Ензимът пероксидаза е активен в месото. Бензидин тест (тест за пероксидаза). Техника за настройка на реакцията
- остра миелоидна левкемия
- хронична лимфоцитна левкемия
+ недиференцирана левкемия
- остра лимфоцитна левкемия
- хронична миелогенна левкемия
/\173. В патогенезата на нарушенията на коагулационния механизъм на хемостазата,
-намален брой на тромбоцитите
-нарушена функция на тромбоцитите
- вазопатия
+дефицит на фактор VIII
-дефект на тромбоцитните рецептори IIb-IIIa
/\174. Характеризира се с тромбоцитопения
-дефицит на плазмени коагулационни фактори
- удължаване на времето за съсирване на кръвта
- хематомен вид кървене
+ петехиален тип кървене
- нормално време на кървене
/\175. Адхезията и агрегацията на тромбоцитите намалява с
-излишък на калций и магнезий
- дефицит на VIII f коагулация на кръвта
-повишаване на концентрацията на АДФ в кръвта
- Излишък на тромбоксан А2
+ дефицит на фактора на von Willebrand
/\176. Наследственият дефицит на прокоагуланти възниква, когато
+ хемофилия
-дефицит на витамин К
-образуване на антитела към прокоагуланти
- нарушение на карбоксилирането на факторите на протромбиновия комплекс
/\177. Характеризира се хемофилия А
- автозомно рецесивен модел на наследяване
-дефицит на IX f коагулация на кръвта
- петехии, екхимози
+ хемартроза
- удължаване на времето на кървене
/\178. Болестта на фон Вилебранд се характеризира с
-намаляване на продължителността на капилярното кървене
- съкращаване на времето за съсирване на кръвта
- повишена агрегация на тромбоцитите
- нарушение на синтеза на фактор VIII
+ намаляване на прокоагулантната активност на фактор VIII
/\179.В патогенезата на хиперкоагулацията при DIC-синдром има значение
+ активиране на "външни" и "вътрешни" механизми на кръвосъсирването
- хипофибриногенемия
- активиране на фибринолитичната система на кръвта
- излишък на антитромбин III
- тромбоцитопатия
//\180. В патогенезата на хипокоагулацията при ДВС е важно
+ коагулопатия и тромбоцитопения на консумация
-излишни прокоагуланти
- навлизане в кръвта Голям бройтъканен тромбопластин
- активиране на инхибиторите на фибринолизата
-дефицит на антитромбин III
/\181. Най-изразеният стадий на DIC при новородени
+хипокоагулация
-хиперкоагулация
- преходен
- възстановяване
-терминал
/\181. Да се клинични проявленияхеморагична болест на новороденото са
+ мелена, кървене от пъпната рана
- жълтеница на кожата и лигавиците
- ядрена жълтеница
- хипербилирубинемия
- оток
/\182. При хемофилия А,
+ Образуване на активна протромбиназа
-преход на протромбин в тромбин
-преход на фибриноген във фибрин
-Втора фаза на кръвосъсирването
-Трета фаза на кръвосъсирването
/\183. Хиперкоагулация на кръвта възниква, когато
- Излишък на протеин С
- Излишък на протеин S
- Излишък на антитромбин-III
+ Резистентност на фактор V към протеин С
- афибриногенемия
/\184. Етиологични факториекзогенен произход, причинявайки поражение нервна система
+ алкохолна интоксикация
- увреждане на невроните при чернодробна кома
- церебрална исхемия
-хипогликемия
-увреждане на невроните при уремия
//\185. Нервните проводници влизат в нервната система
стрептококов екзотоксин
- менингококи
- пневмококи
- Е. коли
+ вирус на бяс
/\186. Причина за спонгиформна трансмисивна енцефалопатия
- Цитомегаловируси
- Ентеровируси
- Вируси на бяс
- Херпесен вирус
+ Приони
/\187. Вируси, които образуват вътреклетъчни включвания в невроните
- Цитомегаловируси
- Ентеровируси
+ Вируси на бяс
- Херпесен вирус
- Вирус на полимиелита
/\188. Дефицитът на инхибиране е
+ излизане на подлежащите части на централната нервна система от контрола на надлежащите части
- намаляване нервни влияниявърху постсинаптичните структури
/\189. Синдромът на денервация е
- нарушение на транспорта на трофогени и образуването на патотрофогени
-намаляване на аферентните импулси към неврона
-излизане на подлежащите отдели на централната нервна система от контрола на надлежащите отдели
+намаляване на нервните влияния върху постсинаптичните структури
-група хиперактивни неврони
//\190. Първичният инхибиторен дефицит се развива поради
- прекомерно стимулиране на нервната система
+ нарушения на структурата и функцията на инхибиторните неврони
-повишаване на синтеза на възбудни медиатори
/\191. Вторичният инхибиторен дефицит се развива поради
+ действия на деполяризиращи агенти на възбуждащи аминокиселини, водещи до прекомерна активност на невроните
- нарушения на структурата и функцията на инхибиторните неврони
- нарушения на структурата и функцията на възбудните синапси
-намален синтез на възбуждащи невротрансмитери
- излишък от низходящи инхибиторни влияния по време на разрушаването на части от нервната система
/\192. Последствие от синдрома на дезинхибиране може да бъде
