Microbiologia: appunti delle lezioni Tkachenko Ksenia Viktorovna

2. Botulismo

2. Botulismo

L'agente eziologico del botulismo appartiene al genere Clistridium, specie Cl. botulino. È l'agente eziologico dell'intossicazione alimentare.

La tossicosi alimentare è una malattia che si verifica quando si mangia cibo contenente esotossine dell'agente patogeno, mentre l'agente patogeno stesso non svolge un ruolo decisivo nello sviluppo della malattia.

Cl. botulinum sono grandi bastoncelli Gram-positivi. Formano spore localizzate subterminalmente. Le capsule no. Anaerobi stretti.

Propagato su agar glucosio nel sangue forma irregolare colonie con germogli o bordi lisci, zona di emolisi intorno alle colonie. Quando crescono in una colonna di agar, assomigliano a batuffoli di cotone o lenticchie. Nei mezzi liquidi si forma una torbidità uniforme e quindi un precipitato compatto cade sul fondo della provetta.

L'habitat naturale del botulismo di Clostridium è l'intestino di pesci, animali, microrganismi che entrano nel terreno con le feci. Capace a lungo persistono e si moltiplicano nell'ambiente esterno sotto forma di spore. Le forme vegetative sono instabili nell'ambiente esterno.

L'attività enzimatica è instabile e non viene utilizzata per l'identificazione.

Secondo la struttura antigenica delle tossine prodotte, si distinguono i sierotipi A, B, C1, D, E, F, Q. La specificità antigenica dei batteri stessi non è determinata.

Il Clostridium botulinum produce l'esotossina più potente, il botulino. La tossina botulinica si accumula prodotto alimentare moltiplicandosi in esso. Questi prodotti sono generalmente in scatola cucina casalinga, salsicce affumicate, ecc.

La tossina ha un effetto neurotropico. Con lo sviluppo della malattia, si verifica sempre la tossinemia, il midollo allungato e i nuclei dei nervi cranici sono interessati. La tossina è resistente enzimi digestivi, viene rapidamente assorbito da divisioni superiori digerente nel sangue ed entra nelle sinapsi neuromuscolari.

La tossina botulinica si lega alla membrana del sinaptosoma ed entra nella cellula nervosa per endocitosi.

Il meccanismo d'azione della tossina è l'inibizione del rilascio calcio-dipendente di acetilcolina, il blocco attività funzionale neurone. Prima di tutto, i centri nervosi bulbari sono interessati. Ci sono intossicazione generale, segni di danno all'organo della vista - visione doppia, disturbo dell'accomodazione, pupille dilatate, danno ai muscoli oculomotori. Allo stesso tempo, la deglutizione diventa difficile, appare l'afonia, male alla testa, vertigini, vomito.

La malattia ha un alto tasso di mortalità.

Diagnostica:

1) infezione di topi da laboratorio; materiale: vomito, lavanda gastrica, feci, sangue;

2) rilevazione della tossina nella reazione di neutralizzazione della tossina;

3) sierodiagnosi.

Trattamento: siero anti-botulinico antitossico.

BOTULISMO(lat. botulus salsiccia; sin. botulismo) - grave intossicazione che si verifica a seguito del consumo di alimenti contenenti tossine di Clostridium botulinum ed è caratterizzata da una lesione predominante del sistema nervoso centrale e autonomo.

Statistiche

Le statistiche esistenti non riflettono la dimensione reale dell'incidenza delle persone B. È più affidabile e completa dove viene effettuato un esame di laboratorio dettagliato di tutti i casi acuti e mortali di malattie ed è praticamente assente in molti paesi in cui i decessi non sono soggetti all'esame e non ci sono condizioni per il ricovero dei pazienti. Anche nei paesi sviluppati, solo negli ultimi decenni, questo gruppo di gravi intossicazioni ha cominciato a differenziarsi in base ai tipi di tossine che ne hanno causato lo sviluppo, condizione indispensabile per un trattamento tempestivo e corretto del paziente. Mayer (K. Meyer, 1956), analizzando l'incidenza di B. nel mondo da 50 anni, ritiene che durante questo periodo si siano ammalate 5635 persone, di cui 1714 sono morte.

Queste statistiche si basano su singole pubblicazioni. Negli USA per 65 anni (1899-1964) sono stati registrati 1574 casi, di cui 955 (60,6%) deceduti. In Russia, dal 1818 al 1913, furono segnalati 609 pazienti affetti da B., di cui circa la metà morì. Con il miglioramento delle registrazioni statistiche di morbilità nel nostro paese dal 1920 al 1939, erano noti 674 pazienti con B., di cui più di un quarto morì. In Giappone, dal 1951 al 1964, furono registrati 297 pazienti affetti da B., di cui 78 deceduti. In Francia, prima dell'occupazione da parte delle truppe fasciste, furono registrati 24 casi di B.; durante l'occupazione il numero di casi ha superato le mille persone, che, come si è scoperto, era associato al consumo di carne di maiali macellati di nascosto in condizioni antigeniche.

Eziologia

L'agente eziologico del botulismo Clostridium botulinum (sin. Bacillus botulinus) fu descritto nel 1896 da Van Ermengem (E. van Ermengem) durante un'indagine su un focolaio di B. in Germania. Lo studio dell'eziologia di B. negli anni successivi ha mostrato che la malattia è causata da diversi agenti patogeni appartenenti alla stessa specie. Sono noti sei tipi di agenti causali del botulismo: A, B, C, D, E, F. La divisione in tipi è associata alla struttura antigenica originaria dell'esotossina prodotta dalla cellula. Ogni tipo di tossina può essere completamente neutralizzato solo dal siero del tipo omologo.

Gli attivatori di B. sono molto diffusi in natura. L'habitat permanente delle spore di questi batteri è il suolo, da dove entrano nell'acqua, nella frutta e nella verdura, nei prodotti alimentari, nel foraggio, e quindi nell'intestino dell'uomo e degli animali (mammiferi, uccelli, pesci, invertebrati). Burke (G. Burke, 1919) durante la ricerca in California isolò 235 raccolti da acqua, fieno, terreno del giardino, insetti, ragni, lumache, letame di cavallo, contenuto intestinale di uccelli. In tutti gli oggetti sopra elencati, i patogeni di B. formano spore resistenti agli effetti delle sostanze chimiche. e fisico fattori. Le forme vegetative dei patogeni B. muoiono quando vengono bollite per 2-5 minuti, le forme di spore di alcuni ceppi, in particolare i tipi A, B, C, F, sono altamente termoresistenti. Resistono a 1-5 ore di ebollizione e muoiono solo se sterilizzati in autoclave. La tossina botulinica viene parzialmente distrutta se riscaldata a t° 70-90°, se fatta bollire per 5-15 minuti. crolla completamente.

Nel nostro paese, i tipi A, B, E sono più comuni nell'ambiente, meno spesso i tipi C e F, i tipi A, B, E si trovano nelle malattie nell'uomo, i tipi A, B, C, E si trovano negli animali.

Tutti e sei i tipi di Cl. botulinum sono molto vicini nelle loro proprietà morfologiche, culturali e nell'effetto delle loro tossine sugli organismi umani e animali. Danno lo stesso quadro clinico della malattia.

Epidemiologia

La particolarità dell'epidemiologia di B. è determinata dal fatto che non si trasmette da malato a sano. Il principale serbatoio di infezione in B. sono gli animali a sangue caldo (principalmente erbivori), meno spesso pesci, crostacei, molluschi, nell'intestino di cui si accumula Cl. botulinum, escreto con le feci nell'ambiente, dove diventano spore. La successiva germinazione delle spore su substrati organici in condizioni anaerobiche, specialmente nell'intervallo di temperatura di 22-37°C, è accompagnata dall'accumulo di microbi e delle loro tossine.

La prevalenza delle malattie nei paesi del mondo è determinata da: contaminazione con spore di Cl. oggetti botulinici ambiente, il grado di sensibilità di una persona a una tossina di questo tipo, nonché la natura della produzione (preparazione) dei prodotti alimentari e le caratteristiche dell'alimentazione e della vita quotidiana della popolazione. L'assenza di spore di Cl. negli oggetti ambientali. botulinum, ovviamente, esclude la possibilità che entrino nei prodotti alimentari e tecnologia moderna la loro produzione anche in presenza di spore impedisce la ritenzione o l'accumulo di tossina botulinica durante la conservazione dei prodotti.

La sensibilità umana alla tossina botulinica di tipo A, B, C, D, E e F varia. Ciò è confermato dai dati epidemiologici riguardanti la diffusione di malattie e la contaminazione di oggetti ambientali con spore, nonché informazioni sulla diversa sensibilità sperimentale e agricola. animali a diversi tipi di tossine.

Spore di Cl. botulinum sono molto diffusi. Secondo V. M. Berman (1941), "tutta la natura è la fonte del botulismo", che sottolinea la diffusa contaminazione di oggetti ambientali con spore dell'agente patogeno. Tuttavia, le statistiche sui ritrovamenti di spore sono insignificanti. Ciò è dovuto a ricerche limitate e mirate associate a malattie emergenti o alla necessità di censire alcune aree da cui vengono forniti ortaggi o prodotti ittici per Industria alimentare.

Il miglioramento dei metodi di ricerca di laboratorio nella direzione dell'identificazione delle caratteristiche del metabolismo del patogeno e l'uso diffuso di sieri tipo-specifici hanno permesso di stabilire in modo più affidabile la contaminazione dell'ambiente con vari tipi di Cl. botulinum e presentano la geografia moderna della loro distribuzione.

Durante la ricerca vari campioni, prelevate nelle regioni del Caucaso settentrionale, del Mar d'Azov e del Mar Caspio, del Primorsky Krai, dell'Estremo Oriente, di Leningrado, le spore dell'agente patogeno B. sono state trovate nel 9% dei campioni di suolo e nel 4% dei campioni di acqua. Allo stesso tempo, nei campioni di suolo sono state trovate spore di agenti patogeni di tipo A, B, C ed E e di tipo E in campioni di acqua e limo.Tra i risultati positivi, il tipo E era di ca. 74%; è stato rinvenuto nel suolo delle sponde dei corpi idrici in quasi tutte le aree censite, il secondo posto nella frequenza dei ritrovamenti è occupato dal tipo B (16,5%), il terzo - dal tipo A (7,8%) e il quarto - per tipo C (1,8%). Nel 33% dei campioni di suolo studiati dalle rive del lago Balkhash e alcune regioni della SSR armena, spore del patogeno B.

Secondo studi stranieri, i ritrovamenti più frequenti di spore del patogeno B. si verificano nello studio di fagioli (32%), piante in decomposizione (20%) e foraggio verde fermentato (20%).

Quando si analizza l'incidenza di B., si richiama l'attenzione sul fatto che tutte le malattie sono causate da tre tipi di tossine: A, B ed E, con la predominanza di una di esse in ogni singolo paese. Quindi, negli Stati Uniti, il tipo A è la causa più comune di B., in Francia e Norvegia, il tipo B, in Giappone quasi tutte le malattie sono associate al tipo E, in Canada predomina il tipo E. Nel nostro paese le malattie sono causato da tre tipi di tossina (A, B ed E). Le malattie causate da tossine come C, D, F sono estremamente rare. Un caso di avvelenamento di gruppo (Lago Ciad) causato da una tossina del tipo

D. Sono stati descritti anche casi isolati di avvelenamento da tossina di tipo C. Per quanto riguarda il patogeno produttore di tossina di tipo F, recentemente scoperto in URSS, le malattie ad esso associate sono state registrate solo in Danimarca e negli Stati Uniti una volta ciascuno.

