Hastalıkların teşhisi için serolojik kan testi yöntemleri. Paraziter hastalıkların tanısında serolojik araştırma yöntemleri Neyin serolojik laboratuvar analizi

Frengi testi en yaygın laboratuvar testlerinden biridir. Frengi testleri önleyici muayeneler sırasında yaygın olarak kullanılmaktadır. Mikroskopi kullanılarak sifilizin etken maddesi tanımlanır. Serolojik reaksiyonlar kullanılarak sifiliz tanısı doğrulanır, latent sifiliz tanısı konur, tedavinin etkinliği izlenir ve hastaların tedavisi belirlenir.

Frengi tanısı klinik verilere, materyal örneklerinde frengi patojenlerinin saptanmasına ve tanının serolojik araştırma yöntemleriyle doğrulanmasına dayanarak konur. Sifilizin belirtileri çok sayıda ve çeşitlidir, bu nedenle hastalığa farklı uzmanlık doktorları tarafından teşhis konur. Primer sifilizin ayırıcı tanısı bir takım hastalıklarla gerçekleştirilir.

Pirinç. 1. Fotoğrafta frenginin birincil belirtisi şanstır.

Treponema pallidum'a karşı antikorlar ve serolojik tanı

Sifiliz ile enfekte olduğunda hastanın vücudunda antikorlar oluşur. Serolojik teşhis, doktorun sifilizli bir hastanın vücudunda antikor oluşumunun dinamiklerini incelemesine yardımcı olur. Ilk aşamalar hastalıklar, tedavi süresi boyunca ve tamamlandıktan sonra, hastada hastalığın nüksetmesi veya yeniden enfeksiyon (yeniden enfeksiyon) sorununu çözer, kitlesel tıbbi durumlarda sifiliz teşhisini koyar.

Treponema pallidum IgM'ye karşı antikorlar

Enfeksiyondan sonra ilk üretilen IgM antikorlarıdır. Enfeksiyondan sonraki ikinci haftadan itibaren serolojik reaksiyonlar kullanılarak tespit edilmeye başlarlar. 6-9 haftalık hastalıkta sayıları maksimuma ulaşır. Hasta tedavi edilmezse altı ay sonra antikorlar kaybolur. IgM antikorları 1-2 ay sonra kaybolur. 3 - 6 ay sonra. - geç sifiliz tedavisinden sonra. Büyümeleri kaydedilirse, bu yeniden enfeksiyona hizmet eder veya gösterir. IgM molekülleri büyüktür ve plasentadan fetusa geçmez.

Treponema pallidum IgG'ye karşı antikorlar

IgG immünoglobulin antikorları enfeksiyon anından itibaren 1. ayın (4. hafta) sonunda ortaya çıkar. Titreleri IgM titresinden daha yüksektir. IgG tedaviden sonra oldukça uzun bir süre devam eder.

Spesifik olmayan antikorlar

Birçok serolojik reaksiyon vardır. Bu, Treponema pallidum'un antijenik çeşitliliği ile açıklanmaktadır. Hasta bir kişinin kan serumunda Farklı aşamalar frengide spesifik olanlara ek olarak belirli spesifik olmayan antikorlar da oluşur - aglütininler, kompleman sabitleyici antikorlar, immobilinler, immün floresansa neden olan antikorlar, presipitinler vb. Spesifik olmayan antikorları tespit etmeye yönelik serolojik reaksiyonlar, tanıyı önlemek için göreceli spesifikliğe sahiptir; Hatalar için birini değil, bir dizi serolojik reaksiyon (RAC) kullanmalısınız.

Frengi için yanlış pozitif testler

Ayırt edici özellik treponemal olmayan testler yanlış pozitif reaksiyonlarla sonuçlanır. İnsan kanında kardiyolipin antijenine karşı üretilen antikorlar sadece sifilizde değil aynı zamanda diğer hastalıklarda da kayıtlıdır: kollajenoz, hepatit, böbrek hastalıkları, tirotoksikoz, kanser, bulaşıcı hastalıklar(cüzzam, tüberküloz, bruselloz, sıtma, tifüs, kızıl), hamilelik ve adet döngüsü sırasında, yağlı yiyecekler ve alkol alırken. Yanlış pozitif reaksiyonların sayısının yaşla birlikte arttığı kaydedilmiştir.

Pirinç. 2. Fotoğraf kadınlarda birincil frengiyi göstermektedir.

Serolojik testler kullanılarak sifilizin laboratuar tanısı

Sifiliz için serolojik testler treponemal ve treponemal olmayan olarak ikiye ayrılır.

1. Treponemal olmayan testler

Bu test grubunda kullanılan antijen kardiyolipin antijenidir. Frengi patojenlerinin lipit antijenleri en çok sayıdadır. Hücrenin kuru kütlesinin 1/3'ünü oluştururlar. Treponemal olmayan testler kullanılarak kardiyolipin antijenine karşı üretilen reaktif antikorlar tespit edilir. Bu grup, kompleman fiksasyon testini (FFR), mikropresipitasyon testini (MPR), hızlı plazma reaktif testini (RPR), vb. içerir. Treponemal olmayan testler kullanılarak, sifiliz için birincil tarama gerçekleştirilir (nüfus grupları araştırması) ve olasılık Sonuçların niceliksel bir biçimde elde edilmesi, bu testlerin tedavinin etkinliğini izlemek için kullanılmasına olanak tanır. Treponemal olmayan testlerden elde edilen pozitif sonuçlar treponemal testlerle doğrulanmalıdır. Treponemal olmayan testlerin ayırt edici bir özelliği, yanlış pozitif reaksiyonların alınmasıdır.

2. Treponemal testler

Treponemal testler, Treponema pallidum kültüründen izole edilen treponemal kökenli antijenleri kullanır. Onların yardımıyla treponemal olmayan testlerin olumlu sonuçları doğrulandı. Grup şunları içerir: RSKtrep - kompleman fiksasyon reaksiyonu, RIF - immünofloresan reaksiyonu ve modifikasyonları, RIT, RIBT - Treponema pallidum'un immobilizasyon reaksiyonu, RPHA - pasif hemaglutinasyon reaksiyonu, ELISA - enzime bağlı immünosorbent tahlili.

3. Rekombinant antijenler kullanılarak sifiliz testleri

Bu test grubu için antijenler genetik mühendisliği ile elde edilir ve RPGA ve ELISA reaksiyonlarında, immünoblotlama (IB) analizlerinde ve immünokromatografik analizlerde kullanılır.

Pirinç. 3. Frengiyi teşhis etmek için bir dizi serolojik test kullanılır.

Treponemal olmayan testler kullanılarak sifiliz tanısı

Frengiyi tespit etmek için treponemal olmayan testler veya bir serolojik reaksiyon kompleksi (SSR) kullanılır. Serolojik tanı enfeksiyon anından itibaren 5. haftadan itibaren veya başlangıcından 2-3 hafta sonra kullanılır. Taze primeri olan hemen hemen tüm hastalarda antikorlar tespit edilir. Sifiliz hastalarının %70-80'inde, üçüncül latent sifiliz hastalarında ise %50-60'ında serolojik reaksiyonlar pozitiftir.