-развитие дистрофични променив неврони и инервирани структури
+ образуване на HPV (генератор на патологично повишено възбуждане)
- развитие на денервационен синдром
-развитие на органна атрофия
-развитие на синдром на деаферентация
/\193. Патологично усилен генератор на възбуждане (GPUV) е
+ съвкупност от хиперактивни взаимодействащи неврони, произвеждащи неконтролиран поток от импулси
-съвкупност от каскадна мембрана и вътреклетъчни процеси
- комплекс от промени в синаптичните структури
- нарушение на трофиката поради загуба или промяна на нервните влияния
Комплекс от промени, които настъпват в постсинаптичните неврони, органи и тъкани след загубата на нервни влияния върху тези структури
/\194. Значение на формирането на GPU
- насърчава образуването на разлято спиране
+ е детерминант на патологичната система и допринася за формирането на патологичната система
- насърчава образованието физиологична система
- засилва трофичния ефект на неврона върху инервираните структури
- инхибира развитието на невропатологични процеси
/\195. Да се бавна хиперкинезасе прилага
-конвулсии
+ атетоза
-тики
-хорея
- тремор
/\196. Неврозата може да доведе до развитие
+пептична язва дванадесетопръстника
- менингит
- спонгиформна трансмисивна енцефалопатия
- енцефалит
- Болест на Алцхаймер
/\197. Централната парализа се характеризира с:
-запазване на произволни движения
-отслабване на сухожилните рефлекси
+ повишени сухожилни рефлекси
-отсъствие патологични рефлекси
-намален мускулен тонус
/\198. Характеризира се с периферна парализа
- повишени гръбначни рефлекси
- появата на патологични рефлекси
- мускулна хипертрофия
- мускулен хипертонус
//203. Болковите медиатори включват
- физиологични концентрации на адреналин
-енкефалини
- ендорфини
+ брадикинин
-динорфин
//204.Чувството за болка се формира в
-ноцицептори
- нервни стволове
-гръбначен мозък
- ретикуларна формация
+ неврони на таламуса и мозъчната кора
//205. Най-податливи на болка
+ кожа и лигавици
-черен дроб
- мозък
-гръбначен мозък
-миокард
//206. Фантомната болка е болка
- в лявата ръка и лявата лопатка по време на пристъп на ангина пекторис
- над ключицата остър хепатитили дразнене на париеталния перитонеум
- със заболявания на мозъка
+ в липсващата част на тялото, най-често след ампутация на крайници
- опасваща болка при панкреатит
/\207.В патогенезата на фантомната болка имат значение
- повишена чувствителност на ноцицепторите
-повишена проводимост на нервните стволове
- повишена възбудимост на кората на главния мозък
Образуване на ампутационна неврома и образуване на патологично усилен генератор на възбуждане в гръбначния мозък
-инхибиране на възбудимостта на мозъчния ствол
//208.Антиноцицептивната система включва
-брадикинин
+ желатиново вещество
-йони Н, К
-хистамин
- вещество Р
/\209.Намаляване чувствителност към болкапри триене на кожата и масаж поради
-намалена чувствителност на ноцицепторите
- блокада на нервните проводници
- намаляване на възбудимостта на невроните на ретикуларната формация
- инхибиране на възбудимостта на таламичните неврони
+активиране на желатиновата субстанция гръбначен мозък
/\211. Водещото звено в патогенезата на диабетната хиперосмоларна кома е
+хипергликемия
-кетоза
- лактатна ацидемия
-хипоксия
- хиперазотемия
//212. Причината за исхемичния инсулт може да бъде
+ тромбоза или емболия на мозъчните съдове
- руптура на церебрална аневризма
- церебрална васкуларна дистония
- артериална хиперемия на мозъка
-намалено съсирване на кръвта
/\213. Причината за хеморагичен инсулт може да бъде
- стенозираща атеросклероза на мозъчните съдове
тромбоза и емболия на мозъчните съдове
- ангиоспазъм на мозъчните съдове
- повишен хематокрит
//214. При исхемичен инсулт, за разлика от хеморагичен клинична картинапо-често преобладава
- мозъчен оток
+ Фокални симптоми
- Кръв гръбначно-мозъчна течност
- Компресия на мозъчната тъкан
-Усилване вътречерепно налягане
/\215. Церебеларна атаксия, нарушения на паметта за текущи събития, нистагъм, дизартрия, дисфагия, хълцане, замаяност са характерни за увреждането
+ Вертебрална артерия (задна долна малкомозъчна артерия)
- отпред церебрална артерия
- Средна мозъчна артерия
- Задни церебрални артерии
-пиални артерии
//216. Пареза или спастична парализа на крайниците (проксималната ръка и дисталенкрака), при увреждане се наблюдава загуба на усещане от противоположната страна на лезията
- Вертебрална артерия (задна долна церебеларна артерия)
+ Предна мозъчна артерия
- Средна мозъчна артерия
- Задна церебрална артерия
-пиални артерии
//217. Пациент М., 64 години, диагноза " исхемичен инсулт“, разкри: положителен рефлекс"Бабински" отляво, загуба на усещане от лявата страна на тялото.
