sud. medicina).

Botulizam je teški oblik intoksikacije hranom koji se razvija kao posljedica konzumacije hrane kontaminirane toksinom Cl.perfringens, karakteriziran specifičnom lezijom središnjeg živčanog sustava.

Povijest:

dugo poznat pod nazivom "allantiazis" (od grčke "kobasica"), "ihtioizam" (od grčke "riba"), botulus (od latinske "kobasica"). Kerner je 1815. opisao 230 slučajeva trovanja, 1896. belgijski liječnik E. Van Ermengem izolirao je uzročnika iz ostataka pršuta, 1914. ruski liječnik Konstansov izolirao je iz jesetre. Trenutno se trovanje ne povezuje s upotrebom kobasica, već s konzerviranom hranom.

Taksonomija: obitelj Bacillaceae, rod: Clostridium, vrsta CL.botulinum (od latinskog botulus - kobasica).

Morfologija.

Polimorfni štapići sa zaobljenim krajevima, duljine 4-10 mikrona, širine 0,3 - 1,0 mikrona, slabo pokretni (peritrihni), formiraju terminalno ili subterminalno smještene spore, a uzročnici nalikuju teniskom reketu, nemaju kapsule.

Tinktorijalna svojstva: gram-pozitivne, prema metodi Orzeszko, spore su obojene crveno, a vegetativni oblici su plavi.

kulturnih dobara.

Strogi anaerobi. Rastu na kazeinskim ili mesnim podlogama, u tekuće kazeinske podloge dodaje se kuhano proso ili vata, a u mesne podloge meso ili jetrena kaša. Na krvnom agaru s glukozom nakon 24-46 sati stvaraju se velike okrugle kolonije okružene zonom hemolize (tip A). Boja kolonije je blago smeđa ili sivkasto-mutna. Kod tetanusa agar može biti u obliku dva oblika: S-oblika u obliku pahuljica s gušćim središtem i R-oblika lentikularnog. U tekućim medijima - zamućenje.

Optimalni pH - 7,2 - 7,4; temperatura uzgoja 35 °C za serovare A, B, C, D, F; 28 °C za serovare E i neproteolitičke sojeve B i F; 37 °C za serovar G; vrijeme uzgoja - 24-48 sati.

biokemijska svojstva.

Saharolitička svojstva izražena su kod tipa A i B (razgrađuju glukozu, maltozu, glicerin, fruktozu, levulozu uz stvaranje kiseline i plina). Tip C slabo razgrađuje šećere ili, poput serovara G, nema saharolitička svojstva, tipovi D i E zauzimaju srednji položaj. Svi sojevi tipa A i B imaju snažna proteolitička svojstva: hidroliziraju kazein i stvaraju sumporovodik, komadići jetre ili mljevenog mesa tope se u Kitta-Tarozzijevom mediju. Tipovi C, D, E nemaju takva svojstva.

Grupa 1 - razgraditi glukozu, maltozu; proteolitička aktivnost u obliku želatinaze; aktivnost lipaze na mediju s bjelanjkom;

skupina 2 - imaju saharolitička svojstva;

skupina 3 - lipolitička aktivnost i ukapljivanje želatine;

Grupa 4 - hidroliza želatine, ne pokazuju saharolitičku aktivnost.

Ukazuju da se diferencijacija uzročnika prema biokemijskoj aktivnosti rijetko koristi.

Antigenska struktura.

Imaju O i H antigene. Međutim, oni ne identificiraju patogen. Prema antigenskoj specifičnosti toksina razlikuje se 8 serovara: A, B, C 1, C 2, E, F, G. Vrsta toksina se određuje u reakciji neutralizacije s odgovarajućim antitoksičnim serumima.

faktori patogenosti.

a) egzotoksin (neurotoksin) - protein dobiven u kristalnom obliku (imajte na umu da je najjači biološki otrov 3 puta jači od kalijevog cijanida), nastao u anaerobnim uvjetima na hranjivim medijima, u raznim konzerviranim prehrambenim proizvodima, otporan na djelovanje proteolitičkih enzimi gastrointestinalnog trakta, imaju sposobnost hemaglutacije eritrocita ljudi, kunića i ptica; ima tropizam za živčanog tkiva(fiksiran na receptore sinaptičkih membrana i mijenja osjetljivost acetilkolinskog receptora na djelovanje medijatora). Toksin serovara E i B nastaje kao protoksin i aktivira ga tripsin. Obratite pozornost na činjenicu da su za ljude najpatogeniji tipovi A, B, E (vrlo toksični E), manje patogeni - C, D, F.

