التشخيص المصلي للعدوى الفيروسية ، التفاعلات المستخدمة. طرق التشخيص الميكروبيولوجي للأمراض الفيروسية. طرق عزل وتحديد الفيروسات. تستخدم الاختبارات المصلية لتشخيص الأمراض الفيروسية الاختبارات المصلية
عدوى فيروس نقص المناعة البشرية
عدوى فيروس نقص المناعة البشرية هي مرض يسببه فيروس نقص المناعة البشرية (HIV) ، وقت طويلتستمر في الخلايا الليمفاوية والضامة والخلايا أنسجة عصبية، مما يؤدي إلى ضرر تدريجي تدريجي للجهاز المناعي و الجهاز العصبيالكائن الحي ، يتجلى في الالتهابات الثانوية والأورام والتهاب الدماغ تحت الحاد والتغيرات المرضية الأخرى.
مسببات الأمراض - فيروسات نقص المناعة البشرية من النوعين t-th و 2 - HIV-1 ، HIV-2 (HIV-I ، HIV-2 ، فيروسات نقص المناعة البشرية ، النوع الأول ، 11) - تنتمي إلى عائلة الفيروسات القهقرية ، وهي عائلة فرعية من فيروسات بطيئة. Virions عبارة عن جسيمات كروية يبلغ قطرها 100-140 نانومتر. يحتوي الجسيم الفيروسي على غلاف خارجي من الفوسفوليبيد ، والذي يتضمن بروتينات سكرية (بروتينات هيكلية) بوزن جزيئي معين ، يتم قياسه بالكيلو دالتون. في HIV-1 ، هذه هي gp 160 ، gp 120 ، gp 41. الغلاف الداخلي للفيروس الذي يغطي النواة يتم تمثيله أيضًا ببروتينات ذات وزن جزيئي معروف - p 17 ، p 24 ، p 55 (يحتوي HIV-2 على gp 140 ، و 105 ، و 36 ، و 16 ، و 25 ، و 55).
يحتوي جينوم فيروس نقص المناعة البشرية على الحمض النووي الريبي (RNA) وإنزيم النسخ العكسي للإنزيم (المرتجع). من أجل ربط جينوم الفيروسات القهقرية بجينوم الخلية المضيفة ، يتم تصنيع الحمض النووي أولاً على قالب الحمض النووي الريبي الفيروسي باستخدام إنزيم الانعكاس. ثم يتم دمج الحمض النووي للفيروس في جينوم الخلية المضيفة. فيروس نقص المناعة البشرية لديه تنوع مستضدي واضح ، يتجاوز بشكل كبير فيروس الأنفلونزا.
الهدف الرئيسي لفيروس نقص المناعة البشرية في جسم الإنسان هو الخلايا اللمفاوية التائية التي تحمل على السطح أكبر عددمستقبلات CD4. بعد دخول فيروس نقص المناعة البشرية إلى الخلية بمساعدة إنزيم الانعكاس ، يصنع الفيروس الحمض النووي بناءً على نمط الحمض النووي الريبي الخاص به ، والذي يتكامل مع الجهاز الوراثي للخلية المضيفة (الخلايا الليمفاوية التائية) ويبقى هناك مدى الحياة في حالة طليعة الفيروس . بالإضافة إلى المساعدين للخلايا اللمفاوية التائية ، تتأثر الخلايا الضامة والخلايا اللمفاوية البائية. الخلايا العصبية والغشاء المخاطي المعوي وبعض الخلايا الأخرى. سبب انخفاض عدد الخلايا الليمفاوية التائية (خلايا CD4) ليس فقط التأثير المباشر للخلايا الفيروسية ، ولكن أيضًا اندماجها مع الخلايا غير المصابة. إلى جانب هزيمة الخلايا اللمفاوية التائية في المرضى المصابين بعدوى فيروس العوز المناعي البشري ، لوحظ التنشيط متعدد النسيلة للخلايا الليمفاوية B مع زيادة تخليق الغلوبولين المناعي من جميع الفئات ، وخاصة IgG و IgA ، واستنفاد هذا القسم لاحقًا. جهاز المناعة. عدم التنظيم عمليات المناعةيتجلى أيضًا من خلال زيادة مستوى ألفا إنترفيرون وبيتا 2-ميكروغلوبولين أ ، وانخفاض مستوى إنترلوكين 2. نتيجة لخلل في الجهاز المناعي ، خاصة مع انخفاض عدد الخلايا اللمفاوية التائية (CD4) إلى 400 خلية أو أقل لكل 1 ميكرولتر من الدم ، تنشأ حالات لتكاثر فيروس نقص المناعة البشرية غير المنضبط مع زيادة كبيرة في عدد الفيروسات في بيئات مختلفة من الجسم. نتيجة لهزيمة أجزاء كثيرة من جهاز المناعة ، يصبح الشخص المصاب بفيروس نقص المناعة البشرية أعزل ضد مسببات الأمراض من العدوى المختلفة. في بهو زيادة كبت المناعة ، تتطور أمراض تقدمية حادة لا تحدث في شخص لديه جهاز مناعة يعمل بشكل طبيعي. حددت منظمة الصحة العالمية هذه الأمراض على أنها مؤشر الإيدز (مؤشر).
المجموعة الأولى - الأمراض المتأصلة فقط في نقص المناعة الشديد (مستوى CD4 أقل من 200). يتم التشخيص السريري في غياب الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية أو مستضدات فيروس نقص المناعة البشرية.
المجموعة الثانية - الأمراض التي تتطور على حد سواء على الخلفية نقص المناعة الشديد، وفي بعض الحالات بدونها. لذلك ، في مثل هذه الحالات ، يكون التأكيد المختبري للتشخيص ضروريًا.
2. التفاعلات المصليةتستخدم لتشخيص الالتهابات الفيروسية.
الطرق المصلية ، أي طرق دراسة الأجسام المضادة ومولدات المضادات باستخدام تفاعلات الأجسام المضادة للمستضد المحددة في مصل الدم والسوائل الأخرى ، وكذلك أنسجة الجسم. إن اكتشاف الأجسام المضادة ضد مستضدات العامل الممرض في مصل دم المريض يجعل من الممكن تشخيص المرض. تُستخدم الدراسات المصلية أيضًا لتحديد المستضدات الميكروبية ، والمواد النشطة بيولوجيًا المختلفة ، ومجموعات الدم ، ومستضدات الأنسجة والأورام ، والمركبات المناعية ، ومستقبلات الخلايا ، وما إلى ذلك. عندما يتم عزل الميكروب عن المريض ، يتم تحديد العامل الممرض من خلال دراسته. خصائص مستضديةباستخدام الأمصال التشخيصية المناعية ، أي مصل الدم للحيوانات مفرطة المناعة التي تحتوي على أجسام مضادة محددة. هذا هو ما يسمى بالتعريف المصلي للكائنات الحية الدقيقة. تعتبر ميزات تفاعل الجسم المضاد مع المستضد أساس التفاعلات التشخيصية في المختبرات. يتكون التفاعل في المختبر بين المستضد والجسم المضاد من مرحلة محددة وغير محددة. يحدث الربط النوعي السريع في المرحلة المحددة مركز نشطالأجسام المضادة مع محدد المستضد. ثم تأتي المرحلة غير المحددة - الأبطأ ، والتي تتجلى في الظواهر الفيزيائية المرئية ، مثل تكون الرقائق (ظاهرة التراص) أو تترسب على شكل عكارة. تتطلب هذه المرحلة شروطًا معينة (الشوارد ، درجة الحموضة المثلى للوسط). يرجع ارتباط محدد المستضد (epitope) بالموقع النشط لجزء Fab للجسم المضاد إلى قوى van der Waals ، والروابط الهيدروجينية ، والتفاعلات الكارهة للماء. تعتمد قوة وكمية المستضد المرتبط بالأجسام المضادة على تقارب الأجسام المضادة وشغفها وتكافؤها.
3. العوامل المسببة للملاريا. الملاريا -بشري الأمراض المعدية، التي تسببها عدة أنواع من البروتوزوا من جنس المتصورة ، تنتقل عن طريق البعوض (Anopheles) ، مصحوبة بالحمى وفقر الدم وتضخم الكبد والطحال. العوامل المسببة للملاريا تنتمي إلى البروتوزوا ، وشعبة Apicomplexa ، وفئة Sporozoa ، وأنواع Pl. vivax ، Pl.malariae ، Pl.falciparum ، Pl.ovale.
علم الأوبئة.مصدر العدوى هو شخص مصاب. الناقل هو أنثى بعوضة من جنس Anopheles. آلية الانتقال الرئيسية قابلة للانتقال من خلال لدغة أنثى بعوضة مصابة.
العلاج والوقاية.الأدوية المضادة للملاريا لها تأثيرات مختلفة على المراحل الجنسية اللاجنسية للمتصورة. تشمل الأدوية الرئيسية المضادة للملاريا الكينين ، والكلوروكين ، والكيناكرين ، والبريماكين ، والكينوسيد ، والبيغومال ، والكلوريدين ، إلخ. إجراءات إحتياطيه تهدف إلى مصدر الممرض (علاج مرضى الملاريا والناقلات) وتدمير ناقلات العامل الممرض - البعوض. يتم تطوير طرق التطعيم القائمة على المستضدات التي تم الحصول عليها عن طريق الهندسة الوراثية.