Pertanto, l'ineguaglianza nella patologia delle tossine botuliniche di vario tipo è evidente. È causato non tanto dalla probabilità che qualsiasi tipo di tossina entri nel corpo umano, ma dalla naturale resistenza di una persona a uno e dall'elevata sensibilità ad altri tipi di tossine, sebbene esista un'opinione (K. I. Matveev, 1959) che tutti gli animali a sangue caldo, mar. ore e gli esseri umani sono ugualmente sensibili alle tossine botuliniche di tutti i tipi. Tuttavia, è noto che il grado di sensibilità degli animali a sangue caldo non è lo stesso. Altamente resistenti alle tossine botuliniche sono maiali, cani, lupi, volpi, gatti selvatici e domestici, leoni, tigri e molti uccelli. Queste specie sono "inservienti" che distruggono animali malati e carogne e la natura della loro dieta offre eccezionali opportunità di contatto con B. agenti patogeni e le loro tossine. I più sensibili alle tossine botuliniche sono i cavalli, la cui natura esclude l'ampiezza di tali contatti e molti animali da laboratorio. esso fenomeno biologico, che consiste nella diversa sensibilità degli animali a sangue caldo ai rappresentanti di un gruppo di tossine, trova una spiegazione nello sviluppo evolutivo delle specie e nella loro relazione con i patogeni B. Nel processo di questa evoluzione, una certa parte degli individui del le specie che avevano una capacità individuale (ma genotipicamente determinata) di resistere in misura maggiore all'azione patogena delle tossine sono sopravvissute trasmettendo queste caratteristiche alla generazione successiva. Si deve presumere che i lontani antenati dell'uomo, che mangiavano carne cruda e in putrefazione, avessero anche i più ampi contatti con i patogeni di B., e soprattutto con i tipi C e D, come con i più antichi rappresentanti della clostridiosi.

anatomia patologica

Le alterazioni patoanatomiche riscontrate all'autopsia di un paziente deceduto per B. non rappresentano nulla di specifico. Di norma, viene rilevata una forte iperemia di tutti gli organi viscerali, accompagnata da molteplici emorragie piccole e grandi. Le membrane del cervello sono fortemente iperemiche, ci sono emorragie. Trombosi, lesioni dell'epitelio vascolare di natura necrotica e distruttiva si trovano nel tessuto cerebrale. Le pareti dei vasi del tessuto cerebrale sono allentate. Le cellule gangliari del sistema nervoso sono le più colpite. C'è vacuolizzazione del protoplasma, disintegrazione del nucleo. La forma delle cellule cambia, i processi si interrompono, i cambiamenti si verificano anche nella neuroglia.

Nel cuore, le fibre del tessuto connettivo si gonfiano, si osservano fenomeni di necrobiosi. Si verifica la frammentazione del miocardio; la striatura a strisce scompare. I vasi traboccano bruscamente di sangue, viene rilevato gonfiore dell'endotelio nei capillari e nei piccoli vasi.

I polmoni sono pieni di sangue, edematosi. C'è un'immagine nitida polmonite emorragica; in alcuni casi, vi è epatizzazione di singole sezioni del polmone e talvolta di interi lobi. I capillari del polmone sono nettamente espansi, negli alveoli c'è un accumulo di eritrociti. Il fegato è pieno di sangue, ingrossato, di colore brunastro, di consistenza flaccida. La microscopia mostra degenerazione granulare delle cellule del tessuto epatico, alterazione grassa, rigonfiamento delle fibre collagene del tessuto connettivo, dissociazione del parenchima epatico.

Nei reni, l'epitelio dei tubuli contorti è fortemente alterato e vi sono cambiamenti distrofici nei tubuli diritti.

La membrana mucosa della distesa digestiva è bruscamente iperemica. La mucosa dello stomaco è gonfia, di colore giallastro, allentata, strappata molto facilmente, in essa sono visibili emorragie puntiformi e più grandi. I vasi intestinali vengono iniettati bruscamente e conferiscono alla membrana sierosa un motivo marmoreo; la mucosa intestinale è gonfia, l'esame microscopico rivela vasodilatazione, danni alla parete e rilascio di globuli rossi.

A partire dal muscolo scheletrico la muscolatura del torace, della parete addominale e degli arti è maggiormente colpita. I muscoli hanno un aspetto "bollito", con una tinta grigiastra; l'esame microscopico rivela vasodilatazione, stasi nei capillari, la striatura striata scompare, le fibre si gonfiano, sembra una degenerazione di Zenker.

Patogenesi

Il principale fattore patogenetico in B. è la tossina botulinica. Secondo un certo numero di ricercatori, la patogenesi di B. ha un carattere tossico. Va notato una caratteristica importante per quanto riguarda la genesi dell'intossicazione con la tossina di tipo E. Su substrati nutritivi, questo tipo di patogeno B. forma una tossina di minore forza rispetto ai patogeni di tipo A, B e F, tuttavia, la gravità dell'intossicazione e la letalità in B. tipo E supera, di regola, quella in B. tipi A, B e F. La ragione di queste differenze è l'esistenza della tossina E in due forme: protossina e tossina.

Protossina inattiva, proveniente da. il cibo nello stomaco, viene attivato dagli enzimi, si trasforma in una tossina ed è già assorbito nell'intestino in uno stato attivo. Pertanto, il rilascio dello stomaco dal contenuto, come importante misura terapeutica per l'intossicazione botulinica causata dalla tossina di tipo E, è di eccezionale importanza.

Oltre che dal tratto digerente, la tossina può entrare anche attraverso le vie respiratorie quando si inala la polvere che la contiene. Ci sono anche casi di ferita B., quando le spore di Cl. botulinum è entrato nella ferita con il terreno, lì è germogliato, provocando la malattia, così come un caso della malattia associata alla trasfusione di sangue cadaverico prelevato dal defunto da B. (la malattia nel defunto non è stata riconosciuta).

Cl. botulinum vengono escreti dal corpo con feci, tossine - con urina, bile e feci.

Nell'esperimento con l'intossicazione botulinica, sono stati stabiliti due modelli importanti: il primo è che la somministrazione simultanea di vari tipi di tossina alla fine porta alla sommatoria azione tossica; il secondo pattern è associato al fenomeno della sensibilità paradossale, quando la somministrazione ripetuta e frequente della tossina porta alla morte, sebbene la sua dose totale non superi la metà della dose letale. È stato stabilito che la tossina botulinica di tipo A agisce selettivamente sulle terminazioni nervose colinergiche periferiche, mentre i tessuti adrenergici sono insensibili ad essa.

Dal sangue, la tossina penetra negli organi, dove colpisce le cellule di vari tessuti, principalmente il sistema nervoso, che è più sensibile alle tossine botuliniche. Il veleno botulinico agisce sui motoneuroni dei centri motori spinali e sul midollo allungato, che è la causa dello sviluppo della sindrome paralitica, nonché sui dispositivi neuromuscolari motori periferici, causando una violazione della trasmissione dell'eccitazione dal nervo al muscolo. In questo caso, non c'è un blocco completo della trasmissione degli impulsi. Inoltre, la tossina botulinica in dosi molto elevate deprime la respirazione dei tessuti del cervello, ma questi cambiamenti non sono la causa della morte. Osservazioni cliniche ei dati sperimentali ci consentono di considerare la tossina botulinica e il veleno vascolare, la cui azione si basa sul danno al sistema nervoso del cuore e dei vasi sanguigni. La perfusione a breve termine della tossina attraverso i vasi provoca il loro spasmo, l'esposizione a lungo termine porta alla paresi vascolare e alla fragilità capillare.

I meccanismi molecolari di interazione tra tossine e cellule rimangono indecifrati.

Immunità

La malattia trasferita non lascia l'immunità. Ci sono segnalazioni di malattie ripetute. Quindi, K. M. Ayanyan (1967) osservò B. in due bambini nel 1963 e di nuovo in loro un anno dopo. Entrambi i bambini sono morti. Sia la prima che la seconda volta la tossina Cl. botulino di tipo A.

Quadro clinico

Il periodo di incubazione è di 12-24 ore, ma può essere esteso fino a 10 giorni. Più breve è il periodo di incubazione, più grave è il decorso della malattia. Durante un focolaio, si osservano casi di malattia con periodi di incubazione sia brevi che più lunghi, anche se gli individui hanno mangiato lo stesso cibo contemporaneamente. Ciò, a quanto pare, è dovuto alla distribuzione irregolare della tossina nel prodotto alimentare, nonché alla sensibilità individuale del malato.

Nella stragrande maggioranza dei casi, B. inizia in modo acuto. I sintomi possono spesso manifestarsi sotto forma di tre: opzioni principali: con una predominanza di disturbi dispeptici, disturbi visivi o funzione respiratoria. Nella prima variante, la malattia inizia con una sensazione di nausea, il vomito si unisce rapidamente, che può essere solo dentro periodo iniziale malattia. Alcuni pazienti notano crampi, dolore a volte intenso nella regione epigastrica. Spesso c'è una sensazione di pienezza e pienezza dello stomaco. Allo stesso tempo, si sviluppa la secchezza delle mucose del cavo orale e i pazienti avvertono una sete intensa. Caratterizzato da flatulenza pronunciata, stitichezza, che, a causa della paresi intestinale, può essere molto persistente. Tuttavia, nel periodo iniziale della malattia, si osserva spesso un allentamento delle feci, mentre le feci non contengono impurità patologiche.

A primi segni B. includeva anche sintomi di disturbi della deglutizione, che in alcuni casi si sviluppano già nelle prime ore della malattia. I pazienti lamentano la presenza di un "nodo" alla gola, dolore durante la deglutizione, una sensazione di "graffio" dietro lo sterno e il soffocamento si unisce poco dopo.

Se la malattia inizia con disturbi visivi, i pazienti spesso si rivolgono a un oftalmologo. Inizialmente si lamentano di "nebbia", "griglia", "mosche" davanti ai loro occhi. La lettura di un carattere normale è difficile o impossibile (paresi dell'accomodazione), il raddoppio degli oggetti è osservato meno spesso.

A pazienti separati «l'ipermetropia affilata» si sviluppa, gli orli possono esser corretti dalle lenti corrispondenti. I disturbi visivi nel periodo iniziale di B. si verificano spesso senza sintomi dispeptici, il che complica la diagnosi. Con un esame approfondito del paziente, oltre a vari disturbi visivi, è possibile stabilire la presenza di secchezza delle fauci, sete, alterazione del timbro della voce (raucedine, voce "ruvida"), nonché sintomi di intossicazione generale: mal di testa, vertigini, debolezza muscolare generale, affaticamento, insonnia . Tutti questi sintomi nel periodo iniziale non sono sempre espressi in modo sufficientemente chiaro o possono essere persi durante l'esame a causa della netta predominanza dei sintomi oculari. Se la variante dispeptica delle manifestazioni iniziali di B. dura per diverse ore, i disturbi visivi senza altre manifestazioni caratteristiche della malattia possono persistere per diversi giorni.