Treponemal olmayan testleri kullanan serolojik testler yanlış pozitif sonuçlar verebilir.

Pirinç. 4. Frengi testi için kan örneği alınması.

Kompleman fiksasyon reaksiyonu (RSK kartı, KA ile KSK, Wasserman reaksiyonu)

A. Wasserman tarafından 100 yıldan fazla bir süre önce icat edilen Wasserman reaksiyonu (RW, РВ), bugün birçok değişikliğe uğradı, ancak geleneğe bir övgü olarak adını günümüze kadar korudu. Kardiyolipin antijeni kullanılarak yapılan kompleman fiksasyon reaksiyonu, yalnızca antikorları tespit etmek için değil, aynı zamanda kantitatif olarak da gerçekleştirilir - farklı serum seyreltmeleriyle, tedavinin etkinliğini izlemek için kullanılmasına olanak tanır. Duyarlılığın ve özgüllüğün düşük olması, yanlış pozitif sonuçların elde edilmesi bu tür çalışmaların olumsuz yönleridir.

Wasserman reaksiyonunun özü şu şekildedir: Wasserman reaksiyonunu gerçekleştirmek için kullanılan antijenler, insan kanında sifilizin etken maddelerine karşı antikorların bulunması durumunda, iltifat yoluyla onlara bağlanır ve çökelir. Reaksiyonun yoğunluğu (+) işaretiyle gösterilir. Reaksiyon negatif (-) olabilir - tortu yok, şüpheli (küçük tortu veya +), zayıf pozitif (++), pozitif (+++) ve güçlü pozitif (++++).

Değiştirilmiş Wasserman reaksiyonu, Kolmer reaksiyonu daha hassastır. Yardımı ile Wasserman reaksiyonunun olumsuz sonuç verdiği serumlarda antikorlar tespit edilir.

Keskin pozitif reaksiyonlar durumunda, serumun 1:10 ila 1:320 arasındaki seyreltmelerde kullanıldığı, kullanıma izin veren reaktiflerin kantitatif bir tespiti gerçekleştirilir. bu tip Tedavinin etkinliğini izlemeye yönelik çalışmalar. Örneğin, antikor titresinde bir azalma ve ardından gelen seronegatiflik (negatif sonuçların alınması), hastalığın başarılı bir şekilde tedavi edildiğini gösterir.

Pirinç. 5. Frengi için kan testi - Wasserman reaksiyonu.

Mikro çökeltme reaksiyonu (MPR)

Yağış mikro reaksiyonu kütle incelemeleri için kullanılır ayrı gruplar nüfus, frengi teşhisi ve tedavinin etkinliğinin izlenmesi. Bu tür bir araştırmayı yürütmek için az miktarda test materyali gereklidir. Çökelmenin mikro reaksiyonu immünolojik antijen-antikor reaksiyonuna dayanır. Deneğin kan serumunda antikorlar mevcutsa, antijen-antikor kompleksi çökelerek pullar oluşturur. Reaksiyon özel bir cam plakanın oyuklarında gerçekleştirilir. Wasserman reaksiyonu olarak (+) çökeltinin yoğunluğu ve pulların boyutu ile değerlendirilir. Hamile kadınları, donörleri muayene ederken ve tedavinin etkinliğini izlemek için kullanılmaz. VDRL ve RPR mikro reaksiyon türleridir.

Pirinç. 6. Cam üzerine bir damlada çökelme reaksiyonunun türü.

Pirinç. 7. Frengi için kan testi - mikropresipitasyon reaksiyonu.

Pirinç. 8. Plazma reaktiflerinin hızlı belirlenmesi için kit (sifiliz için RPR testi).

Spesifik olmayan serolojik reaksiyonlar sırasında elde edilen tüm pozitif testler, spesifik reaksiyonlar - treponemal testler ile onaylanmayı gerektirir.

Treponemal testler kullanılarak sifiliz tanısı

Treponemal testler yapılırken treponemal kökenli antijenler kullanılır. Onların olumsuz taraf tedavinin etkinliğini izlemek, spiroketozis ve zührevi olmayan treponematoz için pozitif sonuçlar elde etmek ve yanlış pozitif sonuçlar elde etmek için kullanmanın imkansızlığıdır. onkolojik hastalıklar, cüzzam, bazı endokrin patolojileri. RPGA, ELISA ve RIF gibi testler, frengi tedavi edildikten sonra uzun yıllar ve bazı durumlarda ömür boyu pozitif kalır.

RIBT ve RIF, frengi teşhisinde kullanılan tüm serolojik reaksiyonlar arasında en spesifik olanlardır. Yanlış pozitif reaksiyonlar arasında ayrım yapmayı ve negatif reaksiyonlarla ortaya çıkan geç frengi formlarını tanımlamayı mümkün kılarlar. RIBT'nin yardımıyla, hamile kadınlarda yanlış pozitif reaksiyonlar, çocuğun enfeksiyon sorununu çözmek gerektiğinde fark edilir.

Treponema pallidum immobilizasyon reaksiyonu (RIBT, RIT)

Reaksiyonun özü, hastanın kan serumundaki antikorların Treponema pallidum'u hareketsiz hale getirmesidir. Patojenlerin %20'ye kadarı hareketsiz hale getirildiğinde reaksiyon negatif olarak kabul edilir, zayıf pozitif - %21 - 50, pozitif - %50 - 100. RIBT bazen yanlış pozitif sonuçlar verir. Test karmaşık ve zaman alıcıdır ancak yürütülürken vazgeçilmezdir. ayırıcı tanı Hamile kadınlar da dahil olmak üzere hastalığın gizli formları ve serolojik reaksiyonların yanlış pozitif sonuçları. RIBT, sekonder, erken ve geç sifiliz için %100 pozitif sonuç verir; diğer sifiliz türleri için vakaların %94 - %100'ünde.

İmmünofloresan reaksiyonu (RIF)

Reaksiyonun özü, treponema pallidum'un (antijenler), florokromlarla etiketlenmiş antikorlarla birleştiğinde, floresan mikroskobunda sarı-yeşil bir parıltı yaymasıdır. Sonuç (+) işaretiyle değerlendirilir. RIF kullanılarak A sınıfı immünoglobulinler tespit edilir. İmmünfloresan reaksiyonu Wasserman reaksiyonundan daha erken pozitif hale gelir. Sekonder ve latent sifilizde her zaman pozitiftir, üçüncül ve konjenital sifilizde vakaların %95-100'ünde pozitiftir. Bu tür bir araştırmayı yürütme tekniği RIBT'ninkinden daha basittir, ancak bu reaksiyonun özgüllüğü RIBT'den daha düşük olduğu için RIF'yi RIBT ile değiştirmek imkansızdır. RIF-10 (RIF modifikasyonu) daha duyarlıdır, RIF-200 ve RIF-abs daha spesifiktir.

Pirinç. 9. Frengi için kan testi - immünofloresan reaksiyonu (RIF).