1. تصنيف المضادات الحيوية من خلال التركيب الكيميائي والآلية والطيف ونوع العمل.حسب علم الكيمياء. هيكل. الفئة 1 - ب لاكتام - البنسلين ، السيفالوسبورين. 2 فئة - الماكروليدات - الاريثروميسين ، أزيثروميسين. الفئة 3 - أمينوغليكوزيدات - ستربتومايسين ، كاناميسين. الفئة 4 - التتراسيكلين - أوكسي تتراسيكلين ، الدوكسيسيكلين. 5 خلايا - عديد ببتيدات - بوليميكسين. 6 خلايا - بوليين - نيستاتين 7 كيلو-أنزاميسين-ريفامبيسين .
2. اعتمادًا على آلية العمل ، يتم تمييز خمس مجموعات من المضادات الحيوية: 1.gr المضادات الحيوية التي تعطل تخليق جدار الخلية - β-lactam. 2.gr المضادات الحيوية التي تعطل التنظيم الجزيئي والتركيب أغشية الخلايا- بوليميكسين ، بوليين ؛ 3.gr المضادات الحيوية التي تعطل تخليق البروتين - أمينوغليكوزيدات ، تتراسيكلين ، ماكروليدات ، كلورامفينيكول. 4. gr المضادات الحيوية - مثبطات التخليق احماض نووية- الكينولونات تعطل تخليق الحمض النووي الريبي - ريفامبيسين - تخليق الحمض النووي الريبي ، 5 غرام من المضادات الحيوية التي تثبط تخليق البيورينات والأحماض الأمينية - السلفوناميدات. تضم كل مجموعة من هذه المجموعات مجموعتين فرعيتين: المضادات الحيوية واسعة الطيف وضيقة الطيف. تشكل المضادات الحيوية المضادة للبكتيريا أكبر مجموعة من الأدوية.
أ) المضادات الحيوية مجال واسعتؤثر الإجراءات على ممثلي جميع الأقسام الثلاثة للبكتيريا - أمينوغليكوزيدات ، التتراسيكلين ، إلخ.
ب) المضادات الحيوية ضيقة الطيف فعالة ضد مجموعة صغيرة من البكتيريا - تعمل myxins الطيران على gracilicutes ، يؤثر الفانكومايسين على البكتيريا موجبة الجرام.
2gr - مضادات السل ومضادات الصرع والعقاقير المضادة للالتهاب.
3. المضادات الحيوية المضادة للفطريات.
أ) أمفوتريسين ب لديه مجموعة واسعة من الإجراءات ، فعالة في داء المبيضات ، داء الفطريات ، داء الرشاشيات ؛ في نفس الوقت
ب) مضاد حيوي ضيق الطيف - النيستاتين ، الذي يعمل على فطريات جنس المبيضات ، هو
4. المضادات الحيوية المضادة للأوالي والفيروسات لها عدد قليل من الأدوية.
5. المضادات الحيوية المضادة للأورام - الأدوية التي لها تأثير سام للخلايا. يستخدم معظمهم في العديد من أنواع الأورام - ميتوميسين سي. يرتبط عمل المضادات الحيوية على الكائنات الحية الدقيقة بقدرتها على قمع بعض التفاعلات الكيميائية الحيوية التي تحدث في الخلية الميكروبية.
2. نظريات المناعة.1. نظرية الحصانة ميتشنيكوف - يلعب البلعمة دورًا حاسمًا في المناعة المضادة للبكتيريا. كان I.I. Mechnikov أول من اعتبر الالتهاب ظاهرة وقائية وليست مدمرة. وأطلق العالم على الخلايا الدفاعية التي تعمل بهذه الطريقة اسم "تلتهم الخلايا". اقترح زملاؤه الفرنسيون الشباب استخدام الجذور اليونانية التي تحمل نفس المعنى. وافق II Mechnikov على هذا الخيار ، وظهر مصطلح "البلعمة". 2. نظرية الحصانةإيرليش هي إحدى النظريات الأولى لتكوين الأجسام المضادة ، والتي وفقًا للخلايا لديها مستقبلات خاصة بالمستضد يتم إطلاقها كأجسام مضادة تحت تأثير مستضد. دعا إيرليش مواد الدم المضادة للميكروبات "الأجسام المضادة". أدرك P. Ehrlich أنه حتى قبل ملامسة ميكروب معين ، فإن الجسم لديه بالفعل أجسام مضادة بالشكل الذي أطلق عليه "السلاسل الجانبية" - وهي مستقبلات الخلايا الليمفاوية للمستضدات. ثم "طبق" إيرليش في علم العقاقير: في نظريته عن العلاج الكيميائي ، افترض وجود مستقبلات في الجسم المواد الطبية. في عام 1908 ، تم منح P. Erlich جائزة نوبللنظرية المناعة الخلطية. 3. نظرية Bezredka الحصانة- نظرية تشرح حماية الجسم من عدد من الأمراض المعدية من خلال حدوث مناعة خلوية محلية محددة لمسببات الأمراض. 4. نظريات إرشاديةمناعة - الاسم العام لنظريات تكوين الجسم المضاد ، والتي بموجبها يتم إعطاء الدور الرئيسي في الاستجابة المناعية للمستضد ، والذي يشارك بشكل مباشر كمصفوفة في تكوين تكوين محدد لمضاد التحديد أو يعمل كعامل يغير اتجاهيًا التركيب الحيوي للجلوبيولينات المناعية بواسطة خلايا البلازما.
3. العامل المسبب للتسمم الغذائي.نوع كلوستريديوم Clostridium botulinum يسبب التسمم الغذائي - تسمم الطعام ، الذي يتميز بتلف الجهاز العصبي المركزي. يحدث المرض نتيجة تناول الأطعمة التي تحتوي على سموم C. Botulinum - قضبان موجبة الجرام ذات نهايات مستديرة. على شكل مضرب تنس. لا تشكل كبسولة. متحرك. تلزم اللاهوائية. وفقا لخصائص المستضد التي تنقسم إلى 7 السيروفارس. سموم البوتولينوم الخارجية - أقوى السموم البيولوجية - لها تأثير سام على الأعصاب (الجرعة المميتة للإنسان حوالي 0.3 ميكروغرام). التشخيص الميكروبيولوجي. الكشف عن توكسين البوتولينوم وتحديده في مادة الاختبار باستخدام تفاعل التراص الدموي غير المباشر العكسي (RONHA) ، تفاعل معادلة السموم مع مضاد السموم (مصل مضاد للسموم) على حيوانات المختبر. الطريقة البكتريولوجية لاكتشاف العوامل الممرضة في مادة الاختبار. الوقاية النوعية.ذوفان البوتولينوم A ، B ، E هي جزء من السيكستاناتوكسين ، وتستخدم وفقًا للإشارات. للوقاية الطارئة من الممكن استخدام الأمصال المضادة للسموم. علاج.تستخدم الأمصال غير المتجانسة المضادة للسموم والغلوبولين المناعي المتماثل.
زراعة. على أجار الدم ، فإنه يشكل مستعمرات شفافة صغيرة محاطة بمنطقة انحلال الدم. مقاومة.تتمتع أبواغ بكتيريا المطثية الوشيقية بمقاومة عالية جدًا لدرجات الحرارة المرتفعة.
علم الأوبئة.تدخل عصية البوتولينوم من التربة منتجات الطعامحيث تتكاثر وتطلق السموم الخارجية. طريق انتقال العدوى هو الغذاء. في أغلب الأحيان ، تعتبر الأطعمة المعلبة (الفطر ، الخضار ، اللحوم ، الأسماك) عاملاً في انتقال العدوى. لا ينتقل المرض من شخص لآخر. طريقة تطور المرض.يتم تناول توكسين البوتولينوم عن طريق الطعام السبيل الهضمي. مقاومة لعمل الإنزيمات الهاضمة ، يتم امتصاص السم من خلال جدار الأمعاء في مجرى الدم ويسبب تسمم الدم لفترات طويلة. السم يرتبط بالخلايا العصبية ويمنع انتقال النبضات من خلالها المشابك العصبية العضلية. نتيجة لذلك ، يتطور شلل عضلات الحنجرة والبلعوم وعضلات الجهاز التنفسي ، مما يؤدي إلى ضعف البلع والتنفس ، ويلاحظ حدوث تغيرات في أجهزة الرؤية. الصورة السريرية. فترة الحضانةيدوم من 6-24 ساعة إلى 2-6 أيام. كلما كانت فترة الحضانة أقصر ، زادت حدة المرض. عادة يبدأ المرض بشكل حاد ، لكن درجة حرارة الجسم تبقى طبيعية. من الممكن وجود أنواع مختلفة من التسمم الغذائي - مع غلبة أعراض تلف الجهاز الهضمي أو الاضطرابات البصرية أو وظائف الجهاز التنفسي. في الحالة الأولى ، يبدأ المرض بظهور جفاف الفم والغثيان والقيء والإسهال. في الحالة الثانية ، ترتبط المظاهر الأولى للمرض بضعف البصر (يشكو المريض من "الضباب" أمام العينين وازدواج الرؤية). نتيجة لشلل عضلات الحنجرة تظهر بحة في الصوت ثم يختفي الصوت. قد يموت المرضى من شلل الجهاز التنفسي. قد يتفاقم المرض الالتهاب الرئوي الحاد، التهاب عضلة القلب السام ، تعفن الدم. معدل الوفيات بسبب التسمم الغذائي هو 15-30٪. حصانة. لم يتشكل. يتم توجيه الأجسام المضادة التي يتم إنتاجها أثناء مسار المرض ضد مصل معين.