В епруветка се наливат 2 ml от филтрата, 5 капки 0,2% алкохолен разтвор на бензидин и 2 капки 1% разтвор на водороден прекис.
Екстрактът от прясното месо на здрави животни придобива зелено-син цвят, който след няколко минути става кафяв. В екстракти от месото на болни, преуморени и умрели в агония животни цветът не се променя, но понякога се появява зелено-син цвят, с голямо закъснение и бързо преминава в кафяв.
Реакцията на пероксидазата може да се зададе без приготвяне на екстракта: 2 капки 1% водороден прекис и 5 капки 0,2% бензидин се нанасят върху прясно парче месо. Появата на синьо-зелено петно с последващ преход към кафяво се счита за положителна реакция, липсата на цветно петно се счита за отрицателна реакция.
ФОРМОЛНА РЕАКЦИЯ
Месото от животни, заклани след продължителна или тежка агония патологично състояние, могат да бъдат разпознати по показатели на формалната реакция.
Месната проба се освобождава от мазнините и съединителната тъкан. Проба от 10 гр. се поставя в хаванче, внимателно се счуква с ножица, залива се с 10 мл физ. разтвор и 10 капки 0,1 N натриев хидроксид. Месото се натрива с чукал. Получената суспензия се прехвърля със стъклена пръчка в колба и се нагрява до кипене, за да се утаят протеините. Колбата се охлажда с чешмяна вода, след което съдържанието й се неутрализира чрез добавяне на 5 капки 5% разтвор на оксалова киселина и се прекарва в епруветка през филтърна хартия. Мътният извлек се филтрира втори път или се центрофугира.
Ходът на реакцията. Изсипете 2 ml от екстракта в епруветка и добавете 1 ml неутрален формалин.
Екстракт от месото на животно, убито в агония, тежко болно или заклано след случай, се превръща в плътен съсирек; в екстракта от месото на болно животно падат люспи, екстрактът от месото на здраво животно остава течен и прозрачен, понякога се появява лека мътност.
Формалинът се неутрализира предварително с 0,1 N натриев хидроксид по индикатор, състоящ се от равна смес от 0,2% водни разтворинеутрално и метиленово синьо, докато цветът се промени от виолетов на зелен.
Санитарна оценка на месото
Извършва се според резултатите от изследването и се записва в работната книга.
Ако има признаци, показващи, че животното е умъртвено по време на агонията (хипостази, слабо кървене, липса на реакция на мястото на клане), труповете и органите подлежат на техническо обезвреждане.
Месото от здраво животно не съдържа патогенни микроорганизми, pH в диапазона 5,7-6,2, реакцията към пероксидазата е положителна.
Месо с рН 6,3 и повече и отрицателна реакция към пероксидаза се счита за подозрително по произход от болно или принудително заклано животно.
ВИДОВЕ МЕСО
Опитът да се продаде месо от един вид животно за месо от друг вид животно, обикновено по-ценно, се нарича фалшифициране на вида и може да се извърши на пазарите в търговска мрежаи заведения за обществено хранене. Следователно ветеринарен лекартрябва да може да определи вида на месото. Обикновено при видова фалшификация се използват трупове на животни, близки по размер, форма и други показатели. Така че обикновено се опитват да представят конското месо за говеждо и обратно (в някои страни, където конското месо се цени по-високо), кланични трупове големи кучетаминават за овце, опитват се да представят котките за зайци и нутрии. За определяне на вида на месото се използват обективни и субективни методи.