Il decorso più grave di B. si verifica quando sviluppo iniziale disturbi respiratori. I pazienti in piena salute iniziano a sentire una mancanza d'aria, fanno pause inaspettate durante una conversazione. A volte queste pause si verificano tra le singole sillabe. C'è una sensazione di oppressione o pesantezza al petto, in alcuni casi ci sono dolori petto. La respirazione di solito non è accelerata, ma superficiale. Contemporaneamente ai disturbi respiratori, la voce cambia, che diventa non solo rauca, ma acquisisce anche un tono nasale. Una violazione dell'atto di deglutire si unisce rapidamente ai disturbi respiratori. I sintomi di intossicazione generale sono sempre espressi: mal di testa, grave debolezza muscolare, vertigini, ecc.

Dopo le manifestazioni iniziali di B., la malattia entra nella fase di massimo sviluppo dei sintomi. Soggettivamente, i pazienti notano "nebbia", "griglia", "sfarfallio" o "mosche" davanti ai loro occhi. I contorni degli oggetti diventano sfocati. Quando provi a leggere le lettere e le righe "scatter". Questi sintomi si sviluppano a seguito dell'effetto sul muscolo ciliare della tossina, che porta al suo rilassamento, che porta alla paralisi dell'accomodazione. Spesso si osserva il raddoppio degli oggetti, specialmente quando si girano i bulbi oculari di lato. Nei casi più gravi, c'è la paralisi di uno o più nervi cranici che innervano i muscoli dell'occhio, oftalmoplegia (vedi).

Quasi sempre c'è una pronunciata e persistente dilatazione delle pupille - midriasi. Questo sintomo appare uno dei primi e dura più a lungo. Abbastanza spesso c'è una disuguaglianza di alunni - anisocoria (vedi). La reazione delle pupille alla luce è nettamente ridotta o del tutto assente. A volte i pazienti non sono in grado di distinguere i contorni degli oggetti e percepiscono solo stimoli luminosi. Si osserva spesso ptosi (vedi), spesso bilaterale, ma il grado di abbassamento della palpebra superiore può predominare su un lato qualsiasi. In un decorso più grave di B., gli occhi possono essere completamente chiusi e per aprirli i pazienti sono costretti a sollevare la palpebra superiore con le mani.

L'azione della tossina botulinica si estende ai nervi oculomotore e abducente, c'è una violazione del movimento dei bulbi oculari, c'è una sensazione di raddoppiamento degli oggetti. Di solito, la paresi del muscolo retto laterale dell'occhio appare prima, il che porta allo strabismo convergente. In rari casi, quando predomina la paresi del nervo oculomotore, si verifica uno strobismo divergente. In grave B. si osserva un danno persistente simultaneo a tutti i muscoli oculomotori, che porta alla completa immobilità dei bulbi oculari. In un certo numero di pazienti è possibile stabilire la presenza di nistagmo, più spesso verticale.

I disturbi della deglutizione sono sintomi caratteristici, ma sono meno comuni dei sintomi oculari. I pazienti inizialmente lamentano difficoltà e dolore durante la deglutizione. In futuro, sentono una sensazione di "nodo" alla gola e, infine, l'atto di deglutire viene disturbato. Il disturbo associato del movimento della lingua peggiora l'atto della deglutizione, cambia l'articolazione. Nei casi gravi di B., il paziente non è in grado di muovere la punta della lingua oltre il bordo dei denti. Lo sviluppo della paresi dell'epiglottide porta a una chiusura incompleta vie respiratorie quando ingerito, che crea la possibilità che il cibo entri nel tratto respiratorio, causando soffocamento, tosse e soffocamento.

Nei pazienti con un disturbo nell'atto della deglutizione, vi è una mancanza di riflesso faringeo, si possono notare fenomeni di paresi del palato molle. Nei casi più gravi, la cortina palatina è immobile, appesa alla radice della lingua. Quando provi a ingoiare l'acqua, esce dal naso.

Nelle prime ore della malattia si osserva una diminuzione del timbro della voce e della raucedine, che è associata a una diminuzione della salivazione e della secchezza delle corde vocali. Man mano che si sviluppa la paresi, a questi sintomi si uniscono l'articolazione sfocata ("noduli in bocca") e la nasalità e, con lo sviluppo della paresi delle corde vocali, può verificarsi un'afonia completa.

Meno comunemente, i pazienti con B. hanno paresi flaccida muscoli facciali a causa di un danno al VII paio di nervi cranici. Dalle prime ore nei pazienti si sviluppa miastenia affilata, gli orli disturbano il paziente per tutto il periodo di ubriachezza. Tuttavia, con B. non c'è mai una lesione della sfera sensibile, così come la perdita di coscienza.

In B. grave, è caratteristico lo sviluppo della paresi dei muscoli respiratori, che si esprime in assenza di respirazione diaframmatica, una netta limitazione della mobilità dei muscoli intercostali e la scomparsa del riflesso della tosse. Il disturbo e l'arresto respiratorio sono una delle principali cause di morte in B. L'insufficienza respiratoria assume un decorso particolarmente grave anche perché, insieme alla paresi dei muscoli respiratori, i pazienti, di regola, hanno processi infiammatori nei polmoni. All'inizio della malattia, i pazienti notano una "mancanza" di aria, una sensazione di oppressione e pesantezza al petto, si stancano rapidamente durante una conversazione o fanno pause inaspettate per fare un respiro profondo. La frequenza respiratoria può raggiungere 30-40 in 1 min. specie patologiche respirazione.

Il sistema cardiovascolare soffre una seconda volta, sulla base dell'intossicazione, con un decorso più grave della malattia (tachicardia, toni cardiaci ovattati, a volte allargando i confini relativa stupidità cuore, soffio sistolico al suo apice, segni di distrofia miocardica secondo l'elettrocardiografia). La pressione arteriosa, sia sistolica che diastolica, ha una certa tendenza all'aumento, che è associata all'effetto vasocostrittore della tossina.

Con B., la temperatura corporea non aumenta, ma nelle forme gravi della malattia è possibile l'ipertermia, come in fasi iniziali, e in più periodo tardo. Tuttavia, un aumento della temperatura corporea nei pazienti con B. nel tardo periodo della malattia è più spesso dovuto all'aggiunta di polmonite.

In alcuni pazienti si notano oliguria, diminuzione del peso specifico delle urine e albuminuria. Il sedimento contiene calchi ialini e granulari, eritrociti. Il livello di azoto residuo nel sangue può superare i valori normali.

Nel sangue si notano più spesso leucocitosi moderata (a volte significativa) con neutrofilia e comparsa di forme giovani di neutrofili (nelle forme gravi della malattia).

Complicazioni

Con violazioni della deglutizione - polmonite da aspirazione. I convalescenti possono manifestare miosite, accompagnata da dolore e difficoltà di movimento, e miocardite infettiva. La miopia può svilupparsi.

Diagnosi

La diagnosi viene effettuata sulla base di dati anamnestici, studi clinici e di laboratorio.

Diagnostica di laboratorio si basa sulla rilevazione della tossina botulinica o dell'agente patogeno di B. nei materiali prelevati dal paziente (sangue, vomito, lavanda gastrica, feci, ecc.), nonché nei prodotti alimentari che hanno causato avvelenamento. È importante stabilire non solo la presenza di una tossina o di un microbo, ma anche il suo tipo per confermare la diagnosi clinica e prescrivere il trattamento corretto.

È necessario prendere il sangue prima d'introduzione al paziente per coricarsi. siero. I conservanti non devono essere aggiunti ai campioni prelevati per ricerche di laboratorio, così come ai prodotti alimentari. I materiali devono essere mantenuti refrigerati.

I campioni ricevuti dal laboratorio vengono esaminati contemporaneamente in due direzioni: due terzi del campione pre-preparato (si ottiene filtrato o centrifugato) è destinato alla rilevazione delle tossine botuliniche nella reazione di neutralizzazione, un terzo è destinato alle colture per isolare microbi botulinici.

Per rilevare la tossina, per ogni campione vengono prelevati 4 topi del peso di 16-18 g.Poiché nel materiale di prova può essere presente uno dei sei tipi di tossine botuliniche, è necessario eseguire una reazione preliminare con una miscela di anti- sieri diagnostici botulinici di tutti i tipi. I sieri antibotulinici medicinali non devono essere utilizzati per scopi diagnostici. Da ciascun campione di prova, una quantità uguale (1,5-2,4 ml) del filtrato o del centrifugato viene versata in due provette. Ad una (prima) provetta (controllo) si aggiungono 0,6 ml di soluzione fisiologica, all'altra (esperimento) si aggiungono 0,6 ml di una miscela di sieri monovalenti, dopodiché si inietta il contenuto della prima provetta per via intraperitoneale o in vena in due topi bianchi o in vena in un volume di 0,7-1,0 ml, lo stesso volume della seconda provetta (esperimento) viene somministrato alla seconda coppia di topi bianchi. Il materiale di prova di ciascuna provetta deve essere iniettato con siringhe diverse.

Gli animali vengono osservati per 4 giorni, tuttavia, se i topi si ammalano o muoiono prima di questo periodo, viene immediatamente applicata una reazione di neutralizzazione con sieri diagnostici monovalenti.

In presenza di tossina botulinica nel campione, due topi muoiono, è stato introdotto il filtrato di Crimea senza sieri, i restanti due rimangono in vita. Di solito, l'immagine della malattia e della morte dei topi è molto caratteristica: appare una respirazione rapida, uno stato di completo rilassamento dei muscoli, retrazione dei muscoli della parete addominale ("vita di vespa" - Fig. 10), paralisi e convulsioni prima Morte.

In caso di morte di tutti e 4 i topi, la reazione di neutralizzazione va ripetuta con estratti diluiti 5, 10, 20, 100 volte. Quando gli estratti vengono diluiti, la microflora estranea perde la capacità di uccidere i topi e la tossina botulinica, che di solito ha una maggiore attività biologica, causerà la morte dei topi quando i filtrati vengono diluiti.

Se la tossina botulinica viene rilevata in una reazione con siero polivalente, viene immediatamente avviata una dettagliata reazione di neutralizzazione per determinare il tipo di tossina con sieri diagnostici specifici per tipo.

Particolare attenzione dovrebbe essere prestata alla formulazione della reazione di neutralizzazione con il siero del sangue del paziente, poiché di solito è piccolo. È necessario separare accuratamente il siero dal coagulo di sangue e mettere immediatamente una dettagliata reazione di neutralizzazione con sieri botulinici monovalenti di tipo A, B, E (altri tipi di B. sono molto rari).

Al ricevimento reazione positiva neutralizzazione con sieri botulinici diagnostici, viene data una conclusione sulla presenza di tossina botulinica nel materiale di prova e ne viene indicato il tipo.

Spesso la formulazione della reazione di neutralizzazione con sieri sia polivalenti che monovalenti deve essere ripetuta a causa della tossicità aspecifica della microflora estranea, che si trova solitamente nel vomito, nelle feci, quindi nella migliore delle ipotesi, la risposta alla presenza di tossina in il campione può essere fornito al 2-3° giorno, e per quanto riguarda la sua tipologia di affiliazione - il 3°-5° giorno dall'inizio dello studio.

Se è impossibile rilevare la tossina nei materiali di prova, vengono effettuati studi per rilevare l'agente patogeno B.