1- طرق تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية. 1) طريقة انتشار أجار.يتم تلقيح الميكروب المدروس على وسط مغذي أجار ، ثم يتم إضافة المضادات الحيوية. يتم إدخال المستحضرات إما في آبار خاصة في أجار ، أو يتم وضع أقراص بالمضادات الحيوية على سطح البذرة ("طريقة القرص"). يتم تسجيل النتائج في يوم واحد من خلال وجود أو عدم وجود نمو جرثومي حول الثقوب (الأقراص). 2) طرق التحديد. الحد الأدنى من مستوى المضادات الحيوية ،مما يسمح في المختبر بمنع النمو المرئي للميكروبات في وسط المغذيات أو يعقمه تمامًا. أ) تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية بطريقة القرص. يتم تلقيح الثقافة البكتيرية المدروسة بعشب على أجار المغذيات أو وسط AGV في طبق بتري.ب) وسط AGV: مرق السمك الجاف المغذي ، أجار أجار ، فوسفات الصوديوم غير المنحل. ج) توضع الأقراص الورقية التي تحتوي على جرعات معينة من المضادات الحيوية المختلفة على سطح البذرة مع ملاقط على نفس المسافة من بعضها البعض. يتم تحضين الثقافات عند 37 درجة مئوية حتى اليوم التالي. وفقًا لقطر مناطق تثبيط النمو للثقافة البكتيرية المدروسة ، يتم الحكم على حساسيتها للمضادات الحيوية.
د) تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية بطريقة التخفيفات المتسلسلة. تحديد الحد الأدنى لتركيز المضاد الحيوي الذي يثبط نمو الثقافة البكتيرية المدروسة.
هـ) يتم تقييم نتائج تحديد حساسية الكائنات الدقيقة للمضادات الحيوية وفقًا لجدول مُعد خاص يحتوي على القيم الحدودية لأقطار مناطق تثبيط النمو للسلالات المقاومة والحساسة والمقاومة المتوسطة ، مثل وكذلك قيم MIC للمضادات الحيوية للسلالات المقاومة والحساسة. 3) تحديد المضاد الحيوي في الدم والبول والسوائل الأخرى لجسم الإنسان.يتم وضع صفين من أنابيب الاختبار في رف. في إحداها ، يتم تحضير تخفيفات المضاد الحيوي المرجعي ، وفي الأخرى ، سائل الاختبار. بعد ذلك ، يتم إضافة تعليق بكتيريا الاختبار المحضرة في وسط Hiss مع الجلوكوز إلى كل أنبوب اختبار. عند تحديد البنسلين ، التتراسكلين ، الاريثروميسين في سائل الاختبار ، يتم استخدام سلالة قياسية من بكتيريا S. aureus كبكتيريا اختبار ، وعند تحديد الستربتومايسين ، يتم استخدام E. coli. بعد حضانة التطعيمات عند 37 درجة مئوية لمدة 18-20 ساعة ، لوحظت نتائج التجربة على تعكر الوسط وتلطيخه بمؤشر ناتج عن تحلل الجلوكوز بواسطة بكتيريا الاختبار. يتم تحديد تركيز المضاد الحيوي بضرب أعلى تخفيف لسائل الاختبار الذي يثبط نمو بكتيريا الاختبار بالحد الأدنى من تركيز المضاد الحيوي المرجعي الذي يثبط نمو نفس بكتيريا الاختبار. على سبيل المثال ، إذا كان الحد الأقصى لتخفيف سائل الاختبار الذي يثبط نمو بكتيريا الاختبار هو 1: 1024 ، وكان الحد الأدنى لتركيز المضاد الحيوي المرجعي الذي يثبط نمو نفس بكتيريا الاختبار هو 0.313 ميكروغرام / مل ، فإن منتج 1024-0.313 = 320 ميكروغرام / مل هو تركيز مضاد حيوي في 1 مل.
4) تحديد قدرة المكورات العنقودية الذهبية على إنتاج بيتا لاكتاماز.في دورق يحتوي على 0.5 مل من مزرعة مرق يومية من سلالة معيارية من المكورات العنقودية الحساسة للبنسلين ، أضف 20 مل من السائل المنصهر وتبريده إلى 45 درجة مئوية أجار المغذيات ، واخلطه واسكبه في طبق بتري. بعد تصلب الأجار ، يتم وضع قرص يحتوي على البنسلين في وسط الطبق على سطح الوسط. تزرع الثقافات المدروسة على طول نصف قطر القرص بحلقة. يتم تحضين التطعيمات عند 37 درجة مئوية حتى اليوم التالي ، وبعد ذلك يتم تدوين نتائج التجربة. يتم الحكم على قدرة البكتيريا المدروسة على إنتاج بيتا لاكتاماز من خلال وجود نمو سلالة معيارية من المكورات العنقودية حول واحدة أو أخرى من الثقافات المدروسة (حول القرص).
2. اضطرابات الجهاز المناعي: نقص المناعة الأولية والثانوية.نقص المناعة هي اضطرابات في الحالة المناعية الطبيعية ناتجة عن خلل في واحد أو أكثر من آليات الاستجابة المناعية. نقص المناعة الأولية أو الخلقية. يمكن أن تؤثر اضطرابات الجهاز المناعي على كلا الجهازين الرئيسيين روابط محددةفي عمل جهاز المناعة ، وكذلك العوامل التي تحدد مقاومة غير محددة. المتغيرات المركبة والانتقائية لاضطرابات المناعة ممكنة. اعتمادًا على مستوى وطبيعة الاضطرابات ، يتم تمييز أوجه القصور المناعي الخلطية والخلوية والمختلطة.
الأسباب: مضاعفة الكروموسومات ، الطفرات النقطية ، خلل في إنزيمات استقلاب الحمض النووي ، اضطرابات الغشاء المحددة وراثيا ، تلف الجينوم في الفترة الجنينية ، إلخ. المظاهر- قصور البلعمة ، النظام التكميلي ، المناعة الخلطية (نظام ب) ، المناعة الخلوية (نظام تي). نقص المناعة الثانوية أو المكتسبة تتطور حالات نقص المناعة الثانوية ، على عكس الحالات الأولية ، لدى الأفراد الذين لديهم جهاز مناعة يعمل بشكل طبيعي منذ الولادة. تتشكل تحت تأثير البيئة على مستوى النمط الظاهري وتنتج عن انتهاك لوظيفة الجهاز المناعي نتيجة لأمراض مختلفة أو تأثيرات ضارة على الجسم. تتأثر أنظمة T- و B للمناعة ، وتتأثر عوامل المقاومة غير المحددة ، كما أن مجموعاتها ممكنة. تعتبر حالات نقص المناعة الثانوية أكثر شيوعًا من حالات نقص المناعة الأولية. نقص المناعة الثانوية قابل للتصحيح المناعي ،
يمكن أن تكون حالات نقص المناعة الثانوية:
بعد العدوى (خاصة الفيروسية) والغزوات (الطفيليات والديدان الطفيلية) ؛
مع مرض الحروق
مع بولينا. مع الأورام
مع اضطرابات التمثيل الغذائي والإرهاق.
مع دسباقتريوز.
في إصابات خطيرة، عمليات جراحية واسعة النطاق ، خاصة تحت التخدير العام ؛ عند التشعيع ، عمل المواد الكيميائية ؛
مع تقدم العمر
الأدوية المرتبطة بتناول الأدوية.
حسب السريريةيتميز التدفق: 1) التعويض ، - زيادة تعرض الجسم للعوامل المعدية. 2) التعويض الثانوي - التأريخ الزمني للعمليات المعدية.
3) اللا تعويضية - العدوى المعممة التي تسببها الميكروبات الانتهازية (OPM) والأورام الخبيثة.
3. العامل المسبب لداء الأميبات. التصنيف. صفة مميزة. التشخيص الميكروبيولوجي. علاج محدد. داء الأميبات هو مرض معد يسببه المتحولة الحالة للنسج ، مصحوبًا بآفات تقرحية في القولون. تشكيل محتمل للخراجات في مختلف الأجهزة. يعمل بشكل مزمن. البروتوزوا ، شعبة Sarcomastidophora ، subphylum Sarcodina.
علم الصرف والزراعة.يوجد العامل الممرض في مرحلتين من التطور: نباتي وكيسي. تتكون المرحلة الخضرية من عدة أشكال (نسيج ، نباتي كبير ، لمعي ، وما قبل الكيسي). الكيس (مرحلة الراحة) له شكل بيضاوي ، يتكون من أشكال نباتية في الأمعاء. تحدث العدوى عندما تدخل أكياس الممرض إلى الأمعاء ، حيث تشكل أشكالًا نباتية معوية.
مقاومة. خارج الجسم ، تموت الأنسجة والأشكال اللمعية للممرض بسرعة (بعد 30 دقيقة). الأكياس مستقرة في البيئة وتبقى في البراز والماء عند درجة حرارة 20 درجة مئوية لمدة شهر. في المواد الغذائية والخضروات والفواكه ، تستمر الأكياس لعدة أيام.
آلية التحويل -برازي لكن شفوي. تحدث العدوى عندما يتم إدخال الأكياس مع الطعام ، وخاصة الخضار والفواكه ، في كثير من الأحيان مع الماء ، من خلال الأدوات المنزلية. يساهم الذباب والصراصير في انتشار الخراجات.