Субективни методи за определяне вида на месото. Да се субективни методивключват като конфигурация, морфологични и органолептични показатели на месото и др.
Органолептични показатели
Идентификация по цвят на месото
Цветът на месото и структурата на мускулната тъкан зависят от възрастта, пола, мазнините на животните и други причини.
голямо месо говедамогат да бъдат от светлочервени до тъмночервени, едрозърнести в напречното сечение.
тъмно червено конско месо
След варенето месото на прасетата и телетата става бяло или светло сиво, месото на говеда, овце и коне става тъмно сиво.
Помогнете ми да намеря снимка или картина, показваща взаимодействието на водороден прекис с картофи или месо. и получи най-добрия отговор
Отговор от Елена Казакова[гуру]
С помощта на опита разберете наличието на ензими в картофените клубени,
разделяне на водороден прекис
Оборудване, реактиви. Лабораторен стенд с епруветки, пипети с означения 1 ml; парчета сурови и варени картофи (или сурово и варено месо); водороден прекис (3% разтвор или 0,5% разтвор); треска; мачове.
Напредък. В една епруветка се поставят резени сурови картофи, в друга - сварени картофи (съответно в третата и четвъртата епруветка могат да се поставят парчета сурово и варено месо). Добавете 0,5 ml 3% разтвор на водороден прекис (H2O2) към всяка епруветка с помощта на пипета.
Когато се пуснат мехурчета, спуснете тлееща треска във всяка от тези епруветки.
Наблюдения.
В епруветки със сурови картофи (или месо) ще има бързо образуване на мехурчета („кипене“). Тлееща треска, поставена в епруветка, пламва.
В епруветки с варени картофии вареното месо не разгражда водороден прекис, мехурчетата не се открояват.
Обсъждане на резултатите. Образуването на мехурчета в епруветки със сурови картофи или месо се обяснява с наличието в клетките на ензима пероксидаза - в растенията (или каталаза - в мускулите), които разграждат водородния прекис до вода и кислород. Молекулярният кислород се отделя под формата на мехурчета. Наличието на кислород може да се определи с помощта на тлееща треска, която пламва, ако се постави в епруветка с появяващи се мехурчета.
В епруветки с варени картофи и варено месо водородният пероксид не се разгражда, тъй като при готвене ензимите (вещества с протеинова природа) денатурират - има нарушение на третичната структура на ензима и загуба на неговата каталитична активност.
Токсичният (отровен) водороден пероксид се произвежда в някои растителни и животински клетки като страничен продукт от метаболизма (по време на биологично окисление). Това съединение е токсично за клетките и пероксидазата (или каталазата), съдържаща се в пероксизомите, осигурява ефективното му отстраняване. Под действието на ензимите каталаза (мускули, кръв) или пероксидаза (картофи, елодея) водородният пероксид незабавно се разлага на молекулярен кислород и вода, съгласно уравнението:
Каталаза (пероксидаза)
2H2O2 = 2H2O + O2
Каталазата е един от най-бързо работещите ензими. При 0 градуса по Целзий една молекула каталаза разлага до 40 000 молекули водороден пероксид за 1 s. Една ензимна молекула разгражда до 5 милиона молекули водороден пероксид за 1 минута, предпазвайки клетката от отравяне. Каталазата е локализирана в микротелца и пероксизоми. Пероксидазата и каталазата принадлежат към класа на оксидоредуктазите, тъй като реакцията на разделяне на водородния пероксид е редокс.
По същия начин, ако капнете водороден прекис върху лист от елодея, тогава ще има бързо освобождаване на газови мехурчета - кислород.
Най-мощната пероксидаза се намира в хряна. Добит е специално за молекулярно-генетични изследвания.
Констатации. Живите клетки съдържат ензими - вещества от протеинова природа, които ускоряват хода на биохимичните реакции чрез намаляване на енергията на активиране. В този експеримент е възможно да се определи наличието в сурови продукти на ензима каталаза - в животински клетки (или пероксидаза - в растителни клетки). По време на термичната денатурация настъпва необратима денатурация на ензима (разрушаване на неговата третична структура и загуба на каталитична активност). Загубата на каталитична активност на каталаза (пероксидаза) след варене на продуктите потвърждава протеиновата природа на ензимите.