A tale scopo, 3-5 ml del materiale preparato vengono inoculati su terreni nutritivi liquidi. Per le inoculazioni primarie è preferibile utilizzare terreno caseina-fungo o caseina-acido, brodo Hottinger o terreno tipo Tarozzi. È necessario che il pH fosse compreso tra 7,2 e 7,4. È inoltre obbligatorio avere carne macinata o carne di fegato nei mezzi di carne e miglio bollito e cotone idrofilo nei mezzi di caseina. La provetta o la fiala devono essere riempite almeno per metà con il mezzo nutritivo. Prima della semina, al terreno viene aggiunto lo 0,5% di glucosio.

Le inoculazioni devono essere effettuate in terreno in grandi provette o in fiale con una capacità di 100-200 ml. Dall'alto, il terreno viene versato con uno strato di olio di vaselina spesso 0,5 cm, in particolare va ricordato che è meglio inoculare l'inoculo iniziale in un grande volume del terreno (70-150 ml) in modo che il liquido di coltura di l'inoculazione primaria è sufficiente per tutti gli studi. Successive sottocolture dei campioni di prova dall'inoculazione primaria nello stesso terreno nutritivo liquido potrebbero non produrre la formazione di tossine nel terreno. La semina va fatta in quattro bottiglie di cui due riscaldate a t°80° per 20 minuti. Le altre due fiale non vengono riscaldate dopo la semina. Tutte le fiale sono poste in un termostato a t° 28 e 35° (in ogni termostato uno riscaldato, uno non riscaldato).

Se gli attivatori di B. si trovano nel materiale studiato principalmente in forma vegetativa, la crescita nelle colture sarà hl. arr. in fiale non riscaldate. Nello stesso caso, se il materiale contiene forme di spore, la crescita avverrà in fiale riscaldate e in alcuni casi può portare immediatamente all'isolamento di una coltura pura da tale semina.

Dopo 48 ore. dall'inizio della crescita, i campioni del fluido di coltura (10-15 ml ciascuno) vengono prelevati da tutte le fiale nel rispetto della sterilità e sottoposti ad esame. Con il liquido di coltura si mette una reazione di neutralizzazione con un siero polivalente antibotulinico. Dopo aver ricevuto risultati positivi, la reazione di neutralizzazione viene eseguita separatamente con ciascun siero specifico per tipo. Se dopo due giorni non viene rilevata alcuna crescita nelle fiale, è necessario continuare l'incubazione in un termostato e lo studio deve essere eseguito nei giorni 4-6-10. Al rilevamento di bastoncini tipici della morfologia per Cl. botulinum, così come la tossina botulinica, viene fornita una conclusione sulla contaminazione del materiale di prova con l'agente patogeno B. L'isolamento di una coltura pura in questo caso non è obbligatorio.

Se nelle colture si trovano microbi morfologicamente simili a Cl. botulinum e la tossina è assente, il liquido di coltura deve essere attivato con pancreatina o tripsina.

Decisive per la risposta sulla contaminazione del materiale di prova da parte dell'agente patogeno B. e del suo tipo sono queste reazioni di neutralizzazione. Nei casi dubbi si isola una coltura pura (da un'alta colonna di agar, da inoculazioni su piastre Petri). Colonie individuali morfologicamente caratteristiche di Cl. botulinum vengono seminati su terreno liquido ed esaminati dopo 3-5 giorni. crescita nella reazione di neutralizzazione con sieri antibotulinici tipo-specifici.

Il test di neutralizzazione è un metodo affidabile, altamente specifico e abbastanza sensibile per rilevare le tossine botuliniche.

Altri metodi proposti per la diagnosi di laboratorio di B. (reazione di emoagglutinazione passiva, metodo di calcolo dell'indice fagocitico, sieri luminescenti) sono puramente sperimentali e non sono ampiamente utilizzati a causa dell'insufficiente specificità.

Diagnosi differenziale

B. dovrebbe essere differenziato dall'avvelenamento da giusquiamo. A differenza di B., i primi segni di avvelenamento si verificano dopo 1-5 ore. dopo aver mangiato la pianta. C'è debolezza, sonnolenza, vertigini, mal di testa. Ci possono essere nausea, raramente vomito. La pelle del viso e del tronco è iperemica, a volte si trova un'eruzione scarlatta. La somiglianza con B. risiede nella persistente dilatazione delle pupille e nella loro assenza di reazione alla luce, secchezza delle mucose della bocca e salivazione alterata. Naturalmente, si osservano disturbi mentali. I pazienti sono generalmente molto irrequieti, i loro movimenti non sono coordinati, c'è una reazione inadeguata ai fenomeni circostanti, delirio, spesso con allucinazioni significative. Possono verificarsi convulsioni clonico-toniche. Si notano tachicardia, disturbi del ritmo, abbassamento della pressione arteriosa, sordità dei toni cardiaci. Con lo sviluppo del coma, c'è un forte pallore della pelle, bradicardia, mancanza di respiro, disturbi del ritmo respiratorio. La morte viene dall'arresto respiratorio.

L'avvelenamento con alcol metilico porta anche allo sviluppo di una serie di sintomi simili a B. Si notano debolezza generale, ronzio nelle orecchie, nausea, vomito e talvolta dolore addominale. Le pupille sono dilatate e reagiscono male alla luce. Le violazioni visive sono il carattere di due onde. In primo luogo, i pazienti notano lampeggiare davanti agli occhi, diminuzione dell'acuità visiva, "nebbia", raddoppio degli oggetti; quindi può verificarsi un certo miglioramento della vista, dopo di che si sviluppa la cecità, che non si osserva in B. Nei casi gravi di avvelenamento, si notano allucinazioni, paura, convulsioni, indebolimento della forza muscolare, perdita di coscienza, calo dell'attività cardiovascolare, ma la paresi non è osservata.

Nella diagnosi differenziale con avvelenamento da funghi velenosi, va tenuto presente che B. di solito si verifica quando si mangiano funghi in scatola, mentre l'avvelenamento da funghi velenosi si verifica più spesso quando si consumano funghi appena preparati.

In caso di avvelenamento da agarico di mosca, associato principalmente all'azione della muscarina, che ha un effetto simile all'atropina, della muscaridina e della piltstossina, vi è forte salivazione, sudorazione, diarrea profusa, dolore addominale colico, rallentamento del polso, pallore del viso , persistente dilatazione delle pupille (quest'ultima somiglia a B.). Nei casi più gravi si notano allucinazioni (spesso visive), arrossamento della pelle del viso e convulsioni.

Anche l'insorgenza precoce di disturbi respiratori in un certo numero di pazienti con poliomielite può essere erroneamente considerata come B. A differenza di B., con la poliomielite vi è un'abbondante secrezione di muco e salivazione.

Per una diagnosi differenziale con la difterite, i cambiamenti nella faringe - incursioni di difterite - contano. I disturbi neurologici nella difterite di solito si verificano dopo mal di gola, febbre, gonfiore del tessuto sottocutaneo. La paralisi si verifica spesso contemporaneamente allo sviluppo della miocardite.

Previsione a B. sempre pesante. La sieroterapia attiva e solo precoce e l'uso della respirazione artificiale possono salvare la vita anche a quei pazienti che in precedenza erano condannati. Il recupero è lento, di solito più di un mese o più. L'efficienza viene ripristinata ancora più a lungo; anche la miopia, insorta nel periodo acuto della malattia, persiste a lungo.

Trattamento

I pazienti sono soggetti a ricovero incondizionato. È urgente eseguire una lavanda gastrica e pulire l'intestino. Va tenuto presente che la lavanda gastrica con B. è piuttosto difficile, poiché a causa dell'assenza di riflesso faringeo nel paziente e della presenza di paresi dell'epiglottide, la sonda può entrare nel tratto respiratorio. Prima di lavarti, devi assicurarti che la sonda sia nello stomaco.

Per neutralizzare la tossina botulinica liberamente circolante nel sangue, è necessario utilizzare sieri antibotulinici. La loro introduzione è più efficace nei primi giorni della malattia, poiché la più alta concentrazione di tossina nel sangue si osserva nel 2o-3o giorno. malattie (L. M. Shvedov, 1960).

Tuttavia, data la possibilità di un'entrata a lungo termine della tossina nel sangue del paziente, possiamo presumere che si stabilisca. l'effetto della sieroterapia sarà espresso nelle fasi successive della malattia. Nei casi in cui il tipo di tossina che ha causato la malattia è ancora sconosciuto, è necessaria l'introduzione di tutti e quattro i tipi di siero (A, B, C, E). Dopo aver stabilito il tipo di agente patogeno, viene somministrato il siero del tipo appropriato. Va tenuto presente che è possibile l'avvelenamento con diversi tipi di tossina. Il siero può essere somministrato sia per via endovenosa che intramuscolare. Inizialmente vengono introdotti i sieri di tipo A - 10.000 ME, tipo B - 5.000 ME, tipo C - 10.000 ME, tipo E - 10.000 ME. Tuttavia, spesso questa quantità non è sufficiente per neutralizzare completamente la tossina. Le introduzioni successive di siero sono possibili, le dosi un taglio dipenderanno da effetto clinico. Di solito, per il trattamento delle forme gravi di B., si consumano per un ciclo completo di trattamento 50.000-60.000 UI di tipo A, C, E e 25.000-30.000 UI di tipo B. Tuttavia, queste dosi possono anche essere aumentate.

Il complesso generale del trattamento dei pazienti con B. comprende la terapia di disintossicazione aspecifica, che consiste nell'introduzione di soluzioni saline, glucosio e sostituti del sangue. Soluzioni a basso peso molecolare - hemodez, polivinilpirrolidone e plasma sanguigno hanno un effetto particolarmente favorevole.

Considerando una possibilità di vegetazione dell'attivatore da disputa in andato - kish. percorso del paziente, molti medici raccomandano l'uso di farmaci cloramfenicolo o tetracicline. La durata del trattamento è di 7-8 giorni. Con l'uso di antibiotici, la frequenza delle "esacerbazioni" della malattia è diminuita.

Al fine di ridurre i tempi di recupero per i disturbi del sistema nervoso, è indicato l'appuntamento di ATP sotto forma di una soluzione all'1% di 2 ml tre volte al giorno per 7-10 giorni.

La sconfitta del sistema cardiovascolare richiede l'uso di canfora, cordiamina, glicosidi cardiaci.

Il paziente deve ricevere per sdraiarsi. dosi di vitamine, soprattutto del gruppo C e B.

Un posto speciale nel trattamento dei pazienti è occupato dai problemi della lotta ai disturbi respiratori. L'uso della respirazione artificiale dell'apparato è giustificato. La rianimazione respiratoria in B. consiste nell'eliminazione dell'ostruzione delle vie aeree e nella creazione di un'adeguata ventilazione polmonare mediante respiratori.

Indicazioni per l'imposizione di una tracheostomia e ventilazione artificiale endotracheale in B. sono paresi dei muscoli della faringe, della laringe e della lingua con disturbi di mancanza di respiro, paresi dei muscoli respiratori con una diminuzione della capacità vitale dei polmoni fino a 30%, indebolimento del riflesso della tosse, atelettasia e infiammazione dei polmoni. Si consiglia di utilizzare dispositivi a volume regolabile con frequenza respiratoria indipendente.

Nonostante la diminuzione della salivazione, il paziente deve periodicamente aspirare il muco che si accumula nelle prime vie respiratorie.