التسبب في المرض والصورة السريرية.يمكن أن تعيش الخراجات التي دخلت الأمعاء وأشكال الأميبات التي شكلتها التجويف فيها دون أن تسبب المرض. مع انخفاض مقاومة الجسم ، تخترق الأميبا جدار الأمعاء وتتكاثر. النامية داء الأميبات المعوي. يساهم بعض ممثلي البكتيريا المعوية في هذه العملية. يتأثر القولون العلوي بتكوين القرحات ، وأحيانًا المستقيم. هناك براز رخو متكرر. في البراز توجد عناصر قيحية ومخاط. قد يحدث انثقاب جدار الأمعاءمع تطور التهاب الصفاق صديدي. يمكن أن تدخل الأميبا مع تدفق الدم إلى الكبد والرئتين والدماغ - يتطور داء الأميبات خارج الأمعاء. ربما ظهور داء الزخار الجلدي الذي يتطور نتيجة لعملية ثانوية. تتشكل تقرحات وتقرحات غير مؤلمة على جلد منطقة الشرج والعجان والأرداف. حصانة. مع داء الأميبات ، تكون المناعة غير مستقرة. العلاج والوقاية. يتم استخدام الأدوية التالية في العلاج: التأثير على الأميبات الموجودة في تجويف الأمعاء (مشتقات أوكسيكوينولين - كينوفون ، إنتيروسيبول ، مكسافور ، إنتستوبان ، وكذلك مركبات الزرنيخ - أمينارسون ، أوسارسول ، إلخ) ؛ العمل على أشكال الأنسجة من الأميبات (مستحضرات emetine) ؛ يعمل على الأشكال الشفافة للأميبا والأميبا الموجودة في جدار الأمعاء (التتراسيكلين) ؛ تعمل على الأميبات في أي من توطينها (مشتقات إيميدازول - ميترونيدازول). الوقايةيرتبط داء الأميبات بتحديد وعلاج الإفرازات الكيسية وناقلات الأميبا.
التشخيص الميكروبيولوجي.الطريقة الرئيسية هي الفحص المجهري لبراز المريض ، وكذلك محتويات خراجات الأعضاء الداخلية. يتم تلطيخ المسحات بمحلول Lugol أو الهيماتوكسيلين لتحديد الأكياس والجوائز. الطريقة المصلية: RIGA ، ELISA ، RSK ، إلخ. تم الكشف عن أعلى عيار للأجسام المضادة في داء الأميبات خارج الأمعاء.
| " |
التشخيصات المخبرية
UDC-078
التشخيص المخبري للعدوى الفيروسية
ن. نوسيك ، ف. ستاخانوف
معهد علم الفيروسات. دي. إيفانوفسكي رامس ، موسكو
التشخيص المختبري للالتهابات الفيروسية
ن. نوسيك ، ف. ستاتشانوفا
مقدمة
يتطلب توسيع الفرص في علاج الأمراض الفيروسية والوقاية منها باستخدام الأدوية المضادة للفيروسات ومعدلات المناعة واللقاحات بآليات عمل مختلفة تشخيصات معملية سريعة ودقيقة. تتطلب الخصوصية الضيقة لبعض الأدوية المضادة للفيروسات أيضًا تشخيصًا سريعًا ومحددًا للغاية لعامل العدوى. كانت هناك حاجة لطرق كمية للكشف عن الفيروسات لرصد العلاج المضاد للفيروسات. بالإضافة إلى تحديد مسببات المرض ، فإن التشخيصات المخبرية مهمة في تنظيم تدابير مكافحة الوباء.
يسمح التشخيص المبكر للحالات الأولى من العدوى الوبائية بتنفيذ تدابير مكافحة الأوبئة في الوقت المناسب - الحجر الصحي ، والاستشفاء ، والتطعيم ، وما إلى ذلك. وقد أظهر تنفيذ برامج القضاء على الأمراض المعدية ، مثل الجدري ، أنه عند تنفيذها ، فإن دور يزداد التشخيص المختبري. يلعب التشخيص المختبري دورًا أساسيًا في خدمة الدم و ممارسة التوليدمثل تحديد المتبرعين المصابين فيروس نقص المناعة البشرية(HIV) ، فيروس التهاب الكبد B (HBV) ، تشخيص الإصابة بالحصبة الألمانية وعدوى الفيروس المضخم للخلايا عند النساء الحوامل.
طرق التشخيص
هناك ثلاث طرق رئيسية للتشخيص المختبري للعدوى الفيروسية (الجدول 1 ، الجدول 2):
1) الفحص المباشر للمادة لوجود مستضد فيروسي أو أحماض نووية ؛
2) عزل الفيروس والتعرف عليه من المواد السريرية ؛
3) التشخيص المصلي ، على أساس إنشاء زيادة كبيرة في الأجسام المضادة الفيروسية أثناء سير المرض.
مع أي نهج يتم اختياره للتشخيص الفيروسي ، فإن أحد أهم العوامل هو جودة مادة الاختبار. لذلك ، على سبيل المثال ، للتحليل المباشر لعينة أو لعزل فيروس ، يجب الحصول على مادة الاختبار في بداية المرض ، عندما يظل العامل الممرض يفرز نسبيًا. كميات كبيرةولا يرتبط بعد بالأجسام المضادة ، ويجب أن يكون حجم العينة كافياً للتحليل المباشر. من المهم أيضًا اختيار المادة وفقًا للمرض المزعوم ، أي المادة التي يكون فيها احتمال وجود الفيروس أكبر ، بناءً على التسبب في العدوى.
تلعب البيئة التي يتم فيها أخذ المادة ، وكيفية نقلها وكيفية تخزينها ، دورًا مهمًا في التشخيص الناجح. لذلك ، المسحات الأنفية أو الشرجية ، توضع محتويات الحويصلات في وسط يحتوي على بروتين يمنع الفقد السريع للعدوى بالفيروس (إذا تم التخطيط للعزل) ، أو في مخزن مؤقت مناسب (إذا كان من المخطط العمل مع الأحماض النووية ).
الطرق المباشرة لتشخيص المادة السريرية
الطرق المباشرة هي طرق تسمح باكتشاف فيروس أو مستضد فيروسي أو فيروسي حمض نووي(NC) مباشرة في المادة السريرية ، أي أنها الأسرع (2-24 ساعة). ومع ذلك ، نظرًا لعدد من ميزات مسببات الأمراض ، فإن الطرق المباشرة لها حدودها (إمكانية الحصول على نتائج سلبية كاذبة وإيجابية كاذبة). لذلك ، غالبًا ما يتطلبون تأكيدًا بطرق غير مباشرة.
المجهر الإلكتروني (EM). باستخدام هذه الطريقة ، يمكنك اكتشاف الفيروس الفعلي. لاكتشاف الفيروس بنجاح ، يجب أن يكون تركيزه في العينة حوالي 1 · 10 6 جزيئات لكل 1 مل. ولكن نظرًا لأن تركيز العامل الممرض ، كقاعدة عامة ، في المادة من المرضى غير مهم ، فإن البحث عن الفيروس صعب ويتطلب ترسبه الأولي باستخدام الطرد المركزي عالي السرعة متبوعًا بتلطيخ سلبي. بالإضافة إلى ذلك ، لا يسمح EM بطباعة الفيروسات ، لأن العديد منها لا يحتوي على اختلافات مورفولوجية داخل الأسرة. على سبيل المثال ، لا يمكن تمييز فيروسات الهربس البسيط أو الفيروس المضخم للخلايا أو فيروسات الهربس النطاقي من الناحية الشكلية.
أحد متغيرات EM المستخدمة لأغراض التشخيص هو المجهر الإلكتروني المناعي(IEM) ، حيث يتم استخدام أجسام مضادة محددة للفيروسات. نتيجة لتفاعل الأجسام المضادة مع الفيروسات ، تتشكل مجمعات ، والتي ، بعد تلطيخ سلبي ، يمكن اكتشافها بسهولة أكبر.
IEM أكثر حساسية إلى حد ما من EM ويستخدم عندما لا يمكن زراعة الفيروس. في المختبر، على سبيل المثال ، عند البحث عن مسببات أمراض التهاب الكبد الفيروسي.
تفاعل التألق المناعي (RIF). تعتمد الطريقة على استخدام الأجسام المضادة المرتبطة بصبغة ، مثل إيزوثيوسيانات الفلورسين. يستخدم RIF على نطاق واسع للكشف عن المستضدات الفيروسية في مادة المرضى وللتشخيص السريع.
في الممارسة العملية ، يتم استخدام نوعين مختلفين من RIF: على التواليو غير مباشر. في الحالة الأولى ، يتم استخدام الأجسام المضادة للفيروسات المصبوغة ، والتي يتم تطبيقها على الخلايا المصابة (اللطاخة ، زراعة الخلايا). وهكذا ، يستمر التفاعل في خطوة واحدة. يكمن الإزعاج في الطريقة في الحاجة إلى وجود مجموعة كبيرة من الأمصال النوعية المترافقة للعديد من الفيروسات.
في المتغير غير المباشر لـ RIF ، يتم تطبيق مصل معين على مادة الاختبار ، حيث ترتبط الأجسام المضادة بمولد الضد الفيروسي الموجود في المادة ، ثم يتم وضع المصل المضاد للأنواع في طبقات جاما جلوبيولين للحيوان حيث تم تحضير المصل المناعي المحدد ، على سبيل المثال ، مضاد للأرانب ، ومضاد للخيول ، وما إلى ذلك. الميزة يتمثل البديل غير المباشر لـ RIF في الحاجة إلى نوع واحد فقط من الأجسام المضادة المصنفة.
تُستخدم طريقة RIF على نطاق واسع لفك شفرة مسببات الالتهابات الفيروسية التنفسية الحادة بسرعة في تحليل بصمات المسحات من الغشاء المخاطي للجزء العلوي الجهاز التنفسي. لا يمكن الاستخدام الناجح لـ RIF للكشف المباشر عن فيروس في المواد السريرية إلا إذا كان يحتوي على عدد كبير بما فيه الكفاية من الخلايا المصابة وتلوث غير مهم بالكائنات الدقيقة التي يمكن أن تنتج تلألؤًا غير محدد.