Treponema pallidum'un (IAT) immün yapışma reaksiyonu

Reaksiyonun özü, kompleman varlığında hastanın serumu tarafından hassaslaştırılan treponema pallidum'un kırmızı kan hücrelerinin yüzeyine yapışmasıdır. Ortaya çıkan kompleksler santrifüjleme sırasında çökelir. Duyarlılık Bu test ve özgüllük RIF ve RIBT'ye yakındır.

Sifiliz için enzim immünolojik testi (ELISA)

ELISA kullanılarak M ve G sınıfı immünoglobulinler belirlenir. IgM - ELISA tekniği bir tarama ve doğrulama testi olarak kullanılabilir. ELISA'nın duyarlılığı ve özgüllüğü RIF'ye benzer. Frengi için ELISA, enfeksiyonun üçüncü ayından itibaren olumlu sonuçlar verir ve oldukça uzun bir süre (bazen yaşam boyunca) pozitif kalır.

Pirinç. 10. Enzim immünoanaliz analizörü.

Pasif (dolaylı) hemaglutinasyon reaksiyonu (RPHA)

RPHA, treponema pallidum antijenlerinin adsorbe edildiği kırmızı kan hücrelerinin hastanın serumu varlığında birbirine yapışma (hemaglütinasyon) yeteneğine dayanmaktadır. RPGA, gizli olanlar da dahil olmak üzere tüm sifiliz türlerini teşhis etmek için kullanılır. Kullanırken Yüksek kalite antijen, bu tür serolojik reaksiyon, özgüllük ve duyarlılık açısından diğer tüm testleri aşar.

Pirinç. 11. RPGA, frenginin tüm türlerini teşhis etmek için kullanılır.

Pirinç. 12. Frengi testi - pasif (dolaylı) hemaglutinasyon reaksiyonu (şema).

Pirinç. 13. Test tüpünün tabanının tamamını kaplayan ters bir şemsiyenin görünümü pozitif reaksiyonu gösterir. Kırmızı kan hücrelerinin test tüpünün tabanının ortasındaki bir sütuna ("düğme") yerleşmesi durumunda, negatif reaksiyon gösterilir.

Pirinç. 14. Laboratuvar koşullarında RPHA testi.

Mikrobiyolojik teşhis

Serolojik teşhisin yanı sıra Treponema pallidum'u tespit etmek için bir yöntem ( mikrobiyolojik teşhis) özellikle seronegatif sifiliz döneminde, kanda hala antikor bulunmadığında önemli bir rol oynar, ancak taze primer sifilizin (şankroid) ilk belirtileri zaten vardır.

Çalışmanın biyolojik materyali sert ülserlerin (şankrlar), püstüler sifilitlerin içeriği, ağlayan ve aşındırıcı papüller, enfekte lenf düğümlerinin delikleri, beyin omurilik sıvısı ve PCR - kan için amniyotik sıvıdan akıntıdır;

Frengi patojenlerini tespit etmenin en iyi yöntemi biyolojik materyali karanlık alan mikroskobunda incelemektir. Bu teknik, soluk treponemayı canlı bir durumda görmenize, yapısal özelliklerini ve hareketini incelemenize, ayırt etmenize olanak sağlar patojenik ajanlar saprofitlerden.

Pirinç. 15. Frengi analizi - karanlık alan mikroskobu.

Pirinç. 16. Kuru yaymaları incelerken Romanovsky-Giemsa boyaması kullanılır. Soluk treponemalar ile lekelenir pembe renk, diğer tüm spiroket türleri mor renktedir.

Treponema pallidum'un karanlık alan mikroskobu ile tespiti, sifilizin kesin tanısı için mutlak bir kriterdir.

Pirinç. 17. Bakterileri tanımlamak için bir immünofloresan reaksiyonu (RIF) kullanılır - bir treponemal test. Spesifik kompleks antijen-antikor Florokrom etiketli spesifik bir serumla birleştirildiğinde, floresan mikroskobu ışığında bakterilere yeşilimsi bir parlaklık verir.

Pirinç. 18. Frengiye neden olan ajanlar, Levaditi yöntemi (gümüş emdirme) kullanılarak hazırlanan smearlarda açıkça görülmektedir. Soluk treponema, enfekte olmuş doku hücrelerinin sarı renginin arka planına karşı koyu renklidir.

Pirinç. 20. Fotoğrafta bir Treponema pallidum kolonisi gösterilmektedir. Bakteri kültürü elde etmek zordur. Pratik olarak yapay olarak büyümezler besin ortamı. At ve tavşan serumu içeren besiyerlerinde koloniler 3-9. günlerde ortaya çıkar.

Frengi için PCR

Günümüzde etkili ve gelecek vaat eden bir teknik polimerazdır zincirleme tepki. Sifiliz için PCR, birkaç saat içinde sonuç almanızı sağlar ve teşhis için toplanan materyalde en az birkaç patojen mevcut olabilir.

Pirinç. 21. Sifiliz için PCR, Treponema pallidum'dan DNA veya parçalarını tespit edebilir.

Bu araştırma yönteminin duyarlılığı biyolojik materyalde Treponema pallidum'un varlığına bağlıdır ve %98,6'ya ulaşır. Bu testin özgüllüğü büyük ölçüde şunlara bağlıdır: doğru seçim teşhis sırasında amplifikasyon hedeflerini belirler ve %100'e ulaşır.

Aynı zamanda, sifiliz ve PCR tanısına yönelik doğrudan yöntemlerin duyarlılığı ve özgüllüğünün yeterince çalışılmamış karşılaştırmalı özellikleri nedeniyle, Rusya Federasyonu'nda hastalığın teşhisine yönelik bu inceleme yöntemi henüz onaylanmamıştır.

Frengi için PCR'nin yalnızca belirli durumlarda yapılmasına izin verilir: ek yöntem HIV hastalarında serolojik araştırma yöntemleri kullanılarak sifiliz teşhisinde zorluk olması durumunda konjenital sifiliz, nörosifiliz tanısı.

Pirinç. 22. PCR kullanılarak Treponema pallidum DNA'sının tespiti, ya canlı bakterilerin varlığını ya da ölü bakteri kalıntılarını gösterir, ancak ek kopyalar oluşturabilen kromozomal DNA'nın ayrı bölümlerini içerir.

Ne gösteriyor serolojik analiz kan? Teşhis önlemleri- Bu herhangi bir hastalığın tedavisinde en önemli aşamadır. Tedavinin başarısı sadece reçete edilen ilaçlara değil, aynı zamanda büyük ölçüde teşhisin ne kadar doğru yapıldığına da bağlıdır.

Ayrıca teşhis komplikasyonları önlemeye yardımcı olur ve eşlik eden hastalıklar. Hastanın kanının serolojik testi kullanılarak antikorların ve antijenlerin varlığı tespit edilir. Çalışma birçok hastalığın bulunmasına, evrelerinin belirlenmesine ve tedavinin ilerleyişinin izlenmesine yardımcı oluyor.

Seroloji nedir?

Seroloji, antijenlerin antikorlara verdiği reaksiyonları inceleyen immünolojinin dalıdır. Bu bölüm Tıp kan plazmasını ve onun immünolojik özelliklerini inceler.