Изследване на месото от болни и принудително заклани животни
Известно е, че месото и кланичните продукти, получени от болни животни, могат да бъдат източник на инфекция на хората със зооантропонозни заболявания и възникване на болести, пренасяни с храни. Следователно основната задача на ветеринарния специалист е да осигури освобождаването на месо и месни продукти, които са безопасни за живота и здравето на хората.
За клане се допускат здрави животни, преминали рутинни диагностични изследвания от населени места, които са безопасни за клане. инфекциозни заболявания. Изпратените за клане животни подлежат на ветеринарномедицински преглед със селективна термометрия по преценка на ветеринарния лекар.
Клането на болни и съмнителни за заразни болести или застрашени от смърт животни (тежки наранявания, счупвания, изгаряния и други наранявания) се разрешава в случаите, предвидени в съответните инструкции, както и в Правилата за ветеринарномедицински преглед на кланичните животни. и Ветеринарно-санитарната експертиза на месото и месните продукти (от 1988 г.).
Трябва да се помни, че има случаи, когато доставчиците на месо умишлено се опитват да продадат месо, получено от трупове, болни и убити в агония животни. Ето защо една от най-важните задачи на ветеринарния лекар е да идентифицира месото на болни животни и трупове. За решаването на този проблем се използва набор от мерки, състоящ се от изследване на придружаващите документи (ветеринарно свидетелство или сертификат и др.), Органолептични и лабораторни изследвания.
Целта на урока: да се разработят методи за определяне на месото на болни животни; установете от кое животно е получено месото: здраво, болно или труп.
Работен план:
1. Разгледайте придружителните документи за месо.
2. Извършете органолептично изследване на месото, лимфни възли вътрешни органии месен бульон 1:3.
3. Извършете физико-химично изследване на месото (определяне на рН, реакция на пероксидаза, формол тест, реакция с меден сулфат).
4. Подгответе отпечатъчни петна от дълбоките слоеве на месото, лимфните възли и органи, оцветете ги по Грам и Олт и направете микроскопия.
5. Съставете протокол за изследване и въз основа на резултатите от органолептични и лабораторни изследвания и проучване на придружаващите документи дайте ветеринарно-санитарна оценка на месото.
Материална поддръжка: пясъчен часовник за 2 минути, термоустойчиви колби 100 ml с капак и 200 ml (2 бр.), стъклени пръчици, пипети 2 и 5 ml, круша, фунии, памучен филтър, хартиен филтър, мерителен цилиндър 100 ml, бюрета, триножник, хаванче, пестик, емайлирана кювета, ножици, анатомични пинсети, скалпел, микроскоп, епруветки (10 бр.), предметни стъкла, бактериологична примка, бактериологичен мост, подквасено мляко, газова горелка (спиртна лампа), месни проби от 100 g от здрави, болни животни и трупове (комплект за 2-3 души), аналитични везни (точност - 0,01 g), цифров pH метър, комплект Michaelis, електрическа печка, водна баня, дестилирана вода, 5% разтвор на меден сулфат, 0,2% разтвор на бензидин, 1% разтвор на водороден прекис, неутрален формалин, 0,1 N. разтвор на натриев хидроксид, 5% разтвор на оксалова киселина, имерсионно масло, фуксин, тинтява виолет, йодиран алкохол, разтвор на Лугол, 2% сафронин, филтърна хартия, разтвор за дезинфекция на ръце.
Проучване на придружаващите документи
При предаване на животни за клане доставчикът представя ветеринарномедицински сертификат - образец № 1 или ветеринарномедицински сертификат - образец № 4 (при транспортиране в рамките на областта). Прочитайки този документ, Специално вниманиепреминават към епизоотично състояние местностот които са дошли животните, за датите и резултатите от планираните диагностични тестове(за туберкулоза, бруцелоза и др.) и ваксинации. При изпращане на болни животни за принудително или диагностично клане диагнозата трябва да бъде посочена в придружаващия документ.
Вземане на проби за лабораторни изследвания
Вземането на проби за физикохимично изследване и микроскопия се извършва след органолептично изследване на трупа и органите. От предната, средната и задната част на трупа се вземат три месни проби по 200 g всяка. За да подготвите цитонамазки, можете допълнително да изберете лимфни възли и части от вътрешни органи (черен дроб, бъбрек, далак, бял дроб).
Органолептични изследвания
Степента на кървене на трупа
Лошо обезкървеното месо има по-тъмен цвят. За да се определи степента на кървене на месото, те гледат напълването на кръвоносните съдове с кръв, което е особено ясно видимо на серозните мембрани. Освен това трябва да потърсите наличието на кръв по повърхността на прясно парче месо; лента от филтърна хартия се използва за определяне на съдържанието на влага в разфасовката.