المقايسة المناعية الإنزيمية (ELISA). إن طرق المقايسة المناعية الإنزيمية لتحديد المستضدات الفيروسية تشبه من حيث المبدأ طريقة RIF ، ولكنها تعتمد على وسم الأجسام المضادة بالإنزيمات بدلاً من الأصباغ. يتم استخدام بيروكسيداز الفجل والفوسفاتيز القلوي على نطاق واسع ، كما تستخدم β-galactosidase و β-lactamases. ترتبط الأجسام المضادة الموصوفة بالمولد الضد ، ويتم الكشف عن هذا المركب عن طريق إضافة ركيزة للإنزيم الذي تترافق معه الأجسام المضادة. قد يكون الناتج النهائي للتفاعل في شكل راسب غير قابل للذوبان ، ثم يتم إجراء العد باستخدام مجهر ضوئي تقليدي ، أو في شكل منتج قابل للذوبان ، والذي عادة ما يكون ملونًا (أو قد يتألق أو يتوهج) و مسجل بطريقة مفيدة.
نظرًا لأنه يمكن قياس المستضدات القابلة للذوبان بواسطة ELISA ، فلا توجد حاجة لخلايا سليمة في العينة ، وبالتالي يمكن استخدام أنواع مختلفة من المواد السريرية.
ميزة أخرى مهمة لطريقة ELISA هي القدرة على قياس المستضدات ، مما يسمح باستخدامها للتقييم بالطبع السريريةمرض وفعالية العلاج الكيميائي. يمكن استخدام ELISA ، مثل RIF ، في شكل مباشر وغير مباشر.
ELISA ذو الطور الصلب ، الذي يعطي منتج تفاعل ملون قابل للذوبان ، وجد التوزيع الأكبر. يمكن استخدام ELISA لتحديد المستضد (ثم يتم تطبيق الأجسام المضادة على المرحلة الصلبة - قاع بئر صفيحة البوليسترين) ، ولتحديد الأجسام المضادة (ثم يتم تطبيق المستضدات على المرحلة الصلبة).
المقايسة المناعية الراديوية (RIA) . تعتمد الطريقة على وسم الأجسام المضادة بالنظائر المشعة ، مما يضمن حساسية عالية في تحديد المستضد الفيروسي. أصبحت هذه الطريقة منتشرة في الثمانينيات ، خاصة لتحديد علامات HBV والفيروسات الأخرى غير القابلة للزراعة. تشمل عيوب الطريقة الحاجة إلى العمل مع المواد المشعة واستخدام معدات باهظة الثمن (عدادات جاما).
الطرق الجزيئية. في البداية ، تم اعتبار الطريقة المحددة للغاية لتهجين NA طريقة كلاسيكية لاكتشاف الجينوم الفيروسي ، ولكن الآن تم عزل جينومات الفيروس باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل(PCR).
التهجين الجزيئي للأحماض النووية.تعتمد الطريقة على تهجين الخيوط التكميلية من DNA أو RNA مع تكوين هياكل مزدوجة الخيط واكتشافها باستخدام ملصق. لهذا الغرض ، يتم استخدام تحقيقات DNA أو RNA الخاصة ، الموصوفة بنظير (32 P) أو البيوتين ، الذي يكتشف السلاسل التكميلية من DNA أو RNA. هناك العديد من المتغيرات للطريقة: - تهجين النقطة - يتم تطبيق NA المعزول والمُشوه على المرشحات ثم يُضاف مسبار مُسمى ؛ بيان النتائج - التصوير الشعاعي الذاتي باستخدام 32 R أو التلوين - مع أفيدين البيوتين ؛ - تهجين اللطخة - طريقة لعزل شظايا NA المقطوعة عن طريق تقييد نوكلياز داخلي من مجموع الحمض النووي ونقلها إلى مرشحات النيتروسليلوز واختبارها باستخدام مجسات مميزة ؛ تستخدم كاختبار تأكيدي لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية ؛ - التهجين فى الموقع- يسمح بتحديد NK في الخلايا المصابة.
PCRعلى أساس مبدأ تكرار الحمض النووي الطبيعي. يتمثل جوهر الطريقة في التكرار المتكرر لدورات التخليق (التضخيم) لتسلسل DNA الخاص بالفيروس باستخدام بوليميراز Taq DNA القابل للحرارة واثنين من البادئات المحددة ، ما يسمى بادئات.
تتكون كل دورة من ثلاث مراحل مع ظروف درجات حرارة مختلفة. في كل دورة ، يتضاعف عدد نسخ المنطقة المركبة. تعمل شظايا الحمض النووي المُصنَّعة حديثًا كقالب لتركيب خيوط جديدة في دورة التضخيم التالية ، مما يجعل من الممكن تجميع عدد كافٍ من نسخ منطقة الحمض النووي المحددة في 25-35 دورة لتحديدها ، عادةً بواسطة هلام الاغاروز الكهربائي.
الطريقة محددة للغاية وحساسة للغاية. يسمح لك باكتشاف نسخ متعددة من الحمض النووي الفيروسي في مادة الاختبار. في السنوات الاخيرةيستخدم تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) بشكل متزايد لتشخيص ومراقبة العدوى الفيروسية (فيروسات التهاب الكبد ، والهربس ، والفيروسات المضخمة للخلايا ، والأورام الحليمية ، وما إلى ذلك).
تم تطوير متغير من PCR الكمي الذي يجعل من الممكن تحديد عدد نسخ موقع الحمض النووي المتضخم. هذه التقنية معقدة ومكلفة وغير موحدة بشكل كافٍ للاستخدام الروتيني.
الطرق الخلوية قيمة تشخيصية محدودة حاليًا ، ولكن لا يزال من الضروري استخدامها في عدد من الإصابات. يتم فحص مواد التشريح والخزعات والمسحات ، والتي ، بعد المعالجة المناسبة ، يتم تلوينها وتحليلها تحت المجهر. في عدوى الفيروس المضخم للخلايا ، على سبيل المثال ، في أقسام الأنسجة أو في البول ، توجد خلايا عملاقة مميزة - "عين البومة" ، مع داء الكلب - شوائب في سيتوبلازم الخلايا (أجسام Babes-Negri). في بعض الحالات ، على سبيل المثال ، في التشخيص التفريقي لالتهاب الكبد المزمن ، من المهم تقييم حالة أنسجة الكبد.
جدول محتويات موضوع "طرق الكشف عن الفيروسات. طرق تشخيص الفطريات (الأمراض الفطرية). طرق الكشف عن البروتوزوا.":الطرق المصلية لتشخيص الالتهابات الفيروسية. تثبيط التراص الدموي. تثبيط تأثير الاعتلال الخلوي عن طريق تدخل الفيروس. تألق مناعي مباشر. الفحص المجهري المناعي.
مع الأغلبية اصابات فيروسيةطور ردود الفعل المناعيةتنطبق على التشخيص. عادة ما يتم تقييم الاستجابات الخلوية في اختبارات السمية الخلوية للخلايا الليمفاوية ضد العوامل المعدية أو الخلايا المستهدفة المصابة بها ، أو قدرة الخلايا الليمفاوية على الاستجابة لمختلف المستضدات والميتوجينات. نادرًا ما يتم تحديد شدة التفاعلات الخلوية في المختبرات العملية. أصبحت طرق تحديد AT المضادة للفيروسات أكثر انتشارًا.
يعتمد RN على قمع التأثير الممرض للخلايابعد خلط الفيروس مع AT محدد. يتم خلط الفيروس المجهول بمضاد مضاد تجاري معروف ، وبعد الحضانة المناسبة ، يتم إدخاله في الخلية أحادية الطبقة. يشير غياب موت الخلايا إلى عدم تطابق بين العامل المعدي والأجسام المضادة المعروفة.
تثبيط التراص الدموي
يستخدم RTGA لتحديد الفيروساتقادرة على تراص كرات الدم الحمراء المختلفة. للقيام بذلك ، يتم خلط الوسط المستنبت الذي يحتوي على العامل الممرض مع مصل مضاد تجاري معروف ويتم إدخاله في مزرعة الخلية. بعد الحضانة ، يتم تحديد قدرة المزرعة على التراص الدموي ، وفي حالة عدم وجودها ، يتم التوصل إلى استنتاج حول عدم تطابق الفيروس مع المصل المضاد.
تثبيط تأثير الاعتلال الخلوي عن طريق تدخل الفيروس
رد فعل تثبيط تأثير الاعتلال الخلوي بسبب تدخل الفيروساتتستخدم لتحديد العامل الممرض الذي يتداخل مع فيروس معروف ممرض للخلايا في مزرعة من الخلايا الحساسة. للقيام بذلك ، يتم إدخال مصل تجاري (على سبيل المثال ، لفيروس الحصبة الألمانية إذا كان هناك شك) في وسط الاستزراع الذي يحتوي على الفيروس قيد الدراسة ، وحضنه وإصابة المزرعة الثانية ؛ بعد يوم أو يومين ، يتم إدخال فيروس معروف ممرض للخلايا (على سبيل المثال ، أي فيروس ECHO). في ظل وجود تأثير ممرض للخلايا ، يتم الاستنتاج أن الثقافة الأولى كانت مصابة بفيروس مطابق لـ AT المطبق.
تألق مناعي مباشر
من بين الاختبارات الأخرى ، الأكثر استخدامًا تفاعل مناعي مباشر(الأسرع والأكثر حساسية وقابلية للتكرار). على سبيل المثال ، يتطلب التعرف على الفيروس المضخم للخلايا من خلال تأثيره الممرض للخلايا ما لا يقل عن 2-3 أسابيع ، وعند استخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المصنفة ، يكون التعرف ممكنًا بعد 24 ساعة.فحص باستخدام الفحص المجهري الفلوري (يسمح لك باكتشاف وجود مضان للخلايا المصابة) .