Con lo sviluppo della polmonite, i pazienti necessitano di un'adeguata terapia antibiotica.

Nella fase di convalescenza tardiva, le procedure fisioterapiche possono essere utilizzate con successo per trattare la paresi.

Prevenzione

Con il miglioramento della tecnologia di lavorazione degli alimenti a condizioni di temperatura ottimali, B. tra le persone, associato all'uso di prodotti industriali per il cibo, praticamente scompare. Il posto principale come causa della malattia in molti paesi del mondo e in URSS è occupato da vari prodotti alimentari fatti in casa (in scatola, in salamoia, affumicati, essiccati, ecc.). Tuttavia, negli Stati Uniti nel 1963, 25 persone si ammalarono a causa di prodotti commerciali, 9 dei quali morirono. In Giappone, B. è associato all'uso del piatto nazionale "izushi", parte integrale to-rogo è pesce crudo, gli eschimesi dell'Alaska hanno piatti a base di carne di balena bianca, gli indiani sulla costa del Pacifico del Nord America hanno il caviale di salmone. Secondo dati di interesse storico, fino al 1964 negli Stati Uniti, la principale fonte di B. erano verdure e frutta scarsamente sterilizzate o in salamoia contenenti una percentuale insufficiente di acido. In Francia, Danimarca, Norvegia, Svezia, Jugoslavia e altri paesi europei, B. era associato al cap. arr. con prosciutto e pesce fatto in casa.

La conoscenza delle condizioni ottimali per la germinazione delle spore, la loro resistenza alla temperatura, nonché le condizioni di formazione delle tossine, consente di definire chiaramente i principali requisiti per la lavorazione tecnologica dei prodotti alimentari, escludendo la possibilità di accumulo di tossine botuliniche in essi . Tali requisiti includono: protezione dei prodotti dalla contaminazione con spore di B. patogeni, trattamento termico dei prodotti che garantisce la morte delle spore (sterilizzazione), delle cellule vegetative e la distruzione della tossina e l'esclusione della possibilità di germinazione delle spore e della tossina formazione nel prodotto finito.

La necessità della massima protezione dei prodotti dall'ingresso di spore o della loro rimozione obbligatoria durante la pulizia e il lavaggio con acqua corrente (verdure, frutta, funghi) è determinata dall'ampia contaminazione degli oggetti ambiente esterno questo patogeno. Per quanto riguarda i prodotti a base di carne e pesce, il rilascio delle spore viene effettuato con attenzione e rimozione rapida intestini durante il sezionamento post-macellazione delle carcasse e dei pesci, soprattutto rossi, subito dopo la cattura.

In questo caso è assolutamente necessario raffreddare immediatamente i prodotti dopo averli puliti e lavati, in quanto ulteriori operazioni tecnologiche, come l'inscatolamento, la salatura, l'affumicatura e il decapaggio, non possono distruggere la tossina formatasi durante la conservazione dei prodotti a caldo, e le sostanze utilizzato per l'inscatolamento o il decapaggio (sale, zucchero, acidi) può solo ritardare l'ulteriore formazione di tossine.

Il corretto regime di temperatura durante la lavorazione dei prodotti è di eccezionale importanza. Il trattamento termico convenzionale dei prodotti destinati all'uso diretto può essere efficace solo se venduti nelle prime ore, poiché, pur distruggendo la tossina in normali condizioni di riscaldamento fino a 100 °, non compromette la vitalità delle spore. Con il raffreddamento graduale e la conservazione prolungata a temperatura ambiente, la tossina può accumularsi in tali prodotti a causa della germinazione delle spore nelle cellule vegetative. È chiaro che il trattamento termico ripetuto di tali prodotti prima del consumo è obbligatorio.

La sterilizzazione dei prodotti deve essere effettuata solo in autoclavi ove appropriato alta pressione sanguigna consente di creare una temperatura di 120 °, che ha un effetto dannoso non solo sulle cellule vegetative e le loro tossine, ma anche sulle spore. Tali prodotti industriali sono innocui anche se conservati a lungo a temperatura ambiente. Questa disposizione non può applicarsi al cibo in scatola fatto in casa, poiché l'effetto della temperatura non supera i 100 ° C e la sigillatura delle lattine crea condizioni anaerobiche ottimali per la germinazione delle restanti spore, vegetazione e formazione di tossine nel substrato alimentare. Pertanto, in casa, in assenza di un'autoclave, i prodotti a base di carne e pesce, che sono un buon mezzo nutritivo, non possono essere conservati in barattoli ermetici. Questa disposizione si applica pienamente alla conservazione di funghi e verdure, che non possono essere completamente liberati dalle spore del patogeno B. È consentito preparare tali prodotti per il futuro solo mediante decapaggio o salatura con l'aggiunta di una quantità sufficiente di acido e sale, e sempre in un contenitore aperto all'aria.

Una manifestazione esterna della contaminazione del cibo in scatola con spore di B. patogeni e il loro sviluppo nel substrato del cibo in scatola è la formazione di gas, che porta al bombardamento del contenitore (rigonfiamento dei coperchi). Allo stesso tempo, il cibo in scatola si ammorbidisce, la loro struttura cambia e appare un odore sgradevole. Tuttavia, vengono descritti casi in cui la tossina botulinica è stata trovata in alimenti in scatola apparentemente inalterati.

Al fine di prevenire le malattie di B., i processi tecnologici nelle imprese alimentari in cui vengono prodotti prodotti in scatola sono rigorosamente regolati dalle relative istruzioni, le cui deviazioni sono inaccettabili.

Per quanto riguarda il tipo di materie prime o prodotti, esistono requisiti rigorosi, la possibilità di soddisfarli che determina la prontezza di una determinata impresa a produrre prodotti di alta qualità. Tali requisiti esistono per la produzione di latticini, per la lavorazione di verdure, frutta e materie prime da verdure, per la lavorazione di funghi, per la preparazione di varie marinate, spezie, spezie e altre sostanze utilizzate per l'inscatolamento. Requisiti rigorosi sono imposti anche alle lattine, alla loro preparazione per il riempimento e al controllo della loro tenuta. Una garanzia di rilascio da parte dell'impresa di produzione di buona qualità sono: buona dignità. lo stato delle dotazioni impiantistiche, l'utilizzo di acqua potabile esente da microrganismi anaerobici per scopi tecnologici, il lavaggio accurato delle materie prime e la lavorazione dei materiali ausiliari, il rispetto di regimi di trasformazione che escludano lo sviluppo del patogeno B. nei prodotti, l'istituzione di acidità regolamentata dei prodotti, utilizzo di soli contenitori sigillati con monitoraggio costante del funzionamento delle aggraffatrici, utilizzo di modalità di sterilizzazione che garantiscano la completa neutralizzazione del cibo in scatola (distruzione della tossina, morte delle cellule vegetative e delle spore).

Un mezzo eccezionalmente efficace di profilassi specifica di B. nell'uomo è la vaccinazione con polianatossina botulinica. Data la natura esotica dell'incidenza di B. in URSS, questo rimedio non è ampiamente utilizzato e viene utilizzato solo nei casi di protezione del personale di laboratorio che conduce ricerche con l'agente patogeno B..

Botulismo in termini forensi

Per una diagnosi esperta di avvelenamento da tossina botulinica è necessario disporre di dati investigativi sulle condizioni di avvelenamento (natura del cibo consumato, numero delle vittime, sintomi riscontrati, documenti medici per assistenza). Perito medico giudiziario deve tenere presente i tratti caratteristici della clinica dell'avvelenamento. Quando si esamina un cadavere, non vengono stabilite modifiche specifiche a B.; di solito si osserva l'immagine della morte in arrivo. Obbligatorio esame istologico, con Krom quadro di disturbi circolatori, stato paretico dei capillari ed emorragie perivascolari in c. n. Insieme a., alterazioni degenerative cellule nervose (ch. arr. nei nuclei nervi oculomotori, nel midollo allungato e quadrigemina). Potrebbe anche esserci uno stato paretico di piccoli vasi nella parete dell'intestino tenue e crasso, nei polmoni e nel miocardio. Inoltre, in tribunale... lui. lo studio è diretto da organi (secondo regole generali), e per batteriologico - sangue, masse alimentari, lavaggi, urina, prodotti alimentari rimanenti.

La conclusione finale sull'avvelenamento da tossina botulinica corte.-med. l'esperto redige sulla base di tutti i dati ricevuti.

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Il botulismo è una grave forma di intossicazione alimentare che si sviluppa a seguito del consumo di alimenti contaminati dalla tossina Cl.perfringens, caratterizzata da una specifica lesione del SNC.

Storia:

conosciuto da tempo con il nome di “allantiazis” (dal greco “salsiccia”), “ittioismo” (dal greco “pesce”), botulus (dal latino “salsiccia”). Kerner nel 1815 descrisse 230 casi di avvelenamento, nel 1896 il medico belga E. Van Ermengem isolò l'agente patogeno dai resti del prosciutto, nel 1914 il medico russo Konstansov lo isolò dallo storione. Attualmente, l'avvelenamento non è associato all'uso di salsicce, ma a cibi in scatola.

Tassonomia: famiglia Bacillaceae, genere: Clostridium, specie CL.botulinum (dal latino botulus - salsiccia).

Morfologia.

Bastoncini polimorfici con estremità arrotondate, lunghezza 4-10 micron, larghezza 0,3 - 1,0 micron, debolmente mobili (peritrichi), formano spore terminali o subterminali, mentre i patogeni assomigliano a una racchetta da tennis, non ha capsule.

Proprietà tintorie: gram-positivi, secondo il metodo Orzeszko, le spore sono colorate di rosso e le forme vegetative sono blu.

beni culturali.

Anaerobi stretti. Crescono su terreni di caseina o carne, miglio bollito o cotone idrofilo vengono aggiunti a terreni di caseina liquida e poltiglia di carne o fegato vengono aggiunti a terreni di carne. Su agar sangue con glucosio, dopo 24-46 ore, si formano grandi colonie rotonde, circondate da una zona di emolisi (tipo A). Il colore della colonia è leggermente marrone o grigio-torbido. Nel tetano, l'agar può assumere due forme: forme S sotto forma di lanugine con un centro più denso e forme R lenticolari. In mezzi liquidi - torbidità.

pH ottimale - 7,2 - 7,4; temperatura di coltivazione 35 °C per i sierotipi A, B, C, D, F; 28 °C per sierotipi E e ceppi non proteolitici B e F; 37 °C per sierotipi G; tempo di coltivazione - 24-48 ore.

proprietà biochimiche.

Le proprietà saccarolitiche sono espresse nei tipi A e B (decompongono glucosio, maltosio, glicerina, fruttosio, levulosio con formazione di acido e gas). Il tipo C decompone debolmente gli zuccheri o, come il serovar G, non ha proprietà saccarolitiche, i tipi D ed E occupano una posizione intermedia. Tutti i ceppi di tipo A e B hanno potenti proprietà proteolitiche: idrolizzano la caseina e formano idrogeno solforato, pezzi di fegato o carne macinata vengono sciolti in terreni Kitta-Tarozzi. I tipi C, D, E non hanno tali proprietà.

Gruppo 1 - abbattere glucosio, maltosio; attività proteolitica sotto forma di gelatinasi; attività della lipasi sul terreno con albume d'uovo;

gruppo 2 - ha proprietà saccarolitiche;

gruppo 3 - attività lipolitica e liquefazione della gelatina;

Gruppo 4 - idrolisi della gelatina, non mostra attività saccarolitica.