Trenutno se vjeruje da je toksin Zn 2+ ovisna endopeptidaza. Tijekom proteolize razgrađuje se na 2 enzima povezana disulfidnom vezom (L i H lanci). Jedna podjedinica odgovorna je za adsorpciju na receptore neurona, druga za prodiranje u njih endocitozom, inhibiciju Ca 2+ - ovisno o oslobađanju acetilkolina, kao rezultat toga, blokiran je prijenos živčanog impulsa kroz sinapse, bulbarni živčani centri su pogođeni, hod i vid su poremećeni, javlja se asfiksija.

Vrste toksina razlikuju se prema antigenskoj strukturi i molekularnoj masi, a 12S-, 16S- i 19S toksini razlikuju se prema brzini sedimentacije.

12S-toksini (M-toksini) sastoje se od molekule neurotoksina (H lanac) i netoksične i nehemaglutinirajuće proteinske molekule (L lanac);

16S-toksini (L-toksini) sastoje se od molekule neurotoksina i netoksičnog proteina hemaglutinina;

19S-toksini (L L - toksini) velike molekularne težine, uključujući neurotoksin i netoksični protein s hemaglutinirajućim svojstvima.

b) hemolizin (lizira ovčje eritrocite) i uzrokuje uginuće laboratorijskih životinja. Treba napomenuti da samo neki sojevi proizvode hemolizin.

otpornost.

Vegetativni oblici su nestabilni (ugibaju na 80 °C unutar 30 minuta);

Spore podnose kuhanje 1-5 sati, na 105 ° C umiru nakon 2 sata, na 120 ° C - nakon 10-20 minuta. Imajte na umu da su u velikim komadima mesa, u staklenkama velikog kapaciteta, održivi nakon autoklaviranja na 120 °C tijekom 15 minuta; 10 % klorovodična kiselina ubija spore nakon 1 sata, 40% otopina formalina - nakon jednog dana, otporne na kiselu sredinu želuca, spore prestaju klijati u 2% otopini octene kiseline pri pH 3-4,5.

Botulinum toksin - kod kuhanja se uništava unutar 15 minuta, otporan na sunčevu svjetlost, visoke koncentracije natrijevog klorida, smrzavanje, kiseline, pH ispod 7,0, na djelovanje proteolitičkih enzima gastrointestinalnog trakta; držati dugo u vodi, u konzerviranoj hrani - 6-8 mjeseci.

Uloga u patologiji: uzrokuju botulizam.

Epidemiologija.

Prirodno stanište klostridije su crijeva biljojeda, ljudi, riba, rakova i mekušaca.

Putevi infekcije (glavni) alimentarni, ali mogu prodrijeti kroz površinu rane. Imajte na umu da botulinum toksin može prodrijeti kroz netaknutu kožu i sluznicu. Bolesna osoba nije zarazna. Navedite da prisutnost samog patogena nije nužna u konzerviranoj hrani. Imajte na umu da se botulinum toksin može nalaziti u proizvodu u obliku žarišta bez promjene njegovih organoleptičkih svojstava.

Ovisno o načinu infekcije, razlikuju se 4 oblika bolesti:

prehrambeni botulizam;

botulizam rana;

botulizam u dojenčadi;

botulizam koji se može nejasno klasificirati (u djece starije od 1 godine i odraslih, nije povezan s gutanjem i ulaskom kroz rane).

Patogeneza:

1. Prehrambeni botulizam - botulinum toksin, ulazeći u gastrointestinalni trakt, prodire u krv, utječe na živčani sustav, djelujući na motoneurone leđne moždine i jezgru produžene moždine, čvrsto se veže na živčane stanice, uzrokujući kršenje prijenos uzbude od živca do mišića, djelujući na krvne žile (suženje s naknadnom parezom i povećanom krhkošću).

Period inkubacije: od nekoliko sati do 8-10 dana.

Klinika: bol u trbuhu, osjećaj težine u želucu, povraćanje, opća intoksikacija, moguće poremećaj stolice. Zatim postoje pritužbe na zamagljen vid, dvoslike, oštećenje gutanja, gubitak glasa, zahvaćeni su III, IY, YI parovi kranijalnih živaca, glavobolja, paraliza respiratornog centra, smrt. Letalitet 60-80%. Obratite pozornost na činjenicu da bolest može započeti pritužbama na "maglu" ili "mrežicu" pred očima, udvostručenje predmeta.

2. Botulizam rana - treba napomenuti da su u posljednje vrijeme njegovi slučajevi sve češći, pogađa uglavnom dječju dob, uglavnom dječake.