الفحص المجهري المناعي
الفحص المجهري المناعي(على غرار الطريقة السابقة) يسمح لك بتحديد أنواع مختلفةفيروسات تم الكشف عنها بواسطة المجهر الإلكتروني (على سبيل المثال ، أنواع مختلفة من فيروسات الهربس) ، والتي لا يمكن إجراؤها بناءً على السمات المورفولوجية. تستخدم الأمصال الموصوفة بدلاً من الأمصال المضادة لتحديد الهوية. طرق مختلفة AT ، لكن التعقيد والتكلفة العالية للطريقة تحد من تطبيقها.
للتشخيص أمراض فيروسيةتطبيق الطرق التالية:
1) التنظير الفيروسي.
2) الفحص المجهري المناعي.
3) الفيروسية.
4) السيرولوجية.
5) تألق مناعي.
6) البيولوجية.
7) استخدام مجسات DNA (RNA).
8) تفاعل البلمرة المتسلسل.
يتم الحكم على تكاثر (تكاثر) الفيروسات في مزرعة الخلايا من خلال تأثير الاعتلال الخلوي (CPE) ، والذي يمكن اكتشافه مجهريًا ويتميز التغيرات المورفولوجيةالخلايا.
يتم استخدام طبيعة CPD للفيروسات في كل من اكتشافها (الإشارة) وللتحديد المؤقت ، أي تحديد أنواعها.
طرق الكشف عن الفيروسات:
1) تفاعل الامتصاص الدموي - بناءً على قدرة سطح الخلايا التي تتكاثر فيها على امتصاص كريات الدم الحمراء - تفاعل الامتزاز. لوضعه في مزرعة من الخلايا المصابة بالفيروسات ، يضاف معلق من كريات الدم الحمراء ، وبعد مرور بعض الوقت ، يتم غسل الخلايا بمحلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر. تبقى كريات الدم الحمراء الملتصقة على سطح الخلايا المصابة بالفيروس.
2) تفاعل التراص الدموي (RG). يتم استخدامه للكشف عن الفيروسات في سائل الثقافة الخلوية أو السائل المشيمي أو السائل الأمنيوسي لجنين الدجاج.
يمكن استخدام الطرق المصلية للكشف عن كل من الأجسام المضادة المحددة والمستضدات الفيروسية في مادة الاختبار. لهذه الأغراض ، يمكن استخدام جميع التفاعلات المصلية المعروفة:
1) تكملة رد فعل ملزم.
2) تفاعل التراص الدموي السلبي ومتغيراته (PHAg ، PHAt).
3) تفاعل تثبيط التراص الدموي.
4) تفاعل التراص الدموي للالتصاق المناعي (يتم امتصاص مركب المستضد + الجسم المضاد في وجود مكمل على كريات الدم الحمراء).
5) تفاعلات ترسيب الهلام.
6) تفاعلات تحييد الفيروس.
7) طريقة المناعة الراديوية.
8) الطرق الإنزيم المناعي.
كل الطرق المذكورة أعلاه اكثر شهرةيتم استخدام طرق ELISA ، والتي تتميز بالخصوصية العالية وسهولة الاستخدام.
7. تفاعل التراص الدموي وآليته في فيروسات الأنفلونزا. تفاعل تثبيط التراص الدموي ، تطبيقه العملي.
تفاعل التراص الدموي (RG). يتم استخدامه للكشف عن الفيروسات في سائل الثقافة الخلوية أو السائل المشيمي أو السائل الأمنيوسي لجنين الدجاج.
8. ميزات المناعة المضادة للفيروسات. دور البلعمة والعوامل الخلطية في المناعة. الإنترفيرون ، خصائص الخصائص الرئيسية ، التصنيف. ملامح عمل الإنترفيرون على الفيروسات .
تشارك جميع أجهزة المناعة في حماية الجسم من الفيروسات ، لكن المناعة المضادة للفيروسات لها سمات محددة مهمة. يتم تحديدها من خلال حقيقة أنه ، أولاً وقبل كل شيء ، ليست أنظمة المكملات والضامة هي التي تتفاعل مع تغلغل الفيروس في الجسم ، ولكن أنظمة الإنترفيرون وخلايا T-killer. ميزة أخرى لتكوين المناعة ترجع إلى حقيقة أن الفيروسات لها تأثير مستضد ضعيف على الخلايا الليمفاوية B ، ولتفعيلها وانتشارها وتمايزها ، ومشاركة T-helpers ، وبالتالي ، تقديم المستضد الفيروسي المعالج (شظايا الببتيد) بمشاركة جزيئات معقد التوافق النسيجي الكبير من الدرجة الثانية أمر ضروري. لذلك ، فإن دور البلاعم والخلايا الأخرى التي تقدم المستضد ليس كثيرًا في البلعمة نفسها ، ولكن في معالجة وعرض المستضد.
يتفاعل نظام الإنترفيرون ، الذي يمنع تكاثر الفيروسات داخل الخلايا ، أولاً وقبل كل شيء مع تغلغل الفيروس. بالإضافة إلى ذلك ، فإن مثبطات أ و ب في مصل الدم لها تأثير مضاد للفيروسات. مثبط ألفا - ركيزة قابلة للحرارة ، هي جزء من الجلوبيولين ، تمنع امتصاص الفيروسات على الخلية ، يتم تدميرها بواسطة النيورامينيداز من فيروسات أورثو وباراميكسوفيرس. مثبط بيتا - mucopeptide بالحرارة ، هو جزء من b-globulins ، يمنع تكاثر ortho- و paramyxoviruses.
ومع ذلك ، لم تكن الإنترفيرونات والمثبطات كافية للحماية من الفيروسات ، لذلك خلقت الطبيعة آلية دفاع أخرى قوية جدًا على مستوى الجسم ضد الفيروسات. يتم تقديمه في المقام الأول الخلايا الليمفاوية التائية السامة للخلاياوالخلايا القاتلة الأخرى. تتعرف هذه الخلايا على جميع المستضدات الأجنبية ، بما في ذلك الفيروسات ، التي تمثلها جزيئات معقد التوافق النسيجي الكبير من الفئة الأولى. الأهمية البيولوجيةالخلايا القاتلة التائية وتتكون من الكشف عن أي خلايا مصابة بمستضدات أجنبية وتدميرها.
الإنترفيرون هي عائلة من البروتينات السكرية التي يتم تصنيعها بواسطة خلايا الجهاز المناعي و النسيج الضام. اعتمادًا على الخلايا التي تصنع الإنترفيرون ، هناك ثلاثة أنواع:؟ ،؟ و؟-interferons.
يتم إنتاج ألفا إنترفيرون بواسطة الكريات البيض ويسمى الكريات البيض. يُطلق على بيتا إنترفيرون اسم الخلايا الليفية ، حيث يتم تصنيعه بواسطة الخلايا الليفية - خلايا النسيج الضام ، ويسمى جاما إنترفيرون المناعي ، حيث يتم إنتاجه بواسطة الخلايا اللمفاوية التائية المنشطة ، الضامة ، القاتلات الطبيعية ، أي الخلايا المناعية.
يزيد إنتاج الإنترفيرون بشكل حاد عند الإصابة بالفيروسات ، بالإضافة إلى التأثير المضاد للفيروسات ، يحتوي الإنترفيرون على حماية مضادة للأورام ، حيث يؤخر تكاثر (تكاثر) الخلايا السرطانية ، وكذلك نشاط تعديل المناعة ، وتحفيز البلعمة ، والقاتل الطبيعي ، وتنظيم تكوين الأجسام المضادة بواسطة الخلايا البائية ، تنشيط التعبير عن معقد التوافق النسيجي الرئيسي.
آلية العمل. لا يعمل الإنترفيرون مباشرة على الفيروس خارج الخلية ، ولكنه يرتبط بمستقبلات خلوية خاصة ويؤثر على عملية تكاثر الفيروس داخل الخلية في مرحلة تخليق البروتين.
علم الفيروسات خاص
1. الفيروسات التي تسبب التهابات الجهاز التنفسي الحادة. تصنيف. الخصائص العامة orthomyxoviruses. هيكل الانفلونزا virion. ملامح الجينوم الخاص به وتنفيذ المعلومات الواردة فيه. تكرار Virion RNA.
1. الفيروسات - العوامل المسببة لالتهابات الجهاز التنفسي الحادة. تصنيف.
العوامل المسببة لـ ARI هي الفيروسات التالية:
1. فيروسات الأنفلونزا A ، B ، C (Orthomyxoviridae)
2. الفيروسات المخاطانية (Paramyxoviridae) - تشمل هذه الفصيلة ثلاثة أجناس: الفيروسة المخاطانية - فيروسات الإنفلونزا البشرية (HPV) من الأنواع 1 ، 2 ، 3 ، 4 ، مرض نيوكاسل ، نظير الإنفلونزا الطيور والنكاف. Pneumovirus - فيروس الجهاز التنفسي المخلوي (RS-virus) ؛ Morbillivirus هو فيروس الحصبة.
3. الفيروسات التاجية التنفسية (Coronaviridae).
4. الفيروسات التنفسية (Reoviridae).
5. Picornaviruses (Picornaviridae).
فيروس الأنفلونزا أ
للفيريون شكل كروي ويبلغ قطره 80-120 نانومتر. يتم تمثيل جينوم الفيروس بواسطة الحمض النووي الريبي السلبي (8 أجزاء) المجزأ أحادي الجديلة بإجمالي ميغاواط يبلغ 5 ميغاواط. نوع تناظر nucleocapsid حلزوني. يحتوي Virion على طبقة فائقة (غشاء) تحتوي على اثنين من البروتينات السكرية - هيماجلوتينين ونورامينيداز ، والتي تبرز فوق الغشاء على شكل طفرات مختلفة.