Indicare che la differenziazione dei patogeni per attività biochimica è usata raramente.

Struttura antigenica.

Hanno antigeni O e H. Tuttavia, non identificano l'agente patogeno. In base alla specificità antigenica della tossina si distinguono 8 sierotipi: A, B, C 1, C 2, E, F, G. Il tipo di tossina viene determinato in una reazione di neutralizzazione con i corrispondenti sieri antitossici.

fattori di patogenicità.

a) esotossina (neurotossina) - una proteina ottenuta in forma cristallina (si noti che il veleno biologico più potente è 3 volte più forte del cianuro di potassio), formata in condizioni anaerobiche su mezzi nutritivi, in vari prodotti alimentari in scatola, resistente all'azione del proteolitico enzimi del tratto gastrointestinale , hanno la capacità di emoagglutare gli eritrociti umani, di coniglio e di uccelli; ha un tropismo per tessuto nervoso(fissato sui recettori delle membrane sinaptiche e modifica la sensibilità del recettore dell'acetilcolina all'azione del mediatore). La tossina dei sierotipi E e B si forma come protossina e viene attivata dalla tripsina. Presta attenzione al fatto che per le persone i tipi più patogeni sono A, B, E (E molto tossico), meno patogeni - C, D, F.

Attualmente si ritiene che la tossina sia endopeptidasi Zn 2+ dipendente. Durante la proteolisi, si decompone in 2 enzimi legati da un legame disolfuro (catene L e H). Una subunità è responsabile dell'adsorbimento sui recettori dei neuroni, l'altra della penetrazione in essi per endocitosi, inibizione del rilascio dipendente di Ca 2+ di acetilcolina, di conseguenza, la trasmissione di un impulso nervoso attraverso le sinapsi è bloccata, centri nervosi bulbari sono colpiti, l'andatura e la vista sono disturbate, si verifica l'asfissia.

I tipi di tossine si distinguono per struttura antigenica e peso molecolare; le tossine 12S, 16S e 19S si distinguono per la velocità di sedimentazione.

Le tossine 12S (tossine M) sono costituite da una molecola di neurotossina (catena H) e da una molecola proteica non tossica e non emoagglutinante (catena L);

Le 16S-tossine (L-tossine) sono costituite da una molecola di neurotossina e da una proteina non tossica dell'emoagglutinina;

19S-tossine (L L - tossine) con un grande peso molecolare, tra cui una neurotossina e una proteina non tossica con proprietà emoagglutinanti.

b) emolisina (lisi degli eritrociti di pecora) e provoca la morte di animali da laboratorio. Va notato che solo alcuni ceppi producono emolisina.

resistenza.

Le forme vegetative sono instabili (muoiono a 80 °C entro 30 minuti);

Le spore resistono all'ebollizione per 1-5 ore, a 105 ° C muoiono dopo 2 ore, a 120 ° C - dopo 10-20 minuti. Si noti che in grossi pezzi di carne, in vasetti di grande capacità, sono vitali dopo autoclave a 120 °C per 15 minuti; 10% acido cloridrico uccide le spore dopo 1 ora, soluzione di formalina al 40% - dopo un giorno, resistente all'ambiente acido dello stomaco, le spore smettono di germogliare con una soluzione di acido acetico al 2% a pH 3-4,5.

Tossina botulinica - una volta bollita, viene distrutta entro 15 minuti, resistente alla luce solare, alte concentrazioni di cloruro di sodio, congelamento, acidi, pH inferiore a 7,0, all'azione degli enzimi proteolitici del tratto gastrointestinale; conservare a lungo in acqua, nel cibo in scatola - 6-8 mesi.

Ruolo in patologia: causare il botulismo.

Epidemiologia.

L'habitat naturale dei clostridi è l'intestino di erbivori, esseri umani, pesci, crostacei e molluschi.

Vie di infezione (principale) alimentare, ma possono penetrare attraverso la superficie della ferita. Si noti che la tossina botulinica è in grado di penetrare nella pelle e nelle mucose intatte. Una persona malata non è contagiosa. Specificare che la presenza del patogeno stesso non è necessaria nei cibi in scatola. Si noti che la tossina botulinica può essere localizzata nel prodotto sotto forma di focolai senza modificarne le proprietà organolettiche.

A seconda delle modalità di infezione, si distinguono 4 forme della malattia:

botulismo alimentare;

botulismo della ferita;

botulismo nei neonati;

botulismo vagamente classificabile (nei bambini di età superiore a 1 anno e negli adulti, non associato all'ingestione e all'ingresso attraverso le ferite).

Patogenesi:

1. Botulismo alimentare - la tossina botulinica, penetrando nel tratto gastrointestinale, penetra nel sangue, colpisce il sistema nervoso, agendo sui motoneuroni del midollo spinale e sul nucleo del midollo allungato, si lega saldamente alle cellule nervose, causando una violazione di la trasmissione dell'eccitazione dal nervo al muscolo, agendo sui vasi (costrizione con conseguente paresi e aumento della fragilità).

Periodo di incubazione: da diverse ore a 8-10 giorni.

Clinica: dolore all'addome, sensazione di pesantezza allo stomaco, vomito, intossicazione generale, forse un disturbo delle feci. Poi ci sono lamentele di visione offuscata, visione doppia, deglutizione compromessa, perdita della voce, III, IY, YI paia di nervi cranici colpiti, mal di testa, paralisi del centro respiratorio, morte. Letalità 60-80%. Presta attenzione al fatto che la malattia può iniziare con lamentele di "nebbia" o "rete" davanti agli occhi, raddoppiando gli oggetti.

2. Botulismo della ferita - va notato che recentemente i suoi casi sono diventati più frequenti, colpisce principalmente l'età dei bambini, principalmente i ragazzi.

3. Botulismo nei neonati - all'età di 3-20 settimane quando spore o forme vegetative entrano nel cibo del bambino (con latte, miele, specialmente con alimentazione artificiale). I sintomi sono gli stessi del botulismo di origine alimentare. Indicare che quando si diagnostica una malattia nei neonati, si dovrebbe prestare attenzione alla debolezza in combinazione con suzione e deglutizione compromesse + ptosi, midriasi, oftalmoplegia. La malattia può sfociare in morte improvvisa (non > 4%), la cosiddetta "morte in culla".

L'immunità post-infezione non si forma, poiché la dose immunitaria della tossina supera quella letale.

Diagnostica microbiologica (vedi schema).

Prestare attenzione al rilevamento della tossina botulinica e dell'agente patogeno nel materiale di prova (lo studio viene eseguito contemporaneamente), la tossina viene determinata nel sangue, solo l'agente patogeno è nelle feci, il resto del materiale viene esaminato per la tossina e batteri.

Prevenzione:

a) non specifico - rispetto della tecnologia di lavorazione degli alimenti (il cibo in scatola viene autoclavato per 30-40 minuti a una temperatura di 120 ° C), nei prodotti vengono introdotti inibitori: nitriti.

b) specifico - solo per indicazioni di emergenza: alle persone che hanno mangiato cibi contaminati, ma non si sono ancora ammalate, vengono prescritti siero antibotulinico polivalente e tossoide botulinico, quindi sieri antibotulinici standard in quanto viene stabilito il tipo di tossina.

L'immunizzazione attiva viene effettuata per gli addetti ai laboratori, il personale militare e le persone la cui professione è associata al contatto con la tossina botulinica.

Trattamento:

a) non specifico - lavanda gastrica, misure di disintossicazione, antibiotici: penicillina, tetraciclina;

b) siero specifico - urgentemente polivalente antibotulinico (A, B, E), per via endovenosa o intramuscolare, dopo aver stabilito il tipo di tossina - monosiero.

È fatto da uno studente

410 Gruppi di facoltà di medicina

MV Zvonkov

Tver, 2011

Botulismo(dal lat . botulo- salsiccia: il nome è associato al fatto che i primi casi descritti di malattie sono stati causati dall'uso di salsicce di sangue e fegato) - una grave malattia tossico-infettiva caratterizzata da danni al sistema nervoso, principalmente al midollo allungato e al midollo spinale , che si verificano con una predominanza di sindromi oftalmoplegiche e bulbari.

Si sviluppa a seguito dell'ingestione di cibo, acqua o aerosol contenenti tossina botulinica prodotta da un bacillo sporigeno Clostridium botulinum. La tossina botulinica colpisce i motoneuroni delle corna anteriori del midollo spinale, a seguito della quale l'innervazione dei muscoli viene disturbata e si sviluppa un'insufficienza respiratoria acuta progressiva.

Le porte d'ingresso sono le mucose delle vie respiratorie, del tratto gastrointestinale, della pelle danneggiata e dei polmoni. L'infezione non si trasmette da persona a persona. Nonostante il fatto che il botulismo sia registrato molto meno frequentemente rispetto ad altre infezioni intestinali e avvelenamenti, continua a essere una malattia rilevante e pericolosa per la vita.

Riferimento storico

Si presume che le persone siano state malate di botulismo durante l'intero periodo dell'esistenza umana. Pertanto, l'imperatore bizantino Leone VI vietò il consumo di sanguinaccio a causa di conseguenze potenzialmente letali, ma la malattia fu documentata solo nel 1793, quando 13 persone che mangiarono sanguinaccio si ammalarono nel Württemberg, 6 delle quali morirono. Da qui la malattia ha preso il nome.

Successivamente, sulla base delle osservazioni del 1817-1822, Yu Kerner fece la prima descrizione clinica ed epidemiologica della malattia. In una monografia da lui pubblicata nel 1822, descrisse i sintomi del botulismo (malessere, vomito, diarrea e altri) e suggerì anche che piccole dosi di tossina botulinica potevano essere utili nel trattamento dell'ipercinesia. In Russia, questa malattia è stata ripetutamente descritta nel XIX secolo con il nome di "ittiismo" ed è stata associata all'uso di pesce salato e affumicato, e il primo studio dettagliato in Russia è stato effettuato da E.F. Zengbush.

Alla fine del XIX secolo in Belgio, 34 musicisti che si preparavano a suonare a un funerale mangiavano prosciutto crudo fatto in casa. Durante il giorno, la maggior parte dei musicisti ha iniziato a mostrare sintomi di botulismo. Di conseguenza, 3 persone sono morte e altre 10 sono rimaste in ospedale per una settimana in gravi condizioni. Dai resti del prosciutto e dalla milza delle vittime, il batteriologo Emil van Ermengem isolò l'agente patogeno e lo chiamò Bacillus botulinus. Ha anche scoperto che la tossina non si forma nel corpo del paziente, ma nello spessore del prosciutto. Successivamente, nel 1904, il ricercatore russo S.V. Konstantinov ha confermato il suo lavoro. Allo stesso tempo, è stato creato il primo siero immunitario per il trattamento del botulismo. Il ricercatore Alan Scott nel 1973 ha condotto i primi test sugli animali della tossina botulinica per ridurre l'attività dei muscoli ipercinetici, e poi, nel 1978, sotto la sua guida, sono iniziati i test sull'uomo del patogeno, secondo un protocollo approvato dalla FDA.