Günümüzde antikorlar için serolojik kan testi, insan bağışıklık yetersizliği virüsünü, hepatiti, brusellozu, cinsel yolla bulaşan hastalıkları ve yaşamı tehdit eden diğer hastalıkları tespit etmenin güvenilir bir yoludur. Hangi durumlarda reçete edildiğini bulalım.

Kullanım endikasyonları

Tanı koymak zorsa, hastalığa neden olan etkeni belirlemek için serolojik bir kan testi gereklidir.

Bu reaksiyonu gerçekleştirmek için patojenlerin antijenleri plazmaya sokulur ve ardından devam eden süreç bir laboratuvar asistanı tarafından incelenir. Veya bunun tersi bir reaksiyon gerçekleştirirler: Patojenin spesifik kimliğini belirlemek için enfekte olmuş kana antikorlar enjekte edilir.

Uygulama kapsamı

Bu araştırma tıbbın çeşitli dallarında kullanılmaktadır. Bu reaksiyon, vücudun enfeksiyonlarla ve virüslerle savaşmak için ürettiği spesifik hücreleri ve antikorları tanımlar.

Ayrıca kişinin kan grubu serolojik yöntemle belirlenir.

Benzer bir serolojik kan testi jinekolojide cinsel yolla bulaşan hastalıkları teşhis etmek için kullanılır. Bu yöntem aynı zamanda şu amaçlarla da kullanılır: kapsamlı anketler hamile kadınlar (toksoplazmoz, HIV, sifiliz vb. tespiti). Doğum öncesi kliniğine kayıt olurken bu testi geçmek zorunludur.

Çocuklarda, semptomların belirgin belirtileri yoksa ve klinik belirtileri analiz ederek hastalığı tanımlamak mümkün değilse, sözde "çocukluk" hastalıklarının (su çiçeği, kızamık, kızamıkçık vb.) tanısını doğrulamak için serolojik bir reaksiyon kullanılır. .

Cinsel yolla bulaşan hastalıkların tespiti

Zührevi uzmanlar için bu test gerçekten yeri doldurulamaz ve çok doğru bir teşhis koymanıza olanak tanır.

Bulanık bir klinik tabloyla, sifiliz, giardiasis, ureaplasmosis, klamidya, herpes ve diğer hastalıklara yönelik serolojik bir kan testi, antikorların varlığını hızlı bir şekilde tespit edebilir.

Viral ve bulaşıcı hastalıklar

Serolojik analiz, viral hepatiti teşhis etmek için gastroenterologlar, hepatologlar ve bulaşıcı hastalık uzmanları tarafından aktif olarak kullanılmaktadır.

Serolojik kan testinin şifresini çözmek, hastalığın evresini belirlemeyi ve hastaneye yatmanın ne kadar gerekli olduğu sorusunu cevaplamayı mümkün kılar. şu an. Doğru şekilde nasıl hazırlanır?

Teste hazırlanıyor

Serolojik kan testleri hem kamu hem de ticari kliniklerde yapılmaktadır. Modern ekipmanlara ve kalifiye personele sahip bir laboratuvar tercih edilmelidir.

Test için biyolojik örnekler tükürük ve dışkı olabilir, ancak çoğu durumda hastanın venöz kanı kullanılır. Serolojik testler için kan alınır ulnar ven laboratuvar ortamında. Testi yapmadan önce bu işleme hazırlık konusunda doktorunuza danışmalısınız.

Serolojik bir teste hazırlanmak için birkaç basit kurala uymanız gerekir.

Kan, yemeklerden önce sakin bir durumda, yani aç karnına bağışlanır. Bundan önce röntgen, ultrason vb. gibi başka testlerden geçmemelisiniz.

Kan vermeden birkaç hafta önce antibakteriyel ve diğer bazı ilaçları almaktan kaçınmak gerekir. Bu durumda bazı öneriler testin yapıldığı hastalığa bağlıdır. Örneğin hepatit testi, işlemden 48 saat önce yağlı yiyeceklerin ve alkolün ortadan kaldırılmasını içerir.

Floresan reaksiyonu

Serolojik reaksiyon türleri arasında floresans reaksiyonu vardır. Bu teknik, kan serumundaki antikorları aydınlatan bir reaktif kullanır.

Doğrudan bir serolojik reaksiyon oluşturmak, belirli antikorların bir floresan maddeyle işaretlenmesini içerir. Bu reaksiyon en hızlı olanıdır ve tek aşamada gerçekleştirilir.

Böyle bir analizi gerçekleştirmek için başka bir seçeneğe dolaylı veya RNIF adı verilir. İki aşamada gerçekleştirilir. İlk adımda antikorlar floresan etiketlerle etiketlenmez ve ikinci aşamada antijenleri ve antikorları tanımlamak için uygun şekilde etiketlenmiş antikorlar kullanılır. Parıltı ancak belirli bir antikora bağlanma meydana geldikten sonra ortaya çıkar.

Serolojik kan testi ne gösterir? Tüm prosedürün sonucu, radyasyonun gücünü analiz eden ve incelenen nesnenin şeklini ve boyutunu ortaya çıkaran özel bir cihaz tarafından değerlendirilir. Bulaşıcı hastalıklara neden olan etkenler, patolojinin türüne ve evresine bağlı olarak güvenilirliği %90-95 olan bir sonuçla tespit edilir.

Bağlantılı immünosorbent tahlili

Bu tür serolojik testlerde benzersiz, stabil reaktifler kullanılır. İşaretlenen maddeler istenen antikorlara yapışıyor gibi görünüyor. Sonuç olarak niteliksel veya niceliksel bir sonuç elde ederiz.

Belirgin bir işaret bulunamazsa sonuç negatif kabul edilecektir. Kalitatif bir çalışma sırasında biyolojik numunelerde antikor varlığı tespit edilirse test sonucu pozitif kabul edilir. Şu tarihte: nicelik belirleme Hücre analizi daha doğru sonuç verir.

Uzman, analiz göstergelerini (örneğin tespit edilen hücrelerin toplamı) analiz ederek hastalığın ileri düzeyde olup olmadığını belirler. İlk aşama akut aşamada veya kötüleşti kronik form patoloji. Teşhis koymak için doktor sadece serolojik test verilerini değil aynı zamanda klinik tablo hastalıklar.

Bu testin özellikleri

Bu analizin yapılması her zaman belirli bir hastalığın tespit edildiğine dair %100 güven sağlayamayabilir. Sonuçların belirsiz olabileceği ve başka prosedürlerin gerekli olabileceği görülür.

Örneğin, bruselloz testi sırasında kan serumunun antijen olmadan kendi kendini tutması kontrol edilir. Bu, testin güvenilirliğini önemli ölçüde artırır. Bruselloz testi pozitif veya negatif olabilir ve aynı zamanda şüphe uyandırabilir.

Açık bir yorumu olmayan şüpheli sonuçlar alırsanız, testi tekrar yapmanız önerilir. Ayrıca kan kültürleri ve testlerle bruselloz tespit edilebilmektedir. Kemik iliği ve beyin omurilik sıvısı.