الفيروسات هي العوامل المسببة لأمراض الجهاز التنفسي الحادة. ملامح من مظاهر الأمراض التي تسببها فيروسات الأنفلونزا ، نظير الأنفلونزا ، فيروسات الأنف ، الفيروس المخلوي التنفسي والفيروسات الغدية. طرق المختبرتشخيصهم.
للفيريون شكل كروي ويبلغ قطره 80-120 نانومتر. يتم تمثيل جينوم الفيروس بواسطة الحمض النووي الريبي السلبي (8 أجزاء) المجزأ أحادي الجديلة بإجمالي ميغاواط يبلغ 5 ميغاواط. نوع تناظر nucleocapsid حلزوني. يحتوي الفيريون على غشاء فائق السرعة يحتوي على اثنين من البروتينات السكرية - هيماجلوتينين ونورامينيداز ، والتي تبرز فوق الغشاء على شكل طفرات مختلفة.
في فيروسات الأنفلونزا أ للإنسان والثدييات والطيور ، تم العثور على 13 نوعًا من الهيماجلوتينين تختلف في المستضد ، والتي تم تخصيص ترقيم مستمر (من H1 إلى H13).
نيورامينيداز (N) عبارة عن رباعي الحركة بقدرة 200-250 كيلو دالتون ، كل مونومر له MW 50-60 كيلو دالتون.
يحتوي فيروس الأنفلونزا أ على 10 أنواع مختلفة من النورامينيداز
التشخيصات المخبرية. مادة الدراسة هي إفرازات البلعوم الأنفي ، والتي يتم الحصول عليها إما عن طريق التنظيف أو باستخدام مسحات شاش قطنية ، والدم. يتم استخدام طرق التشخيص التالية:
1. الفيروسية - إصابة أجنة الدجاج ، مزارع خلايا الكلى للقرود الخضراء (فيرو) والكلاب (MDSC). تعتبر مزارع الخلايا فعالة بشكل خاص لعزل فيروسات A (H3N2) و B.
2. السيرولوجي - الكشف عن الأجسام المضادة المحددة وزيادة عيارها (في الأمصال المزدوجة) باستخدام RTGA و RSK والمقايسة المناعية الإنزيمية.
3. كتشخيص سريع ، يتم استخدام طريقة الفلورسنت المناعي ، مما يجعل من الممكن الكشف بسرعة عن المستضد الفيروسي في مسحات - بصمات من الغشاء المخاطي للأنف أو في مسحات من البلعوم الأنفي للمرضى.
4. لاكتشاف وتحديد الفيروس (المستضدات الفيروسية) ، تم اقتراح طرق مسبار RNA و PCR.
الوقاية النوعية
1) يعيش من الفيروس الموهن ؛ 2) قتل فيريون كامل. 3) لقاح التخريب (من الفيروسات الانقسام) ؛ 4) لقاح وحيد يحتوي فقط على هيماجلوتينين ونورامينيداز.
فيروسات الانفلونزا (orthomyxoviruses). الخصائص العامة. البروتينات فائقة الكبسولة ، وظائفها ، أهمية التباين (التحول والانجراف) لوبائيات الأنفلونزا. طُرق التشخيص المختبري. اللقاحات المستخدمة للوقاية من الانفلونزا.
الامراض المعدية الحادة مع الحمى وتلف الكبد. الأنثروبونيز.
التصنيف ، التشكل ، التركيب المستضدي: عائلة Picornaviridae ، جنس Hepatovirus. أنواع الأنواع لها نمط مصلي واحد. إنه فيروس يحتوي على RNA ، منظم ببساطة ، وله مستضد واحد خاص بالفيروس.
الزراعة: ينمو الفيروس في مزارع الخلايا. تكون دورة التكاثر أطول من دورة الفيروسات المعوية ، ولا يظهر تأثير الاعتلال الخلوي.
المقاومة: مقاومة للحرارة. المعطل عن طريق الغليان لمدة 5 دقائق. مستقر نسبيًا في بيئة خارجية(ماء).
علم الأوبئة. المصدر هو المرضى. آلية العدوى هي البراز الفموي. يتم التخلص من الفيروسات في البراز في البداية الاعراض المتلازمة. مع ظهور اليرقان ، تقل شدة عزل الفيروس. تنتقل الفيروسات عن طريق الماء والغذاء واليدين.
معظم الأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 4 إلى 15 سنة يعانون من المرض.
التشخيص الميكروبيولوجي. مادة الدراسة هي المصل والبراز. يعتمد التشخيص بشكل أساسي على تحديد IgM في الدم باستخدام ELISA و RIA والمجهر الإلكتروني المناعي. يمكن بنفس الطرق الكشف عن المستضد الفيروسي في البراز. لا يتم إجراء الاختبارات الفيروسية.
3. التشخيص الفيروسي للأنفلونزا. عزل الفيروس وتحديد نوعه. الطرق المصلية لتشخيص الانفلونزا: RSK، RTGA. طريقة تشخيص معجلة باستخدام الأجسام المضادة الفلورية.
التشخيص الميكروبيولوجي. يعتمد تشخيص "الأنفلونزا" على (1) عزل الفيروس والتعرف عليه ، (2) تحديد المستضدات الفيروسية في خلايا المريض ، (3) البحث عن الأجسام المضادة الخاصة بالفيروس في مصل المريض. عند اختيار مادة للبحث ، من المهم الحصول على الخلايا المصابة بالفيروس ، حيث يحدث تكاثر الفيروس فيها. مادة للبحث - إفرازات بلعومية. لتحديد الأجسام المضادة ، يتم فحص أمصال الدم المزدوجة للمريض.
التشخيص السريع. تم الكشف عن المستضدات الفيروسية في مادة الاختبار باستخدام RIF (الخيارات المباشرة وغير المباشرة) و ELISA. يمكن الكشف عن جينوم الفيروسات في المادة باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل.
الطريقة الفيروسية. إن النموذج المختبري الأمثل لاستنبات السلالات هو جنين الصيصان. يتم إجراء الكشف عن الفيروسات اعتمادًا على النموذج المختبري (عن طريق الوفاة ، عن طريق التغيرات السريرية والمرضية ، CPP ، تكوين "لويحات" ، "عينة اللون" ، RHA و hemadsorption). يتم التعرف على الفيروسات من خلال تركيبها المستضدي. يتم استخدام RSK و RTGA و ELISA و RBN (تفاعل المعادلة البيولوجية) للفيروسات ، وما إلى ذلك عادةً ، يتم تحديد نوع فيروسات الأنفلونزا في RSK ، النوع الفرعي في RTGA.
الطريقة المصلية. يتم التشخيص بزيادة عيار الجسم المضاد بمقدار أربعة أضعاف في الأمصال المزدوجة من المريض ، والتي يتم الحصول عليها على فترات 10 أيام. تطبيق فيروسات RTGA و RSK و ELISA و RBN.
الفيروسات الغدية ، خصائص الخصائص ، تكوين المجموعة. الفيروسات الغدية الممرضة للإنسان. ملامح التسبب التهابات الفيروس الغدي، طرق زراعة الفيروسات الغدية. تشخيص أمراض الفيروسات الغدية.
تنقسم عائلة Adenoviridae إلى جنسين: Mastadenovirus - فيروسات الثدييات ، وتشمل فيروسات غدية بشرية (41 متغيرًا مصليًا) ، والقرود (24 متغيرًا مصلًا) ، وكذلك كبيرة. ماشية، الخيول ، الأغنام ، الخنازير ، الكلاب ، الفئران ، البرمائيات ؛ و Aviadenovirus - فيروسات غدية الطيور (9 أنماط مصلية).
تفتقر الفيروسات الغدية إلى كبسولة فائقة. الفيريون له شكل عشري الوجوه - نوع مكعب من التناظر ، قطره 70-90 نانومتر. يتكون الكابسيد من 252 كبسولة يبلغ قطرها 7-9 نانومتر.
تحتوي الفيريون على 7 مستضدات على الأقل. فترة الحضانة 6-9 أيام. الفيروس يتكاثر في الخلايا الظهاريةالجهاز التنفسي العلوي والأغشية المخاطية للعينين. يمكن أن تخترق الرئتين ، وتؤثر على الشعب الهوائية والحويصلات الهوائية ، وتسبب التهاب رئوي حاد ؛ الخاصية البيولوجية المميزة للفيروسات الغدية هي الانتثار للأنسجة اللمفاوية.
يمكن وصف أمراض الفيروسات الغدية بالحمى التهاب نزليالغشاء المخاطي للجهاز التنفسي والعينين ، مصحوبًا بزيادة في الأنسجة اللمفاوية تحت المخاطية والعقد الليمفاوية الإقليمية.
التشخيصات المخبرية. 1. الكشف عن المستضدات الفيروسية في الخلايا المصابة باستخدام أساليب التألق المناعي أو IFM. 2. عزل الفيروس. مادة الدراسة هي إفراز البلعوم الأنفي والملتحمة والدم والبراز (يمكن عزل الفيروس ليس فقط في بداية المرض ، ولكن أيضًا في اليوم 7-14 منه). لعزل الفيروس ، يتم استخدام مزارع الخلايا الأولية التي تمت معالجتها بالتريبسين (بما في ذلك المزروعات ثنائية الصبغيات) للجنين البشري ، والتي تكون حساسة لجميع المتغيرات المصلية للفيروسات الغدية. يتم الكشف عن الفيروسات من خلال تأثيرها الخلوي وبواسطة CSC ، حيث تشترك جميعها في مستضد مشترك مثبت مكمل. يتم تحديد الهوية بواسطة مستضدات خاصة بالنوع باستخدام RTGA ودرجة الحموضة في ثقافة الخلية. 3. الكشف عن زيادة عيار الجسم المضاد في الأمصال المزدوجة لمريض باستخدام RSC. يتم تحديد الزيادة في عيار الأجسام المضادة الخاصة بالنوع باستخدام السلالات المصلية المرجعية للفيروسات الغدية في RTGA أو RN في مزرعة الخلية.