3. Botulizam u dojenčadi - u dobi od 3-20 tjedana kada spore ili vegetativni oblici dospijevaju u djetetovu hranu (s mlijekom, s medom, posebno kod umjetne ishrane). Simptomi su isti kao kod botulizma koji se prenosi hranom. Ukazuju da pri dijagnosticiranju bolesti u novorođenčadi treba obratiti pozornost na slabost u kombinaciji s oštećenim sisanjem i gutanjem + ptoza, midrijaza, oftalmoplegija. Bolest može završiti iznenadnom smrću (ne > 4%), tzv. „smrt u kolijevci“.

Imunitet nakon infekcije nije formiran, jer imunološka doza toksina premašuje smrtonosnu.

Mikrobiološka dijagnostika (vidi dijagram).

Obratite pažnju na otkrivanje botulinum toksina i patogena u ispitnom materijalu (ispitivanje se provodi istovremeno), toksin se određuje u krvi, samo je patogen u izmetu, ostatak materijala se ispituje na toksin i bakterije.

Prevencija:

a) nespecifična - usklađenost s tehnologijom obrade hrane (konzervirana hrana se autoklavira 30-40 minuta na temperaturi od 120 ° C), u proizvode se uvode inhibitori: nitriti.

b) specifični - samo za hitne indikacije: osobama koje su jele kontaminiranu hranu, a još nisu oboljele, propisuje se polivalentni antibotulinski serum i botulin toksoid, zatim se utvrđuju standardni antibotulinski serumi prema vrsti toksina.

Aktivna imunizacija provodi se kod laboratorijskih radnika, vojnih osoba i osoba čija je profesija povezana s kontaktom s botulinum toksinom.

Liječenje:

a) nespecifični - ispiranje želuca, mjere detoksikacije, antibiotici: penicilin, tetraciklin;

b) specifični - hitno polivalentni antibotulinski (A, B, E) serum, intravenozno ili intramuskularno, nakon utvrđivanja vrste toksina - monoserum.

Izvodi student

410 Grupe medicinskog fakulteta

M. V. Zvonkov

Tver, 2011

Botulizam(od lat . botulus- kobasica: naziv je povezan s činjenicom da su prvi opisani slučajevi bolesti uzrokovani uporabom krvavica i jetrenih kobasica) - teška toksično-infektivna bolest koju karakterizira oštećenje živčanog sustava, uglavnom produžene moždine i leđne moždine , koji se javlja s predominacijom oftalmoplegičnih i bulbarnih sindroma.

Razvija se kao posljedica gutanja hrane, vode ili aerosola koji sadrže botulinum toksin koji proizvodi bacil koji stvara spore Clostridium botulinum. Botulinum toksin utječe na motorne neurone prednjih rogova leđne moždine, zbog čega je poremećena inervacija mišića i razvija se progresivno akutno respiratorno zatajenje.

Ulazna vrata su sluznice dišnog trakta, probavnog trakta, oštećena koža i pluća. Infekcija se ne prenosi s čovjeka na čovjeka. Unatoč činjenici da se botulizam bilježi mnogo rjeđe od drugih crijevnih infekcija i otrovanja, on je i dalje relevantna i po život opasna bolest.

Referenca povijesti

Pretpostavlja se da su ljudi bili bolesni od botulizma tijekom cijelog razdoblja ljudskog postojanja. Tako je bizantski car Lav VI zabranio konzumaciju crnice zbog posljedica opasnih po život, no bolest je dokumentirana tek 1793. godine kada je u Württembergu oboljelo 13 ljudi koji su jeli crnicu, od kojih je 6 umrlo. Otuda je bolest dobila ime.

Kasnije, na temelju promatranja 1817.-1822., Yu.Kerner je napravio prvi klinički i epidemiološki opis bolesti. U monografiji koju je objavio 1822. opisao je simptome botulizma (malaksatost, povraćanje, proljev i druge), a također je sugerirao da male doze botulinum toksina mogu biti korisne u liječenju hiperkineze. U Rusiji je ova bolest više puta opisivana u 19. stoljeću pod nazivom "ihtiizam" i povezivala se s upotrebom soljene i dimljene ribe, a prvo detaljnije istraživanje u Rusiji napravio je E. F. Zengbush.

Krajem 19. stoljeća u Belgiji su 34 glazbenika koji su se spremali svirati na sprovodu jeli sirovu domaću šunku. Tijekom dana većina glazbenika počela je pokazivati ​​simptome botulizma. Zbog toga su 3 osobe umrle, a još 10 bilo je tjedan dana u bolnici u teškom stanju. Iz ostataka pršuta i slezene žrtava bakteriolog Emil van Ermengem izolirao je uzročnika i nazvao ga Bacillus botulinus. Također je otkrio da se toksin ne stvara u tijelu pacijenta, već u debljini pršuta. Kasnije, 1904. godine, ruski istraživač S.V. Konstantinov je potvrdio svoj rad. U isto vrijeme nastao je i prvi imunološki serum za liječenje botulizma. Istraživač Alan Scott 1973. proveo je prva ispitivanja botulinum toksina na životinjama za smanjenje aktivnosti hiperkinetičkih mišića, a zatim su 1978. pod njegovim vodstvom započela ispitivanja patogena na ljudima, prema protokolu koji je odobrila FDA.