Ora, come prima, il botulismo si manifesta sia sotto forma di singoli avvelenamenti che sotto forma di casi di gruppo. Per il 1818-1913 in Russia sono stati registrati 98 focolai di intossicazione alimentare di gruppo, a causa dei quali hanno sofferto 608 persone, ovvero 6,2 persone per focolaio. Per il periodo 1974-1982. ci sono stati 81 focolai, che, in media, hanno rappresentato 2,5 casi ciascuno. Negli ultimi decenni, i casi di malattia associati all'uso di cibo in scatola fatto in casa sono stati comuni.

Il libro di testo si compone di sette parti. La prima parte - "Microbiologia generale" - contiene informazioni sulla morfologia e fisiologia dei batteri. La seconda parte è dedicata alla genetica dei batteri. La terza parte - "Microflora della biosfera" - considera la microflora dell'ambiente, il suo ruolo nel ciclo delle sostanze in natura, così come la microflora umana e il suo significato. La quarta parte - "La dottrina dell'infezione" - è dedicata alle proprietà patogene dei microrganismi, al loro ruolo in processo infettivo e contiene anche informazioni sugli antibiotici e sui loro meccanismi d'azione. Parte quinta - "La dottrina dell'immunità" - contiene idee moderne sull'immunità. La sesta parte - "I virus e le malattie che causano" - fornisce informazioni sulle principali proprietà biologiche dei virus e sulle malattie che provocano. Parte sette - "Microbiologia medica privata" - contiene informazioni sulla morfologia, fisiologia, proprietà patogene dei patogeni di molti malattie infettive, nonché metodi moderni per la loro diagnosi, prevenzione specifica e terapia.

Il libro di testo è destinato a studenti, dottorandi e insegnanti di medicina superiore istituzioni educative, università, microbiologi di tutte le specialità e professionisti.

5a edizione riveduta e ampliata

Prenotare:

Il botulismo è una grave forma di malattia di origine alimentare associata al consumo di alimenti contaminati. Clostridium botulinum, e caratterizzato da una specifica lesione del sistema nervoso centrale.

L'agente eziologico della malattia fu scoperto per la prima volta nel 1896 da E. van Ermengem nei resti di salsiccia (lat. . botulo- salsiccia), così come nella milza e nel colon di persone morte per botulismo. Questa scoperta è stata confermata da S. V. Konstansov, che ha individuato C. botulinico dal pesce rosso che ha causato l'avvelenamento.

C. botulinico- bastoncini polimorfici piuttosto grandi con estremità arrotondate, lunghi 4 - 9 micron, diametro 0,5 - 1,5 micron, a volte si formano forme accorciate; disposti in modo casuale, a volte in coppia o sotto forma di brevi catenelle; nelle culture antiche possono formare lunghi fili; Gram-positivi, mobili, con flagelli peritrichi. Le capsule non si formano, le spore sono ovali, situate subterminalmente, dando al bastoncino una forma che ricorda una racchetta da tennis (Fig. 106). Le spore nelle colture compaiono dopo 24-48 ore dall'inizio dell'incubazione. C. botulinico non si moltiplica nei prodotti a reazione acida (pH 3,0 - 4,0) ea concentrazione di NaCl superiore al 10%.

C. botulinico forma 8 tipi di tossine: A, B, C1, C2, D, E, F, G, che differiscono per specificità antigenica. Di conseguenza, si distinguono 8 tipi di agenti patogeni, uno di caratteristiche importanti che è la presenza o l'assenza di proprietà proteolitiche. Queste proprietà sono determinate dalla capacità di idrolizzare la caseina e produrre H 2 S. In accordo con ciò, si distingue un gruppo proteolitico, che comprende tutti i ceppi di tipo A e parte dei ceppi B e F, e un gruppo non proteolitico, che comprende tutti i ceppi di tipo E e alcuni ceppi di tipo B e F. Gli agenti patogeni di tipo C e D occupano una posizione intermedia tra questi gruppi, poiché alcuni di essi producono enzimi proteolitici, ma molti ceppi C e D non li formano (Tabella 48 ). Il sierotipo G differisce da tutti gli altri sierotipi in quanto non fermenta i carboidrati pur possedendo proprietà proteolitiche.

pura cultura

Tabella 48

Segni differenziali ceppi proteolitici e non proteolitici C. botulinico

Nota. (+) - il segno è positivo; (–) – il segno è negativo; segno in apice (-) - alcuni ceppi di gelatina non si idrolizzano. a Questo sierotipo è stato isolato come specie separata. C. argentinense.

Alcune caratteristiche di diversi tipi C. botulinico. Tipo A e ceppi proteolitici di tipo B, C, D e F- bastoncini diritti o leggermente ricurvi lunghi 4,4 - 8,6 µm, diametro 0,8 - 1,3 µm, mobili (peritrichi). Spore ovali, subterminali. Crescere abbondantemente in brodo nutriente. Su agar sangue con 0,5 - 1,0% di glucosio, formano colonie lisce o ruvide di 3 - 8 mm di diametro, circondate da una zona di emolisi. All'inizio della crescita, le colonie sono molto piccole, lucenti, sotto forma di gocce di rugiada. Quindi aumentano, diventano grigiastri con bordi uniformi o irregolari. Nell'agar colonnare, le colonie sono a forma di disco o simili a lanugine. Il latte è peptonizzato. La temperatura ottimale per la crescita è di 30 - 40 °C. Il contenuto di G + C nel DNA è del 26 - 28% in moli.

Tipo E e ceppi non proteolitici di tipo B e F. Bastoncini dritti, diametro 0,3 - 0,7 micron, lunghezza 3,4 - 7,5 micron; gram-positivi, ma nelle culture antiche diventano gram-negativi, mobili (peritrichi). Spore ovali, subterminali. Crescita abbondante su terreno Kitt-Tarozzi con formazione di gas. Colonie su agar sangue di 1-3 mm di diametro, con bordi irregolari, superficie opaca, struttura a mosaico, con una zona di emolisi. Alcuni ceppi di tipo E non idrolizzano la gelatina. Il latte è coagulato ma non peptonizzato. La temperatura ottimale per la crescita è di 25 - 37 ° C. Il contenuto di G + C nel DNA è del 26 - 28% in moli.

Ceppi non proteolitici di tipo C e D. Bastoncini diritti, diametro 0,5 - 0,7 micron, lunghezza 3,4 - 7,9 micron, mobili (peritrichi), spore ovali, subterminali; la gelatina è idrolizzata, il latte non è coagulato o peptonizzato; crescita su terreno Kitt-Tarozzi con moderata formazione di gas. Su agar sangue le colonie sono rotonde, con bordi frastagliati, leggermente rilevate, lisce, bianco-grigiastre, traslucide, circondate da una zona di emolisi. La temperatura ottimale per la crescita è di 30–37 °C, il contenuto di G + C nel DNA è del 26–28% molare.

tipo G. Bastoncini diritti, diametro 1,3 - 1,9 micron, lunghezza 1,6 - 9,4 micron, mobili (peritrichi), spore ovali, subterminali, gram-positivi. Su agar sangue le colonie sono rotonde, di 0,5-1,5 mm di diametro, con bordi lisci, rilevate, traslucide, grigie, lisce, con superficie lucida; su Kitt-Tarozzi medium la crescita è moderata, senza fermentazione del glucosio; il latte viene peptonizzato lentamente. La temperatura ottimale per la crescita è di 30 - 37 ° C. Trovato nel suolo. I casi umani causati da questo tipo non sono noti.

resistenza. conservazione a lungo termine C. botulinico in natura e in vari prodotti alimentari è associato alla loro formazione di spore. Le spore rimangono a lungo nel terreno e in condizioni favorevoli in estate possono germogliare e moltiplicarsi. Tollerano bene le basse temperature (non muoiono nemmeno a -190°C). Una volta essiccati, rimangono vitali per decenni. Le spore sono anche resistenti al calore (soprattutto di tipo A). Le spore di tipo A e B tollerano l'ebollizione per 5 ore, a una temperatura di 105 ° C muoiono dopo 1 - 2 ore, a 120 ° C - dopo 20 - 30 minuti. Esistono ceppi le cui spore tollerano temperature di 120°C per diverse ore. controversia C. botulinico resistente a molte sostanze battericide: la soluzione di formalina al 20% le uccide dopo 24 ore; alcool etilico - dopo 2 mesi; Il 10% di HCl li uccide dopo solo 1 ora.

tossine C. botulinico sono anche altamente resistenti a fattori fisici e chimici. Non vengono distrutti dagli enzimi proteolitici del tratto intestinale. In un ambiente acido (pH 3,5 - 6,8) sono più stabili che in un ambiente neutro o alcalino, vengono distrutti dall'azione del 2 - 3% di alcali, ma alte concentrazioni di NaCl nei prodotti alimentari non li distruggono; nel cibo in scatola le tossine persistono a lungo. tossine C. botulinico hanno anche una certa stabilità termica: a 58°C si distruggono dopo 3 ore; a 80 °C - dopo 30 minuti; e a 100 °C in pochi minuti. Le tossine di tipo C sono le più resistenti, i tipi D ed E sono meno resistenti e i tipi A e B sono una via di mezzo. La resistenza delle tossine alle alte temperature dipende dal tipo di prodotto, dal suo pH e da altre condizioni. In particolare, in presenza di grassi, un'alta concentrazione di saccarosio, aumenta la resistenza delle tossine alle alte temperature.

fattori di patogenicità. Il principale fattore di patogenicità dell'agente eziologico del botulismo sono le esotossine. Sebbene differiscano nelle proprietà antigeniche, la loro attività biologica è la stessa. Sono tutte varianti della stessa neurotossina. La specificità antigenica e l'attività letale sono determinate da vari determinanti dell'esotossina. Le tossine di tutti i tipi sono prodotte come complessi proteici tossici (tossine progenitrici). A seconda del peso molecolare e della struttura, questi complessi sono divisi in 3 gruppi in base alle costanti di sedimentazione: 12S– (300 kDa), 16S– (500 kDa) e 19S– (900 kDa) tossine. Recentemente, nei tipi A e B sono stati trovati supercomplessi ipertossici di tossine.

Le 12S-tossine (M-tossine) sono costituite da una molecola di neurotossina associata a una molecola proteica non tossica che non ha proprietà emoagglutinanti. Le 16S-tossine (L-tossine) sono strutture costituite da un complesso M e da una proteina non tossica che differisce dalla proteina del complesso M e ha proprietà emoagglutinanti. Le tossine 19S (tossine LL) sono le strutture più grandi che includono una neurotossina e una proteina non tossica con proprietà di emoagglutinina.

Il botulismo da Clostridium di tipo A può produrre complessi tossici di tre varianti: M, L e LL, tipi B, C e D - sotto forma di tossine L e M e tipi E e F - solo sotto forma di tossine M . Quindi la stessa cultura C. botulinico può produrre diversi tipi di complessi tossici. Le funzioni delle proteine ​​​​non emoagglutinanti non tossiche, così come le proteine ​​​​emoagglutinanti (sono stati identificati tre tipi: 15 kD, 35 kD e 70 kD), non sono state ancora stabilite. I componenti neurotossici di qualsiasi sierotipo di tossina botulinica e qualsiasi tipo di complesso tossico hanno una struttura e proprietà biologiche simili. Sono sintetizzati come una singola catena polipeptidica con 150 kDa mw (7S-tossina), che non ha attività tossica significativa. Questa catena polipeptidica viene convertita in una neurotossina attiva solo dopo essere stata tagliata da una o più proteasi batteriche del tratto intestinale umano. Come risultato dell'idrolisi puntuale, si forma una struttura costituita da due catene interconnesse da legami disolfuro: pesante, con mm 100 kDa (catena H) e leggera, con mm 50 kDa (catena L). La catena H è responsabile del legame della neurotossina ai recettori della membrana cellulare e la catena L svolge uno specifico effetto di blocco della neurotossina sulla trasmissione colinergica dell'eccitazione in. Le tossine dei tipi C1 e C2 differiscono l'una dall'altra non solo dal punto di vista sierologico, ma anche dal fatto che le forme vegetative delle colture non formano la tossina C2. Si forma solo durante il periodo di sporulazione e la sua attivazione è fornita dalla proteasi microbica.