Serolojik kan testinin avantajları

Serolojik reaksiyonları kullanan teşhis teknikleri modern tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır. tıbbi uygulama. Bu özellikle viral ve bulaşıcı patolojileri belirlerken sıklıkla yapılır.

Enfeksiyonun epidemiyolojik yayılımını önlemek amacıyla coğrafi tarama ve tıbbi muayene sırasında da aynı testler kullanılmaktadır.

Yöntemin avantajları şunları içerir:

• Yüksek düzeyde güven.
• Hızlı reaksiyon ve sonuçlar. RSC'nin sonuçları 24 saat içinde belli olur. Özel bir durumda, hastane ortamında analiz birkaç saat içinde hazır olacaktır.
• Hastalığın gelişiminin ve tedavinin etkinliğinin izlenmesi.
• Hastalar için düşük maliyet ve erişilebilirlik.

Yöntemin dezavantajları

Ancak serolojik çalışmaların dezavantajları da vardır.

Bunlar, analizin dikkate alması gerektiği gerçeğini içerir. kuluçka süresi Daha güvenilir bir tablo elde etmek için hastalıklar.

Örneğin, herpes simpleks tip 1 veya 2'nin belirlenmesi enfeksiyondan yalnızca 14 gün sonra mümkündür. Bağışıklık yetersizliği virüsünün varlığına ilişkin bir analiz, enfekte bir kişiyle temastan 30 gün, 90 gün ve altı ay sonra gerçekleştirilir.

Elbette sonuçların güvenilirliği insan faktöründen de etkilenebilir: kan numunesi almaya hazırlanma kurallarının ihmal edilmesi veya laboratuvar asistanının reaksiyonu gerçekleştirirken yaptığı bir hata.

İstatistiklere göre, yanlış sonuç Vakaların %5'inde elde edilebilir. Deneyimli bir doktor, bir hastayı muayene ederken, klinik tabloyu inceleyerek çoğu durumda yapılan hatayı hesaplayabilir.

Site şunları sağlar: arkaplan bilgisi yalnızca bilgilendirme amaçlıdır. Hastalıkların teşhis ve tedavisi mutlaka uzman gözetiminde gerçekleştirilmelidir. Tüm ilaçların kontrendikasyonları vardır. Bir uzmana danışmak gereklidir!

Serolojik Kan tahlili belirli antijenlerin veya antikorların laboratuvar testlerine yönelik bir yöntemdir ( spesifik proteinler) hastanın kan serumunda bağışıklık reaksiyonları vücut. Bu method ne zaman kullanılır teşhis bulaşıcı hastalıklar, hastanın kanında belirli bir virüs veya bakteri türüne karşı antikorların varlığını tespit etmenin yanı sıra kan grubunu belirlemek için kullanılır.

İncelenen materyal

Öncelikle serolojik analiz için hastadan toplanan biyolojik materyal kullanılır:

• kan serumu
• tükürük
• dışkı

Bazı durumlarda belirli çevresel nesnelerden izole edilen materyal incelenir:

• toprak

Analiz yöntemi veya kan örneklemesi

Bu analiz hastanın özel hazırlığını gerektirmez. Kan alımı sabahları aç karnına yapılır ve tedavi odalarında yapılır. tıbbi kurumlar genel kabul görmüş hematolojik tekniklere göre. Serolojik testler için kan iki yöntem kullanılarak toplanır: venöz kan Hastanın ulnar veninden kılcal kan alınır. yüzük parmağı. Kan steril kapalı tüplere yerleştirilir.

Kan taşıma ve serum depolamanın özellikleri

Kan alındıktan hemen sonra özel bir laboratuvara nakledilir ve aynı gün serum hazırlanır. Peynir altı suyu buzdolabında 2-4 derece sıcaklıkta en fazla 4-6 gün saklanabilir. Daha uzun süre depolama gerekiyorsa peynir altı suyu dondurulur. Peynir altı suyunun kalitesinden ödün vermemek için, bir kez dondurulmasına ve buna göre buzunun çözülmesine izin verilir. Uzun süreli depolama sırasında antikorlar özelliklerini kaybeder ve kısmen inaktif hale gelirler; donmaya karşı en duyarlı olan sınıfın immünoglobulinleri; M. Serumu çözdükten sonra pürüzsüz hale gelinceye kadar iyice karıştırmak gerekir, bu da bu serumda bulunan antikor konsantrasyonunun eski haline getirilmesine yardımcı olur.

Serolojik testler ne için kullanılır?

Serolojik yöntemler laboratuvar teşhisi gibi hastalıkları tespit etmek için kullanılır. ekinokokkoz, trikinoz, toksokaroz, opisthorchiasis, sistiserkoz, toksoplazmoz, amebiasis, giardiasis Tedavi sürecinin etkinliğini belirlemek ve son olarak tespit etmek tekrarlanan hastalık Hasta tamamen iyileştikten sonra.

Serolojik tanının temel yöntemleri

İmmünofloresan reaksiyonu (RIF)

Bu reaksiyon serolojik testin dolaylı bir versiyonudur, yani iki aşamada gerçekleştirilir. İlk aşamada gerekli antikor, yapı olarak immün serum proteinlerine benzer olan antiglobulin kullanılarak dolaşımdaki antijen-antikor kompleksinde tanımlanır. İstenilen antikorun tanımlanması, antiglobülinler kullanılmadan, önceden hazırlanmış bir antijen preparasyonunun floresan mikroskobu altında incelenmesiyle de mümkündür.

İmmünofloresan reaksiyonu, bir uzmanın çok fazla zaman ve sorumluluk almasını gerektiren, çok emek yoğun bir süreçtir. Reaksiyon çözeltilerin hazırlanmasıyla başlar, ardından serumlar ve bunların kontrol örnekleri titre edilir ( test solüsyonunu kontrollü miktarda reaktifle kademeli olarak karıştırarak belirli bir maddenin içeriğini belirlemenize olanak tanıyan bir işlem). Daha önceden hazırlanmış dilüsyonlar ve bunların kontrol numuneleri antijen içeren cam slaytlara dikkatlice uygulanır. Daha sonra preparatlar inkübe edilir, ardından yıkanır ve havayla kurutulur. Antijenli slaytlara ince bir antiserum tabakası uygulanır, ardından preparatların ikincil inkübasyonu gerçekleştirilir ve önceki eylem zincirinin tamamı tekrarlanarak preparatın kurutulmasıyla sona erer. Sonuç olarak, bir cam slayt üzerindeki preparat gliserol ile işlenir ve floresan mikroskobu altında incelenir.

Reaksiyonun sonuçları, antijen hücrelerinin yüzey sarı-yeşil parıltısının yoğunluğu ile karakterize edilen dört noktalı bir ölçekte değerlendirilir:
+ hücrenin çok zayıf parıltısı, yalnızca çevresinde fark edilebilir
++ hücre çevresinin zayıf parıltısı, ancak açıkça fark edilen yeşil renk tonuyla
+++/++++ parlak parıltı Yeşil renk hücre çevresi
Reaksiyon titresi, antijen hücrelerinin en az %50'sinin berrak bir yüzey parıltısı sergilediği, yani reaksiyonun sonucu olan bir serum seyreltmesi olarak kabul edilir. +++ veya ++++ . Reaksiyon aralığı değeri 1/80 ila 1/100 arasındadır.