Има четири степени на кървене на месото: Добро - няма кръв в кръвоносните съдове, повърхността на среза е суха, възможно е малко количество месен сок.
Задоволително - открива се малко количество кръв в малки кръвоносни съдове, няма кръв в мускулите, срезната повърхност е мокра.
Лоши - откриват кръв в малки и средни кръвоносни съдове, при натиск върху срезната повърхност се отделят капки кръв.
Много лошо - откриват кръв в малки, средни и големи кръвоносни съдове, серозните мембрани са лилаво-червени, кръвта се отделя на срезната повърхност.
Месото от трупове има много лоша степен на кървене, месото от тежко болни животни, убити в агонално състояние - лошо или много лошо.
Дефиниция на хипостази
При трупове и слабо обезкървени трупове кръвта се просмуква през стените кръвоносни съдовеи се събира в долната част на трупа, образувайки хипостази - напоени с кръв области със синьо-червен цвят. Тъй като отеците се образуват в долната част на трупа, горната част на трупа на трупа може да бъде задоволително обезкървена. Следователно, по част от трупа или парче месо е невъзможно да се прецени кървенето на целия труп.
Определяне на мястото на разреза
Мястото на клане се проверява, ако клането е извършено по открит начин. Ако животното е било здраво по време на клането, тогава мястото на клане ще бъде неравномерно и наситено с кръв. Това се дължи на факта, че мускулите не умират веднага след клането, отделните мускулни влакна се отпускат, докато други се свиват, освен това се появява кървене през мястото на клане. При симулация на клане в труп мястото на клане е равномерно и не е наситено с кръв. Следователно на частни лица, които доставят месо на пазара, е забранено да почистват мястото на клане.
Определяне на състоянието на лимфните възли
В трупове и органи, получени от здрави животни, лимфните възли са жълти или сив цвят. При трупове и животни, убити в агонално състояние, поради слабо кървене и хипоксия, лимфните възли от розово до люляк. При болни животни по време на развитие възпалителни процесилимфните възли могат да бъдат увеличени, като краищата на разреза са обърнати и може да има кръвоизливи и други патологични промени по повърхността на разреза.
Определяне на маслеността на кланични трупове и органи
При определяне на тлъстината на животните се обръща специално внимание на наличието на признаци на изтощение. За разлика от изтощението, недохранването причинява дистрофични и дегенеративни промени в мускулите и мастната тъкан. При недохранени животни консистенцията на мазнините става желатинова. Най-удобно е да се определи състоянието на мастната тъкан между прешлените след разделяне на трупа на половинки.
Месото от изтощени животни се предава за техническо обезвреждане.
Определяне на патологични промени в органи и тъкани
при определяне на месото на болни животни
При определяне на месото на болни животни се извършват следните физикохимични изследвания: определяне на рН на месото, реакция към пероксидаза (бензидин тест), определяне на продуктите от първичния протеинов разпад (формол тест и реакция с меден сулфат), готвене тест. Освен това се извършва микроскопия на петна от отпечатъци, оцветени по Грам и капсули на B. anthracis.
Преди определяне на рН, настройка на реакцията към пероксидазата, както и формалния тест и реакцията с меден сулфат, месото трябва да престои най-малко 20-24 часа, за да узрее.
При изследване на месото на болни животни се извършва микробиологично изследване на месото и вътрешните органи за идентифициране на причинителя на заболяването и вторичната микрофлора (Salmonella, E. coli, Proteus и др.).
Микроскопски петна-отпечатъци
Техника за изготвяне на цитонамазка-отпечатък. Приготвят се натривки от горния и дълбокия слой на всяка проба. От фламбираната проба със стерилна ножица се изрязва парче месо с размери най-малко 1,5 х 2,0 х 2,5 cm, срязаните повърхности се нанасят върху стерилно предметно стъкло (три отпечатъка върху две предметни стъкла). Щрихи кръг със обратна странапредметно стъкло с восъчен молив, след това изсушено на въздух, фиксирано върху пламък на газова горелка и оцветено по Грам и капсули антраксспоред Олт.
Оцветяване по Грам. Карболовата тинтява се излива върху фиксирани намазки през лента от филтърна хартия, след 2 минути боята се отцежда и намазката се измива с вода, след което се излива разтвор на Лугол за 2 минути, след това се излива йодиран алкохол за 1 минута, накрая цитонамазката се промива с вода и се оцветява с фуксин за 2 минути. След това намазката се промива и изсушава с филтърна хартия.