La capacità dell'agente eziologico del botulismo di produrre enzimi proteolitici gioca un ruolo importante nella formazione delle tossine. I gruppi proteolitici di agenti patogeni forniscono l'attivazione delle protossine da parte delle loro proteasi endogene e l'attivazione delle neurotossine prodotte dalle varianti non proteolitiche dei sierotipi C. botulinico, viene effettuato in modo esogeno, ad es. con l'aiuto di proteasi del tratto gastrointestinale durante l'infezione o in vitro - con tripsina.

Oltre alla pronunciata attività neurotossica, tipi diversi C. botulinico hanno attività leucotossica, emolitica e lecitinasica. Una caratteristica della leucotossina è che inibisce la fagocitosi senza distruggere i leucociti. Diversi periodi di accumulo di leucotossine, emotossine e lecitinasi nel mezzo di coltura durante l'incubazione C. botulinico indicano che apparentemente hanno una diversa natura chimica.

Il locus dei geni per i complessi tossici contiene i geni per le neurotossine (bont), i geni per le proteine ​​non emoagglutinanti non tossiche (ntnh), i geni per le emoagglutinine (ha + o ha -) e il gene botR, il cui prodotto agisce come un regolatore positivo.

Caratteristiche dell'epidemiologia. habitat naturale C. botulinicoè il suolo, da dove entrano l'acqua, il cibo, il foraggio, nell'intestino di umani, mammiferi, uccelli e pesci, dove si riproducono. In un certo numero di paesi del mondo (USA, Canada, ecc.), Il botulismo esiste nella forma focolai naturali: in luoghi dove il suolo, le piante e l'acqua ne contengono molto C. botulinico, è stata ripetutamente osservata la morte in massa di uccelli acquatici selvatici e altri animali (topo muschiato, rane, ecc.) che svolgono un ruolo importante nell'epidemiologia del botulismo. Carrozza stabilita C. botulinico nell'intestino dei cavalli bestiame, maiali, polli, roditori. Prodotti contaminanti, foraggi, terreno con le loro feci, contribuiscono alla diffusa contaminazione dell'ambiente con i clostridi.

L'infezione di pesci rossi e parziali con l'agente eziologico del botulismo può essere endogena - dal loro intestino ed esogena - dall'ambiente esterno (con trasporto e conservazione impropri).

Tutti i prodotti agricoli contaminati da suolo, feci umane e animali possono essere infettati da agenti patogeni del botulismo e causare malattie umane.

Il botulismo si verifica in tutte le regioni globo, ma più spesso registrato nei paesi in cui la popolazione consuma un gran numero di vari cibi in scatola. In ogni paese, la fonte dell'avvelenamento è il cibo in scatola, che è molto richiesto: in Germania, Francia e altri paesi europei - carne in scatola, salsiccia, prosciutto, ecc.; negli Stati Uniti - verdure in scatola; in Russia - pesce e pesce in scatola. Il botulismo non è contagioso. La malattia si verifica solo quando si mangia cibo contenente l'agente patogeno e le sue tossine. Perché il C. botulinico- stretto anaerobio migliori condizioni per la sua riproduzione e produzione di tossine, vengono creati in cibi in scatola, dove le spore possono arrivare con particelle di terreno. Possono resistere al trattamento termico del cibo in scatola, quindi germinare e produrre una tossina, facilitata dalla conservazione a lungo termine del cibo in scatola. L'incidenza del botulismo è bassa, si verifica più spesso come malattia sporadica. Tuttavia, sono noti anche focolai di gruppo, ad esempio un focolaio nel 1933 nella città di Dnepropetrovsk, quando 230 persone si ammalarono a causa dell'avvelenamento con caviale di zucca, 26 di loro morirono. Raramente, l'infezione si verifica attraverso le ferite.

Caratteristiche di patogenesi e clinica. Il botulismo procede come un'infezione tossica. Il corpo è influenzato non solo dalla tossina contenuta nel prodotto alimentare, ma anche dalla tossina che si forma nel tratto digestivo e nei tessuti in connessione con la penetrazione dell'agente patogeno lì. Le persone sono estremamente sensibili alla tossina botulinica di tipo A, B, C, E e F. Sono state osservate malattie anche quando una persona ha preso in bocca un prodotto contaminato, ma non l'ha ingerito. La dose letale della tossina per l'uomo è di 1 ng/kg di peso corporeo. La tossina botulinica viene rapidamente assorbita nello stomaco e nell'intestino, penetra nel sangue e agisce selettivamente sui nuclei del midollo allungato e sulle cellule gangliari del midollo spinale. Va notato che, entrando nel tratto digestivo di una persona o di un animale, il botulismo di Clostridium si moltiplica, penetra nel sangue e da lì a tutti gli organi, producendo tossine. Il periodo di incubazione nell'uomo varia da due ore a 10 giorni, ma il più delle volte è di 18-24 ore Maggiore è la dose infettiva, minore è il periodo di incubazione e più grave è la malattia.

Il quadro clinico del botulismo consiste solitamente in una combinazione di varie sindromi mioneurologiche, di cui l'oftalmoplegico è il primo a manifestarsi: l'accomodazione del paziente è disturbata, le pupille si dilatano in modo irregolare, compaiono strabismo, visione doppia e talvolta cecità. Questi sintomi sono associati a danni ai nervi oculomotori. Quindi si unisce la paresi dei muscoli della lingua (afonia), la deglutizione diventa difficile, i muscoli del collo, del tronco e dell'intestino si indeboliscono (paresi, stitichezza, flatulenza), c'è un rilascio di muco denso e viscoso. La temperatura può essere normale, a volte aumenta. La coscienza è preservata. Di norma, non si nota alcuna infiammazione acuta del tratto gastrointestinale. Nella fase finale della malattia, l'angoscia respiratoria gioca il ruolo principale, la morte si verifica per paralisi respiratoria e cardiaca. La mortalità è del 35-85%.

Immunità postinfettiva. La malattia trasferita, evidentemente, lascia l'immunità antitossica specifica per il tipo, l'immunità arrabbiata non è formata. La durata e l'intensità dell'immunità post-infezione e il ruolo degli anticorpi e dei fagociti antimicrobici in essa non sono stati studiati a sufficienza.

Diagnostica di laboratorio. Il materiale per lo studio è: dal paziente - lavanda gastrica, feci, sangue, urina, vomito; dal cadavere - il contenuto dello stomaco, dell'intestino tenue e crasso, dei linfonodi, nonché della testa e midollo spinale. Anche il prodotto che ha causato l'avvelenamento è oggetto di ricerca. La ricerca viene effettuata per rilevare e identificare C. botulinico o, più comunemente, allo scopo di rilevare la tossina botulinica e stabilirne il sierotipo. Per evidenziare la cultura C. botulinico il materiale viene inoculato su terreno solido e mezzo di conservazione Kitt-Tarozzi (una parte delle provette viene riscaldata ad una temperatura di 85 °C per 20 min per uccidere i batteri non sporigeni). Dalle colture liquide, dopo l'incubazione, si effettuano inoculazioni su terreni solidi al fine di ottenere colonie isolate, e successivamente colture pure, che si identificano per proprietà morfologiche, colturali, biochimiche e tossigeniche. I seguenti tre metodi possono essere utilizzati per rilevare la tossina botulinica nel materiale di prova o nel filtrato di coltura.

1. Test biologico sui topi. Per fare questo, prendi almeno 5 topi. Uno di essi è stato infettato solo dal materiale di prova e ciascuno degli altri quattro è stato infettato da una miscela di materiale con 200 UA di siero antitossico del tipo corrispondente: A, B, C ed E. La miscela è conservata a temperatura ambiente per 40 minuti per neutralizzare la tossina con l'antitossina. In presenza di tossina botulinica nel materiale di prova, tutti i topi muoiono, tranne quello a cui è stata iniettata una miscela del materiale con siero antitossico, che ha neutralizzato l'effetto del tipo omologo di tossina.

2. L'uso di RPHA con un anticorpo diagnostico, cioè eritrociti sensibilizzati con antitossine dei tipi appropriati.

3. Il metodo di rilevamento altamente sensibile e specifico per la tossina botulinica si basa sulla sua capacità di inibire l'attività dei fagociti. In presenza di un appropriato siero antitossico, la proprietà leucotossica della tossina viene neutralizzata.

Trattamento. Maggior parte metodo efficace il trattamento del botulismo è l'applicazione precoce di sieri antitossici. Fino a quando non viene stabilito il tipo di tossina che ha causato il botulismo, al paziente vengono iniettate per via intramuscolare 10.000 UI di siero antitossico di tipo A, C ed E e 5.000 UI di siero di tipo B (35.000 UI in totale). Il primo giorno, il siero viene somministrato ripetutamente ogni 5-10 ore, nei casi più gravi, per via endovenosa. A tutte le persone che hanno mangiato cibo che ha causato avvelenamento, ma non si sono ammalate, viene somministrato siero antitossico da 2000 UI dello stesso tipo a scopo profilattico. Dopo aver stabilito il tipo di tossina, viene somministrato solo l'antisiero omologo. Al fine di stimolare la produzione di immunità attiva, al paziente vengono iniettati anche tossoidi di tipo A, B, C ed E e, dopo aver determinato il tipo di tossina, solo tossoide omologo. Lavando lo stomaco e somministrando un lassativo, ottengono la rapida rimozione della tossina e dell'agente patogeno dall'intestino. La sieroterapia è integrata con terapia antibiotica, nonché trattamento sintomatico e riparatore.

Prevenzione. Per creare un'immunità antitossica artificiale contro il botulismo, sono stati ottenuti i toxoidi, ma non hanno trovato ampia applicazione. La base per la prevenzione del botulismo è la stretta osservanza del regime sanitario e igienico durante la lavorazione dei prodotti nelle imprese dell'industria alimentare, in particolare quelli associati alla produzione di cibo in scatola, prosciutto, salsicce, nonché durante l'affumicatura, la salatura del pesce e la preparazione di balyks da. Le conserve dopo il trattamento termico devono essere sottoposte a controllo termostatico (si conservano in un termostato a 37°C per un certo tempo): i clostridi conservati nelle conserve provocano il rigonfiamento delle lattine, e il loro contenuto puzza di olio rancido. Tali prodotti in scatola sono soggetti a sequestro e attenta ricerca batteriologica. Per salare il pesce è necessario utilizzare soluzioni saline forti - salamoia contenente il 10-12% di NaCl. Particolarmente pericoloso può essere il cibo in scatola fatto in casa, in particolare i funghi, prodotto senza osservare il regime necessario.