Sada, kao i prije, botulizam se očituje iu obliku pojedinačnih trovanja iu obliku grupnih slučajeva. Za 1818-1913 u Rusiji je registrirano 98 grupnih epidemija trovanja hranom od kojih je oboljelo 608 osoba, odnosno 6,2 osobe po epidemiji. Za razdoblje 1974.-1982. bilo je 81 izbijanje, što je u prosjeku činilo po 2,5 slučaja. Posljednjih desetljeća česti su slučajevi bolesti povezanih s korištenjem domaće konzervirane hrane.

Udžbenik se sastoji od sedam dijelova. Prvi dio - "Opća mikrobiologija" - sadrži podatke o morfologiji i fiziologiji bakterija. Drugi dio posvećen je genetici bakterija. Treći dio - "Mikroflora biosfere" - razmatra mikrofloru okoliša, njenu ulogu u kruženju tvari u prirodi, kao i ljudsku mikrofloru i njen značaj. Četvrti dio - "Doktrina infekcije" - posvećen je patogenim svojstvima mikroorganizama, njihovoj ulozi u infektivni proces a sadrži i informacije o antibioticima i njihovim mehanizmima djelovanja. Peti dio - "Doktrina imuniteta" - sadrži moderne ideje o imunitetu. Šesti dio - "Virusi i bolesti koje uzrokuju" - daje informacije o glavnim biološkim svojstvima virusa i bolestima koje uzrokuju. Sedmi dio - "Privatna medicinska mikrobiologija" - sadrži informacije o morfologiji, fiziologiji, patogenim svojstvima patogena mnogih zarazne bolesti, kao i suvremene metode njihove dijagnostike, specifične prevencije i terapije.

Udžbenik je namijenjen studentima, diplomantima i nastavnicima visokih medicinskih studija obrazovne ustanove, sveučilišta, mikrobiolozi svih specijalnosti i praktičari.

5. izdanje, dopunjeno i prošireno

Knjiga:

Botulizam je teški oblik bolesti izazvane hranom povezan s konzumacijom zaražene hrane. Clostridium botulinum, a karakterizira ga specifična lezija središnjeg živčanog sustava.

Uzročnika bolesti prvi je otkrio 1896. godine E. van Ermengem u ostacima kobasice (lat. . botulus- kobasica), kao iu slezeni i debelom crijevu ljudi koji su umrli od botulizma. Ovo otkriće potvrdio je S. V. Konstansov, koji je izdvojio C. botulinum od crvene ribe koja je uzrokovala trovanje.

C. botulinum- prilično velike polimorfne šipke sa zaobljenim krajevima, duge 4 - 9 mikrona, promjera 0,5 - 1,5 mikrona, ponekad se formiraju skraćeni oblici; raspoređeni nasumično, ponekad u parovima ili u obliku kratkih lanaca; u starim kulturama može formirati dugačke niti; Gram-pozitivan, pokretljiv, s peritrihosnim flagelama. Kapsule se ne stvaraju, spore su ovalne, smještene subterminalno, dajući štapiću oblik nalik na teniski reket (slika 106). Spore se u kulturama pojavljuju nakon 24-48 sati od početka inkubacije. C. botulinum ne razmnožava se u proizvodima s kiselom reakcijom (pH 3,0 - 4,0) i pri koncentraciji NaCl iznad 10%.

C. botulinum tvori 8 vrsta toksina: A, B, C1, C2, D, E, F, G, koji se razlikuju po antigenskoj specifičnosti. Prema tome, razlikuje se 8 vrsta patogena, jedan od važne karakteristikešto je prisutnost ili odsutnost proteolitičkih svojstava. Ova svojstva određena su sposobnošću hidrolize kazeina i stvaranja H 2 S. U skladu s tim razlikuju se proteolitička skupina, koja uključuje sve sojeve tipa A i dio sojeva B i F, i neproteolitičku skupinu, koja uključuje sve sojeve tipa E i neke sojeve tipova B i F. Patogeni tipova C i D zauzimaju srednji položaj između ovih skupina, budući da neki od njih proizvode proteolitičke enzime, ali mnogi sojevi C i D ih ne tvore (tablica 48. ). Serotip G razlikuje se od svih ostalih serotipova po tome što ne fermentira ugljikohidrate, a posjeduje proteolitička svojstva.