Оцветяване според Олга. Фиксираните намазки се оцветяват с прясно приготвен топъл 2% разтвор на сафранин за 1-2 минути (антраксните бактерии се оцветяват в керемидено червено, а капсулите в жълто).
Натривката се микроскопира при голямо увеличение на микроскопа (630-900 пъти) под емерзия. На един слайд се изследват 25 зрителни полета.
В прясното месо, получено от здраво животно, не трябва да има микрофлора.
Физически и химични изследвания
Готварски тест
Настройка на реакцията. Пригответе месен бульон 1: 3. На лабораторна везна (фиг. 15) претеглете 20-30 g месо. След това пробата от месото се раздробява с ножица до състояние на мляно месо, поставено в 100 ml конична колба. С помощта на мерителен цилиндър отмерете 60-90 ml дестилирана вода и я добавете в колбата с месото. Колбата се покрива с часовниково стъкло и се поставя във вряща водна баня за 10 минути.
Отчитане на реакцията. За да се отчете реакцията, чашата се повдига и се определя ароматът на парите от бульона. След това се обръща внимание на прозрачността на бульона: месото на здраво животно - бульонът остава прозрачен, ароматът е специфичен; месото на болно или убито животно в агонално състояние - забелязва се мътност на бульона, ароматът е отслабен, възможни са външни миризми (лекарствени и др.); трупно месо - мътен бульон с люспи, мухлясал или гниещ мирис.
Определяне на продуктите от първичния протеинов разпад в месото
Реакция с меден сулфат. Същността на техниката се състои в това, че продуктите от първичното разграждане на протеина, съдържащ се във филтрата на бульона, и медния сулфат образуват комплексни съединения, които се утаяват.
Настройка на реакцията. Пригответе месен бульон 1: 3, за това 20 g мляно месо се поставят в конична колба, добавят се 60 ml дестилирана вода и се разбъркват добре. Колбата се покрива с капак и се нагрява в продължение на 10 минути на кипяща водна баня. След това горещият бульон се филтрира през плътен слой памучна вата с дебелина най-малко 0,5 cm в епруветка, поставена в чаша с студена вода. Ако във филтрата има люспи, той отново се филтрира през хартиен филтър.
След филтруване 2 ml от филтрирания бульон се излива в епруветка и се добавят 3 капки 5% разтвор на меден сулфат, разклаща се 2-3 пъти и се инкубира 5 минути.
Отчитане на реакцията: месото на здраво животно - бульонът остава прозрачен; месо от животно, убито от тях в агонално състояние
Отбелязва се помътняване на бульона, а в бульона от замразено месо
Интензивно помътняване с образуване на люспи; трупно месо - в бульона се образуват люспи, изпадащи в желеобразна утайка.
Формол тест (използва се само при изследване на говеждо месо). Същността на техниката се състои в утаяването на продуктите от първичното разграждане на протеина с формалдехид.
Настройка на реакцията. Извлекът се приготвя в съотношение 1:1. За целта се взема проба от 10 g мускулна тъкан без мазнини и съединителна тъкан и се поставя в хаванче, където се натрошава с ножица до състояние на кайма, след което се добавят 10 ml 0,9% разтвор на натриев хлорид и 10 капки. 0,1 N натриев хлорид се добавят там. разтвор на натриев хидроксид. Съдържанието на хаванчето внимателно се стрива с пестик до мазна консистенция и се прехвърля в колба. Колбата се нагрява на електрическа печка, като се разбърква със стъклена пръчка, за да се утаят белтъците (до побеляване). Колбата се охлажда със студена чешмяна вода. Съдържанието на колбата се неутрализира с 5 капки 5% разтвор на оксалова киселина и се филтрира през филтърна хартия. 2 ml от получения филтрат от месен екстракт се поставят в епруветка и се добавя 1 ml неутрален формалин.
Отчитане на реакцията: месото на здраво животно - месният екстракт остава прозрачен; месото на болно или убито животно в агонално състояние - месният екстракт става мътен, изпада флокулентна утайка; трупно месо - в месния екстракт се образува желеобразен съсирек.
Пероксидазна реакция (бензидин тест)
Пероксидазата е ензим, който се съдържа в животинските тъкани и разрушава пероксидните съединения, образувани по време на метаболизма. Същността на реакцията е, че пероксидазата разлага водородния прекис и полученият атомен кислородбързо окислява бензидина до парахинодиимид, който образува синьо-зелено съединение с остатъците от бензидин, превръщайки се в кафяво.