5. فيروسات Coxsackie و ECHO. توصيف خصائصهم. تكوين المجموعات. طُرق التشخيص الميكروبيولوجيالأمراض التي تسببها فيروسات Coxsackie و ECHO.
Coxsackie هي أكثر الفيروسات القلبية من بين جميع الفيروسات المعوية. في 20-40 ٪ من المرضى الذين تقل أعمارهم عن 20 عامًا ، تكون عدوى كوكساكي معقدة بسبب التهاب عضلة القلب. يتم تمثيل فيروسات كوكساكي بمجموعتين: مجموعة كوكساكي أ تضم 23 من المتغيرات المصلية (A1-A22 ، 24) ؛ تشتمل مجموعة Coxsackie B على 6 متغيرات مصلية (B1-B6).
يمكن أن تسبب فيروسات كوكساكي A و B في البشر ، بالإضافة إلى أمراض شبيهة بشلل الأطفال ، مصحوبة أحيانًا بالشلل ، وأمراض أخرى مختلفة مع عيادة غريبة: التهاب السحايا العقيم ، ألم عضلي وبائي (مرض بورنهولم) ، الذباح الحلئي ، مرض بسيطالتهاب المعدة والأمعاء الحاد أمراض الجهاز التنفسي، التهاب عضل القلب
ECHO ، مما يعني: E - معوي ؛ ج - ممرض للخلايا. ح - الإنسان س - يتيم - يتيم. يحتوي على 32 نمط مصلي.
مصدر العدوى كوكساكي و ECHO هو شخص. تحدث العدوى بالفيروسات بالطريق البرازي-الفموي.
إن التسبب في الأمراض التي تسببها فيروسات كوكساكي و ECHO يشبه التسبب في شلل الأطفال. بوابات الدخول هي الغشاء المخاطي للأنف والبلعوم والبلعوم الأمعاء الدقيقة، في الخلايا الظهارية ، وكذلك في الأنسجة اللمفاوية ، تتكاثر هذه الفيروسات.
تقارب الأنسجة اللمفاوية هي واحدة من السمات المميزةهذه الفيروسات. بعد التكاثر ، تخترق الفيروسات اللمف ثم إلى الدم مسببة فيروسية وتعميم العدوى.
بمجرد دخولها إلى مجرى الدم ، تنتشر الفيروسات بشكل دموي في جميع أنحاء الجسم ، وتستقر بشكل انتقائي في تلك الأعضاء والأنسجة التي لديها انتفاخ.
طرق تشخيص أمراض الفيروس المعوي. استعمال الطريقة الفيروسيةوالتفاعلات المصلية المختلفة. يجب إجراء الدراسة على مجموعة الفيروسات المعوية بأكملها. لعزلها ، يتم استخدام محتويات الأمعاء وغسلها ومسحات من الحلق ، وفي كثير من الأحيان يتم استخدام السائل النخاعي أو الدم ، وفي حالة وفاة المريض ، يتم استخدام قطع من الأنسجة من أجهزة مختلفة. المزارع الخلوية (فيروسات شلل الأطفال ، ECHO ، Coxsackie B وبعض مصل Coxsackie A) ، وكذلك الفئران حديثي الولادة (Coxsackie A) مصابة بمواد الاختبار.
تتم كتابة الفيروسات المعزولة في تفاعلات التعادل ، RTGA ، RSK ، تفاعلات الترسيب ، باستخدام الخلائط المرجعية للأمصال ذات التوليفات المختلفة. للكشف عن الأجسام المضادة في الأمصال البشرية الالتهابات المعويةاستخدم نفس الاختبارات المصلية (RN ، اختبارات اللون ، RTGA ، RSK ، تفاعلات الترسيب) ، ولكن لهذه الأغراض من الضروري أن يكون لديك مصل مزدوج من كل مريض (في الفترة الحادة وبعد 2-3 أسابيع من بداية المرض ). تعتبر التفاعلات إيجابية عندما يزيد عيار الجسم المضاد بمقدار 4 مرات على الأقل. تستخدم هاتان الطريقتان أيضًا IFM (للكشف عن الأجسام المضادة أو المستضد).
التهاب الكبد B. هيكل وخصائص الخصائص الرئيسية للفيريون. مستضد السطح ، معناه. ملامح تفاعل الفيروس مع الخلية. طرق الإصابة. طرق التشخيص المختبري. الوقاية النوعية.
فيروس التهاب الكبد B ، HBV يحتوي الفيروس على ثلاثة مستضدات رئيسية
1. HBsAg - سطحي (سطحي) ، أو قابل للذوبان (قابل للذوبان) ، أو مستضد أسترالي.
2. HBcAg - مستضد النواة (cog-antigen).
3. HBeAg - مستضد e ، المترجمة في قلب الفيريون
الفيريون الفعلي - الجسيم الدنماركي - له شكل كروي وقطره 42 نانومتر. يتكون الغلاف الفائق للفيريون من ثلاثة بروتينات: البروتينات الرئيسية (الرئيسية) والكبيرة والمتوسطة (الشكل 88.1). الجينوم محاط بقفيصة ويمثله DNA دائري مزدوج الشريطة مع m.m 1.6 MD. يتكون الحمض النووي من حوالي 3200 نيوكليوتيد ، لكن خيطه "الزائد" أقصر بنسبة 20-50٪ من الخيط "الناقص".
مستضد السطح - HBsAg - موجود في شكل ثلاثة متغيرات مختلفة شكليًا: 1) يمثل الكبسولة الفائقة للفيريون بأكمله ؛ 2) يحدث بكميات كبيرة في شكل جسيمات يبلغ قطرها 20 نانومتر ، لها شكل كروي ؛ 3) على شكل خيوط بطول 230 نانومتر. كيميائيا هم متطابقون. يحتوي HBsAg على مستضد واحد مشترك a وزوجين من المحددات الخاصة بالنوع الحصري المتبادل: d / y و w / r ، لذلك هناك أربعة أنواع فرعية رئيسية من HBsAg (وبالتالي HBV): adw و adr و ayw و ayr. يوفر المستضد أ تكوين مناعة عامة متصالبة لجميع الأنواع الفرعية للفيروس.
توجد البروتينات التي تشكل المستضد السطحي في أشكال جليكوزيلاتيد (gp) وغير جليكوزيلاتيد. Gp27 و gp33 و gp36 و gp42 هي جليكوسيلاتيد (تشير الأرقام إلى m.m في القرص المضغوط). يتكون HBV supercapsid من البروتين S الرئيسي أو الرئيسي (92٪) ؛ متوسط بروتين M (4٪) وكبير أو طويل L- بروتين (1٪).
بروتين ميجور - p24 / gp27 ، بروتين كبير - p39 / gp42 ، بروتين متوسط - gp33 / gp36.
التفاعل مع الخلية.
1. الامتزاز على الخلية.
2. الاختراق في الخلية باستخدام آلية الالتقام الخلوي بوساطة المستقبل (الحفرة المغلفة -> الحويصلة الحدودية -> الليزوزوم -> إطلاق القفصنة النووية واختراق الجينوم الفيروسي في نواة خلية الكبد).
3. التكاثر داخل الخلايا.
مصدر العدوى بفيروس التهاب الكبد B هو الشخص فقط. تحدث العدوى ليس فقط عن طريق الحقن، ولكن أيضًا جنسيًا وعموديًا (من الأم إلى الجنين)
في الوقت الحالي ، تتمثل الطريقة الرئيسية لتشخيص التهاب الكبد B في استخدام التراص الدموي السلبي العكسي (RPHA) للكشف عن الفيروس أو مستضده السطحي ، HBsAg. كما ذكرنا سابقًا ، يحتوي الدم على مستضد سطحي أكبر بعدة مرات من الفيروس نفسه (100-1000 مرة). بالنسبة لتفاعل ROPHA ، يتم استخدام كريات الدم الحمراء المحسّسة بالأجسام المضادة ضد فيروس التهاب الكبد B. في حالة وجود مستضد في الدم ، يحدث تفاعل التراص الدموي. للكشف عن الأجسام المضادة للمستضد الفيروسي HBsAg ، مختلفة طرق المناعة(RSK ، RPGA ، IFM ، RIM ، إلخ.)
الوقاية النوعية
لقاحات التهاب الكبد الوبائي ب إلزامية ويجب إعطاؤها في السنة الأولى من العمر. تم اقتراح نوعين من اللقاحات للتحصين. لتحضير واحد منهم ، يتم استخدام بلازما حاملات الفيروسات كمادة خام ، حيث أنها تحتوي على المستضد الفيروسي بكميات كافية لتحضير اللقاح. الشرط الأساسي لتحضير هذا النوع من اللقاح هو سلامته التامة. لتصنيع نوع آخر من اللقاحات ، يتم استخدام الطرق الهندسة الوراثيةعلى وجه الخصوص ، للحصول على مادة مستضدية ، يتم استخدام استنساخ الخميرة المؤتلف الذي ينتج المستضد السطحي لفيروس التهاب الكبد B.
تم ابتكار لقاحات في روسيا لكل من البالغين وحديثي الولادة والأطفال عمر مبكر. تتكون دورة التطعيم الكاملة من ثلاث حقن:
أنا جرعة - مباشرة بعد الولادة ؛ الجرعة الثانية - بعد 1-2 شهر ؛ الجرعة الثالثة - حتى نهاية السنة الأولى من العمر.