Reaksiyonun yoğunluğu, oluşan deliklerin dibinde çöken kırmızı kan hücrelerinin sayısına bağlıdır:
– kırmızı kan hücrelerinin kuyucukların dibine düzgün kenarlı küçük bir halka veya bir "düğme" şeklinde birikmesi ile karakterize edilen negatif bir reaksiyon
+ Düşük yoğunluklu bu reaksiyon, deliğin tabanındaki küçük tek tortularla karakterize edilir. Aglütine olmayan kırmızı kan hücreleri kuyucuğun merkezinde "küçük bir halka" oluşturur
++ orta yoğunlukta, aglütine olmayan eritrositlerden oluşan “geniş yoğun bir halkanın” deliğinin dibinde oluşması ile karakterize edilir
+++ yoğun reaksiyon, aglütine eritrositler, ortasında yerleşmiş aglütine olmayan eritrositlerin oluşturduğu halkaların açıkça görülebildiği "şemsiyeler" oluşturur
++++ tüm kırmızı kan hücrelerinin aglütine olduğu ve "şemsiyeler" oluşturarak kuyucukların dibini kapladığı keskin derecede yoğun bir reaksiyon.
Bu reaksiyonun titresi, en azından eritrositlerin bariz aglütinasyonunun tespit edildiği serumun son dilüsyonu olarak kabul edilir. +++ yani yoğun veya keskin bir şekilde yoğun bir tepkiyle.

Yöntemlerin güvenilirliği ve kalitesi serolojik teşhis birkaçından oluşan iç ve dış laboratuvar kontrolünün organizasyonuna bağlıdır. bağımsız prosedürler Analiz sonuçlarının kalitesini değerlendirmeyi amaçlamaktadır.

Seroloji(Latince serumdan - “serum”, logolar - “bilim”) serum antikorlarının antijenlerle etkileşiminin özelliklerini inceleyen bir immünoloji dalıdır.

Tanının temeli, vücudun belirli bir antijenle enfeksiyonuna tepki olarak oluşan spesifik antikorların saptanmasıdır. Kanda hangi antikorların bulunduğuna bağlı olarak enfeksiyonun doğası hakkında bir sonuca varılır ve bu antikorların sayısı bulaşıcı hastalığın aktivite derecesini gösterir.

Serolojik kan testinin bir parçası olarak araştırma için alınan materyal üzerinde çalışılır ve diğer Tehlikeli hastalıklar- uçuk, bağırsak enfeksiyonları, kızamıkçık, toksoplazmoz, klamidya, kızamık, klamidya. Ayrıca bu çalışma kan grubunuzu doğrulamanıza ve proteinlerin özgüllüğünü belirlemenize olanak tanır.

Böylece serolojik çalışmalar yapılır:

• bir ön teşhis yapılmışsa ve şimdi onaylanması gerekiyorsa. Çalışma, karşılık gelen antijenin kan serumuna eklenmesine dayanmaktadır. Yanıt, hastalığın varlığı veya yokluğu hakkında bir sonuca varmamızı sağlar;
• eğer tanı konulamıyorsa. Çalışma kapsamında kana antikorlar ekleniyor ve antijenlerin türü belirleniyor, bu da belirli bir hastalığın belirlenmesini mümkün kılıyor;
• Eğer gerekliyse .

Böylece, serolojik bir kan testi tanı koymaya veya en çok reçeteyi yazmaya yardımcı olur. etkili tedavi- minimum zaman ve finansal maliyetle.

Serolojik çalışmaların avantajları şunları içerir:

• Patolojik mikroorganizmaları tanımlama imkanı erken aşamalar enfeksiyonlar;
• hastalığın gelişimini ve tedavinin etkinlik düzeyini izlemek;
• biyomateryali almadan önce özel bir hazırlığa gerek yoktur;
• yeterlik. Sonuç, aşağıdaki koşullar altında iki ila üç saat içinde elde edilecektir. yatarak tedaviçok önemli;
• Numunelerin ihtiyaç duyulduğu sıklıkta yapılmasına olanak tanıyan reaktifin mali mevcudiyeti;
• kontrendikasyon yok.

Serolojik testler nasıl yapılır?

Kan ulnar damardan alınır. Önemli nokta- kan şırıngayla değil yerçekimiyle alınır - şırınga olmadan damara bir iğne batırılır ve bir test tüpünde beş ml'ye kadar kan toplanır. İşlem sabah gerçekleştirilir.

Çalışmanın temelini oluşturan reaksiyonlara bağlı olarak, çeşitli prosedür türleri ayırt edilir:

1. Nötrleştirme reaksiyonu. Bağışıklık serumu antikorlarının, mikroorganizmalara veya toksinlere karşı nötrleştirici bir madde olarak reaksiyona girerek onları önleme özelliğine dayanır. olumsuz etki vücutta;
2. aglütinasyon reaksiyonu. Doğrudan veya dolaylı olabilir. İlk durumda, antikorların varlığı açısından kan serumunun incelenmesinden bahsediyoruz (öldürülen mikroplar malzemeye enjekte edilir ve reaksiyon değerlendirilir - pul şeklinde bir çökelti varsa reaksiyon pozitiftir), dolaylı reaksiyonüzerlerinde adsorbe edilmiş antijenlerle eritrositlerin malzemesine girişe dayanır (taraklı bir çökelti pozitif bir reaksiyonu gösterir);
3. Yağış reaksiyonu. Antijen çözeltisi bağışıklık serumu üzerinde katmanlanır (sıvı bir ortam görevi görür). Çözünebilir bir antijen kullanılır. Antijen-antikor kompleksi çökerse reaksiyon pozitif kabul edilir;
4. tamamlayıcı içeren reaksiyon. Uygulama alanı: bulaşıcı hastalıkların tespiti. Kompleman aktive edilir ve reaksiyonlar incelenir;
5. etiketli antijenler ve antikorlarla reaksiyon. Özel bir şekilde işlenen doku antijenlerinin veya mikropların UV ışınlarının etkisi altında ışık yaymaya başlaması esasına dayanır. Yöntem sadece antijenlerin teşhisinde değil aynı zamanda hormonların, enzimlerin ve ilaçların belirlenmesinde de yaygın olarak kullanılmaktadır.

Teste hazırlanmak gerekir: Dört gün önceden hasta kalp ilaçlarını almayı bırakmalı, ayrıca her türlü alkolü, baharatlı ve yağlı yiyecekleri, tatlıları ortadan kaldırmalı, fiziksel eforu sınırlamalı ve stresten kaçınmalıdır.

Bu kurallara uyulmadığı takdirde yanlış pozitif sonuç riski artar. Tekrar testi reçete etmeden önce doktor, hastanın işlemden önceki gün ne yaptığını öğrenmeli ve nasıl yapılacağına dair önerilerde bulunmalıdır. uygun hazırlık muayene için.