Настройка на реакцията. Пригответе месен извлек 1:4. В колбата се поставя претеглена част от 10-20 g месо, смляно с ножица до мляно месо, добавят се 40-80 ml дестилирана вода и се екстрахира 15 минути, като съдържанието на колбата се разбърква с стъклена пръчка или с помощта на магнитна бъркалка (фиг. 16), след което се филтрира през хартиен филтър.
Ориз. 16. Магнитни бъркалки
В епруветката се добавят 2 ml филтриран месен екстракт, добавят се 5 капки 0,2% алкохолен разтвор на бензидин, съдържанието на епруветката се разклаща, след което се добавят две капки прясно приготвен 1% разтвор на водороден прекис.
Отчитане на реакцията: месото на здраво животно - екстрактът придобива синьо-зелен цвят, става кафяво-кафяв за 1-2 минути (положителна реакция); месото на болно или умъртвено животно в агонално състояние - екстрактът придобива синьо-зелен цвят, за няколко секунди става кафяво-кафяв (съмнителна реакция); трупно месо - екстрактът или не придобива специфичен синьо-зелен цвят, или веднага се появява кафяво-кафяв цвят (отрицателна реакция).
Определяне на рН на месо
pH на месото се определя чрез потенциометрични и колориметрични методи.
потенциометричен метод. Определянето на рН на месото се извършва с аналогов или цифров потенциометър (рН метър) директно в месото със специален електрод-нож (фиг. 17) или във воден извлек, приготвен в съотношение 1:10. Извлекът се влива 15 минути при периодично разбъркване и се прецежда през хартиен филтър. Определянето на pH се извършва съгласно инструкцията (паспорт) за работа на потенциометъра (pH метър). По време на работа трябва периодично да се проверяват правилните показания на устройството, като се използват стандартни буферни разтвори.
Колориметричен метод с използване на компаратор на Михаелис.
Настройка на реакцията. Приготвя се месен извлек в съотношение 1:4.В колба се поставя претеглена порция от 20 г месо, смляно с ножица до мляно месо, добавят се 80 мл дестилирана вода и се разбърква енергично 15 минути, след което прецежда се през хартиен филтър.
Ориз. 18. Компаратор на Михаелис
pH се определя с помощта на цветни стандарти, запечатани в епруветки и компаратор с шест гнезда (фиг. 18), разположени в 2 реда по 3 във всеки. Епруветките се поставят в гнездата на компаратора и се пълнят по следния начин: към епруветките от първия ред се добавят 2 ml месен екстракт, след това към външните епруветки се добавят 5 ml дестилирана вода и 4 ml дестилирана вода. и 1 ml индикатор (0,1% разтвор на паранитрофенол). В централната епруветка на втория ред се добавят 7 ml дестилирана вода и стандартите се поставят във външните слотове, като се избират така, че когато се гледат през хоризонтални отвори, цветът им съвпада с цвета на съдържанието на средната тръба. pH на месото ще съответства на цифрата, посочена на етикета на стандарта.
Отчитане на реакцията: рН на месото на здраво животно е 5,6-6,2; pH на месото на болно животно - 6,3; pH на трупното месо се измества към алкалната страна - над 6,4 и може да достигне 7 и повече.
Ветеринарно-санитарна оценка на месото от болни животни и трупове
Месото се счита за получено от здраво животно при наличие на добри органолептични показатели на трупа, липса на патогенни микроби в намазките, стойност на рН в диапазона 5,6-6,2, положителна реакцияна пероксидаза и отрицателни показатели на формалния тест и реакция с меден сулфат.
Месото на болни, както и преуморени животни, има недостатъчно кървене, рН в диапазона 6,3-6,5, съмнителна реакция към пероксидаза и в екстракта се образуват люспи, когато се образува тест с формал и реакция с меден сулфат.
Месото на животни, убити в състояние на агония, има слабо кървене, лилаво-розов или синкав цвят на лимфните възли, рН 6,6 и повече, отрицателна реакция към пероксидаза, а тестът с формал и реакцията с меден сулфат са придружени от образуване на желеобразен съсирек.
Месото и кланичните продукти, получени от трупове и убити в агония животни, се изпращат за техническо обезвреждане.
Въпросът за използването на месо и продукти от клане, получени от болни животни, се решава след установяване на диагнозата в съответствие с Правилата за предкланичен преглед и следкланичен ветеринарен преглед на месо и месни продукти (от 1988 г.) и други приложими нормативни документи.
Месото от здрави животни се използва без ограничения.