čista kultura

Tablica 48

Diferencijalni znakovi proteolitičkih i neproteolitičkih sojeva C. botulinum

Bilješka. (+) - znak je pozitivan; (–) – predznak je negativan; gornji znak (-) - neki sojevi želatine ne hidroliziraju. a Ovaj serotip je izoliran kao zasebna vrsta. C. argentinense.

Neke značajke različitih vrsta C. botulinum. Tip A i proteolitički sojevi tipa B, C, D i F- ravni ili blago zakrivljeni štapići duljine 4,4 - 8,6 µm, promjera 0,8 - 1,3 µm, pokretni (peritrihalni). Spore ovalne, subterminalne. Bujno rasti u hranjivoj juhi. Na krvnom agaru s 0,5 - 1,0% glukoze stvaraju glatke ili hrapave kolonije promjera 3 - 8 mm, okružene zonom hemolize. U početku rasta kolonije su vrlo sitne, sjajne, u obliku kapi rose. Zatim se povećavaju, postaju sivkaste s ravnim ili neravnim rubovima. U stupastom agaru kolonije su u obliku diska ili paperja. Mlijeko se peptonizira. Optimalna temperatura za rast je 30 - 40 °C. Sadržaj G + C u DNA je 26 - 28 mol%.

Tip E i neproteolitički sojevi tipa B i F. Ravni štapići, promjera 0,3 - 0,7 mikrona, duljine 3,4 - 7,5 mikrona; gram-pozitivne, ali u starim kulturama postaju gram-negativne, pokretne (peritrične). Spore ovalne, subterminalne. Bujan rast na Kitt-Tarozzijevom mediju sa stvaranjem plina. Kolonije na krvnom agaru promjera 1-3 mm, neravnih rubova, mat površine, mozaične strukture, sa zonom hemolize. Neki sojevi tipa E ne hidroliziraju želatinu. Mlijeko je zgrušano, ali ne i peptonizirano. Optimalna temperatura za rast je 25-37°C. Sadržaj G + C u DNA je 26 - 28 mol%.

Neproteolitički sojevi tipa C i D. Ravni štapići, promjera 0,5 - 0,7 mikrona, duljine 3,4 - 7,9 mikrona, pokretni (peritrični), spore ovalne, subterminalne; želatina je hidrolizirana, mlijeko nije zgrušano niti peptonizirano; rast na Kitt-Tarozzijevom mediju uz umjereno stvaranje plina. Na krvnom agaru kolonije su okrugle, nazubljenih rubova, blago uzdignute, glatke, sivobijele, prozirne, okružene zonom hemolize. Optimalna temperatura za rast je 30-37 °C, sadržaj G + C u DNA je 26-28 mol%.

G vrsta. Ravni štapići, promjera 1,3 - 1,9 mikrona, duljine 1,6 - 9,4 mikrona, pokretni (peritrihni), spore ovalne, subterminalne, gram-pozitivne. Na krvnom agaru kolonije su okrugle, promjera 0,5-1,5 mm, glatkih rubova, uzdignute, prozirne, sive, glatke, sjajne površine; na Kitt-Tarozzijevom mediju rast je umjeren, bez fermentacije glukoze; mlijeko se polako peptonizira. Optimalna temperatura za rast je 30-37°C. Pronađen u tlu. Slučajevi kod ljudi uzrokovani ovom vrstom nisu poznati.

otpornost. dugotrajno skladištenje C. botulinum u prirodi iu raznim prehrambenim proizvodima povezana je s njihovim stvaranjem spora. Spore dugo ostaju u tlu, au povoljnim uvjetima ljeti mogu klijati i razmnožavati se. Dobro podnose niske temperature (ne umiru ni na -190 ° C). Kada se osuše, ostaju održive desetljećima. Spore su također otporne na toplinu (osobito tip A). Spore tipa A i B toleriraju kuhanje 5 sati, na temperaturi od 105 ° C umiru nakon 1 - 2 sata, na 120 ° C - nakon 20 - 30 minuta. Postoje sojevi čije spore podnose temperaturu od 120 °C nekoliko sati. polemika C. botulinum otporan na mnoge baktericidne tvari: 20% otopina formalina ih ubija nakon 24 sata; etilni alkohol - nakon 2 mjeseca; 10% HCl ih ubija nakon samo 1 sata.