Serolojik analiz: açıklama

Serolojik kan testi, bulaşıcı ajanın türünü belirlemenize/doğrulamanıza olanak tanıyan ve bir uzmanın teşhis koymasına yardımcı olan bir testtir. Doktor bulamazsa bu vazgeçilmez bir yardımdır ilaç tedavisi patojenler olduğundan çeşitli hastalıklar spesifik ilaçların ve antibiyotiklerin etkisine karşı farklı hassasiyetlerde farklılık gösterir.

Malzeme toplama prosedürü tamamlandıktan sonra laboratuvar asistanları bir sonraki aşamaya geçerek göstergelerin şifresini çözer. Yani hastanın kanında antikor bulunmazsa vücutta enfeksiyon olmadığı sonucuna varabiliriz - bu durumda test sonucu pozitiftir.

Ancak bu durum, kuralın bir istisnasıdır: Hastalığın belirtileri varsa, serolojik çalışmalar vücutta ciddi bir patolojinin varlığını tespit eder ve kanıtlar.

Öncelikle analiz kullanılarak vücutta patojenler bulunur, daha sonra antikor miktarı değerlendirilir ve buna göre enfeksiyonun ne kadar ciddi olduğu hakkında bir sonuca varılır.

Hepatit, HIV, sifiliz için serolojik testler: özellikler

Frengi . Uzmanlar frengi testi yaparken vücuda girişten sorumlu proteinleri ararlar. insan vücudu enfeksiyonun etken maddesi - Treponema pallidum'dan bahsediyoruz. Bu durumda kan serumu biyolojik bir materyal görevi görür.

. Viral hepatit- Tehlikesi yeterince tedavi edilmemesinden kaynaklanan ciddi bulaşıcı hastalıklar uzun zamandır hiçbir şekilde kendilerini göstermeden vücutta yaşayabilirler. Hastalık, daha tedavi edilebilir olduğu erken aşamada, belirteçlerin analiz edilmesiyle tespit edilebilir; işaretleyiciler, bir hastalık veya aşı uygulanmasından sonra kanda belirir.

Anlamak gerekiyor patojenin tanımlanması enfeksiyondan sadece 1,5-2 ay sonra mümkündür. Hamile bir kadın testi yaparsa, yanlış pozitif sonuç mümkündür.

Tıbbi web sitesini https://tabletix.ru/ ziyaret etmenizi öneririz. Web sitesinde bulacaksınız kullanışlı bilgi, tıbbi görüşler.
Aşağıda listelenen semptomlardan bir veya daha fazlasını yaşıyorsanız serolojik test yaptırmayı düşünmelisiniz:

• kusmak;
• iştahsızlık veya iştahsızlık;
• vücudun nedensiz zayıflığı, fazla çalışma;
• sarımsı ten rengi;
• dışkı ve idrar renginde değişiklikler.

HIV. Sonucun pozitif çıkması hastanın AIDS'e yakalandığı anlamına gelmez. Enfeksiyon yakın zamanda meydana geldiyse (en fazla iki ay önce), antikorların varlığı hastalığın gelişip gelişmediğini belirlememize izin vermez. Tekrar çalışma yapılması istenir.

Serolojik kan testi- Temel amacı vücuttaki virüsleri, enfeksiyonları, mikropları hızlı bir şekilde tanımlamak olan en önemli araştırma yöntemi.

Bu eşsiz laboratuvar "aracı", bağışıklık sisteminin baskılanmasının bir sonucu olan herhangi bir hastalığı tanımlamanıza olanak tanır; bu nedenle tembel olmayın, hastalığı zamanında tanımlayabilmek ve ondan hızlı bir şekilde kurtulmak için düzenli olarak test yaptırın.

8 057

Serolojik teşhis yöntemi 2 araştırma alanının kullanılmasını içerir: serodiyagnoz (deneklerin kan serumunda spesifik antikorların tespiti) ve sero-tanımlama (tipini ve tipini belirlemek için izole edilmiş patojenin antijenik özelliklerinin belirlenmesi).

Serodiyagnoz için aglütinasyon, çöktürme, lizis, RSC reaksiyonları ve etiketli antijen veya antikorların kullanıldığı reaksiyonlar kullanılır. Bu reaksiyonların bileşenleri şunlardır: incelenen hastaların kan serumu ve standart antijen preparatları. Araştırmanın amacı, test serumlarında bulaşıcı hastalıkların patojenlerine karşı antikorların titrelerini belirlemektir.

Spesifik antikorların yüksek titrelerinin saptanması, özellikle de "tanısal" titreler olarak adlandırılan seviyeye ulaştıklarında, şüpheli tanıyı doğrular. Hastalığın en başında (3-4. gün) alınan serumlar ile hastalığın 7. - 10. gününde alınan serumlar aynı anda titre edildiğinde eşleştirilmiş serumların çalışmasına büyük önem verilmektedir. Antikor titrelerindeki 4 kat artışın tanısal önemi vardır.

Sero-tanımlama için en sık cam aglütinasyon reaksiyonu kullanılır. Reaksiyonun bileşenleri: Patojenin (antijen) yetiştirilen saf kültürü ve standart tanısal immün tavşan serumu (antikorlar).

Serolojik yöntemin avantajı- basitlik, erişilebilirlik, yüksek hassasiyet, özgüllük, ifade.

Kusurlar: pahalı ihtiyaç standart ilaçlar ve ekipman.

Alerjik yöntem

Bu yöntem, teşhis açısından büyük öneme sahip olan, vücudun belirli bir bulaşıcı ajana karşı duyarlılığının belirlenmesini içerir. Bazı bulaşıcı hastalıkların seyrine gecikmiş tip aşırı duyarlılık oluşumunun eşlik ettiği bilinmektedir. Bu bağlamda, bu tür hastalara küçük dozlarda alerjenin intradermal uygulanması, alerjenle tekrar tekrar karşılaşmanın neden olduğu vücut kısmında karşılık gelen bir reaksiyona neden olur. Reaksiyon gecikmeli olarak ilerler ve 48-72 saat sonra alerjenin enjeksiyon yerinde kızarıklık, şişlik ve bazen infiltrasyon ortaya çıkar ( olumlu tepki). Vücut duyarlı değilse intradermal uygulama vücutta herhangi bir reaksiyona (negatif reaksiyon) neden olmaz. Endüstri, cilt alerjisi testleri için özel preparatlar üretmektedir: tüberkülin, dizenterin, brusellin, tularin vb.

Alerjik yöntem özellikle büyük önem bulaşıcı bir hastalığın etken maddesini tanımlamanın zor veya imkansız olduğu durumlarda (örneğin cüzzamda) veya bunun çok zaman gerektirdiğinde (örneğin brusellozda). Tüberkülin testi pratikte sadece teşhis amacı, aynı zamanda çocukların BCG aşısıyla yeniden aşılanma zamanlamasını belirlemek ve toplu tüberküloz karşıtı bağışıklığı incelemek.

Alerjik yöntemin avantajları - sadeliği, güvenilirliği, ifade gücü.