toksina C. botulinum također su vrlo otporni na fizičke i kemijske čimbenike. Ne uništavaju ih proteolitički enzimi intestinalnog trakta. U kiseloj sredini (pH 3,5 - 6,8) stabilniji su nego u neutralnoj ili alkalnoj sredini, uništavaju se djelovanjem 2 - 3% lužine, ali ih visoke koncentracije NaCl u prehrambenim proizvodima ne uništavaju; u konzerviranoj hrani, toksini se zadržavaju dugo vremena. toksina C. botulinum također imaju određenu toplinsku stabilnost: na 58 ° C uništavaju se nakon 3 sata; na 80 °C - nakon 30 minuta; a na 100 °C unutar nekoliko minuta. Toksini tipa C su najotporniji, tipovi D i E su manje otporni, a tipovi A i B su između. Otpornost toksina na visoke temperature ovisi o vrsti proizvoda, njegovom pH i drugim uvjetima. Konkretno, u prisutnosti masti, visoke koncentracije saharoze, povećava se otpornost toksina na visoke temperature.

faktori patogenosti. Glavni faktor patogenosti uzročnika botulizma su egzotoksini. Iako se razlikuju po antigenskim svojstvima, njihova biološka aktivnost je ista. Sve su to varijante istog neurotoksina. Antigenska specifičnost i letalna aktivnost određuju se različitim determinantama egzotoksina. Toksini svih vrsta proizvode se kao toksični proteinski kompleksi (progenitorni toksini). Ovisno o molekularnoj masi i strukturi, ovi kompleksi se prema konstantama sedimentacije dijele u 3 skupine: 12S– (300 kDa), 16S– (500 kDa) i 19S– (900 kDa) toksini. Nedavno su hipertoksični superkompleksi toksina pronađeni u tipovima A i B.

12S-toksini (M-toksini) sastoje se od molekule neurotoksina povezane s netoksičnom proteinskom molekulom koja nema hemaglutinirajuća svojstva. 16S-toksini (L-toksini) su strukture koje se sastoje od M-kompleksa i netoksičnog proteina koji se razlikuje od proteina M-kompleksa i ima hemaglutinirajuća svojstva. 19S-toksini (LL-toksini) su najveće strukture koje uključuju neurotoksin i netoksični protein sa svojstvima hemaglutinina.

Clostridium botulizam tip A može proizvesti toksične komplekse tri varijante: M, L i LL, tipovi B, C i D - u obliku L- i M-toksina, a tipovi E i F - samo u obliku M-toksina. . Dakle ista kultura C. botulinum može proizvesti nekoliko vrsta toksičnih kompleksa. Funkcije netoksičnih nehemaglutinirajućih proteina, kao i hemaglutinirajućih proteina (utvrđene su tri vrste: 15 kD, 35 kD i 70 kD), još nisu utvrđene. Neurotoksične komponente bilo kojeg serotipa botulinum toksina i bilo koje vrste toksičnog kompleksa imaju sličnu strukturu i biološka svojstva. Sintetiziraju se kao jedan polipeptidni lanac s 150 kDa mw (7S-toksin), koji nema značajno toksično djelovanje. Ovaj polipeptidni lanac se pretvara u aktivni neurotoksin tek nakon što ga presječe bakterijska proteaza ili proteaze ljudskog crijevnog trakta. Kao rezultat točkaste hidrolize nastaje struktura koja se sastoji od dva lanca međusobno povezana disulfidnim vezama - teška, s m. m. 100 kDa (H-lanac), i lagana, s m. m. 50 kDa (L-lanac). H-lanac je odgovoran za pričvršćivanje neurotoksina na receptore stanične membrane, a L-lanac provodi specifičan blokirajući učinak neurotoksina na kolinergički prijenos ekscitacije u. Toksini tipa C1 i C2 međusobno se razlikuju ne samo serološki, već i po tome što vegetativni oblici kultura ne stvaraju C2 toksin. Nastaje samo u razdoblju sporulacije, a njegovu aktivaciju osigurava mikrobna proteaza.

Važnu ulogu u stvaranju toksina ima sposobnost uzročnika botulizma da proizvodi proteolitičke enzime. Proteolitičke skupine patogena osiguravaju aktivaciju protoksina njihovim endogenim proteazama, te aktivaciju neurotoksina proizvedenih neproteolitičkim varijantama serotipova. C. botulinum, provodi se egzogeno, tj. uz pomoć proteaza gastrointestinalnog trakta tijekom infekcije ili in vitro - tripsinom.

Osim izraženog neurotoksičnog djelovanja, različiti tipovi C. botulinum imaju leukotoksično, hemolitičko i lecitinazno djelovanje. Značajka leukotoksina je da inhibira fagocitozu bez uništavanja leukocita. Različita razdoblja nakupljanja leukotoksina, hemotoksina i lecitinaze u mediju kulture tijekom inkubacije C. botulinum pokazuju da oni očito imaju drugačiju kemijsku prirodu.

Lokus gena za toksične komplekse sadrži gene za neurotoksine (bont), gene za netoksični nehemaglutinirajući protein (ntnh), gene za hemaglutinine (ha + ili ha -) i botR gen, čiji produkt djeluje kao pozitivan regulator.

Značajke epidemiologije. prirodno stanište C. botulinum je tlo, odakle ulaze u vodu, hranu, stočnu hranu, u crijeva ljudi, sisavaca, ptica i riba, gdje se razmnožavaju. U nizu zemalja svijeta (SAD, Kanada i dr.) botulizam postoji u obliku prirodna žarišta: na mjestima gdje tlo, biljke i voda sadrže puno C. botulinum više puta je uočeno masovno uginuće divljih ptica močvarica i drugih životinja (muskrata, žaba i dr.) koje igraju važnu ulogu u epidemiologiji botulizma. Prijevoz uspostavljen C. botulinum u crijevima konja goveda, svinje, kokoši, glodavci. Kontaminirajući proizvode, stočnu hranu, tlo svojim izmetom, pridonose širokoj kontaminaciji okoliša klostridijama.

Infekcija crvene i djelomične ribe s uzročnikom botulizma može biti endogena - iz njihovih crijeva i egzogena - iz vanjskog okruženja (uz nepravilan transport i skladištenje).

Svi poljoprivredni proizvodi kontaminirani tlom, ljudskim i životinjskim izmetom mogu biti zaraženi uzročnicima botulizma i izazvati bolest ljudi.

Botulizam se javlja u svim regijama Globus, ali se češće bilježi u zemljama u kojima stanovništvo troši veliki broj razne konzervirane hrane. U svakoj zemlji izvor trovanja je konzervirana hrana, za kojom je najveća potražnja: u Njemačkoj, Francuskoj i drugim europskim zemljama - konzervirano meso, kobasice, šunka itd.; u SAD - konzervirano povrće; u Rusiji - riba i riblje konzerve. Botulizam nije zarazan. Bolest se javlja samo kada se jede hrana koja sadrži uzročnika i njegove toksine. Jer C. botulinum- strogi anaerob najbolji uvjeti za njegovo razmnožavanje i proizvodnju toksina stvaraju se u konzerviranoj hrani, gdje spore mogu dospjeti s česticama tla. Oni mogu izdržati toplinsku obradu konzervirane hrane, a zatim klijati i proizvoditi toksin, što je olakšano dugotrajnim skladištenjem konzervirane hrane. Učestalost botulizma je mala, češće se javlja kao sporadična bolest. No, poznata su i grupna izbijanja, na primjer, izbijanje 1933. godine u gradu Dnjepropetrovsku, kada se 230 ljudi razboljelo od trovanja kavijarom od tikvica, 26 ih je umrlo. Rijetko se infekcija događa kroz rane.

Značajke patogeneze i klinike. Botulizam se javlja kao toksična infekcija. Na tijelo utječe ne samo toksin sadržan u prehrambenom proizvodu, već i toksin koji nastaje u probavnom traktu i tkivima u vezi s prodorom patogena tamo. Ljudi su izrazito osjetljivi na botulinum toksin tipa A, B, C, E i F. Bolesti su uočene čak i kada je osoba uzela kontaminirani proizvod u usta, ali ga nije progutala. Smrtonosna doza toksina za ljude je 1 ng/kg tjelesne težine. Botulinum toksin se brzo apsorbira u želucu i crijevima, prodire u krv i selektivno djeluje na jezgre produžene moždine i ganglijske stanice leđne moždine. Treba napomenuti da se Clostridium botulism, ulazeći u probavni trakt osobe ili životinje, razmnožava, prodire u krv i odatle u sve organe, stvarajući toksine. Razdoblje inkubacije kod ljudi varira od dva sata do 10 dana, ali najčešće je 18-24 sata.Što je infektivna doza veća, to je razdoblje inkubacije kraće i bolest je teža.

Klinička slika botulizma obično se sastoji od kombinacije različitih mioneuroloških sindroma, od kojih se prvi očituje oftalmoplegični: akomodacija bolesnika je poremećena, zjenice se neravnomjerno šire, javlja se strabizam, dvoslike, a ponekad i sljepoća. Ovi simptomi povezani su s oštećenjem okulomotornih živaca. Zatim se pridruži pareza mišića jezika (afonija), gutanje postaje otežano, mišići vrata, trupa i crijeva slabe (pareza, zatvor, nadutost), dolazi do oslobađanja guste viskozne sluzi. Temperatura može biti normalna, ponekad raste. Svijest je očuvana. U pravilu se ne bilježi akutna upala gastrointestinalnog trakta. U završnoj fazi bolesti glavnu ulogu ima respiratorni distres, smrt nastupa od respiratorne i srčane paralize. Smrtnost je 35 - 85%.