Kusur - Tüm bulaşıcı hastalıklarda gecikmiş tipte aşırı duyarlılık gelişmediği için sınırlı kullanım.

TEŞHİSDE SEROLOJİK REAKSİYONLAR

BULAŞICI HASTALIKLAR

Şu anda immünolojik yöntemler Araştırma, bulaşıcı ve bulaşıcı olmayan hastalıkların laboratuvar teşhisinde yaygın olarak kullanılmaktadır.

Antijenler ve antikorlar arasındaki etkileşim reaksiyonlarına serolojik (serum - serum, logolar - öğretim) denir.

Tüm serolojik reaksiyonların özü, antijenlerin ve bunlara karşılık gelen antikorların bir kompleks oluşturacak şekilde spesifik kombinasyonudur. Ana bileşenlerin (antijenler ve antikorlar) immünolojik bir eşleşmesi (homoloji) varsa serolojik bir reaksiyon mümkündür. İmmünolojik özgüllüğün temeli, antijen ve antikorun yapısal tamamlayıcılığıdır.

Antijenler ve antikorlar arasındaki etkileşim süreci, spesifik ve spesifik olmayan iki aşamada gerçekleşir. İlk aşama hızla gelişir. Antikorun aktif merkezinin karşılık gelen (homolog) antijenin belirleyici grupları ile spesifik bir bağlantısından oluşur. Sonraki aşama daha yavaş gelişir, spesifik değildir - bu dışsal tezahür antijen-antikor reaksiyonları (pul kaybı, ortamın bulanıklığı vb.)

Serolojik reaksiyonlar iki amaç için kullanılır:

1) bilinen antijenleri kullanarak test serumundaki antikorları tespit etmek (serodiagnoz);

2) bilinen serumları kullanarak bilinmeyen bir antijeni tanımlamak (serotanımlama).

Bilinmeyen bir antijenin belirlenmesi mikrobiyolojik araştırma denekten izole edilen patojenlerin jenerik, tür ve tipini belirlemek amacıyla gerçekleştirilir. Bu gibi durumlarda reaksiyonun iki ana bileşeninden (antikor, antijen) bilinmeyeni antijendir; reaksiyonun bilinen antikorlarla gerçekleştirilmesi gerekir. Bu durumda antijen, test materyalinden izole edilen saf bir mikroorganizma kültürüdür. İmmün teşhis serumları bilinen antikorlar olarak kullanılır. İkincisi, önceden uygun bakteriyel antijenlerle aşılanmış hayvanların (çoğunlukla tavşanların) kanından elde edilir. Bağışıklık serumları içermelidir yüksek seviye spesifik antikorlar.

Ek olarak, çeşitli bakteriyel olmayan antijenleri belirlemek için serolojik reaksiyonlar kullanılabilir: kan gruplarını, doku antijenlerini, tümörleri belirlemek, organ ve doku nakli için donör-alıcı çiftlerini seçmek vb.

Kan serumundaki antikorları tespit etmek için serolojik testler de kullanılabilir. Bu gibi durumlarda bilinen bir antijene (diagnosticum) ihtiyaç vardır. Canlı veya öldürülmüş mikropların süspansiyonları, ekstraktları veya bunlardan izole edilmiş kimyasal fraksiyonlar antijen olarak kullanılabilir.

Günümüzde sağlık uygulamalarında kullanılan çok sayıda serolojik test, antijen ve antikor arasındaki ilişkiyi ortaya koyan olguda farklılık göstermektedir. Reaksiyonun görünür tezahürü, hangi tekniğin kullanıldığına, hangi durumda kullanıldığına bağlı olarak değişecektir. Fiziksel durumu antijen mi yoksa bağışıklık serumu mu kullanıldığı, komplemanın reaksiyona dahil olup olmadığı. Örneğin, eğer korpüsküler bir antijen kullanılırsa, aglütinasyon olgusu meydana gelir - parçacıkların yapıştırılması (aglütinasyon reaksiyonu). Korpüsküler antijenler nispeten büyük parçacıklardan oluştuğu için gözle görülür topaklayıcı bir çökelti oluşur. Reaksiyonda çözünür bir antijen kullanılırsa ince taneli bir çökeltinin oluşumu gözlenir (çökelme reaksiyonu). Kompleman ayrıca bakteriyel antijenler ile bağışıklık serumu arasındaki etkileşime dahil edilirse, bakteriyoliz (bakteriyel antijenlerin çözünmesi) veya kırmızı kan hücrelerinin parçalanması (antijen olarak kullanıldıklarında) meydana gelir. Serolojik reaksiyonlarda florokromlar, enzimler veya radyoizotoplarla işaretlenmiş bağışıklık serumlarının kullanılması, karşılık gelen fenomen (lüminesans, renk değişikliği veya radyoizotop etiketinin aktivitesi) yoluyla antijenlerin antikorlara spesifik bağlanmasını sağlamayı mümkün kılar.

Serolojik reaksiyonları değerlendirmek için özgüllük ve duyarlılık gibi kriterler kullanılır. Özgüllük, antijenlerin yalnızca homolog antikorlarla reaksiyona girme yeteneğidir. Duyarlılık, minimum miktarda antijen ve antikorla spesifik etkileşim yeteneğidir.

Aglütinasyon reaksiyonu

Aglütinasyon reaksiyonu (RA), antijenlerin serum antikorlarının etkisi altında yapıştırılmasında ve bunların bir elektrolit varlığında çökelmesinde ifade edilen, antijenlerin antikorlarla spesifik bir etkileşimidir. Önerilen serolojik reaksiyonların ilkiydi.

Aglütinasyon reaksiyonunun özelliği, hücrelerin veya diğer korpüsküler parçacıkların üretiminde antijen olarak kullanılmasıdır. Reaksiyon, korpüsküler antijenlerin, bağışıklık serumunun homolog antikorlarıyla spesifik olarak birleşerek taneler, pullar ve topaklar şeklinde bir çökelti oluşturma yeteneğine dayanmaktadır. Reaksiyon yalnızca elektrolitlerin varlığında gerçekleşir. Reaksiyonda kullanılan antijenlere aglütinojenler, antikorlara aglütininler ve ortaya çıkan çökeltiye aglütinat adı verilir.

Canlı kültürlerin izotonik bir sodyum klorür çözeltisi içindeki süspansiyonu veya formaldehit, alkol veya ısıtmayla öldürülen mikropların yanı sıra kırmızı kan hücreleri, lökositler veya diğer hücreler, aglütinasyon reaksiyonunda bir antijen olarak kullanılabilir.

Antikorların kaynağı, hayvanların karşılık gelen antijenlerle immünize edilmesiyle elde edilen bilinen bir aglütinasyon serumu veya incelenen hastanın serumudur.

Aglütinasyon reaksiyonunu gerçekleştirmenin farklı yolları vardır. Bunlardan en yaygın kullanılanları şunlardır: cam üzerinde gösterge niteliğinde reaksiyon, test tüplerinde yoğun aglütinasyon, hemaglutinasyon reaksiyonları ve dolaylı hemaglutinasyon(RNGA).

İlgili bilgi.