Postinfektivni imunitet. Prenesena bolest, očito, ostavlja antitoksični imunitet specifičan za tip, križni imunitet se ne formira. Trajanje i intenzitet postinfekcijske imunosti te uloga antimikrobnih protutijela i fagocita u njoj nisu dovoljno istraženi.

Laboratorijska dijagnostika. Materijal za studiju je: od pacijenta - ispiranje želuca, izmet, krv, urin, povraćanje; iz leša - sadržaj želuca, tankog i debelog crijeva, limfnih čvorova, kao i glave i leđna moždina. Proizvod koji je uzrokovao trovanje također je podvrgnut istraživanju. Istraživanja se provode radi otkrivanja i identifikacije C. botulinum ili, češće, u svrhu detekcije botulinum toksina i utvrđivanja njegovog serotipa. Za isticanje kulture C. botulinum materijal se inokulira na krute podloge i Kitt-Tarozzi medij za pohranjivanje (dio epruveta se zagrijava na temperaturi od 85 °C 20 minuta kako bi se ubile nesporogene bakterije). Iz tekućih kultura nakon inkubacije vrše se inokulacije na čvrste podloge kako bi se dobile izolirane kolonije, a zatim čiste kulture koje se identificiraju morfološkim, kulturalnim, biokemijskim i toksigenim svojstvima. Sljedeće tri metode mogu se koristiti za otkrivanje botulinum toksina u ispitnom materijalu ili filtratu kulture.

1. Biološki test na miševima. Da biste to učinili, uzmite najmanje 5 miševa. Jedna od njih se inficira samo ispitivanim materijalom, a svaka od ostale četiri se inficira mješavinom materijala sa 200 AJ antitoksičnog seruma odgovarajućeg tipa - A, B, C i E. Smjesa se čuva na sobnoj temperaturi. 40 minuta da neutralizira toksin antitoksinom. U prisutnosti botulinum toksina u ispitivanom materijalu svi miševi uginu osim onog kojemu je ubrizgana mješavina materijala s antitoksičnim serumom, čime je neutralizirano djelovanje homologne vrste toksina.

2. Primjena RPHA s dijagnostikumom antitijela, tj. eritrocitima senzibiliziranim antitoksinima odgovarajućeg tipa.

3. Visoko osjetljiva i specifična metoda detekcije botulinum toksina temelji se na njegovoj sposobnosti da inhibira aktivnost fagocita. U prisutnosti odgovarajućeg antitoksičnog seruma neutralizira se leukotoksično svojstvo toksina.

Liječenje. Najviše učinkovita metoda liječenje botulizma je rana primjena antitoksičnih seruma. Dok se ne utvrdi vrsta toksina koji je uzrokovao botulizam, bolesniku se intramuskularno ubrizgava 10 000 IU antitoksičnog seruma tipa A, C i E i 5 000 IU seruma tipa B (ukupno 35 000 IU). Prvog dana, serum se primjenjuje više puta svakih 5-10 sati, u teškim slučajevima - intravenski. Svim osobama koje su jele hranu koja je uzrokovala trovanje, a nisu se razbolile, u profilaktičke svrhe daje se antitoksični serum od 2000 IU iste vrste. Nakon utvrđivanja vrste toksina primjenjuje se samo homologni antiserum. Radi poticanja stvaranja aktivnog imuniteta bolesniku se ubrizgavaju i toksoidi tipa A, B, C i E, a nakon određivanja vrste toksina samo homologni toksoid. Ispiranjem želuca i davanjem laksativa postižu brzo uklanjanje toksina i uzročnika iz crijeva. Seroterapija se nadopunjuje antibiotskom terapijom, kao i simptomatskim i restorativnim liječenjem.

Prevencija. Za stvaranje umjetne antitoksične imunosti protiv botulizma, dobiveni su toksoidi, ali nisu pronašli široku primjenu. Osnova za prevenciju botulizma je strogo poštivanje sanitarnog i higijenskog režima pri preradi proizvoda u poduzećima prehrambene industrije, posebno onih povezanih s proizvodnjom konzervirane hrane, šunke, kobasica, kao i pri dimljenju, soljenju ribe i pripremi balyksa. iz toga. Konzervirana hrana nakon toplinske obrade mora biti podvrgnuta termostatskoj kontroli (drže se u termostatu na 37 °C određeno vrijeme): klostridije sačuvane u konzerviranoj hrani uzrokuju bombardiranje (napuhanost) konzervi, a njihov sadržaj miriše na užeglo ulje. Takva konzervirana roba podliježe zapljeni i oprezu bakteriološka istraživanja. Za soljenje ribe potrebno je koristiti jake otopine soli - salamuru koja sadrži 10 - 12% NaCl. Posebno opasno može biti domaća konzervirana hrana, posebno gljive, napravljena bez pridržavanja potrebnog režima.